El documento describe un proyecto de investigación realizado por estudiantes del Colegio Loyola para la Ciencia y la Innovación en Medellín, Colombia en 2013. El objetivo del proyecto era desarrollar un material nano-sintético con capacidades de captación, retención y liberación de agua similares al musgo sphagnum. Para lograr este objetivo, los estudiantes realizaron experimentos con musgos utilizando cultivo in vitro para caracterizar sus propiedades. Luego analizaron materiales que podrían imitar las propiedades del musgo sphagnum para
3. Resumen
El proyecto está centrado en buscar una alternativa, que se basa en diseñar un
material nanosintético con propiedades de captación, retención y liberación de
agua como lo hace el musgo sphagnum, por medio del cual, se pretende
solucionar la actual problemática que se evidencia en todos los ecosistemas
colombianos; la cual se desata, por la extracción irracional del musgo que ha
generado el hombre, por medio de la intervención en los ecosistemas.
Estudiando y analizando así todas las variables que nos permitan desarrollar el
material nanosintético, el cual ayudara con la restauración de ecosistemas y la
revegetalización de zonas áridas.
5. Pregunta de investigación
¿Cómo diseñar una estructura semejante a la que utiliza el musgo sphagnum,
para la captación, retención y liberación de agua, por medio de la
nanotecnología?
6. Justificación
Debido a que las briofitas, especialmente el musgo es una planta con capacidad
de captar, retener y liberar agua, además de tener una alta tolerancia al estrés
osmótico y a la salinidad, según lo dicho en el articulo “CULTIVO IN VITRO Y
ANALISIS FENOTIPICO DE Ceratodon stenocarpus, UN MUSGO MEXICANO
CON ALTA TOLERANCIA A ESTRÉS OSMÓTICO”.Se decidió utilizar esta clase
de briofita para hacer una caracterización de las mismas y desarrollar un material
sintético con capacidades similares, según el resultado de la caracterización de
estas mismas.
7. Objetivo General
Desarrollar un material nanosintético con capacidades de captación, retención y
liberación de agua similares a las del musgo sphagnum.
Objetivos Específicos
● Realizar experimentaciones con musgo, por medio del cultivo in vitro para
reconocer las variables que afectan a estè.
● Caracterizar la composición física y morfológica del musgo sphagnum por
medio de un microscopio de fluorescencia.
● Analizar el comportamiento del musgo a diferentes situaciones de estrés.
● Identificar materiales que puedan similar las propiedades del musgo
sphagnum, para la realización del material nanosintético.
8. Descripción del problema.
La falta de recursos naturales, es algo que ha comenzado a afectar a todos,
recursos naturales como los árboles y nuestros ecosistemas están siendo
destruidos por el hombre, ya sea por la tala de estos o la extracción del musgo
para otros usos, todo esto afecta nuestros ecosistemas, dejando así un grave
impacto en nuestra tierra; los ecosistemas poseen como principal base de ellos
mismo el musgo.
El manejo irracional del musgo por parte de los humanos, ha generado gran
inestabilidad en los ambientes naturales, ya que este es parte importante del
ecosistema, este tiene la capacidad de captar y liberar agua en la tierra y ayuda a
la formación de ríos, cascadas y otras fuentes de agua totalmente naturales;
además también ayuda a prevenir la erosión del suelo y al mismo tiempo
proporciona a la tierra algunos minerales del agua lluvia. Se sabe que el agua es
la principal fuente de vida de un ecosistema,es el elemento más abundante de la
Tierra el cual cubre el 73% de la superficie terrestre,el musgo es un gran
colaborador a este, en resumidas cuentas, por lo cual si hay escasez de agua
igualmente hay escasez de fauna y flora por lo tanto, sin musgo que absorba la
mayor parte del agua de los ecosistemas todo aquello que conocemos poco a
poco se extinguirá.
9. Antecedentes del problema
Lifeng Li, director del programa internacional freshwater del fondo mundial para la
naturaleza(4), dice que es preocupante la mala gestión de recursos hídricos para
los pobladores en países de América latina, Asia meridional y África
subsahariana, donde pagan más por el agua que en Europa. Agrega que tanto
como el sector privado como el gobierno son los responsables.
De acuerdo con los escenarios de cambio climático que ha construido la Ideam,
se considera que hacia el 2050 el 60% de los páramos en Colombia habrán
desaparecido.(5)
En el caso de Colombia los ecosistemas más propensos a desaparecer por
efectos del cambio climático son los de alta montaña, los páramos y los glaciares.
De hecho, las principales fuentes de agua están ubicadas en los andes
colombianos, específicamente en las cordilleras oriental y occidental, desde
donde se origina la mayor oferta hídrica que consumen los colombianos, según
César Ruiz, coordinador socioeconómico de conservación internacional. (5)
Los factores por los cuales las fuentes se están secando y son más contaminadas
tienen múltiples orígenes. “Por un lado, existe un antecedente histórico: la
deforestación de los bosques andinos que se encuentran por encima de los 2.000
metros sobre el nivel del mar. La transformación de los páramos, que han debido
ceder grandes porciones de tierra para ampliar la frontera agrícola del cultivo de
diferentes productos, especialmente la papa, y el desplazamiento de
comunidades en las partes altas de la montaña”, asegura Ruiz.(5)
La especialista Yelitza León, habla sobre la importancia de musgos y otras
especies. Ella asegura que el problema radica en la cantidad de personas que
quieren seguir la tradición del pesebre con musgo. Imposible comparar la gente
en la región andina que lo hacía a principios de los años 1900, a las que hoy
quieren hacerlo en todo el país. En el caso por la pérdida de musgo en el páramo,
dice: “Al ser altamente impactada por la extracción, el páramo pierde diversidad,
agua, se deterioran los suelos y se afecta la belleza del paisaje”. (3)
Los musgos cumplen un papel fundamental en el ecosistema donde habitan. Sus
funciones como regulador del agua, protector de suelo y hogar de pequeños
animales (entre muchas otras) son clave para el equilibrio ecológico. Pero la
exagerada demanda de musgos y otras especies en la temporada decembrina,
10. llevó en el 2005 al entonces Ministerio del Ambiente a emitir la Resolución 122
(GORBV 38.314) que prohíbe su explotación y comercialización.
Las briofitas (hablamos de miles de especies y no de una sola), son organismos
que a diferencia de otras plantas absorben el agua y otras partículas que le sirven
de alimento a través del todo el cuerpo de la planta, eso hace que sean grandes
captadores y almacenadores de agua que van liberando al ambiente poco a
poco. Son verdaderas esponjas en bosques y páramos.
Además, protegen el suelo contra la erosión, son hogar de muchas especies de
invertebrados que son también muy útiles para la formación del suelo y además
actúan como germinadores de semillas de otras plantas de los ambientes donde
habitan.(3)
11. Metodología
Primero se buscará información sobre algunas ubicaciones geográficas aquí en
la ciudad de medellín, donde encontremos una buena variedad de briofitas.
Luego la realización de este proyecto se hará por medio de un cronograma que
separará por etapas lo que se realizará:
La Primera Etapa
Por lo primero se realizarán caracterizaciones de tipo físico evaluando el
comportamiento físico de la briofita, al estimularse con diferentes medios: luz,
agua, oscuridad, pruebas osmóticas, de cinética de reacciones, permeabilidad,
capilaridad, entre otras, para esto se hará un cultivo in vitro del musgo con un
control necesario para la manutención de la muestra.
Luego al haber pasado una cantidad específica de tiempo que permitirá la
evaluación de las capacidades y debilidades del musgo, se hará un análisis de
todo el proceso del musgo en los invernaderos con su respectivo diagnóstico.
Cultivo In Vitro:
Para el cultivo in vitro se observan distintas variables como lo son la humedad, la
temperatura, la reproducción; además también de mirar qué minerales son
buenos para el medio de cultivo que permita la propagación del musgo
La caracterización morfológica, identificando sus diferentes partes y sus
funciones.
Luego la caracterización óptica, para identificar a microescala sus características
morfológicas.
Y luego someterla en la segunda fase a condiciones de estrés para analizar su
comportamiento
La segunda etapa hará referencia a la selección del musgo que se utilizará;
También se hará una caracterización de materiales orgánicos que nos permitirá
encontrar uno con características morfológicas compatibles con las del musgo.
Cuando se encuentre será la hora de pasar a la tercera y última etapa del
proyecto que será el desarrollo del material como tal y las pruebas de su eficacia
con respecto a las expectativas que se tenían al comenzar con el proyecto;
cuando su eficacia sea comprobada pasaremos a producir en masa este material
para la comercialización del mismo.
13. MARCO TEÓRICO
Briofitas
En el ambiente terrestre, son cerca de 20,000 especies, las briofitas son el
segundo grupo más importante de plantas verdes. Generalmente son pequeñas y
habitan en ambientes muy variados, desde cerca del nivel del mar hasta las
elevaciones más altas, en las selvas o en los desiertos, pero su vida siempre está
íntimamente ligada al agua en estado líquido. Su ciclo de vida incluye dos fases:
el gametofito y el esporofito. Cada una de ellas tiene atributos morfológicos y
biológicos que señalan a las briofitas como un grupo excepcional y muy
importante en la evolución del reino vegetal. Tradicionalmente se les divide en tres
categorías, a saber, Antocerotes, Hepáticas y Musgos.
Estas plantas se caracterizan porque no tienen vasos conductores, ni frutos ni
flores.
El Ciclo de Vida de las briofitas
Las briofitas tienen un ciclo de vida heteromórfico. El gametofito o fase haploide
es la dominante en las briofitas; es la más conspicua y la que tiene mayor
duración. En comparación, el esporofito o fase diploide es pequeño y de
duración corta. En la fase del gametofito, las plantas verdes pueden tener formas
taloides o foliosas que derivan de la división de una sola célula apical. Durante la
etapa reproductiva, el gametofito produce órganos sexuales masculinos
(anteridios) o femeninos (arquegonios); las células sexuales masculinas o
anterozoides son biflagelados y, por lo tanto, necesitan un ambiente acuoso
para desplazarse. Los anterozoides y la oosfera (célula sexual femenina) se
produce por mitosis pues se forman en gametofitos haploides. Al ocurrir la
fecundación, la célula diploide o cigoto, derivada de la unión de las dos células
sexuales, por divisiones sucesivas se transforma en un embrión multicelular. Más
tarde, una vez diferenciado el pie que lo sujeta al gametofito y la seta o pedicelo
que sostiene a una cápsula, el embrión se transforma en un esporofito en el que
la división meiótica del tejido esporógeno de la cápsula permite la formación de
esporas unicelulares haploides. Las esporas maduras son liberadas y al
dispersarse, germinan y forman filamentos o masas celulares que se conocen
como `protonema'. A partir del protonema forman nuevos gametofitos.
14. gametofito: las plantas con ciclo de vida haplodiplonte (es decir, con
generaciones alternadas de individuos haploides y diploides), se llama gametofito
al individuo de la generación haploide. El gametofito es descendiente de un
individuo adulto fértil de la generación diploide (llamado esporofito), y a su vez
tendrá descendientes directos que también serán diploides (esporofitos).
El gametofito es en un principio una única célula haploide derivada de la meiosis
producida en el esporofito (el individuo adulto diploide multicelular), pero a
diferencia de lo que pasa con los animales por ejemplo, esta célula haploide
posteriormente se desarrolla por mitosis, dando un individuo adulto multicelular.
Es este adulto multicelular el que dará las gametas fértiles que se unirán durante
la fecundación, dando un nuevo individuo diploide.
El gametofito produce los gametos masculinos o femeninos (o ambos). No hay
cambio de número de cromosomas en el gameto, que tiene la misma cantidad
haploide de cromosomas que el gametofito y por lo tanto en este caso los
gametos son producidos por mitosis (esto es una diferencia con lo que pasa en el
ciclo de vida diplonte que poseen los animales, por ejemplo). La fusión de los
gametos masculinos y femeninos produce el cigoto diploide.
el gametofito es una fase visible del ciclo de vida. En los briofitos se dice que el
gametofito es "la fase dominante" del ciclo de vida, porque es fotosintético y el
que debe resistir la presión de selección del ambiente.
15. esporofito: se llama esporofito a la fase diploide multicelular, la cual produce por
meiosis esporas haploides (meiosporas), de cuyo desarrollo deriva individuos
haploides, llamados gametofitos.
Un esporofito se desarrolla por proliferación celular (mitosis) a partir de un cigoto,
formado por fecundación, es decir, la fusión de dos gametos o células sexuales
haploides, originados en órganos especializados llamados gametangios que se
desarrollan sobre los gametofitos.
El gametofito es la estructura haploide multicelular de las plantas haplodiplontes
(con alternancia de generaciones gametofítica y esporofítica).
Un esporofito se desarrolla por proliferación celular (mitosis) a partir de un cigoto,
formado por fecundación, es decir, la fusión de dos gametos o células sexuales
haploides, originados en órganos especializados llamados gametangios que se
desarrollan sobre los gametofitos
16. Los Musgos:
Los musgos son plantas briofitas que crecen en gran variedad de condiciones,
desde el agua a las rocas. Eso sí, generalmente los encontramos en suelos
húmedos: troncos, cortezas de árboles. Con cerca de 13.000 especies en todo el
planeta, los musgos son el grupo más numeroso y diverso de las briofitas.
Los musgos son plantas simples: sin vasos conductores, ni flores, ni frutos, el
musgo inhibe la erosión del suelo y promueve la retención de la humedad del
mismo. Así, Se encontramos al musgo entre los primeros organismos que
colonizan las rocas. Y es que al crecer éstos sobre las rocas modifican su
superficie y forman un sustrato en el que pueden agarrar otras plantas.
El tallo puede ser erecto o postrado, de unos milímetros o centímetros de tamaño;
su estructura interna, aunque simple, puede incluir un eje o cordón central en
muchos musgos, y un sistema de conducción primitivo en algunos grupos.
Además de los rizoides, los tallos de los musgos pueden tener estructuras
fotosintéticas o de protección como pelos axilares, parafilios y pseudo parafílicos.
Las hojas están arregladas en forma espiral sobre el tallo, pero con frecuencia
tienen otros arreglos; son uni o pluriestratificadas y sus células varían en tamaño,
forma y ornamentación. Las hojas de muchos musgos tienen una costa, un nervio
de longitud variable que puede prolongarse más allá de la lámina foliar en un
mucrón o pelo foliar hialino. La costa puede se doble en algunos musgos
tropicales y en algunos musgos, está cubierta por filamentos o lamelas. La
anatomía de la costa también es compleja; consiste de varios tipos de células,
incluyendo algunas de pared gruesa y otras de pared delgada que participan en la
conducción de agua.
17. Las Hepáticas:
Estamos ante plantas briofitas que se encuentra en emplazamientos húmedos.
Presentan un tallo provisto de rizoides. Este talo les sirve para fijarse y absorber
alimento. No presentan vasos conductores, aunque sí poseen células muy
especializadas. Poseen unos pequeños tallos con arquegonios (gametofitos
femeninos) y anteridios (gametofitos masculinos). Hay plantas hepáticas talosas y
foliosas.
Los Antoceros:
Los antoceros parecen un grupo de plantas esencial y clave en la evolución de las
plantas. El gametofito es de estructura simple y presenta rasgos primitivos. Se
conocen algo más de 100 especies de antoceros en el planeta. Su gametofito es
un talo multiestratificado en el que cada célula contiene de 1 a 12 cloroplastos
lenticulares.
18. Capilaridad:
La capilaridad es una propiedad física del agua por la que ella puede avanzar a
través de un canal minúsculo (desde unos milímetros hasta micras de tamaño)
siempre y cuando el agua se encuentre en contacto con ambas paredes de este
canal y estas paredes se encuentren suficientemente juntas.
Esta propiedad la conocemos todos pues es perfectamente visible cuando
ponemos en contacto un terrón de azúcar con el café. El agua del café "invade" en
pocos segundos los pequeños espacios de aire que quedan entre los minúsculos
cristales de sacarosa del azucarillo.
Pues bien, esta misma propiedad es la que distribuye el agua por el
microespacio de aire que queda entre las partículas del suelo o sustrato. Allí
queda el agua retenida hasta que finalmente es encontrada por las raíces de las
plantas siendo absorbida por unos pelillos que tienen las mismas, que son los
encargados de cumplir con esta misión de absorción. La capilaridad, es pues, el
principio natural por el que el agua circula a través el suelo de nuestros campos y
bosques y nutre a todas las plantas de la tierra.
19. TURGENCIA: Es el estado de RIGIDEZ de una célula Vegetal, es decir, es el
fenómeno por el cual las células al ABSORBER H2O, se HINCHAN, ejerciendo
PRESIÓN contra las membranas celulares, las cuales se ponen tensas. De esto
depende que una planta esté marchita o firme. Este fenómeno esta relacionado
con la ÓSMOSIS.
La PRESIÓN ejercida por la absorción de H2O hace que las células se DILATEN
cuanto lo permite la elasticidad de las membranas, y por ende la resistencia de
las células vecinas, es por eso que los órganos, como por ejemplo el pecíolo, el
tallo, las hojas y frutos maduros se encuentren en ese estado de firmeza.
Las PLANTAS dependen de la PRESIÓN de TURGENCIA para la elongación de
sus células y para su crecimiento y usan este fenómeno para regular la
transpiración a través de la apertura y cierre de las células estomáticas.
PLASMÓLISIS: Es contrario a la Turgencia. En este fenómeno las células al
PERDER H2O se CONTRAEN, separándose el Protoplasto de la Pared Celular.
Cuando por ejemplo se amputa un órgano de la planta este se marchita en un
determinado tiempo. También si la planta se encuentra un tiempo extendido a los
rayos solares se produce un exceso de TRANSPIRACIÓN, provocando de esta
manera la eliminación de vapor de agua al medio.
osmosis: Se define ósmosis como una difusión pasiva, caracterizada por el
20. paso del agua, disolvente, a través de la membrana semipermeable, desde la
solución más diluida a la más concentrada.
La ósmosis a pesar de que su nombre suene tan raro, no es más un proceso
normal de toda célula, según el cual un líquido pasa de una región de alta
concentración acuosa a través de una membrana semipermeable a una región
de baja concentración con el objetivo de igualar las concentraciones de ambos
solutos.
presión osmótica : entendemos por presión osmótica, a aquella que sería
necesaria para detener el flujo de agua a través de la membrana semipermeable.
Al considerar como semipermeable a la membrana plasmática, las células de los
organismos pluricelulares deben permanecer en equilibrio osmótico con los
líquidos tisulares que los bañan.
características que distinguen a las plantas de otros organismos :
21. 1. las plantas son eucariotas pluricelulares, en la clasificación moderna; las
plantas se encuentran entre eucariotas, organismos cuyas células poseen un
núcleo, membrana que contiene el ADN celular.
2. casi todas las plantas son capaces de realizar fotosíntesis. como las plantas
pueden fabricar su alimento mediante la misma, se les conoce como autótrofas.
3. las plantas poseen paredes celulares compuestas principalmente por celulosa.
la celulosa es una cadena de moléculas de glucosa. las paredes celulares ricas
en celulosa ayudan a distinguir las plantas de otros eucariotas.
4. las plantas presentan dos formas o fases que se alternan para producirse
mutuamente. una de ella fábrica esporas, células reproductoras que puede
convertirse en adultos sin fusionarse con otra célula reproductora. la otra forma
adulta fabrica espermatozoides u ovocélulas. el espermatozoide fecunda la
ovocélula para crear un embrión que da lugar al organismo adulto.
5. el embrión pluricelular de las plantas se encuentra protegido dentro de la planta
madre. los embriones protegidos evolucionaron como una forma de adaptación a
la vida terrestre.
cada una de estas características no es inherente por sí misma a las plantas, pero
en conjunto todas son útiles para distinguir las plantas de otros organismos.
La progenie vegetal puede concebirse mediante reproducción sexual o
reproduccion asexual, en la que un unico progenitor puede tener hijos identicos a
èl.asíi mismo, el crecimiento vegetal es bastante diferente a el animal. los
vegetales pueden crecer durante toda su vida y, debido a que este crecimiento
es ilimitado, se conoce como crecimiento indeterminado.
Microscopio de fluorescencia
Microscopía de fluorescencia: Descubierto en 1908 por Köhler y Siedentopf, y
se basa en que una sustancia natural en las células o un colorante fluorescente
aplicado al corte es estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energía
absorbida
da como rayas luminosos.
Siendo escasas las moléculas auto fluorescentes, su aplicación más difundida es
para revelar una fluorescencia agregada, como en la detección de antígenos o
anticuerpos. También se puede inyectar moléculas fluorescentes específicas en
22. un animal o directamente en células y usarlas como marcadores.
Fluorocromos: Pueden usarse directamente, aprovechando la propiedad de
unirse a determinadas moléculas u orgánulos. Pero lo más habitual es que estos
colorantes se emplean conjugados a otras moléculas, como anticuerpos, que son
capaces de unirse de modo específico a estructuras concretas de la célula.
Algunos colorantes denominados fluorocromos tienen la propiedad de ser
excitados (pasar a un nivel superior de energía) cuando absorben luz ultravioleta
(luz de longitud de onda corta).
Problema: La utilización de fluorocromos pierde grandes intensidades de luz
empleadas, entonces no pueden observadas durante largos periodos de tiempo
debido a la desaparición de la fluorescencia.
Fluorescencia: A medida que las moléculas excitadas regresan a su estado
normal liberan el exceso de energía en forma de luz visible de mayor longitud de
onda que la radiación excitante. Los objetos fluorescentes aparecen
brillantemente iluminados contra un fondo oscuro, según el color del colorante
usado.
Epifluorescencia: Hoy día se utiliza mucho un microscopio de fluorescencia en
el cual la luz es emitida desde arriba del preparado. Por lo tanto, el objetivo del
microscopio actúa como lente iluminadora y de imagen.
Microscopio de fuerza atómica (AFM)
El Microscopio de Fuerza Atómica (AFM) es un instrumento mecanoóptico capaz
de detectar fuerzas del orden de los nanos newtons. Al analizar una muestra, es
capaz de registrar continuamente la altura sobre la superficie de una sonda o
punta cristalina de forma piramidal. La sonda va acoplada a un listón
microscópico, muy sensible al efecto de las fuerzas, de sólo unos 200 µm de
longitud (cantiléver, ver figura).
La fuerza atómica se puede detectar cuando la punta está muy próxima a la
superficie de la muestra. Es posible entonces registrar la pequeña flexión del
listón mediante un haz láser reflejado en su parte posterior. Un sistema auxiliar
piezoeléctrico desplaza la muestra tridimensionalmente, mientras que la punta
recorre ordenadamente la superficie. Todos los movimientos son controlados por
una computadora.
La resolución del instrumento es de menos de 1 nm, y la pantalla de visualización
permite distinguir detalles en la superficie de la muestra con una amplificación de
23. varios millones de veces.
Algunas imágenes obtenidas con el Microscopio de Fuerza Atómica son las
siguientes: a) cabello, b) bacilo "anclado" sobre una base de vidrio, c) plano de
clivaje de la mica. Note las diferentes escalas y que en (c) se resuelven detalles
bastante menores de 1 nm.
24. Marco Referencial
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Y WEBGRÁFIAS
1. Fuente “Florpedia.com”, “Plantas no vasculares”, publicado en el año
2008, recopilado el 30 de mayo del 2013 de:
http://plantas.florpedia.com/plantasnovascularesbriofitas.html
2. Fuente “euroresidentes.com”, “Tecnología de riego avanzado EL
PRINCIPIO DE LA CAPILARIDAD”, recopilado el 30 de mayo del 2013
de:http://www.euroresidentes.com/jardineria/sistemas_de_riego/rieg
o/riego_en_casa/capilaridad.htm
3. Fuente: “Colegio Tecnólogos Médicos de Chile A.G”, “Microscopio de
Fluorescencia”, publicado el 27 de julio del 2012, recopilado el 30 de mayo
del 2013 de la pagina:
http://morfoudec.blogspot.com/2008/07/microscopadefluorescenci
a.html
4. Fuente “Universidad Nacional(UNal)”, “escasez de recursos en colombia”,
recuperado el 04 de junio del 2013 de:
http://www.idea.unal.edu.co/public/docs/abund_escasez.pdf
5. Luis Aparicio Hernández, “Los musgos “son verdaderas esponjas en
bosques y páramos” publicado el 23 de diciembre del 2007, recopilado el
04 de junio de 2013 de la pagina:
http://www.condesan.org/ppa/node/3393
6. Marcela Osorio Granados, “La escasez de agua puede ser inevitable:
WWF” publicado el 22 de marzo del 2013, recopilado el 04 de junio del
2013 de la pagina:
http://www.elespectador.com/noticias/medioambiente/articulo4119
01escasezdeaguapuedeserinevitablewwf
7. Sandra del Castillo, “El país se está quedando sin agua”, publicado el 21
de marzo del 2011, recuperado el 04 de junio del 2013 de la
página:http://www.elespectador.com/noticias/cultura/vivir/articulo25
8295elpaisseestaquedandosinagua
8. Fuente: “fisica.uh.cu”, “Microscopio de Fuerza Atómica” recopilado el 30
de mayo del 2013 de la pagina:
http://www.fisica.uh.cu/bibvirtual/vida%20y%20tierra/microscopiofu
erza%20atomica/
9. Morray W. Nabore, Pearson y Addison Wesley, “Introducción A La
Botánica El Mundo De Las Plantas” Publicación “no conocida”, recopilado
el 29 de mayo del 2013, (capitulo del 1 al 20).