Separacion de proteinas por cromatografia

1. UNIVERSIDAD SIMÓN BOLÍVAR
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR
SEPARACION DE PROTEINAS POR
CROMATOGRAFIA
José Bubis

2. Las proteinas son muy diversas…

4. A = Eluyente
B = Fracciones eluidas
Reservorio con la
solucion tampon
Colector de fracciones
Columna
Montaje tipico

5. Ejemplo de un perfil cromatografico tipico

6. TIPOS DE CROMATOGRAFIA
• INTERCAMBIO IONICO (CATIONICO O
ANIONICO)
• EXCLUSION MOLECULAR (FILTRACION DE
GEL)
• AFINIDAD
• HIDROFOBICA

7. Cromatografia de intercambio iónico
Separación por carga

8. Por ejemplo…

9. Las proteinas eluyen cambiando la fuerza ionica
o el pH de la solucion

10. Cromatografia de exclusión molecular
Separación por tamaño

11. Las proteinas mas grandes eluyen primero
y luego las mas pequeñas

12. Por ejemplo…

13. Cromatografía de afinidad
Separación de acuerdo a
especificidad de enlazamiento

14. Las proteinas eluyen empleando concentraciones altas de
su ligando natural o cambiando la fuerza ionica o el pH

15. Cromatografia Hidrofobica
Las proteinas se enlazan a concentraciones altas de sal y
eluyen a concentraciones bajas de sal o aumentando la
hidrofobicidad del eluyente

16. TIPOS DE CROMATOGRAFIA
• INTERCAMBIO IONICO (CATIONICO O
ANIONICO)
• EXCLUSION MOLECULAR (FILTRACION DE
GEL)
• AFINIDAD
• HIDROFOBICA
En conclusion…