1. LA BRUCELOSIS BOVINA Y EL ESTABLECIMIENTO DE PROGRAMAS DE CONTROL
MVZ LUIS CARLOS REZA GUEVARA
La brucelosis bovina es una enfermedad infecto contagiosa, la cual forma parte
importante del complejo abortivo la cual produce también niveles altos de
infertilidad, definida como una zoonosis por ser altamente transmisible al humano.
Brucelosis, es el término usado para definir la enfermedad causada por una
bacteria del genero Brúcela. En humanos se refiere a un padecimiento con cuadro
clínico de fiebre ondulante, también conocido con la denominación popular de
Fiebre de Malta, también se le reconoce en los bovinos como Enfermedad de
Bang y Aborto Contagioso.
ETIOLOGIA.-
La especie que afecta a los bovinos es Brucella abortus, la cual se caracteriza
por ser un cocobacilo intracelular, gram negativo, no móvil, sin capsula, se
desarrolla en medio aeróbico, aun cuando existen especies que requieren dióxido
de carbono para su crecimiento.
Se han identificado los biotipos: 1, 2, 3,4, de estos, el responsable del 85 % de las
infecciones es el biotipo 1, destacando la Brucella abortus, los biotipos restantes,
son menos frecuentes y su identificación puede ser útil en el estudio
epidemiológico de la Brucelosis en una región determinada.
La Brucella abortus cepa RB51, pertenece al género Brucella que contiene seis
especies: B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. neotomae, B. ovis, B. canis. las 4
primeras se presentan en la naturaleza en forma lisa en tanto que las dos últimas
en forma rugosa.
La taxonomía del genero, así como su identificación están basadas en criterios:
fenotípicos, serológicos, fagotipicos y epidemiológicos.
Se destaca como principal característica del género su morfología de cocos,
cocobacilos o bacilos cortos de 0.5 a 0.7 por 1.0 micras de largo, aislados, en
parejas, cadenas cortas o pequeños grupos. no presentan capsulas, no
manifiestan tinción bipolar, son gran negativos y no poseen flagelos.
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2. Son aerobios, en primo aislamiento algunas cepas requieren de suplemento de
co2 para su crecimiento. son catalasa y oxidasa positivo. no producen acido a
partir de carbohidratos en medios convencionales, no producen indol, ni licuan la
gelatina, no lisan eritrocitos y son vogesproskauer y rojo de metilo negativos. se
incuban a 37º c por 48 a 72 horas. las colonias en fase lisa, en medio claro
enriquecido, miden de 0.5 a 1.0 mm de diámetro y son transparentes, elevadas ,
convexas y no toman la tinción de white-wilson.
CERTIFICADO DE ORIGEN DE LA CEPA RB51 DE BRUCELLA abortus .-
Brucella abortus RB51 es una mutante rugosa y avirulenta obtenida en el
laboratorio, desarrollada por el Dr. Gerhard Schurig en Virginia Polytechnic
Institute y State University, Blacksburg. Esta cepa es derivada de referencia
virulenta S 2308. esta cepa no presenta la cadena lateral “0” de lipopolisacarido
( LPS ), que se encuentra en otras cepas de brucella como la cepa 19 o los
aislamientos de campo virulentos que se presentan en forma natural , su
rugosidad es muy estable después de múltiples pasajes in vivo e in vitro.
La ausencia de la cadena lateral “o “del LPS en la cepa RB51 no estimula la
producción de anticuerpos aglutinantes, por lo que no interfiere con el diagnostico
serológico contra la brucelosis en los bovinos vacunados, cuando se usan las
pruebas establecidas por la nom-041 zoo-1995, como son Tarjeta y Rivanol. Por
lo anterior resulta favorable vacunar animales con la cepa rb51 debido a que en el
campo podrán diferenciarse fácilmente los animales inmunizados y protegidos de
aquellos que presentan la infección por cepas de brucella abortus virulentas y que
pueden causar y diseminar la enfermedad en animales expuestos y susceptibles.
DIAGNOSTICO.
El diagnostico de la causa de aborto en un animal o en un grupo de bovinos debe
ser diferencial en virtud de lo variable de las mismas causas, cuando se trata de
establecer la causa de aborto es recomendable:
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3. _ Asegurar, en lo posible, la edad del feto mediante inspección y comprobación de
la fecha de inicio de la gestación.
_ Muestreo sanguíneo para pruebas serológicas especificas
_Realización de análisis de fluidos uterinos en busca del agente causal
SEROLOGIA.-
Estas pruebas se realizan con fines diagnósticos con objeto de determinar la
causa específica y así identificar a los animales que han estado en contacto con
los animales infectados así como con los sanos.
Por lo tanto, la prueba serológica ideal, será aquella capaz de diferenciar los
animales infectados de los vacunados, simple de realizar y proporcionar los
resultados con rapidez y repetición.
Para fines prácticos, las ´Pruebas diagnosticas usuales son:
a) PRUEBAS TAMIZ
b) PRUEBAS DE VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA
c) PUEBAS COMPLEMENTARIAS
Pruebas serológicas mas utilizadas:
_PRUEBA DE ANILLO DE LECHE.
_PRUEBA DE TARJETA O ROSA DE BENGALA 8% Y 3%
_PRUEBA DE RIVANOL
_PRUEBA DE FIJACION DE COMPLEMENTO
_PRUEBA DE MERCAPTO-ETANOL.
_PRUEBA DE HIPERSENCIBILIDAD RETARDADA.
VACUNACION.-
La vacunación presenta dos vértices fundamentales considerables, por una parte,
el aspecto zootécnico, al prevenir los trastornos patológicos que produce y evitar
perdidas económicas y la más importante, disminuir el riesgo de zoonosis como
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4. regla general, la inducción de la respuesta inmune protectora efectiva, de larga
duración a parásitos intracelulares facultativos como es la Brucella, requiere de
vacunas vivas.
La vacuna mas comúnmente empleada para prevenir la brucelosis bovina es
elaborada con CEPA 19 de brucella abortus. La CEPA 19 es un microorganismo
atenuado de morfología lisa incapaz de crecer en la presencia de eritritol. La
presencia de LPS con la cadena “0” en la CEPA 19 explica la aparición y
persistencia de anticuerpos (ac.), en suero después de la administración de esta
vacuna. Estos ac. Se detectan en ensayos serológicos usados para el diagnostico
de Brucelosis y son el principal problema asociado a la vacunación con la CEPA
19 porque no es fácil diferenciar el ganado vacunado del infectado. La aparición y
persistencia de estos ac. depende de la edad, dosis y ruta de vacunación,
limitando la flexibilidad de uso de la vacuna CEPA 19.
La inmunidad que protege contra la infección es la inmunidad celular (IC) y no está
relacionada a los niveles de ac . Esta inmunidad se puede inducir con vacunas y
se basa en el desarrollo de linfocitos “T“ que reaccionan específicamente con los
antígenos (ag) de Brucella, produciendo interferon-gama e interleucina-2.
La aparición de ac. Séricos debidos a la vacunación con la CEPA 19, que
interfieren con el diagnostico. estimularon la búsqueda de vacunas que evitaran
este problema, lógicamente el uso de una cepa rugosa viva, atenuada estable y
capaz de conferir una respuesta inmune celular.
Encontrar un mutante que fuera verdaderamente rugoso (esencialmente sin
cadena “o”), estable y suficientemente atenuado.
La atenuación tenía que ser de un grado suficiente para causar colonización solo
en pocas semanas a fin de inducir una respuesta inmune celular protectora.
REPETIR QUE LOS TOROS NUNCA SE VACUNARAN CONTRA BRUCELOSIS,
YA QUE LAS BRUCELLAS TIENEN TROPISMO A LOS TESTICULOS POR LA
PRESENCIA DE ERITRITOL, POR LO QUE SE DESECHARAN BRUCELLAS A
TRAVES DEL SEMEN.
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5. Se ha manejado la aplicación con éxito un modelo de vacunación que se hace con
previa información al ganadero ya que se deberá informar al OFICIAL de la
campaña nacional sobre la aplicación de:
CEPA 19 A LAS BECERRAS A LOS 3 A 4 MESES
APLICAR RB51 DOSIS BECERRA A LOS 12 MESES DE EDAD
DOSIS DE RB51 DOSIS VACA 30 DIAS DESPUES DE CADA PARTO EN EL
CASO DE ZONAS DE ALTA INCIDENCIA
Insisto en dos asuntos muy importantes, Informar al ganadero para que se le
comunique al OFICIAL, el uso de CEPA 19 como primo vacunación y la otra
que tal vez sea aun a muy largo plazo el hecho que la secretaria encargada
de las campañas, modifique su criterio en cuanto a REACTORAS POSITIVAS
o VACAS POSITIVAS
ESTUDIOS DE INOCUIDAD E INMUNOGENICIDAD DE LA VACUNA RB51.-
1.- Efecto de la edad a la vacunación en la eficiencia de la Cepa RB5I en la
protección de ganado contra brucelosis.-
cheville,nf; olsen, sc; jensen, ae; stevens mg;palmer, mv; florance am. 1995, Iowa
state university.
Objetivo.- establecer que becerras vacunadas a los 3, 5 y 7 meses de edad son
protegidas contra la infección y aborto, cuando son retadas y expuestas a la
infección durante su primera gestación.
Procedimiento.- las becerras fueron vacunadas vía subcutánea a los 3, 5 y 7
meses de edad con la cepa rb51 (n= 26), cepa 19 (n= 16), o solución salina estéril
(n= 15). las becerras fueron servidas entre 16 y 17 meses de edad y expuestas al
reto durante su primera gestación con la cepa 2308 de brucella abortus.
Resultado.- las 4 becerras que habían sido vacunadas con RB51 a los tres meses
de edad fueron protegidas contra la infección y el aborto cuando fueron expuestas
al reto (100 %). las vacunadas a los 5 y 7 meses de edad tuvieron una protección
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6. equivalente. las becerras vacunadas con la cepa 19 tuvieron una protección al 95
%, las testigos presentaron una alta incidencia de infección y aborto (100 %)
Conclusión.- la cepa RB51 protege a niveles comparables a la cepa 19 en
becerras de 3 a 12 meses de edad.
Relevancia clínica.- la vacuna RB51 contra Brúcella abortus, es muy eficiente ya
que evita fallas que interfieran los resultados de diagnostico serológico con las
infecciones de campo.
2.- Evaluación de la vacuna RB51 de brucella abortus en hembras bovinas
gestantes.
samartino, le ; salustio, e ; gregoret, r .
Instituto de Patobiologia, área de Bacteriologia,Moron, Argentina
Resumen.- la vacunación de terneras con cepa 19 de Brucella abortus ha sido
uno de los pilares fundamentales del control de la brucelosis bovina en el mundo.
Sin embargo esta vacuna produce anticuerpos indistinguibles por las pruebas de
diagnostico serológico de aquellos inducidos por las cepas de campo. En los
últimos años una nueva vacuna, la cepa RB51 de B. abortus fue desarrollada en
E.U... la misma carece de la cadena “o” del lipopolisacarido brucelar, por ello no
induce anticuerpos detectables. En este trabajo se evaluó la bioseguridad de la
cepa RB51 en bovinos adultos en condiciones de campo. Se vacunaron con una
dosis completa de cepa RB51, 210 hembras bovinas entre el primer y séptimo
mes de gestación, previamente vacunadas con la cepa 19 entre los 3 y 8 meses
de edad. Se evaluó la inducción de anticuerpos post vacunación con RB51, la
eliminación de esta cepa por leche y la factibilidad de inducir abortos. Se observo
que todos los animales fueron serológicamente negativos a las pruebas de
aglutinación y Elisa. No hubo eliminación de la cepa RB51 por leche y no hubo
abortos inducidos por la mencionada cepa. En consecuencia la vacuna RB51 no
tiene efectos residuales al aplicarse durante los dos primeros tercios de la
gestación en vacas vacunadas previamente de terneras con la cepa 19. Estos
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7. resultados sugieren que el uso de esta vacuna en animales adultos favorecerá a
los programas de control y erradicación de brucelosis bovina que utilizan esta
cepa.
PRESENTACIONES.- VACUNA CEPA RB51 PARA VACAS, LA CUAL SE
PUEDE APLICAR A PARTIR DE LOS 12 MESES, REVACUNACION ANUAL,
NO SE APLIQUE A TOROS EN NINGUNA EDAD
VACUNA CEPA RB51 PARA PRIMOVACUNACION (BECERRAS) LA CUAL SE
APLICA A PARTIR DE LOS 3 MESES Y HASTA LOS 12 MESES DE EDAD, NO
SE APLIQUE A MACHOS EN NINGUNA EDAD.
3.- Valoración de la estabilidad acelerada de la vacuna liofilizada de brucella
abortus cepa rb51 bajo temperatura y periodos establecidos.
Salazar, a.j., Sánchez, c.y., Bohórquez, n.l., educación y extencionismo
agropecuario, Universidad Autónoma Metropolitana
Los resultados obtenidos de las cuentas viables al inicio y al final a los 28 días de
prueba, sometiendo los frascos de vacuna RB51, dosis adulta a una exposición
de 37, 25, y 4° c donde se observo, que la vacuna mantenida 28 días a 37° c
disminuyo 2.47 las ufc, la vacuna almacenada a 25°. mostro una disminución en
su cuenta viable de 2.34 ufc/ dosis y los conservados a 4°c no presentaron
modificaciones en la cuenta viable al final de la prueba aplicando la ecuación de
arrhenius, fue posible estimar que la vacuna rb51, dosis vacas, es estable a 4°c
durante 36 meses y considerando que esta temperatura es la recomendada por el
fabricante para el almacenamiento en anaquel durante el periodo de vigencia que
es de dos años, se observa un lapso de seguridad de 6 meses que corresponde al
doble de lo que marca la nom- 012- zoo-/--, para productos biológicos. Con estos
resultados se demuestra que la vacuna RB51 dosis vacas, es estable durante su
periodo de vigencia cuando se almacena a 4° c.
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8. LITERATURA CITADA.-
*Bercovich,z. the use of skin delayed-type hypersensibilityas and adjunct test to
diagnose brucellosis in cattle: a review
*Cheville, N.F., Olsen, S.C., effects of age at vaccination on efficacy of brucella
abortus strain rb51 to protect cattle against brucellosis, dept. of Veterinary
Pathology, College of Veterinary Medicine, Iowa state university, ajvr, vol.57, no 8
august 1996
* Posadas, m.e., brucelosis, sistema de producción animal i bovinos, volumen II,
Fmvz, Unam, 1998 (pag. 158 a 163)
*Van metre, D.C., Kennedy, G.A., brucellosis induced by rb51 vaccine in a
pregnant heifer, javma, 1999.v. 215 (10) p. 1491-1493.
*Vemulapalli, r., cravero, s., overexpression of protective antigen as a novel
approach to enhance vaccine efficacy of brucella abortus strain rb51 Washington,
American society of microbiology, June 2000.v. 68 (6) p. 3286-3289.
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