Extração de dna das framboesas

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Relatório sobre a Attividade Laboratorial- Extração do DNA das framboesas

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Extração de dna das framboesas

  1. 1. Colégio Vasco da Gama Realizado por: Ganna Gab; Sílvia Urmal de Almeida Turma: 11ºB Data:12 Outubro 2014
  2. 2. Objetivos……………………………………………………………………….……………..p.2 Introdução…………………………………………………………………………….………p.3 Desenvolvimento……………………………………………………………………………..p.4 Discussão………………………………………….………………………………………….p.6 Conclusão ……………………………………………………………………...…………….p.7 Bibliografia…………………………………………………………………………………….p.8
  3. 3. O objectivo desta actividade laboratorial é conseguir extrair DNA presente no núcleo das células, neste caso nas células das framboesas, de modo a que este possa ser visto a olho nu. Material:  Framboesas;  Sal de cozinha;  Água destilada;  Álcool comercial a 96º;  Pacote de 250 mL de ananás (foi utilizada um lata de sumol);  Detergente líquido para loiça;  Gobelets de 250 mL;  Provetas de 10, 20, 50 e 100 mL;  Gaze;  Funil;  Caixa de Petri;  Banho-maria;  Espátulas;  Vidro de relógio;  Vareta de vidro;  Pipetas de 5 e 20 mL;  Frigorífico com congelador;  Bisturi;  Tubo de ensaio grande;  Suporte de tubos de ensaio. Procedimento: 1. Coloque o álcool no frigorífico para que arrefeça; 2. Pese 50g de framboesas numa caixa de Petri; 3. Com uma espátula macere as framboesas; 4. Pese 3g de sal num vidro de relógio; 5. Num gobelé de 250mL, coloque 90mL de água destilada aquecida a 60ºC; 6. Dissolva o sal na água e adicione 10 mL de detergente, mexendo lentamente durante alguns minutos; 7. Coloque a gaze num funil e filtre o preparado obtido para um gobelé; 8. Ao filtrado obtido adicione 25 mL de sumo de ananás; 9. Meça 20mL do preparado anterior para um tubo de ensaio; 10. À solução filtrada adicione, muito lentamente, 20 mL de álcool frio, com o tubo de ensaio ligeiramente inclinado. Deve distinguir-se uma fase alcoólica (sobrenadante) e uma fase aquosa (inferior); 11. Deixe repousar 5inutos; 12. Começará a ver um novelo branco (neste caso vermelho porque foram utilizadas framboesas) a formar-se no sobrenadante alcoólico) - É o DNA.
  4. 4. A molécula do DNA (ácido desoxirribonucleico), contém toda a informação da actividade celular e permite obter proteínas (síntese proteica). Esta molécula é muito grande e encontra-se dentro do núcleo, que é relativamente pequeno (por exemplo, estima-se que o DNA humano meça cerca de 2 metros, enquanto o núcleo das respectivas células mede 0,5 μm de diâmetro). O DNA das células eucarióticas encontra-se no núcleo mas também no interior das mitocôndrias e dos cloroplastos, enquanto que nas células procarióticas encontra-se espalhado pelo citoplasma.
  5. 5. Fases da Atividade Laboratorial
  6. 6. Para que fosse possível visualizar o DNA foi necessário romper a membrana celular e membrana nuclear das células das framboesas. Para que tal acontecesse as framboesas foram maceradas (processo físico) e foi adicionado o detergente de modo a destruir a bicamada fosfolipídica das membranas celulares (processo químico). A adição de sal (NaCl) serviu para neutralizar a carga negativa do DNA devido à carga positiva do ião (Na+). O DNA não se dissolve no álcool etílico, provocando a sua precipitação e consequente visualização.
  7. 7. Na primeira tentativa, a experiência não correu bem e as frutas foram desperdiçadas. No entanto, na segunda tentativa tudo correu conforme o planeado e foi possível extrair o DNA e visualiza-lo no tubo de ensaio.
  8. 8. Imagens: https://www.facebook.com/photo.php?fbid=10152742797889581&set=oa.3496194118 65163&type=1&theater https://www.facebook.com/photo.php?fbid=10152742796934581&set=oa.3496194118 65163&type=1&theater

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