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1 de 68
Plaquetas: fisiologia e avaliação laboratorial

                        Nelcivone Soares de Melo

                              Hematologia

                             Patologia clínica

                          Goiânia/Março/2011




14/4/2013                           nsm                      1
Células sanguíneas




14/4/2013           nsm          2
Plaquetas




14/4/2013      nsm      3
Importância

            Hemorragia




                               Trombose




14/4/2013                nsm              4
Terminologia

                              Trombocitopenia




            Trombocitopatia                     Trombocitose




                              Tromboastenia




14/4/2013                          nsm                         5
Fatores de crescimento plaquetários
                                     PDGF – Fator
                                           de
                                     crescimento
                                      derivado da
                                       plaqueta


            VEGF – Fator
                 de                                          TGF – Fator de
            crescimento                                       crescimento
              vascular                                       transformante
             endotelial




                     ILGF – Fator
                                                    FGF – Fator de
                          de
                                                     crescimento
                    crescimento“i
                                                    do fibroblasto
                      nsulin-like”




14/4/2013                            nsm                                      6
Hematopoiese




14/4/2013       SBAC/RO/AC   7
Plaquetogênese




14/4/2013         nsm        8
Plaquetogênese




14/4/2013         nsm        9
Plaquetogênese




14/4/2013         nsm        10
Liberação das plaquetas

      Megacariócitos maduros na
      medula óssea emitem protusões
      citoplasmáticas (próplaquetas) no
      interior dos vasos.


      A força do fluxo sanguíneo
      fragmenta essas protusões e gera
      as plaquetas no interior dos vasos.




14/4/2013                                   nsm   11
Trombopoietina



                      Produzido             Regula a
      Hormônio
                      no fígado e         produção de
     glicoproteico
                       nos rins            plaquetas




14/4/2013                           nsm                 12
Produção de plaquetas


            Normal: 1x1011/dia

            Aumenta com sangramento

            Diminui após sangramento




14/4/2013                          nsm   13
Vida média das plaquetas

            Circulando: 8 – 12 dias


            Destruição por fagocitose


            Sinusóides do baço e células
            de Kupfer do fígado




14/4/2013                                  nsm   14
Equilíbrio produção vs. destruição
                                            Destruição
                                            aumentada

            Produção
                                             Produção
                                             diminuida




                       Destruição             Púrpura
                                          trombocitopênica




14/4/2013                           nsm                      15
Hemostasia primária




                                                             Plug
                                                             hemostárico
                                               Agregação
                                               plaquetária

                           Adesão
                           plaquetária


              Lesão
              endotelial




14/4/2013                                nsm                               16
Hemostasia primária




14/4/2013           nsm           17
Hemostasia secundária



            Formação da malha de             Formação do plug de
                   fibrina                         fibrina
            • Simples e fina                • Espessa e abundante
            • Aprisiona as hemácias         • Demora minutos




14/4/2013                             nsm                           18
Etapa 1: Adesão plaquetária




14/4/2013               nsm               19
Etapa 1: Adesão plaquetária




14/4/2013               nsm               20
Fator Von Willebrand




14/4/2013            nsm           21
Fator Von Willebrand




14/4/2013            nsm           22
Mecanismo de adesão




14/4/2013            nsm          23
Papel da Gp IIb IIIa




14/4/2013            nsm           24
Inibidores endógenos




14/4/2013            nsm           25
Inibidores exógenos




14/4/2013           nsm           26
Etapa 2: Ativação das plaquetas



     Sofrem
 modificações     Ficam         Emitem
       no        esféricas   pseudópodos
 citoesqueleto




14/4/2013                                  nsm   27
Plaquetas ativadas

                                Secretam
                                produtos



                   Gatilho
                  para vias
                 enzimáticas

                                         Estimula
                                        atividade
                                      procoagulante




14/4/2013                      nsm                    28
Estimulo enzimático




14/4/2013           nsm           29
Etapa 3: Secreção plaquetária




14/4/2013                nsm                30
Etapa 3: Secreção plaquetária




14/4/2013                nsm                31
Etapa 4: Agregação plaquetária




14/4/2013           nsm                32
Etapa 4: Agregação plaquetária




14/4/2013           nsm                33
Etapa 4: Agregação plaquetária




14/4/2013           nsm                34
Etapa 4: Agregação plaquetária




14/4/2013           nsm                35
Mediadores importantes




14/4/2013             nsm            36
Formação do plug




14/4/2013          nsm         37
Mecanismo de formação do plug




14/4/2013        nsm                38
Interação vaso-plaqueta




14/4/2013             nsm             39
Avaliação laboratorial
                     Tempo de sangramento
                               Prova do laço
                        Retração do coágulo
                             Plaquetograma
                                Microscopia
                     Adesividade plaquetária
                     Agregração plaquetária
                                    PFA-100
                         Tromboelastografia
                                Mielograma




14/4/2013              nsm                     40
Tempo de sangramento
                    Metodologia: Ivy x Duke

                             Invasivo

                            Laborioso

                         Desconfortável

                       Baixa sensibilidade

                     Baixa reprodutibilidade

                            Aplicações
                         • Diagnóstico de DVW
                       • Monitoramento de DDAVP


14/4/2013             nsm                         41
Prova do laço
            Técnica                     Figura
• Insuflar o manguito entre a
  PA sistólica e a diastólica,
  deixando:
      – 5 minutos adultos
      – 3 minutos em crianças
• Após esse tempo, desenhar
  um quadrado de 2,5 cm de
  lado no local onde surgirem
  mais petéquias;


14/4/2013                        nsm             42
Prova do laço
            Técnica                        Figura
• Contar o nº de petéquias
  em um quadrado de 2,5 cm
  de lado e considerar
  positivo se:

      – > 20 em adultos
      – > 10 em crianças




14/4/2013                       nsm                 43
Prova do laço
            Atenção!                   Figura



Esta prova não
pode ser realizada
com garrote ou
torniquete.

14/4/2013                   nsm                 44
Retração do coágulo
            Aplicação:        Interferentes:

              Avaliação da
               capacidade         Quantidade de
              funcional das         plaquetas
                plaquetas



                                     Função
                                   plaquetária




                                  Hematócrito




                                 Concentração do
                                   fibrinogênio




14/4/2013                                   nsm    45
Contagem de plaquetas

       Normal: 150.000 – 500.000/uL

       Trombocitose: > 500.000/uL

       Trombocitopenia: < 150.000/uL

       Risco de sangramento: < 20.000/uL

       Trombocitopenia severa: < 10.000/uL




14/4/2013                              nsm   46
Plaquetograma

                        Valores de referência
  Analito                                        Limites

  Plaquetas                                150.000 – 500.000/uL

  Plaquetócrito                              0,100 – 0,500 %

  VPM (volume plaquetário médio)              6,00 – 10,00 fL

  PDW (coeficiente de anisocitose)            10,0 – 18,0 %




14/4/2013                            nsm                          47
Contadores eletrônicos



                                        Hemograma com
                                        25 parâmetros e
                                        diferencial de 5
                                        partes.

                                        120 exames/h.


            Coulter STKS

14/4/2013                  SBAC/RO/AC                      48
Tecnologia VCS

             Volume




                               Condutividade



                                               Scatter laser
                                               Difração




14/4/2013             SBAC/RO/AC                               49
Trombocitopenia

                           • Púrpuras
                             trombocitopênicas
                           • Mieloaplasias
                           • Leucemias agudas
            <150.000/uL    • Grandes hemorragias
                           • Viroses
                           • Esplenomegalia
                           • CIVD
                           • Septicemias



14/4/2013                              nsm         50
Trombocitose

                      • Síndromes
                        Mieloproliferativas
                      • Pós-Hemorragia
       > 500.000/uL   • Doenças Inflamatórias
                        Crônicas
                      • Pós-Esplenectomia
                      • Anemia Ferropriva



14/4/2013                      nsm              51
Microscopia

            Plaquetas normais




                                Satelitismo




                                              Aglomerados




14/4/2013              nsm                             52
Normal           Corpúsculos de Dohle




Macroplaquetas      Esquizócitos
Adesividade plaquetária

        Sangue   Tubo plástico      Pérolas de vidro




                 1ª contagem:              2ª contagem:
                 350.000/ul                200.000/ul


                 Adesividade: 200.000/350.000*100 = 57,14%




14/4/2013                         nsm                        54
Agregação plaquetária




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Agregação plaquetária




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Agregação plaquetária




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Agregação plaquetária




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Agregação plaquetária




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Agregação plaquetária
   ADP
           Receptor de fibrinogênio                                 GP IIb/IIIA
   Ácido Araquidônico
           Via enzimática                                           Tromboxane A2
   Colágeno
           Receptor de colágeno                                     GP Ia/IIa
   Ristocetina
           Receptor de vWF                                          GP Ib/IX/V
   Adrenalina
           Receptores alfa adrenérgicos inibição da adenilciclase AMPC intracelular.
   Trombina
           Receptor de trombina




14/4/2013                                         nsm                                   60
Agregação plaquetária




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Agregação plaquetária




14/4/2013            nsm            62
Agregação plaquetária
                        Bernard-Soulier       Von Willebrand        Glanzmann
            Agonista                                                                   Aspirina
                            GPIb                  VWF              GPIIb e GPIIIa



             ADP
                           Normal                Normal               Ausente           Normal



     Ác Araquidônico
                           Normal                Normal               Ausente          Ausente



        Colágeno
                           Normal                Normal                Normal          Diminuida



       Ristocetina
                           Ausente        Ausente ou diminuida   Normal ou diminuida    Normal



        Adrenalina
                           Normal                Normal               Ausente           Normal



        Trombina
                           Normal                Normal               Ausente           Normal




14/4/2013                                        nsm                                              63
PFA-100

   • Avalia a função plaquetária in vitro.
   •Elimina os interferentes da agregometria
   convencional.
   •Utiliza sangue total.
   •Simula as condições fisiológicas das
   arteríolas.
   •Mede o tempo de oclusão.
   •Utiliza dois agonistas (colágeno/epinefrina e
   colágeno/ADP).
   •Apresenta grande
   sensibilidade, especificidade e
   reprodutibilidade.

14/4/2013                              nsm          64
Tromboelastografia




14/4/2013           nsm          65
Mielograma
   Condição          Medula óssea                Diagnóstico

   Trombocitopenia   Megacariócitos ausentes     Hipofunção medular



                     Megacariócitos aumentados   Destruição periférica



   Trombocitose      Normal                      Trombocitose reativa



                     Anormal                     Síndrome mieloproliferativa



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Mielograma




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