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TRANSCRIPCION EN
   EUCARIOTES
  PRESENTADO POR:
 WERNER MENDOZA B.
En Eucariotes hay 3 ARN polimerasas
                nucleares.
Los promotores de estos genes son diferentes:

   - Los promotores de ARN pol I y II se
         localizan corriente arriba.
- Los promotores de ARN pol III se localizan
          corriente arriba y abajo.
- Las ARN pol dependen de factores de transcripción
(proteínas) que favorecen la,localización o anclaje de
 la ARN pol al sitio de iniciación de la transcripción.
     - Los factores de transcripción (FT) interactúan
específicamente con secuencias de ADN (en la zona
    promotora) con otros factores proteicos y con la
                         ARN pol.
   - Los FT contienen diversos motivos (estructuras
super secundarias) que interactúan con secuencias de
                    ADN específicas.
  - Los α-hélices de los FT están orientados de modo
   tal que se ubican en el Surco > de ADN, en donde
sus átomos establecen interacciones van der Waals y
           puentes de H con átomos del ADN.
FACTORES DE
        TRANSCRIPCION:
• Proteínas de homeodominio.
• Proteínas con dedos de Zinc.
• Proteínas con hélice alada (en lengüeta de
  flecha).
• Proteínas con cremallera de Leucina /básica
  (b Zip, del ingles: basic Zipper).
• Proteínas hélice bucle hélice.
Las ARN pol I y III reconocen un conjunto
 restringido de promotores, en conjunción
 con sus FT correspondientes, denominados
      FT-I y FT-III, respectivamente.
  La ARN pol II interacciona con un gran
     número de promotores diferentes.
MECANISMOS DE LA
       TRANSCRIPCION
                    INICIACION
• La ARN pol II no contiene el factor σ de los
  procariotes, que reconoce al promotor y abre la
  doble hélice. Estas funciones son cumplidas por
  un grupo de proteínas llamadas FT generales.
• La ARN pol II esta asociada con 6 FT generales,
  designados como TFIIA, TFIIB,TFIID, TFIIE,
  TFIIF y TFIIH.
INTENSIFICADORES O
  AMPLIFICADORES
• Los promotores reconocidos por la ARN
  pol II poseen en su mayoria la secuencia o
  caja TATA (o de Hogness), localizada a
  unos 25 pb corriente arriba del punto de
  iniciación (es reconocida por la TFIID).
• El TFIID es una proteína con una masa de
  alrededor 750KDa. Consiste en una
  proteína ligadora de la caja TATA (TBP) y
  factores asociados a la TBP (TAFs).
• La TBP es un monómero que se pliega para
  formar una estructura en silla de montar.
THREE-
   dimensional
structures of TBP
•Una vez que la TBP se ha fijado a la caja TATA,
entonces puede unirse el TFIIB.
•Tras la fijación del TFIIB se une un complejo
preformado de TFIIH (tetramero α2 β2).
•El TFIIH abre el duplex de ADN. Despues del
desenrrollamiento, la ARN pol II y menos de 5
factores de trasncripción van a formar un
complejo de preiniciación (PIC).
ELONGACION:
•En presencia de ATP, la actividad Helicasa del
TFIIH desenrrolla el duplex de ADN y permite
que la pol II forme un complejo abierto.
•Si se añade los trifosfatos de ribonucleosidos, la
pol II comienza a transcribir el ADN      ARN.
• La subunidad mas grande de la pol II contiene
un segmento de 7 AAs que se repiten muchas
veces casi con precisión absoluta.
•Esta repetición heptapeptidica, se conoce como
el dominio carboxiterminal (CTD).
•In vitro, para iniciar las transcripción se utiliza
una pol II con un CTD no fosforilado, pero que
se fosforila mientras la polimerasa se aleja del
promotor.
•In vivo, el análisis de cromosomas politenicos
de Drosophila indica que el CTD también es
fosforilado durante la transcripción.
•La subunidades de la proteína TFIIH también
son necesaria para otros dos procesos:
  *La activación de las proteínas cinasas
requeridas para la entrada en la fase S y la
reparación del daño del ADN, mediante
reparación por escisión.
TERMINACION
•Los genes eucariotes poseen una señal poli-A
localizada corriente abajo del ultimo exon.
•Esta señal es usada para añadir una serie de
residuos de Adenilato durante el procesamieto
del ARN.
• La transcripción a menudo termina 0.5-2Kb
corriente debajo de la señal poli-A, pero el
mecanismo no es claro.
PROCESOS POSTRANSCRIPCIONALES
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Transcripción en eucariotes

  • 1. TRANSCRIPCION EN EUCARIOTES PRESENTADO POR: WERNER MENDOZA B.
  • 2. En Eucariotes hay 3 ARN polimerasas nucleares. Los promotores de estos genes son diferentes: - Los promotores de ARN pol I y II se localizan corriente arriba. - Los promotores de ARN pol III se localizan corriente arriba y abajo.
  • 3. - Las ARN pol dependen de factores de transcripción (proteínas) que favorecen la,localización o anclaje de la ARN pol al sitio de iniciación de la transcripción. - Los factores de transcripción (FT) interactúan específicamente con secuencias de ADN (en la zona promotora) con otros factores proteicos y con la ARN pol. - Los FT contienen diversos motivos (estructuras super secundarias) que interactúan con secuencias de ADN específicas. - Los α-hélices de los FT están orientados de modo tal que se ubican en el Surco > de ADN, en donde sus átomos establecen interacciones van der Waals y puentes de H con átomos del ADN.
  • 4. FACTORES DE TRANSCRIPCION: • Proteínas de homeodominio. • Proteínas con dedos de Zinc. • Proteínas con hélice alada (en lengüeta de flecha). • Proteínas con cremallera de Leucina /básica (b Zip, del ingles: basic Zipper). • Proteínas hélice bucle hélice.
  • 5. Las ARN pol I y III reconocen un conjunto restringido de promotores, en conjunción con sus FT correspondientes, denominados FT-I y FT-III, respectivamente. La ARN pol II interacciona con un gran número de promotores diferentes.
  • 6. MECANISMOS DE LA TRANSCRIPCION INICIACION • La ARN pol II no contiene el factor σ de los procariotes, que reconoce al promotor y abre la doble hélice. Estas funciones son cumplidas por un grupo de proteínas llamadas FT generales. • La ARN pol II esta asociada con 6 FT generales, designados como TFIIA, TFIIB,TFIID, TFIIE, TFIIF y TFIIH.
  • 7.
  • 8. INTENSIFICADORES O AMPLIFICADORES
  • 9. • Los promotores reconocidos por la ARN pol II poseen en su mayoria la secuencia o caja TATA (o de Hogness), localizada a unos 25 pb corriente arriba del punto de iniciación (es reconocida por la TFIID). • El TFIID es una proteína con una masa de alrededor 750KDa. Consiste en una proteína ligadora de la caja TATA (TBP) y factores asociados a la TBP (TAFs). • La TBP es un monómero que se pliega para formar una estructura en silla de montar.
  • 10. THREE- dimensional structures of TBP
  • 11.
  • 12. •Una vez que la TBP se ha fijado a la caja TATA, entonces puede unirse el TFIIB. •Tras la fijación del TFIIB se une un complejo preformado de TFIIH (tetramero α2 β2). •El TFIIH abre el duplex de ADN. Despues del desenrrollamiento, la ARN pol II y menos de 5 factores de trasncripción van a formar un complejo de preiniciación (PIC).
  • 13.
  • 14.
  • 15. ELONGACION: •En presencia de ATP, la actividad Helicasa del TFIIH desenrrolla el duplex de ADN y permite que la pol II forme un complejo abierto. •Si se añade los trifosfatos de ribonucleosidos, la pol II comienza a transcribir el ADN ARN. • La subunidad mas grande de la pol II contiene un segmento de 7 AAs que se repiten muchas veces casi con precisión absoluta. •Esta repetición heptapeptidica, se conoce como el dominio carboxiterminal (CTD).
  • 16. •In vitro, para iniciar las transcripción se utiliza una pol II con un CTD no fosforilado, pero que se fosforila mientras la polimerasa se aleja del promotor. •In vivo, el análisis de cromosomas politenicos de Drosophila indica que el CTD también es fosforilado durante la transcripción. •La subunidades de la proteína TFIIH también son necesaria para otros dos procesos: *La activación de las proteínas cinasas requeridas para la entrada en la fase S y la reparación del daño del ADN, mediante reparación por escisión.
  • 17. TERMINACION •Los genes eucariotes poseen una señal poli-A localizada corriente abajo del ultimo exon. •Esta señal es usada para añadir una serie de residuos de Adenilato durante el procesamieto del ARN. • La transcripción a menudo termina 0.5-2Kb corriente debajo de la señal poli-A, pero el mecanismo no es claro.
  • 18.