2. CROMOSSOMO
COR CORPO
São filamentos espiralados de cromatina, existente no
núcleo de todas as células, que coram intensamente com
uso de corante citológico (carmin acético, orceína
acética, reativo de Schiff), e observável à microscopia de
luz durante a divisão celular.
3. CROMOSSOMO
• Uma molécula de DNA, altamente compactada com proteínas
histônicas e não-histônicas (não-compactado – cromatina)
QUANTAS MOLÉCULAS EXISTEM NAS CÉLULAS HUMANAS??
E EM CÉLULAS DE OUTROS ANIMAIS?
E NOS PROCARIONTES?
• Atinge sua maior compactação durante a divisão celular
• Atividade transcricional nula (nenhum gene expresso)
6. Alta Compactação
M
(Mitose/
Meiose)
Baixa Compactação
G2 G1
(Gap 2) (Gap 1)
CICLO
CELULAR
Eucariontes
Células que
não se
Fase S dividem
(Síntese de DNA
Replicação) (G0)(G0)
7. INTÉRFASE
• Célula não está em divisão (Fase G1/G0)
• Cromatina – baixa compactação
do material genético
• Transcrição e tradução ocorrendo
(expressão gênica)
8. Cromatina
Heterocromatina
• Regiões de compactação “média”
• Pequena atividade transcricional
• hetero = diferente
(coloração mais intensa)
Eucromatina
• Regiões de compactação baixa
• Alta atividade transcricional
• eu = verdadeiro
(coloração mais fraca)
9. Alta Compactação
M
(Mitose/
Meiose)
Baixa Compactação
G2 G1
(Gap 2) (Gap 1)
CICLO
CELULAR
Eucariontes
Células que
não se
Fase S dividem
(Síntese de DNA
Replicação) (G0)(G0)
10. DIVISÃO CELULAR
(Mitose/Meiose)
• Processos de multiplicação celular (Fase M):
• 1 célula 2 ou 4 células
• Células-filha idênticas à célula-mãe – MITOSE
• Células-filha diferentes da célula-mãe - MEIOSE
• Cromossomos - Alta compactação do
material genético
• Baixa atividade transcricional
25. Divisão Celular
Mitose - Fases:
• Prófase:
• Espiralização da cromatina (formação dos cromossomos)
• Desintegração da carioteca
• Formação e posicionamento dos centríolos
• Ligação dos centrômeros ao fuso acromático
• Metáfase:
• Migração dos cromossomos à placa equatorial (centro da célula)
• NÃO HÁ PAREAMENTO DOS HOMÓLOGOS!
26. Divisão Celular
Mitose - Fases:
• Anáfase:
• Rompimento do centrômero
• Separação das cromátides-irmãs
• Telófase:
• Reestruturação dos dois novos núcleos
• Reorganização da carioteca
• Divisão do citoplasma
27. Divisão Celular
Mitose:
Cromossomos nos
pólos; Organização
reorganização da cromossômica, formaç
membrana o do fuso mitótico
nuclear;
citocinese
Segregação
cromossômica:
separação das
cromátides irmãs e
migração para os Desintegração da
pólos membrana nuclear;
ancoramento dos
Formação da placa cromossomos aos
metafásica; microtúbulos do
Cromossomos na fuso de ambos os
região equatorial pólos
28. Divisão Celular
Mitose:
• Divisão EQUACIONAL
(gera células iguais à célula-mãe)
• Não gera variação da ploidia
(céluas diplóides geram células diplóides;
células haplóides geram células haplóides)
• Processo de multiplicação celular
(ocorre em tecidos de renovação constante –
pele, ossos, fígado...)
30. Divisão Celular
Meiose – Fases:
• MEIOSE I:
• Prófase I:
• Espiralização da cromatina (formação dos cromossomos)
• Desintegração da carioteca
• Formação e posicionamento dos centríolos
• Ligação dos centrômeros ao fuso acromático
• Crossing over – entre cromossomos homólogos
• Metáfase I:
• Migração dos cromossomos à placa equatorial (centro da célula)
• CROMOSSOMOS HOMÓLOGOS PAREADOS!
31. Divisão Celular
Meiose – Fases:
• MEIOSE I:
• Anáfase I:
• Separação dos cromossomos homólogos
• Não há separação das cromátides-irmãs
• Telófase I:
• Reorganização dos dois novos núcleos
• Divisão do citoplasma
32. Divisão Celular
Meiose – Fases:
• MEIOSE II:
• Idêntico ao processo de Mitose
• Ocorre em cada uma das duas células geradas pela Meiose I
• Cada célula dá origem à duas células idênticas
36. Divisão Celular
Meiose:
• Divisão REDUCIONAL
(as células-filhas têm metade do número de
cromossomos da célula-mãe)
• Diminui o nível de ploidia
(células diplóides geram células haplóides)
• Gera células diferentes entre si
(ocorrência de crossing-over)
• Processo de produção de gametas
42. Organização Cromossômica do Genoma Humano
Critérios de Organização do Cariótipo:
• Tamanho
• Posição do Centrômero
• Padrão de Bandeamento
ISCN 2005
International System for Human Cytogenetic Nomenclature
43. Organização Cromossômica do Genoma Humano
Cromossomos Sexuais
• 23º par do Cariótipo Humano
• Diferente entre homens (XY) e mulheres (XX)
• X e Y diferentes
45. Organização Cromossômica do Genoma Humano
Cromossomos Sexuais
• 1º nível de Determinação do Sexo em humanos
• Sistema XY, Sistema X0 (alguns insetos), Sistema ZW
(peixes, répteis, aves)
Social Feminino Masculino
Cromossômico 46,XX 46,XY
Gonadal Ovários Testículos
Ovidutos, útero, terço Epidídimo, conduto
Genitália Interna
superior da vagina deferente, bolsa escrotal
Clitóris, pequenos e grandes
Pênis, próstata, bolsa
Genitália externa lábios, 2/3 inferiores da
escrotal
vagina
49. Organização Cromossômica do Genoma Humano
Cromossomos Sexuais
• Genes no Cromossomo X não são feminilizantes
• Genes ligados ao X: Daltonismo, Hemofilia, MAOA
• Mecanismos de Compensação de Dose
50. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais
Inativação do X
• Apenas um cromossomo X permanece transcricionalmente ativo em
células XX
• O X inativado passa por intensa compactação, sendo visualizado como
um corpúsculo heterocromático (Corpúsculo de Barr) durante a intérfase
• Essa inativação ocorre de forma aleatória nas diferentes células de um
mesmo organismo, durante a fase pré-embrionária
• Fêmeas de mamíferos (XX) são consideradas MOSAICOS
51. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais
Inativação do X
• Após a inativação de um X em uma
determinada célula, suas
descendentes terão o mesmo X
inativado
52. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais
Hemofilia A
• Deficiência de fator VIII
• Gene no cromossomo X
53. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais
Pelagem de Gatos
• Dois loci para pelagem
• 1 Autossômico
• 1 no Cromossomo Sexual
• Machos – máximo de duas cores
• Fêmeas – até três cores (mosaico)
54. Organização Cromossômica do Genoma Humano > Cromossomos Sexuais
Inativação do X
• Podem ocorrer “desvios” na aleatoriedade da inativação do X
• Lyonização seletiva:
• Inativação preferencial do cromossomo X mutado
• Lyonização negativa:
• Inativação preferencial do cromossomo X normal
• Heterozigotas manifestas
55.
56. TÉCNICAS BÁSICAS DE
VISUALIZAÇÃO DE
CROMOSSOMOS
• Citogenética Clássica Células em divisão / Tecido
• Bandeamento Cromossômico de alta multiplicação
• Citogenética Molecular (mitose – maior índice de
• FISH/GISH compactação)
• Pintura Cromossômica
57. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos
Citogenética Clássica:
• Cultura de células (linfócitos, a partir de sangue periférico)
58.
59. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos
Bandeamento Cromossômico:
• Diferentes técnicas – mais comum Banda G
• Regiões escuras (Giemsa)
ricas em AT – inativas
• Regiões claras
ricas em GC – ativos
60. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos
Hibridização in situ por fluorescência
(FISH):
• Cadeias simples de DNA (sondas), que se anelam às suas sequências
complementares durante a metáfase
• Sequências específicas marcadas com fluoróforos
61. Técnicas Básicas de Visualização de Cromossomos > FISH
Sondas Centroméricas: