2. En Eucariotes hay 3 ARN polimerasas
nucleares.
Los promotores de estos genes son diferentes:
- Los promotores de ARN pol I y II se
localizan corriente arriba.
- Los promotores de ARN pol III se localizan
corriente arriba y abajo.
3. - Las ARN pol dependen de factores de transcripción
(proteínas) que favorecen la,localización o anclaje de
la ARN pol al sitio de iniciación de la transcripción.
- Los factores de transcripción (FT) interactúan
específicamente con secuencias de ADN (en la zona
promotora) con otros factores proteicos y con la
ARN pol.
- Los FT contienen diversos motivos (estructuras
super secundarias) que interactúan con secuencias de
ADN específicas.
- Los α-hélices de los FT están orientados de modo
tal que se ubican en el Surco > de ADN, en donde
sus átomos establecen interacciones van der Waals y
puentes de H con átomos del ADN.
4. FACTORES DE
TRANSCRIPCION:
• Proteínas de homeodominio.
• Proteínas con dedos de Zinc.
• Proteínas con hélice alada (en lengüeta de
flecha).
• Proteínas con cremallera de Leucina /básica
(b Zip, del ingles: basic Zipper).
• Proteínas hélice bucle hélice.
5. Las ARN pol I y III reconocen un conjunto
restringido de promotores, en conjunción
con sus FT correspondientes, denominados
FT-I y FT-III, respectivamente.
La ARN pol II interacciona con un gran
número de promotores diferentes.
6. MECANISMOS DE LA
TRANSCRIPCION
INICIACION
• La ARN pol II no contiene el factor σ de los
procariotes, que reconoce al promotor y abre la
doble hélice. Estas funciones son cumplidas por
un grupo de proteínas llamadas FT generales.
• La ARN pol II esta asociada con 6 FT generales,
designados como TFIIA, TFIIB,TFIID, TFIIE,
TFIIF y TFIIH.
9. • Los promotores reconocidos por la ARN
pol II poseen en su mayoria la secuencia o
caja TATA (o de Hogness), localizada a
unos 25 pb corriente arriba del punto de
iniciación (es reconocida por la TFIID).
• El TFIID es una proteína con una masa de
alrededor 750KDa. Consiste en una
proteína ligadora de la caja TATA (TBP) y
factores asociados a la TBP (TAFs).
• La TBP es un monómero que se pliega para
formar una estructura en silla de montar.
12. •Una vez que la TBP se ha fijado a la caja TATA,
entonces puede unirse el TFIIB.
•Tras la fijación del TFIIB se une un complejo
preformado de TFIIH (tetramero α2 β2).
•El TFIIH abre el duplex de ADN. Despues del
desenrrollamiento, la ARN pol II y menos de 5
factores de trasncripción van a formar un
complejo de preiniciación (PIC).
13.
14.
15. ELONGACION:
•En presencia de ATP, la actividad Helicasa del
TFIIH desenrrolla el duplex de ADN y permite
que la pol II forme un complejo abierto.
•Si se añade los trifosfatos de ribonucleosidos, la
pol II comienza a transcribir el ADN ARN.
• La subunidad mas grande de la pol II contiene
un segmento de 7 AAs que se repiten muchas
veces casi con precisión absoluta.
•Esta repetición heptapeptidica, se conoce como
el dominio carboxiterminal (CTD).
16. •In vitro, para iniciar las transcripción se utiliza
una pol II con un CTD no fosforilado, pero que
se fosforila mientras la polimerasa se aleja del
promotor.
•In vivo, el análisis de cromosomas politenicos
de Drosophila indica que el CTD también es
fosforilado durante la transcripción.
•La subunidades de la proteína TFIIH también
son necesaria para otros dos procesos:
*La activación de las proteínas cinasas
requeridas para la entrada en la fase S y la
reparación del daño del ADN, mediante
reparación por escisión.
17. TERMINACION
•Los genes eucariotes poseen una señal poli-A
localizada corriente abajo del ultimo exon.
•Esta señal es usada para añadir una serie de
residuos de Adenilato durante el procesamieto
del ARN.
• La transcripción a menudo termina 0.5-2Kb
corriente debajo de la señal poli-A, pero el
mecanismo no es claro.