O documento estabelece padrões para a classificação da morfologia de oócitos e embriões visando a comparação de resultados entre laboratórios de reprodução assistida. Ele define os pontos críticos de checagem de fertilização e clivagem e padroniza a terminologia para descrever a maturação oocitária e embrionária.
The Istanbul Consensus Workshop on Embryo Assessment: Proceedings of an Expert Meeting
1. Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special
Interest Group of Embryology
2. Padronização de uma terminologia comum em relação à
classificação da morfologia embrionária para efeito
comparativo inter-clínicas.
Consenso: Representa os padrões mínimos que cada
laboratório deve reportar em relação à classificação de
morfologia oocitária e embrionária.
3. A padronização do tempo de checagem de fertilização e
clivagem é crítica, para que seja possivel a comparação de
resultados entre laboratórios, e deve ser calculada em
horas pós-inseminação do óvulo :
• Checagem Fertilização: 17±1
• Day-2 embryo assessment 44±1
• Day-3 embryo assessment 68±1
• Day-5 embryo assessment 116±2
4. Maturação oocitária: mudanças dentro do oócito,
preparando-o para a ovulação.
Apesar da conclusão das mudanças nucleares para a
produção de oócitos em MII, esta não define sua
competência e não reflete a maturidade molecular e
estrutural do oócito. Um oócito, que não completou a
maturação citoplasmática (MC), é de pobre qualidade
e incapaz de atingir seu desenvolvimento com pleno
sucesso.
5. •Meiose reiniciada.
• Membrana nuclear
desaparece.
• Cromossomos migram para a
periferia
• Extrusão do primeiro do
corpúsculo polar
Arranjo cromossomico
haploide (23).
Arranjo
cromossômico
diploide (46)
6. Maturidade do citoplasma: citoplasma claro, com
estrutura uniforme e granulosidade homogênea e
fina.
Imaturidade do citoplasma: excesso de
granularidade, presença de vacúolos e inclusões no
citoplasma
A. Farrag et al, 2008. Recombinant HCG for triggering ovulation increases the rate of mature oocytes in
women treated for ICSI.
Loutradis Det al, 1999. Oocyte morphology correlates with embryo quality and pregnancy rate after
intracytoplasmic sperm injection. Fertil Steril, 72, 240-244.
7. Complexo cumulus-oócito (COC): Score 0 ou 1,
sendo:
1: COC considerado de boa qualidade – células
do cumulus e corona radiata expandido
8. 0 : COC considerado de má qualidade –
Células do cumulus compactadas
9. Oócito normal
Envolto por Zona Pelúcida uniforme
Citoplasma translúcido uniforme, livre de inclusões
Corpúsculo polar de tamanho normal.
Mais da metade de todos os oócitos humanos
aspirados mostram pelo menos uma anormalidade
morfológica
10. ANORMALIDADES ZP: cor ou espessura alteradas da ZP
devem ser registradas
ANORMALIDADES EPV:
Presença de inclusões no EPV
Aumento considerável no tamanho do EPV
ZP Espessa
Inclusões no EPV
11. ANORMALIDADES: De acordo com o consenso,
oócitos com tamanho consideravelmente
aumentado não devem ser inseminados, devido ao
elevado risco de aneuploidia.
13. sER: Agrupamento de retículo endoplasmático liso.
Visualizado como um disco suave, ligeiramente elíptico
e plano no citoplasma (disco único ou uma série de
discos menores).
Taxa de aneuploidia: 37%
Meriano J. et al. (2001).Tracking of oocyte dysmorphisms for ICSI patients may prove relevant to the
outcome in subsequent patient cycles.
14. SER reduzem significativamente as chances de
gestação clinica e aumentam as chances de
gestação quimica (Otsuki et al., 2004).
Hiromitsu Hattori et al, 2014: Tx fertilização
(p<0,01).Tx Gestação Clínica sER+ (3/36 – 8,3%) vs
sER- (24/105 – 22,9%; p=0,0559)
Oócitos com SER fertilizados não devem ser
transferidos (quando possivel)
15. Vacúolos
Pequenos vacúolos (5 –10 µm de diâmetro) parecem
não ter consequência biológica.
Grandes vacúolos (>14 µm de diâmetro): associados
a baixa fertilização. Quando o oócito fertiliza e o
vacúolo persiste durante a clivagem, a taxa de
blastulação é reduzida.
16. ANORMALIDADE: Oócito gigante
Geralmente associado a um conjunto diploide de
material genético.
Aparecem com baixa frequência (0,26% a 0,31%) e
são facilmente identificados por seu diâmetro
aumentado (aproximadamente 200 μm, comparados
com oócitos de tamanho regular, em torno de 140 μm
Devem ser descartados, pois há grandes
probabilidades de gerar um embrião triploide.
Atlas de Reprodução Humana, 2012. Albuquerque M. Albuquerque L e Azevedo A. Avaliação
Morfológica da Qualidade dos oócitos (Capitulo 13)
17. Pronúcleos devem ter tamanhos iguais e de localização
central.
PNs tamanhos diferentes: embriões com baixo potencial
de desenvolvimento e altas taxas de aneuploidia (Scott et
al., 2000; Scott, 2002c, 2003; Munné and Cohen, 1998;
Sadowy et al., 1998).
Localização não-central: falha de algum mecanismo
durante o processo, como na formação dos microtúbulos
por exemplo.
18. Número de
nucleolos e
distrubuição
entre os PNS
Tamanho
Nucleolos e
PNS
Polarização
Nucleolos
Localização e
Disposição dos
PNS
2PNA >3 – Igual Iguais Polarizados Central
2PNB >3 –
Diferentes
Iguais Não
polarizados ou
polarização
unilateral
Central
2PBC ≤3 – Diferente Desiguais Independente
da polarização
Periférico
19. Número de
nucléolos e
distribuição
entre os PNS
Tamanho
Nucléolos e
PNS
Polarização
Nucléolos
Localização e
Disposição dos
PNS
Categoria 1
(Simétricos)
>1 – Igual Iguais Ambos
Polarizados ou
ambos não
polarizados
Central e
justapostos
Categoria 2
(Não
Simétricos)
>1– Diferente Desiguais Polarização
unilateral
Não-
Centralizados
e/ou distantes
Categoria 3
(Anormal)
0 ou 1 –
Diferente
Independente Independente
da polarização
Independente
21. A observação de halo translúcido periférico no
citoplasma do oócito fertilizado não fornece evidências
suficientes para oferecer valor prognóstico.
23. Fragmentação Embrionária:
Leve: <10%
Moderada: 10-25% (
Grave: >25% (um quarto do embrião fragmentado)
Tamanho das Células
Simétricas ou assimétricas
24. Multinucleação
Mais de um núcleo em um mesmo
blastômero, incluindo micronúcleos, em D2.
Potencial implantação
Anomalias cromossômicas
Aborto espontâneo
25. Grau Classificação Descrição
1 Bom 4 células
<10% fragmentação
Sem multinucleação
Células Simétricas
2 Regular 3 ou 5 células
10-25% fragmentação
Sem multinucleação
Células Assimétricas
3 Ruim <3 ou > 5 células
>25% fragmentação
Multinucleado
Células Assimétricas
26. Grau Classificação Descrição
1 Bom 8células
<10% fragmentação
Sem multinucleação
Células Simétricas
2 Regular 6-7 ou 9-10 células
10-25% fragmentação
Sem multinucleação
Células Assimétricas
3 Ruim <6 ou >10 células
>25% fragmentação
Multinucleado
Células Assimétricas
27. Fertaid classifica Blastocisto segundo Gardner =
Androfert.
Consenso altera apenas a classificação de expansão dos
blastocistos
Blastocisto Boa Qualidade:
1. Totalmente expandido a eclodido (Graus IV,V ouVI)
2. ICM: proeminente, facilmente visualizado, com muitas
células compactadas e fortemente aderidas umas às
outras
3. Trofoblasto: muitas células comprimidas formando um
epitélio coeso