Electroforesis en gel

1. Electroforesis
en gel
Elena Pacheco

2. Electroforesis es…
Cuando se aplica una carga eléctrica a una solución:
•Las moléculas con carga positiva se desplazan hacia el
electrodo negativo.
•Las moléculas con carga negativa se desplazan hacia
el electrodo positivo.

3. Utilidad
Las moléculas se desplazan según su tamaño
separar DNA/RNA/proteínas

4. La electroforesis puede ocurrir
Libre en
disolución
En un medio
de soporte
Papel Gel

5. Electroforesis en gel
Se tiñe con un colorante que se une a los ac. nucleicos
o a las proteínas.
A través del gel migran las moléculas.
El gel funge como una matriz porosa.

7. Las moléculas (fragmentos) pequeñas migran más que
las pesadas pues atraviesan la matriz con mayor
facilidad.

8. Según lo que se desee separar se utilizan dos tipos de gel
Ac. Nucléicos Proteínas
Agarosa Poliacrilamida

9. Gel de agarosa
Polisacárido de poros pequeños.
Según el tamaño de la molécula a separar se
utilizan distintas concentraciones.
Colorante: bromuro de etidio.

10. Gel de poliacrilamida
Polímero entretejido de poros grandes.
Permite la migración de grandes moléculas.
Colorante: azul de Coomassie.

11. Aplicaciones
Es una de las herramientas más utilizadas en
biología molecular.
Detecta proteínas y ácidos nucleicos según su
tamaño.

12. Ventajas
Sencilla.
Bajo costo.
Efectiva.

13. Desventajas
Sólo separa por tamaño.
Colorantes carcinogénicos.

14. Fuentes:
Nelson, D.L., Cox, M.M.(2008) Lehninger. Principles
of biochemistry, 5ª ed. USA.
Mathews, C.K., van Holde, K.E., Ahern, K.G.
(2002)Bioquímica. 3ª ed. España.