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Laboratorio de hemostasia
- 1. Hematología Clínica I Laboratorio de Hemostasia
- 2. Hemostasia
- 5. Formación del tapón hemostático • 1. Vasoconstricción • 2. Adhesividad y agregación plaquetaria • 3. Activación del sistema de coagulación • 4. Activación del sistema fibrinolítico
- 6. LESION Adhesividad Plaquetaria Agregacion Plaquetaria Relación Endotelio Vascular/Plaquetas SISTEMA DE FLUJO MEDIO Fibrina
- 7. Plaquetaria Relación Endotelio Vascular/Plaquetas Plaquetas SISTEMA DE ALTO FLUJO Plaquetaria Agregación Plaquetaria Relación Adhesividad Plaquetaria Agregación LESION
- 8. SUBENDOTELIO ADHESIVIDAD PLAQUETARIA Von Willebrand GP Ib-IX-V GP IIb-IIIa (IIbβ3)Plaqueta Alto Flujo >>>
- 11. Farmacología
- 12. Celula Endotelial fosfolipidos Fosfolipasa A2 Acido araquidonico Ciclo-oxigenasa Prostaciclina Prostaciclina sintetasa PG G2 PGH2 Plaqueta fosfolipidos Fosfolipasa A2 Acido araquidonico Ciclo-oxigenasa Tromboxano A2 Tromboxano sintetasa PG G2 PGH2 ASPIRINA AINE
- 13. • INHIBIDORES DE LA CICLO-OXIGENASA (COX-1) • INHIBIDORES DE LA TROMBOXANO SINTETASA • BLOQUEADORES DE LOS RECEPTORES DEL TROMBOXANO A2 • INHIBIDORES DE LA FOSFODIESTERASA • INHIBIDORES DEL ACOPLE AL ADP • INHIBIDORES DE LOS RECEPTORES PLAQUETARIOS NIVEL DE ACCION DE LOS ANTIAGREGANTES PLAQUETARIOS
- 14. TROMBINA COAGULAC. INTRINSECA COAGULAC. EXTRINSECA ENDOTELIO FACTOR TISULAR
- 15. Serino Proteasa 1 Zimógeno Serino Proteasa 2 Péptido de activación MECANISMO DE ACTIVACIÓN EN CASCADA
- 16. Resumen de la cascada
- 17. Cal PreCal=QAPM XII XIIa QAPM=XI XIa IX VIIIa Calcio Fosfolipidos X Va Calcio Fosfolipidos XIIIa XIII FIBRINOGENO VII F.Tisular Calcio VIIa IXa Xa Lesión Vascular F. Tisular TROMBINAII FIBRINA S FIBRINA I
- 19. Cal PreCal=QAPM XII XIIa QAPM=XI XIa IX VIIIa Calcio Fosfolipidos X Va Calcio Fosfolipidos XIIIa XIII FIBRINOGENO VII F.Tisular Calcio VIIa IXa Xa Lesión Vascular F. Tisular TROMBINAII FIBRINA S FIBRINA I Ca ANTITROMBINA PROTEINA C PROTEINA S
- 20. Cal PreCal=QAPM XII XIIa QAPM=XI XIa IX VIIIa Calcio Fosfolip. X Va Calcio Fosfolip. XIIIa XIII FIBRINOGENO VII F.Tisular Calcio VIIa IXa Xa Lesión Vascular F. Tisular TROMBINAII FIBRINA S FIBRINA I ANTITROMBINA PROTEINA C PROTEINA S
- 21. TROMBINA ACCION ACCION ACCION COAGULANTE INHIBIDORA ANTIFIBRINOLITICA PLAQUETAS FIBRINOGENO FIBRINA F V F Va F VIII F VIIIa F XIII F XIIIa PROTEINA C PROTEINA Ca TAFI INHIBE ACTIVA TRANSFORMA Trombomodulina EPCR Factor V
- 25. Información Genetica Aminoacidos Sintesis Proteica Pro-Factores II, VII, IX, X, PC, PS, etc. Carboxilasa FACTORES K DEPENDIENTES VITAMINA K DICUMARINICOS
- 26. VIDA MEDIA DE LOS FACTORES K DEPENDIENTES Factor VII Proteina C Factor X Factor IX Factor II Proteina S 6 horas 6 horas 48 horas 30 horas 72 horas 50 horas
- 27. TIEMPO DE PROTROMBINA Expresion A. CONCENTRACION B. TASA C. INR (Razon Internacional Normatizada)
- 28. Intensidad de la Anticoagulacion EventosClinicos Ventana Terapeutica 50
- 32. FIBRINOGENO A A B B NH2terminal COOH terminal COOH terminal COOH terminal COOH terminal
- 33. E D E E D E DD E DD E DD ED D E E DD ED D E D DD E D D D D D plasmina plasmina plasmina trombina A + B F XIIIa Xfp Yfp X0 Y0 DIMERO D
- 34. ENFERMEDADES HEMORRAGICAS Mecanismos de Hemostasia Interacción Endotelio-Plaquetas Mecanismo Fibrinolítico Extrínseca (Explosión) Intrínseca (Ampliación) Lesión Adhesión Agregación
- 38. Técnica • Se utiliza plasma pobre en plaquetas (PPP) y tromboplastina cálcica • En un baño a 37ºC se coloca un tubo de vidrio de Khan o hemólisis • Agregar 50 µ de PPP • Incubar 30 segundos • Agregar 100 µ de Reactivo y disparar el cronometro • Detener el cronometro cuando se visualiza la formación del coagulo. Para obtener los resultados en % de actividad es necesario realizar la curva de calibrado donde se interpolan los resultados obtenidos en segundos
- 39. Curva de Calibración Pool Buffer Porcentaje Tiempo 0,100 ml 0 100 0,70 ml 0,30 ml 70 0,50 ml 0,50 ml 50 0,25 ml 0,75 ml 25 Log de cc (%) Tpo. (seg)
- 40. RIN • RIN = Fórmula para expresar el TQuick en pacientes anticoagulados con ACO que nos independiza de la tromboplastina de trabajo • RIN = ( PT pac/ MNPT) ISI • MNPT: Media Geométrica del tiempo de Quick de 20 normales del día de la calibración de la tromboplastina de trabajo • PT pac: Tiempo de Quick del paciente
- 41. TP prolongado • CAUSAS MÁS FRECUENTES DE DÉFICIT • Avitaminosis K: adquirida, iatrogénica sindromes de mala absorción, etc. • Hepatopatías: Obstructiva,funcional. • Inhibidores. La anticoagulación con ACO se controla con el RIN
- 42. TP. prolongado TP Prolongado Corrección c/plasma Normal Corrige No corrige Déficit de factores Inhibidores Dosar Factores Repetir Secuencia de Trabajo
- 43. Corrección con Plasma Normal • El TQuick se puede prolongar por déficit de los factores o por presencia de inhibidores. • Se hace una mezcla de partes iguales del plasma problema y de un normal de concentración conocida, • se hace el TQuick de la mezcla • Corrige si el valor en % es igual o mayor que el promedio de los TQuick del paciente y el normal • TQuick teórico (%paciente +% normal) 2 • Ejemplo de corrección • Plasma problema (P) TQuick de 50% • Plasma normal (N) TQuick de 80% • Mezcla P + N TQuick de 65% o más
- 44. KPTT o APTT • Es la prueba más sensible • Es la prueba más reproducible • Es sensible a los déficit de factores de fase de contacto, IX y VIII • Es sensible a inhibidores neutralizantes • Es sensible a inhibidores de interferencia • Es sensible a la heparina
- 45. Fundamento Se incuba el PPP del paciente con una mezcla de fosfolípidos y un activador de contacto entre 2 a 4 minutos y se recalcifica con CL2Ca 25mM
- 46. Técnica • En baño termostatizado a 37ºC Colocar un tubo de hémolisis o Khan de vidrio Agregar 100µl de PPP y 100µl de Reactivo de aPTT • Incubar según indicación del fabricante • Agregar 100µl de CL2Ca 25mM y disparar el cronómetro • Detener el cronómetro cuando aparece el coágulo
- 47. Utilidad El aPTT se utiliza para el seguimiento de pacientes heparinizados con heparina regular
- 48. Algoritmo de corrección • Índice de Rosner • (aPTT mezcla + aPTT normal/aPTT paciente).100 • < de 10% corrige • ≥ de 10% no corrige
- 49. Aplicación del Índice de Rosner CORRIGE • Dédicit de factores de la vía intrínseca NO CORRIGE • Inhibidor contra factor • Inhibidor de interferencia • Heparina
- 50. DOSAJE DE FACTORES DE LA VÍA INTRÍNSECA Es un aPTT modificado • En un baño termostatizado colocar un tubos de vidrio • Agregar 50µl de plasma diluido • 50µl de plasma deficiente • 50µl de reactivo de aPTT • Incubar según indicación del fabricante • Recalcificar con 50µl de CL2Ca 25mM • Cronometrar • Interpolar en la curva de calibración
- 51. • Graficar en papel log-log tiempo vs concentración
- 52. Evaluación de la Vía final común
- 53. Tiempo de Trombina • Mide el tiempo que tarda en coagular una alícuota (100µl) de PPP por el agregado de una alícuota (100µl) de trombina de a 37ºC. • Se informa tiempo del paciente/normal • TT prolongado •Afibrinogenemia •Hipofibrinogenemia •Disfibrinogenemia •PDF/pdf muy elevados •Paraproteínas •Heparina
- 54. Criterio de Corrección del TT • TT de normal al medio N/2 • TT de la mezcla P+N • Corrige si el TT de P+N es ≤ TT de N/2 • Ejemplo: TT paciente↑ TT P+N > N/2 TT cálcica Normal 18seg TT cálcica Paciente 19seg
- 55. Dimero D
- 56. Dimero D