Cultura celular e de órgãos

5.316 visualizações

Publicada em

Cultura de Células e tecidos.

Publicada em: Saúde e medicina
  • Seja o primeiro a comentar

Cultura celular e de órgãos

  1. 1. ENFERMAGEM 2012.2
  2. 2. ConceitoConceitoConjunto de técnicas que permitem cultivar ou mantercélulas isoladas fora do organismo onde existem,mantendo as características próprias;A cultura de tecidos é um termo genérico que inclui acultura de órgãos, o qual é o crescimento de pequenosfragmentos de tecidos ou de um completo órgãoembrionário, essa cultura implica a préviadesagregação (mecânica ou enzimática) do tecidooriginal e em que as células são cultivadas numacamada aderente, num substrato sólido ou emsuspensão em meio de cultura.
  3. 3. Alguns DestaquesAlguns DestaquesFerramenta de estudos de processos biologicosGrande avanço (1940):Surgimento dos antibióticosCrescimento de linhagens celulares a partir de célulasisoladas que aderiam à superfície de placas de cultura.
  4. 4. Desenvolvimento da Cultura de Células e TecidosDesenvolvimento da Cultura de Células e Tecidos
  5. 5. ClassificaçãoClassificação
  6. 6. Linhagem de célulasLinhagem de célulasAs células podem proliferar indefinidamente epoderão ser propagadas como uma linhagem decélulas;podem ser preparadas a partir decélulas cancerígenas
  7. 7. Linhagem de célulasLinhagem de célulasAssim…A uniformidade genética de uma linhagem de célulaspode ser melhorada pela clonagem celular, em queuma única célula é isolada e prolifera-se para formarposteriormente uma colónia;Podem ser armazenadas em azoto (N) líquido a - 196ºC,por um período muito longo e continuarem viáveis,quando descongeladas.
  8. 8. Exemplos de cultura de célulasExemplos de cultura de célulasFig. 1 – Células em cultura
  9. 9. Meios de cultura de células e orgãosMeios de cultura de células e orgãos
  10. 10. IsolamentoIsolamentoCélulas grandessão separadasdas célulaspequenas ecélulas densasde células nãodensas porcentrifugaçãofraccionada;Fig.2 - Centrifugação fracionada
  11. 11. IsolamentoIsolamento Marcação específicadas células comanticorpos acoplados aum corantefluorescente, emseguida, a separaçãodestas célulasmarcadas das nãomarcadas numseparador de célulasativado porfluorescência;Fig. 3 – Citometria de fluxo
  12. 12. PreparaçãoPreparaçãoB- Cultivo em placas de culturaAo contrário das bactérias, a maior parte das célulasde tecidos não estão adaptadas para viverem emsuspensão e necessitam de uma superfície sólida paracrescerem e dividirem-se, que é agora usualmente asuperfície plástica de uma placa de cultura de tecidos;Fig.4- Microdissecção
  13. 13. Aminoácidos Vitaminas Sais Outros Proteínas (necessárias em meios semsoro, quimicamente definidos)ArgininaCistinaGlutaminaHistidinaIsoleucinaLeucinaLisinaMetioninaFenilalaninaTreoninaTriptofanoTirosinaValinaBiotinaColinaFolatoNicotinamidaPantotenatoPiridoxalTiaminaRiboflavinaNaClKClNaH2PO4NaHCO3CaCl2MgCl2GlicosePenicilinaEstreptomicinaVermelho de fenolSoroInsulinaTransferrinaFactores específicos de crescimentoComposição de um Meio Típico AdequadoComposição de um Meio Típico Adequadopara o Cultivo de Células de Mamíferospara o Cultivo de Células de MamíferosFig.5 – Tabela de componentes de um meio típico Algumas células não crescem nem se diferenciam se a placa nãoestiver coberta com componentes específicos da matriz extracelular.
  14. 14. Vantagens da Cultura CelularVantagens da Cultura Celular
  15. 15. Desvantagens da Cultura CelularDesvantagens da Cultura Celular
  16. 16. LimitaçõesLimitações
  17. 17. Aplicações gerais da cultura celular
  18. 18. Equipamentos BásicosNecessários ao Cultivo deCélulas e órgão.
  19. 19. Câmara de Fluxo LaminarCâmara de Fluxo Laminar
  20. 20. Estufa de CO2 - Placa de culturaEstufa de CO2 - Placa de cultura
  21. 21. Centrifuga / Microscópio InvertidoCentrifuga / Microscópio Invertido
  22. 22. Agitadores
  23. 23. Culturas de células e tecidosFig. 6 - etapas da célula-tronco 
  24. 24. Fig. 7-HN-5 (de um carcinoma da língua)Aspectos importantes: Dinâmica da divisão e agregação de células normais e cancerosas;Crescimento X Fatores; Colônia , diferenciação Celular, e meio ambiente.Cultivos de células e tecidos
  25. 25. AgradecimentosAgradecimentosAgradecimentos aos que deAgradecimentos aos que dealguma forma contribuíramalguma forma contribuírampara realização destepara realização desteseminário...seminário...Orientador: Prof. Me.Orientador: Prof. Me.Adalberto A. M. Neto;Adalberto A. M. Neto;Aos colegas de classe.Aos colegas de classe.Obrigado ...Obrigado ...

×