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DIVISÃO CELULAR
Prof. Guilherme Pinto Bertuzzi




             gpbertuzzi@gmail.com
CROMOSSOMO
            COR                        CORPO



 São filamentos espiralados de cromatina, existente no
núcleo de todas as células, que coram intensamente com
   uso de corante citológico (carmin acético, orceína
acética, reativo de Schiff), e observável à microscopia de
              luz durante a divisão celular.
CROMOSSOMO
• Uma molécula de DNA, altamente compactada com proteínas
histônicas e não-histônicas (não-compactado – cromatina)


   QUANTAS MOLÉCULAS EXISTEM NAS CÉLULAS HUMANAS??
              E EM CÉLULAS DE OUTROS ANIMAIS?
                    E NOS PROCARIONTES?


• Atinge sua maior compactação durante a divisão celular
• Atividade transcricional nula (nenhum gene expresso)
Maior compactação


Cromatina                         Cromossomo




              Menor compactação
Alta Compactação
                       M
                    (Mitose/
                    Meiose)
                                     Baixa Compactação

    G2                                 G1
  (Gap 2)                            (Gap 1)
                     CICLO
                    CELULAR
                   Eucariontes
                                         Células que
                                            não se
   Fase S                                  dividem
(Síntese de DNA
   Replicação)                           (G0)(G0)
INTÉRFASE
• Célula não está em divisão (Fase G1/G0)


• Cromatina – baixa compactação
do material genético


• Transcrição e tradução ocorrendo
(expressão gênica)
Cromatina
 Heterocromatina
• Regiões de compactação “média”
• Pequena atividade transcricional
• hetero = diferente
(coloração mais intensa)


 Eucromatina
• Regiões de compactação baixa
• Alta atividade transcricional
• eu = verdadeiro
(coloração mais fraca)
Alta Compactação
                       M
                    (Mitose/
                    Meiose)
                                     Baixa Compactação

    G2                                 G1
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                   Eucariontes
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                                            não se
   Fase S                                  dividem
(Síntese de DNA
   Replicação)                           (G0)(G0)
DIVISÃO CELULAR
                     (Mitose/Meiose)
• Processos de multiplicação celular (Fase M):
    • 1 célula  2 ou 4 células
• Células-filha idênticas à célula-mãe – MITOSE
• Células-filha diferentes da célula-mãe - MEIOSE


• Cromossomos - Alta compactação do
material genético


• Baixa atividade transcricional
Por que uma
célula se divide?
   (Mitose/Meiose)
Mitose
Meiose       Equacional
Reducional
MORFOLOGIA DOS
          CROMOSSOMOS
• Durante a divisão celular, os cromossomos têm, em sua
maioria, forma de X
Morfologia dos Cromossomos

Centrômero:
• Une as duas cromátides-irmãs
• Ligação do fuso acromático
Morfologia dos Cromossomos

Classificação quanto à posição do
Centrômero:
Morfologia dos Cromossomos

Telômeros:
• Extremidades dos cromossomos
• Sequência repetida: TTAGGG
• Essenciais para a manutenção do material genético
Morfologia dos Cromossomos

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Morfologia dos Cromossomos

Telômeros:
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Morfologia dos Cromossomos

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• Pares de cromossomos (1 paterno e 1 materno)
DIVISÃO CELULAR
 Mitose
          Meiose
Divisão Celular

Mitose:
Divisão Celular

Mitose - Fases:
• Prófase:
    • Espiralização da cromatina (formação dos cromossomos)
    • Desintegração da carioteca
    • Formação e posicionamento dos centríolos
    • Ligação dos centrômeros ao fuso acromático


• Metáfase:
    • Migração dos cromossomos à placa equatorial (centro da célula)
    • NÃO HÁ PAREAMENTO DOS HOMÓLOGOS!
Divisão Celular

Mitose - Fases:
• Anáfase:
    • Rompimento do centrômero
    • Separação das cromátides-irmãs


• Telófase:
    • Reestruturação dos dois novos núcleos
    • Reorganização da carioteca
    • Divisão do citoplasma
Divisão Celular

Mitose:
  Cromossomos nos
       pólos;                   Organização
  reorganização da        cromossômica, formaç
     membrana                o do fuso mitótico
      nuclear;
     citocinese

       Segregação
     cromossômica:
     separação das
   cromátides irmãs e
    migração para os        Desintegração da
          pólos            membrana nuclear;
                            ancoramento dos
     Formação da placa      cromossomos aos
         metafásica;         microtúbulos do
      Cromossomos na        fuso de ambos os
      região equatorial           pólos
Divisão Celular

Mitose:
• Divisão EQUACIONAL
(gera células iguais à célula-mãe)


• Não gera variação da ploidia
(céluas diplóides geram células diplóides;
células haplóides geram células haplóides)


• Processo de multiplicação celular
(ocorre em tecidos de renovação constante –
pele, ossos, fígado...)
Divisão Celular

Meiose:
Divisão Celular

Meiose – Fases:
• MEIOSE I:
• Prófase I:
    • Espiralização da cromatina (formação dos cromossomos)
    • Desintegração da carioteca
    • Formação e posicionamento dos centríolos
    • Ligação dos centrômeros ao fuso acromático
    • Crossing over – entre cromossomos homólogos


• Metáfase I:
    • Migração dos cromossomos à placa equatorial (centro da célula)
    • CROMOSSOMOS HOMÓLOGOS PAREADOS!
Divisão Celular

Meiose – Fases:
• MEIOSE I:
• Anáfase I:
    • Separação dos cromossomos homólogos
    • Não há separação das cromátides-irmãs


• Telófase I:
    • Reorganização dos dois novos núcleos
    • Divisão do citoplasma
Divisão Celular

Meiose – Fases:
• MEIOSE II:
    • Idêntico ao processo de Mitose
    • Ocorre em cada uma das duas células geradas pela Meiose I
    • Cada célula dá origem à duas células idênticas
Divisão Celular

Meiose I:
Crossing over
Divisão Celular

Meiose II:
Divisão Celular

Meiose:
• Divisão REDUCIONAL
(as células-filhas têm metade do número de
cromossomos da célula-mãe)


• Diminui o nível de ploidia
(células diplóides geram células haplóides)


• Gera células diferentes entre si
(ocorrência de crossing-over)


• Processo de produção de gametas
Divisão Celular

Meiose: Resumo
Divisão Celular

Meiose: Resumo
ORGANIZAÇÃO
CROMOSSÔMICA DO
 GENOMA HUMANO
22 pares de cromossomos AUTOSSÔMICOS
 1 par de cromossomos SEXUAIS (X ou Y)
Cariograma
Idiograma
Organização Cromossômica do Genoma Humano

Critérios de Organização do Cariótipo:
• Tamanho
• Posição do Centrômero
• Padrão de Bandeamento




ISCN 2005
    International System for Human Cytogenetic Nomenclature
Organização Cromossômica do Genoma Humano

Cromossomos Sexuais
• 23º par do Cariótipo Humano
• Diferente entre homens (XY) e mulheres (XX)
• X e Y diferentes
Organização Cromossômica do Genoma Humano

Cromossomos Sexuais
• Regiões homólogas na extremidade
Organização Cromossômica do Genoma Humano

Cromossomos Sexuais
• 1º nível de Determinação do Sexo em humanos
• Sistema XY, Sistema X0 (alguns insetos), Sistema ZW
(peixes, répteis, aves)

           Social                  Feminino                     Masculino

       Cromossômico                  46,XX                        46,XY

          Gonadal                   Ovários                     Testículos

                             Ovidutos, útero, terço        Epidídimo, conduto
      Genitália Interna
                              superior da vagina         deferente, bolsa escrotal

                          Clitóris, pequenos e grandes
                                                          Pênis, próstata, bolsa
      Genitália externa      lábios, 2/3 inferiores da
                                                                 escrotal
                                      vagina
Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais

Determinação do Sexo
Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais

Determinação do Sexo

     SRY                 Gônada Primitiva



     TDF                                            Testículo




                              Ovário
Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais

Determinação do Sexo
Organização Cromossômica do Genoma Humano

Cromossomos Sexuais
• Genes no Cromossomo X não são feminilizantes
• Genes ligados ao X: Daltonismo, Hemofilia, MAOA




• Mecanismos de Compensação de Dose
Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais

Inativação do X
• Apenas um cromossomo X permanece transcricionalmente ativo em
células XX
• O X inativado passa por intensa compactação, sendo visualizado como
um corpúsculo heterocromático (Corpúsculo de Barr) durante a intérfase


• Essa inativação ocorre de forma aleatória nas diferentes células de um
mesmo organismo, durante a fase pré-embrionária
• Fêmeas de mamíferos (XX) são consideradas MOSAICOS
Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais

Inativação do X
• Após a inativação de um X em uma
determinada célula, suas
descendentes terão o mesmo X
inativado
Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais

Hemofilia A
• Deficiência de fator VIII
• Gene no cromossomo X
Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais

Pelagem de Gatos
• Dois loci para pelagem
    • 1 Autossômico
    • 1 no Cromossomo Sexual


• Machos – máximo de duas cores
• Fêmeas – até três cores (mosaico)
Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais

Inativação do X
• Podem ocorrer “desvios” na aleatoriedade da inativação do X


• Lyonização seletiva:
    • Inativação preferencial do cromossomo X mutado


• Lyonização negativa:
    • Inativação preferencial do cromossomo X normal
    • Heterozigotas manifestas
TÉCNICAS BÁSICAS DE
       VISUALIZAÇÃO DE
        CROMOSSOMOS
• Citogenética Clássica          Células em divisão / Tecido
    • Bandeamento Cromossômico      de alta multiplicação
• Citogenética Molecular          (mitose – maior índice de
    • FISH/GISH                        compactação)
    • Pintura Cromossômica
Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos

Citogenética Clássica:
• Cultura de células (linfócitos, a partir de sangue periférico)
Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos

Bandeamento Cromossômico:
• Diferentes técnicas – mais comum Banda G
• Regiões escuras (Giemsa)
     ricas em AT – inativas
• Regiões claras
     ricas em GC – ativos
Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos

Hibridização in situ por fluorescência
(FISH):
• Cadeias simples de DNA (sondas), que se anelam às suas sequências
complementares durante a metáfase
• Sequências específicas marcadas com fluoróforos
Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos > FISH

Sondas Centroméricas:
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Sondas Teloméricas:
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Sondas de Sequências de Cópia Única:
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Sondas Cromossômicas:
Ciclo e divisão celular

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Ciclo e divisão celular

  • 1. DIVISÃO CELULAR Prof. Guilherme Pinto Bertuzzi gpbertuzzi@gmail.com
  • 2. CROMOSSOMO COR CORPO São filamentos espiralados de cromatina, existente no núcleo de todas as células, que coram intensamente com uso de corante citológico (carmin acético, orceína acética, reativo de Schiff), e observável à microscopia de luz durante a divisão celular.
  • 3. CROMOSSOMO • Uma molécula de DNA, altamente compactada com proteínas histônicas e não-histônicas (não-compactado – cromatina) QUANTAS MOLÉCULAS EXISTEM NAS CÉLULAS HUMANAS?? E EM CÉLULAS DE OUTROS ANIMAIS? E NOS PROCARIONTES? • Atinge sua maior compactação durante a divisão celular • Atividade transcricional nula (nenhum gene expresso)
  • 4.
  • 5. Maior compactação Cromatina Cromossomo Menor compactação
  • 6. Alta Compactação M (Mitose/ Meiose) Baixa Compactação G2 G1 (Gap 2) (Gap 1) CICLO CELULAR Eucariontes Células que não se Fase S dividem (Síntese de DNA Replicação) (G0)(G0)
  • 7. INTÉRFASE • Célula não está em divisão (Fase G1/G0) • Cromatina – baixa compactação do material genético • Transcrição e tradução ocorrendo (expressão gênica)
  • 8. Cromatina Heterocromatina • Regiões de compactação “média” • Pequena atividade transcricional • hetero = diferente (coloração mais intensa) Eucromatina • Regiões de compactação baixa • Alta atividade transcricional • eu = verdadeiro (coloração mais fraca)
  • 9. Alta Compactação M (Mitose/ Meiose) Baixa Compactação G2 G1 (Gap 2) (Gap 1) CICLO CELULAR Eucariontes Células que não se Fase S dividem (Síntese de DNA Replicação) (G0)(G0)
  • 10. DIVISÃO CELULAR (Mitose/Meiose) • Processos de multiplicação celular (Fase M): • 1 célula  2 ou 4 células • Células-filha idênticas à célula-mãe – MITOSE • Células-filha diferentes da célula-mãe - MEIOSE • Cromossomos - Alta compactação do material genético • Baixa atividade transcricional
  • 11. Por que uma célula se divide? (Mitose/Meiose)
  • 12. Mitose Meiose Equacional Reducional
  • 13.
  • 14. MORFOLOGIA DOS CROMOSSOMOS • Durante a divisão celular, os cromossomos têm, em sua maioria, forma de X
  • 15. Morfologia dos Cromossomos Centrômero: • Une as duas cromátides-irmãs • Ligação do fuso acromático
  • 16. Morfologia dos Cromossomos Classificação quanto à posição do Centrômero:
  • 17. Morfologia dos Cromossomos Telômeros: • Extremidades dos cromossomos • Sequência repetida: TTAGGG • Essenciais para a manutenção do material genético
  • 18. Morfologia dos Cromossomos Telômeros: • Sofrem encurtamento progressivo após ciclos de divisões celulares
  • 19. Morfologia dos Cromossomos Telômeros: • Reposição pela Enzima Telomerase...
  • 20. Morfologia dos Cromossomos Cromossomos Homólogos: • Pares de cromossomos (1 paterno e 1 materno)
  • 21.
  • 23.
  • 25. Divisão Celular Mitose - Fases: • Prófase: • Espiralização da cromatina (formação dos cromossomos) • Desintegração da carioteca • Formação e posicionamento dos centríolos • Ligação dos centrômeros ao fuso acromático • Metáfase: • Migração dos cromossomos à placa equatorial (centro da célula) • NÃO HÁ PAREAMENTO DOS HOMÓLOGOS!
  • 26. Divisão Celular Mitose - Fases: • Anáfase: • Rompimento do centrômero • Separação das cromátides-irmãs • Telófase: • Reestruturação dos dois novos núcleos • Reorganização da carioteca • Divisão do citoplasma
  • 27. Divisão Celular Mitose: Cromossomos nos pólos; Organização reorganização da cromossômica, formaç membrana o do fuso mitótico nuclear; citocinese Segregação cromossômica: separação das cromátides irmãs e migração para os Desintegração da pólos membrana nuclear; ancoramento dos Formação da placa cromossomos aos metafásica; microtúbulos do Cromossomos na fuso de ambos os região equatorial pólos
  • 28. Divisão Celular Mitose: • Divisão EQUACIONAL (gera células iguais à célula-mãe) • Não gera variação da ploidia (céluas diplóides geram células diplóides; células haplóides geram células haplóides) • Processo de multiplicação celular (ocorre em tecidos de renovação constante – pele, ossos, fígado...)
  • 30. Divisão Celular Meiose – Fases: • MEIOSE I: • Prófase I: • Espiralização da cromatina (formação dos cromossomos) • Desintegração da carioteca • Formação e posicionamento dos centríolos • Ligação dos centrômeros ao fuso acromático • Crossing over – entre cromossomos homólogos • Metáfase I: • Migração dos cromossomos à placa equatorial (centro da célula) • CROMOSSOMOS HOMÓLOGOS PAREADOS!
  • 31. Divisão Celular Meiose – Fases: • MEIOSE I: • Anáfase I: • Separação dos cromossomos homólogos • Não há separação das cromátides-irmãs • Telófase I: • Reorganização dos dois novos núcleos • Divisão do citoplasma
  • 32. Divisão Celular Meiose – Fases: • MEIOSE II: • Idêntico ao processo de Mitose • Ocorre em cada uma das duas células geradas pela Meiose I • Cada célula dá origem à duas células idênticas
  • 36. Divisão Celular Meiose: • Divisão REDUCIONAL (as células-filhas têm metade do número de cromossomos da célula-mãe) • Diminui o nível de ploidia (células diplóides geram células haplóides) • Gera células diferentes entre si (ocorrência de crossing-over) • Processo de produção de gametas
  • 39. ORGANIZAÇÃO CROMOSSÔMICA DO GENOMA HUMANO 22 pares de cromossomos AUTOSSÔMICOS 1 par de cromossomos SEXUAIS (X ou Y)
  • 42. Organização Cromossômica do Genoma Humano Critérios de Organização do Cariótipo: • Tamanho • Posição do Centrômero • Padrão de Bandeamento ISCN 2005 International System for Human Cytogenetic Nomenclature
  • 43. Organização Cromossômica do Genoma Humano Cromossomos Sexuais • 23º par do Cariótipo Humano • Diferente entre homens (XY) e mulheres (XX) • X e Y diferentes
  • 44. Organização Cromossômica do Genoma Humano Cromossomos Sexuais • Regiões homólogas na extremidade
  • 45. Organização Cromossômica do Genoma Humano Cromossomos Sexuais • 1º nível de Determinação do Sexo em humanos • Sistema XY, Sistema X0 (alguns insetos), Sistema ZW (peixes, répteis, aves) Social Feminino Masculino Cromossômico 46,XX 46,XY Gonadal Ovários Testículos Ovidutos, útero, terço Epidídimo, conduto Genitália Interna superior da vagina deferente, bolsa escrotal Clitóris, pequenos e grandes Pênis, próstata, bolsa Genitália externa lábios, 2/3 inferiores da escrotal vagina
  • 46. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais Determinação do Sexo
  • 47. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais Determinação do Sexo SRY Gônada Primitiva TDF Testículo Ovário
  • 48. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais Determinação do Sexo
  • 49. Organização Cromossômica do Genoma Humano Cromossomos Sexuais • Genes no Cromossomo X não são feminilizantes • Genes ligados ao X: Daltonismo, Hemofilia, MAOA • Mecanismos de Compensação de Dose
  • 50. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais Inativação do X • Apenas um cromossomo X permanece transcricionalmente ativo em células XX • O X inativado passa por intensa compactação, sendo visualizado como um corpúsculo heterocromático (Corpúsculo de Barr) durante a intérfase • Essa inativação ocorre de forma aleatória nas diferentes células de um mesmo organismo, durante a fase pré-embrionária • Fêmeas de mamíferos (XX) são consideradas MOSAICOS
  • 51. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais Inativação do X • Após a inativação de um X em uma determinada célula, suas descendentes terão o mesmo X inativado
  • 52. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais Hemofilia A • Deficiência de fator VIII • Gene no cromossomo X
  • 53. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais Pelagem de Gatos • Dois loci para pelagem • 1 Autossômico • 1 no Cromossomo Sexual • Machos – máximo de duas cores • Fêmeas – até três cores (mosaico)
  • 54. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais Inativação do X • Podem ocorrer “desvios” na aleatoriedade da inativação do X • Lyonização seletiva: • Inativação preferencial do cromossomo X mutado • Lyonização negativa: • Inativação preferencial do cromossomo X normal • Heterozigotas manifestas
  • 55.
  • 56. TÉCNICAS BÁSICAS DE VISUALIZAÇÃO DE CROMOSSOMOS • Citogenética Clássica Células em divisão / Tecido • Bandeamento Cromossômico de alta multiplicação • Citogenética Molecular (mitose – maior índice de • FISH/GISH compactação) • Pintura Cromossômica
  • 57. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos Citogenética Clássica: • Cultura de células (linfócitos, a partir de sangue periférico)
  • 58.
  • 59. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos Bandeamento Cromossômico: • Diferentes técnicas – mais comum Banda G • Regiões escuras (Giemsa) ricas em AT – inativas • Regiões claras ricas em GC – ativos
  • 60. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos Hibridização in situ por fluorescência (FISH): • Cadeias simples de DNA (sondas), que se anelam às suas sequências complementares durante a metáfase • Sequências específicas marcadas com fluoróforos
  • 61. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos > FISH Sondas Centroméricas:
  • 62. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos > FISH Sondas Teloméricas:
  • 63. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos > FISH Sondas de Sequências de Cópia Única:
  • 64. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos > FISH Sondas Cromossômicas: