2. 1941
Iniciaron el uso de la
cromatografía de reparto o
partición.
1952
Recibieron el premio nobel
de química por el
desarrollo de la
cromatografía de partición.
3. Se caracteriza por una FASE
ESTACIONARIA líquida anclada en
un SOPORTE SOLIDO y una FASE
LÍQUIDA MOVIL.
Ambas fases son inmiscibles.
4. Columnas de tipo
liquido-liquido
Columnas de Fase Liquida Unida
Los líquidos se mantenían
en su lugar mediante
adsorción liquida.
Los líquidos están ligados n
enlace por un enlace tipo
iónico.
Provocando rellenos muy
estables e insolubles en la
fase móvil.
5. El soporte solido por lo general es gel de sílice.
• Solidos formados por partículas mecánicamente resistentes,
porosas y uniformes con diámetros de 3 a 5 µm.
• La fase de sílice totalmente hidrolizada (por calentamiento con
HCl 0.1 M durante 1 o 2 días) esta constituida por grupos silanol
químicamente reactivos.
• Los grupos silanol se transforman con organoclorosilanos en
grupo siloxanos , lo que proporciona una fase liquida
estacionaria técnicamente estable y difícil de hidrolizar en
condiciones normales.
6. Un componente de la mezcla se va
desplazando por la columna
depende de su
Soluble
Lento
FASE ESTACIONARIA
(F.E.)
7. Puede modificarse en función
de lo que esté unido a la
superficie de sílice (éteres,
nitrilos, aminas alifáticas).
FASE ESTACIONARIA
(F.E.)
Permite disponer de F.E.
selectivas.
En función
Fase
normal
Fase
inversa
8. • Cromatografía en fase normal.
La F.E. está constituida por un líquido de carácter
POLAR (trietilenglicol, agua).
Como FASE MÓVIL (F.M.) se emplean disolventes
relativamente no polares (hexano, éter isoproílico).
Mezcla polar/no polar
El componente menos polar es el primero que se
detecta.
Soluble F.E.
Se utiliza para la separación
de compuestos muy polares .
Tiempo de
elución
9. • Cromatografía en fase inversa.
La F.E. está constituida por un líquido de carácter NO
POLAR (usualmente hidrocarburo).
Como F.M. se emplean mezclas de agua con
disolventes polares miscibles, como metanol o
acetonitrilo .
El componente más polar es el primero que se detecta.
Soluble F.E.
Se emplea para la separación
de mezclas de compuestos de
polaridad baja.
Tiempo de
elución
10. • La mayor parte de las separaciones por
cromatogarfía de líquidos se realizan en esta
fase.
• Empaquetado: Octil u octodecilsiloxano
C8 H17- / C18 H37-
• Fase Móvil: Disolución acuosa con contenido
variable de un disolvente (metanol,
acetonitrilo o tetrahidrofurano)
11. FASE NORMAL
FASE INVERSA
F. E. POLAR
F. E. NO POLAR
F.M. NO POLAR
F. M. POLAR
Elución: Menos polar 1°
Elución: Más polar 1°
Separación de comp. POLARES
Separación de comp. NO POLARES
14. Cuando la fase móvil es líquida, los
componentes de la muestra interaccionan
con la fase móvil y la estacionaria; por
ejemplo:
• Acetonitrilo
• Hexano
• Dioxano
16. La polaridad de la fase estacionaria apenas se
debe parecer a la de los analitos y para la
elución se utiliza entonces una fase móvil
considerablemente distinta
La fuerza del solvente depende de la naturaleza
del analito y de la fase estacionaria (por lo
regular polares
17. Índice de Polaridad de Snyder
Índice de polaridades es una mezcla de
solventes de A y B
Donde
y
son los indices de polaridad
de los dos solventes y
y
son las
fracciones en volumen de cada uno de los
solventes A y B
