Agregometria plaquetaria

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Agregometria plaquetaria

  1. 1.  FUNDAMENTO › La agregometria plaquetaria es una técnica utilizada para estimar la cinética de la agregación de la plaquetas por medio de turbidometria (medición de la turbidez o densidad óptica). › Es el patrón de referencia para el estudio de la función plaquetaria.
  2. 2.  METODO OPTICO CON PLASMA RICO EN PLAQUETAS. METODO DE IMPEDANCIA CON SANGRE COMPLETA.
  3. 3.  ESTA PRUEBA MIDE EN TIEMPO REAL LA AGREGACION DE LAS PLAQUETAS EN UNA MUESTRA DE PLASMA RICO EN PLAQUETAS MEDIANTE ACLARAMIENTO OPTICO. PARA SU REALIZACION SE REQUIERE UN AGREGOMETRO (ESPECTROFOTOMETRO).
  4. 4.  SE REALIZA SEPANRANDO LOS ERITROCITOS Y LEUCOCITOS D E EL PLASMA Y LAS PLAQUETAS EN UNA MUESTRA DE SANGRE COMPLETA, MEDIANTE CENTRIFUGACION LENTA (1000 RPM) DURANTE 15 MINUTOS. TAMBIEN SE REQUIERE LA PREPARACION DE UNA MUESTRA DE PLASMA POBRE EN PLAQUETAS, QUE SE OBTINE POR CENTRIFUGACION RAPIDA (3000 RPM).
  5. 5.  ESTA MUESTRA DE DEPOSITA EN UNA CUBETA DE INCUBACIONA 37 GRADOS CENTRIGRADOS, QUE SE ENCUENTRA ENTRE UNA FUENTE DE LUZ Y UNA FOTOCELDA DE MEDICION QUE CALCULA LA DENSIDAD OPTICA O TURBIDEZ DEL PRP.
  6. 6.  LA CALIBRACION DE LA TRANSMISION DE LA LUZ A TRAVES DE EL PLASMA POBRE EN PLAQUETAS O CLARO, SE AJUSTA AL 100%; LA TRANSMISION DE LUZ A TRAVES DE PLASMA RICO EN PLAQUETAS O9 TURBIO ENTONCES SE AJUSTA AL 0%.
  7. 7.  DESPUES SE AGREGA UNA DE VARIAS SUSTANCIAS CONOCIDAS POR SU EFECTO AGONISTA SOBRE LAS PLAQUETAS, CON LÑA FINALIDAD DE INDUCIR AGREGACION DE LAS PLAQUETAS Y SIMULAR IN VITRO LO QUE SUCEDE IN VIVO.
  8. 8.  EPINEFRINA ADP COLAGENA ACIDO ARAQUIDONICO TROMBINA RISTOCETINA (antibiótico que estimula la agregación por aumento de la unión de FvW a GP Ib)
  9. 9. EN EL TRASCURSO DE ESTE PROCESO LALUZ PASA A TRAVES D ELA CUBETA CONEL PRP Y SE CAPTURA POR EL DETECTORO FOTOCELDA EN EL LADO OPUESTO.CONFORME LAS PLAQUETAS SEAGREGAN EN RESPUESTA ALAGONISTA, EL PRP SE ACLARA Y SETRANSMITE MAYOR CANTIDAD DE LUZ.LA TRANSMISION DE LA LUZ SE MIDE ENTIEMPO REAL Y SE GRAFICA ELPORCENTAJE DEL ALCARAMIENTO DE LAMUESTRA.
  10. 10.  LA TRANSMISION DE LA LUZ ES DIRECTAMENTE PROPORCIONAL A LA AGREGACION PLAQUETARIA. ES DECIR, A MAYOR AGREGACIONPLAQUETARIA, MAYOR TRANSMISION DE LA LUZ Y VICECERSA.
  11. 11. Esquema de la agregación plaquetariaen plasma rico en plaquetas
  12. 12.  SU GRAFICACION GENERA UNA CURVA DE LA AGREGACION PLAQUETARIA EN PORCENTAJE Y TIEMPO. SE DEBE ESTUDIAR UN AGONISTA A LA VEZ. LA CURVA TIPICA DE LA AGREGACION PLAQUETARIA TIENE CINCO FASES DISTINTAS CON DOS CURVAS.
  13. 13. 1. INCREMENTO INICIAL DE LA TRANSMISION DE LA LUZ ATRIBUIBLE A DILUCION DEL PRP POR EL AGONISTA QUE AÑADE2. DISCRETA DISMINUCION DE LA TRANSMISION CONFORME LAS PLAQUETAS CAMBIAN FORMA3. INGREMENTO AGUDO INICIAL DE LA TRANSMISION CONFORME LAS PLAQUETAS SE AGREGAN(AGREGACION PRIMARIA)4. MESETA BREVE O DISMINUCION DE LA AGREGACION5. AGREGACION SECUNDARIA QUE SE ESTIMULA POR LA SECRECION DE LOS GRANULOS PLAQUETARIOS
  14. 14.  EN LA MAYORIA DE LOS INDIVIDUOS ESTA RESPUESTA BIFASICA SE OBSERVA CON CONCENTRACIONES BAJAS DE ADP Y EPINEFRINA. LAS CURVAS QUE SE GENERAN CON OTROS AGONISTAS (COLAGENA, RISTOCETINA) SON TIPICAMNETE UNIMODALES CON UNA SOLA CURVA.
  15. 15.  CONSUME TIEMPO LABORIOSO Y COMPLEJO SE REQUIERE EQUIPO HUMANO BIEN ADIESTRADO Y CON EXPERIENCIA EN LA TECNICA
  16. 16.  MUESTRA DEBE OBTENERSE POR PUNCION VENOSA DIRECTA COLECTAR EN TUBOS CON ANTICOAGULANTE CITRATO ( PARA TIEMPOS DE COAGULACION) REALIZAR EN LAS TRES HORAS SIGUIENTES A LA RECOLECCIONDE LA MUESTRA NO REALIZAR EN MUESTRAS HEMOLIZADAS LIPEMICAS O CONTAMINADAS POR ERITROCITOS.
  17. 17.  EN ESTE METODO SE COLOCA LA MUESTRAS DE SANGRE EN UNA CUBETA O RECIPIENTE A 37 GRADOS CENTIGRADOS, SE COLOCAN DOS ELECTRODOS DE PLATINO A DISTANCIA FIJA Y ENTRE LOS ELECTRODOS SE APLICA UNA CORRIENTE ELECTRICA.
  18. 18.  LA ADICION DE UN AGONISTA ESTIMULA LA AGREGACION DE LAS PLAQUETAS EN LA SUPERFICIE DE LOS ELECTRODOS LO QUE IMPIDE EL FLUJO DE LA CORRIENTE ELECTRICA. EL AUMENTO EN LA RESISTENCIA AL FLUJO DE LECTRICIDAD ES PROPORCIONAL A LA AGREGACION . ESTE METODO ELIMINA VARIAS DE LAS VARIBALES CONFUSAS EN LA PREPARACION DEL PRP, YA QUE NO SE REQUIERE, ADEMAS DE SER MAS SIMPLE Y FACIL DE REALIZAR.
  19. 19. EPINEFRINA RISTOCETINA COLAGENA100 100% 100%50% 50% 50%0% 0% 0% AC. ARAQUIDONICO EPINEFRINA SEROTONINA100 100% 100%50% 50% 50% 0% 0%0%
  20. 20.  EN LA PRACTICA CLINICA LA UTILIDAD DE ESTOS ESTUDIOS ES MUY AMPLIA; SIN EMBARGO LOS RESULTAOS NO SON ESPECIFICOS DE ALGUN TRASNTORNO EN PARTICULAR. ESTA PRUEBA NO SE DEBE UTILIZAR COMO ESTUDIO GENERAL, SOLO EN CASOS DE SITUACION DE SOSPEHCA DE UNA SITUACION ESPECIFICA.

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