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MATERIA PRIMA E INSUMOS -LÁCTEOS
Ing. Nilza Ciriaco Reyes
PRACTICA Nº 02
DETERMINACIÓN DE LA GRASA DE LA LECHE
I. OBJETIVO:
Mostrar al estudiante los requerimientos para la determinación de la grasa.
II. PROCEDIMIENTO
Practica demostrativa con dinámica de grupo y apreciación personal de los equipos, técnica y resultados.
III. ALGUNAS CONSIDERACIONES TEORICAS
1. Grasas
Debido a diversos factores que intervienen en la composición de la leche (algunos de los cuales se han
mencionado anteriormente) el contenido de grasa en la leche vacuna varía notablemente; los valores
porcentuales más comunes se encuentran entre 3.2 y 4.2%.
La materia grasa está constituida por tres tipos de lípidos:
 Las sustancias grasas propiamente dichas es decir los triglicérido y que forman el 96% del total de
la materia grasa.
 Los fosfolípidos, que representan entre el 0.8 y el 1%.
 Sustancias no saponificables que constituyen otro 1%.
El resto lo constituyen digliceridos, monogliceridos, ácidos grasos libres, etc.
Características de los componentes:
a) Grasas propiamente dichas:
Los triglicérido son los componentes naturales de todas las grasas y aceites. Son esteres formados por un triol
(la glicerina) y distintos ácidos grasos:
H2C  O  C R
 ║
HC  O  C  R’
 ║
 O
H2C  O  C  R”
║
O
R, R’, R” son radicales generalmente distintos.
En el caso de la leche, la grasa tiene una serie de características importantes.
1) Tienen una gran variedad de ácidos grasos; se han logrado identificar 150, aunque los más importantes
son muchos menos: 13 y son los siguientes (a su vez se indican su porcentaje en la grasa y la
temperatura de fusión):
Ácido graso Porcentaje Punto fusión (ºC)
Butírico (4 carbonos) 3.5% -7ºC
Caproico (6 carbonos) 2% -4ºC
Caprílico (8 carbonos) 1% 16ºC
Cáprico (10 carbonos) 2% 31.3ºC
Láurico (12 carbonos) 2.5% 43.6ºC
Miristico (14 carbonos) 10% 54ºC
Palmitico (16 carbonos) 27% 62ºC
Esteárico (18 carbonos) 10.5% 70ºC
Araquidico (20 carbonos) 0.5% 77ºC
Oleico (18 carbonos) 33% 13ºC
Vacénico (18 carbonos) 33% 39ºC
Linolenico (18 carbonos) 4% ------
Liniolenico(18 carbonos) 4% ------
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Ing. Nilza Ciriaco Reyes
2) Los últimos cuatro son ácidos grasos no saturados y los restantes son saturados; estos últimos
constituyen la mayor parte de la grasa, alrededor del 60% mientras que los no saturados (son los que
presentan una, dos o tres dobles ligaduras entre carbonos) son el 35% aproximadamente.
3) Las grasas tienen una gran proporción de ácidos grasos volátiles de bajo peso molecular y, en
especial, de ácido butírico (las demás leches de mamíferos no contienen tanto ácido butírico salvo la de
oveja).
4) La presencia de ácidos grasos volátiles (a pesar que cuantitativamente son porcentajes pequeños)
influyen mucho en el punto de fusión de los grasos, pues son líquidos, a diferencia de los otros ácidos
grasos saturados que son sólidos. Es una característica el fuerte olor de estos ácidos volátiles y que
son indicativos de la rancidez hidrolítico.
5) Los ácidos caprilicos y capricos están presentes en la leche de vaca en un porcentaje mucho menos
que en la de otros mamíferos, por ejemplo, cabra y oveja y es útil para detectar adulteraciones de la
grasa de leche con grasas de leche de cabra u oveja.
6) De las grasas no saturadas, como puede verse por su presencia cuantitativa, el más importante es el
oleico y su isómero el vacenico (representa el 33% de las sustancias grasas)
La mayoría de los no saturados presentes en la leche tienen un punto de fusión bajo; de ahí que cuanto mayor
sea su presencia la grasa será más “blanda” (importante para la textura de la manteca).
La presencia de estos ácidos grasos no saturados son los que suelen ser responsables de ciertos sabores
desagradables, pues tienen la propiedad de fijar oxigeno provocando la llamada rancidez oxidativa.
b) Fosfolipidos:
Los fosfolipidos don esteres derivados de la glicerina y de ácidos grasos, pero de estructura más compleja y
que contienen en su molécula un átomo de fósforo en forma de ácido fosfórico y aminos cuaternarios. Los
fosfolipidos de mayor presencia en la leche son la Lecitina, la cefalina y los fosfoesfingolipidos. Sólo como
ilustración o ejemplo de un fosfolipido, se muestra la estructura de la Lecitina.
O
║
O CH2  O  C ¾R1
║
R2  C  O  CH O
║
CH2  O  P  O  CH2  CH2  N+ (CH3)3

OH
Estas sustancias tienen mucha afinidad con el agua y con los lípidos, y esta es la causa de la estabilidad de la
emulsión de triglicérido en la fase acuosa de la leche.
c) Sustancias no saponificables:
Son constituyentes de las grasas que no saponifican con NaOH o KOH. Los más importantes son los esteroles,
los carotenoides y los tocoferoles.
Entre los esteroles* están el colesterol, el ergosterol y el 7-dehidro-colesterol (este último es útil, para la
elaboración de la vitamina D3).
En el grupo de los carotenoides se hallan sustancias coloreados, rojas, amarillas, que son solubles en grasa,
en la leche vacuna los principales son -caroteno, -caroteno y vitamina A. Los carotenoides se hallan en la
leche unidos a una proteína y forman lipoproteinas. Los carotenos son los que le dan un cierto color crema a la
materia grasa de la leche.
MATERIA PRIMA E INSUMOS -LÁCTEOS
Ing. Nilza Ciriaco Reyes
Por último, los tocoferoles son sustancias muy complejas, en particular es importante el a-tocoferol que es la
vitamina E.
En general son resistentes a altas temperaturas y resultan buenas antioxidantes natural de la leche.
La materia grasa de la leche tiene una densidad que varía entre 0.91 a 0.96 g/cm3 , un punto de fusión entre 31
y 36ºC y un punto de solidificación entre 25 y 30ºC, siendo insoluble en agua, poco en alcohol y muy soluble en
disolventes orgánicos como éter, benceno, acetona, etc.
La materia grasa se halla en la leche en emulsión formando pequeños glóbulos de grasa de forma esférica de
diámetro entre 2 y 10  (micrones), dependiendo este tamaño de la raza vacuna, así también como de la
cantidad de grasa en la leche, pues cuanto mayor sea el porcentaje de materia grasa existente, mayor será el
diámetro medio del glóbulo.
Los glóbulos de grasa en el proceso de homogeneización son reducidos facilitando la emulsión y evitando la
formación de una línea de crema característica que se forma en la leche no homogeneizada.
Los glóbulos de grasa en la leche se hallan recubiertos de una membrana protectora; esta membrana es de
naturaleza lipoproteicos, estando constituida por trigliceridos de alto punto de fusión, fosfolipidos (lecitinas y
cefalina y protidos). También, pero en menos porcentaje hay carotenos, colesterol, minerales y enzimas).
En cuanto a la parte central del glóbulo de grasa está formada por trigliceridos y los no saponificables; esta
parte central no es homogénea, ya que los trigliceridos no saturados y los líquidos están en el centro del
glóbulo, mientras que los triglicérido saturados se hallan en la periferia de esa parte central.
La estabilidad de la materia grasa en la leche depende de la integridad del glóbulo de grasa y en partículas de
la membrana protectora, esta membrana puede romperse por acción de algún ácido o por la acción de ciertos
microorganismos tales como Bacillus cereus y Bacillys mgcoids que lo hacen por la acción de la enzima
lecitinasa que esos mucroorganismos segregan provocando la adherencia de los glóbulos formando
verdaderos racimos que ascienden a la superficie. la membrana también puede romperse por un brusco
enfriamiento pues provoca la cristalización de trigliceridos que al contraerse rompe la membrana.
Siempre que se produzca el aglutinamiento o adherencia de los glóbulos, la emulsión de la materia grasa
pierde estabilidad y es un fenómeno irreversible.
IV. ANALISIS FISICO-QUÍMICO EN LA LECHE
4.1. DETERMINACIÓN DE LA GRASA
La determinación de la grasa en la leche se realiza mediante la técnica volumétrica de Gerber empleando el
butirómetro de Gerber según el método oficial de análisis de leche y productos lácteos (Presidencia de
Gobierno, 1977).
La determinación de la grasa de la leche es importante no solamente, por que denota su pureza sino también
porque demuestra buen cuidado en la alimentación, calidad de pastoso y es más valiosa por los sub productos
que salen de ella.
El análisis más sencillo para medir la grasa es el conocido como Método Gerber y se fundamenta en el uso del
ácido sulfúrico para quemar todos los compuestos de la leche excepto la grasa y, dejar separada la grasa que
no esa atacada por el ácido.
MATERIA PRIMA E INSUMOS -LÁCTEOS
Ing. Nilza Ciriaco Reyes
4.2. DESARROLLO DE LA PRACTICA
A. MUESTRAS, MATERIALES Y EQUIPOS
MATERIAL
- Centrífuga Gerber
- Pipetas de 11 mL.
- Dosificador de 10 mL para el H2SO4.
- Dosificador de 1 mL para el alcohol isoamílico.
- Butirómetros Gerber, tapones y vástago de ajuste.
- Guantes.
- Gradilla.
REACTIVOS
- Ácido sulfúrico 90-91%.
- Alcohol isoamílico.
MUESTRAS
 1 litro de leche descremada pasteurizada
 1 litro de leche entera pasteurizada
 1 litro de leche fresca de establo
B. PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR EL CONTENIDO DE GRASA
Se colocan en un butirómetro de Gerber graduado y siguiendo este orden:
- 10 mL de la disolución de H2SO4,
- 11 mL de leche de forma cuidadosamente para que no se mezclen y
- 1 mL de alcohol isoamílico
Se coloca el tapón en el butirómetro con la ayuda del vástago y se agita enérgicamente hasta la disolución
total de la fase proteica de la leche.
Se centrifuga en la centrífuga Gerber termostatizándola a 65ºC.
Se sacan los butirómetros con cuidado de la centrífuga para no mezclar la capa de grasa separada y se
procede a leer rápidamente el porcentaje de grasa sobre la escala del butirómetro.
4.3. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
 Los resultados obtenidos de las muestras evaluadas, deben reportarse en el cuadro siguiente.
 Los resultados finales deben ser evaluadas y analizadas en función a las Normas técnicas.
DESCREMADA ENTERA FRESCA
DENSIDAD
% GRASA
4.4. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la importancia del contenido de grasa en la leche?
2. ¿Cómo se encuentra la grasa en la leche?
3. ¿Qué importancia tiene la homogenización en la leche?
4. ¿Cuál es la finalidad de la normalización en la leche?

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Practica nº 02 determinación de la grasa de la leche

  • 1. MATERIA PRIMA E INSUMOS -LÁCTEOS Ing. Nilza Ciriaco Reyes PRACTICA Nº 02 DETERMINACIÓN DE LA GRASA DE LA LECHE I. OBJETIVO: Mostrar al estudiante los requerimientos para la determinación de la grasa. II. PROCEDIMIENTO Practica demostrativa con dinámica de grupo y apreciación personal de los equipos, técnica y resultados. III. ALGUNAS CONSIDERACIONES TEORICAS 1. Grasas Debido a diversos factores que intervienen en la composición de la leche (algunos de los cuales se han mencionado anteriormente) el contenido de grasa en la leche vacuna varía notablemente; los valores porcentuales más comunes se encuentran entre 3.2 y 4.2%. La materia grasa está constituida por tres tipos de lípidos:  Las sustancias grasas propiamente dichas es decir los triglicérido y que forman el 96% del total de la materia grasa.  Los fosfolípidos, que representan entre el 0.8 y el 1%.  Sustancias no saponificables que constituyen otro 1%. El resto lo constituyen digliceridos, monogliceridos, ácidos grasos libres, etc. Características de los componentes: a) Grasas propiamente dichas: Los triglicérido son los componentes naturales de todas las grasas y aceites. Son esteres formados por un triol (la glicerina) y distintos ácidos grasos: H2C  O  C R  ║ HC  O  C  R’  ║  O H2C  O  C  R” ║ O R, R’, R” son radicales generalmente distintos. En el caso de la leche, la grasa tiene una serie de características importantes. 1) Tienen una gran variedad de ácidos grasos; se han logrado identificar 150, aunque los más importantes son muchos menos: 13 y son los siguientes (a su vez se indican su porcentaje en la grasa y la temperatura de fusión): Ácido graso Porcentaje Punto fusión (ºC) Butírico (4 carbonos) 3.5% -7ºC Caproico (6 carbonos) 2% -4ºC Caprílico (8 carbonos) 1% 16ºC Cáprico (10 carbonos) 2% 31.3ºC Láurico (12 carbonos) 2.5% 43.6ºC Miristico (14 carbonos) 10% 54ºC Palmitico (16 carbonos) 27% 62ºC Esteárico (18 carbonos) 10.5% 70ºC Araquidico (20 carbonos) 0.5% 77ºC Oleico (18 carbonos) 33% 13ºC Vacénico (18 carbonos) 33% 39ºC Linolenico (18 carbonos) 4% ------ Liniolenico(18 carbonos) 4% ------
  • 2. MATERIA PRIMA E INSUMOS -LÁCTEOS Ing. Nilza Ciriaco Reyes 2) Los últimos cuatro son ácidos grasos no saturados y los restantes son saturados; estos últimos constituyen la mayor parte de la grasa, alrededor del 60% mientras que los no saturados (son los que presentan una, dos o tres dobles ligaduras entre carbonos) son el 35% aproximadamente. 3) Las grasas tienen una gran proporción de ácidos grasos volátiles de bajo peso molecular y, en especial, de ácido butírico (las demás leches de mamíferos no contienen tanto ácido butírico salvo la de oveja). 4) La presencia de ácidos grasos volátiles (a pesar que cuantitativamente son porcentajes pequeños) influyen mucho en el punto de fusión de los grasos, pues son líquidos, a diferencia de los otros ácidos grasos saturados que son sólidos. Es una característica el fuerte olor de estos ácidos volátiles y que son indicativos de la rancidez hidrolítico. 5) Los ácidos caprilicos y capricos están presentes en la leche de vaca en un porcentaje mucho menos que en la de otros mamíferos, por ejemplo, cabra y oveja y es útil para detectar adulteraciones de la grasa de leche con grasas de leche de cabra u oveja. 6) De las grasas no saturadas, como puede verse por su presencia cuantitativa, el más importante es el oleico y su isómero el vacenico (representa el 33% de las sustancias grasas) La mayoría de los no saturados presentes en la leche tienen un punto de fusión bajo; de ahí que cuanto mayor sea su presencia la grasa será más “blanda” (importante para la textura de la manteca). La presencia de estos ácidos grasos no saturados son los que suelen ser responsables de ciertos sabores desagradables, pues tienen la propiedad de fijar oxigeno provocando la llamada rancidez oxidativa. b) Fosfolipidos: Los fosfolipidos don esteres derivados de la glicerina y de ácidos grasos, pero de estructura más compleja y que contienen en su molécula un átomo de fósforo en forma de ácido fosfórico y aminos cuaternarios. Los fosfolipidos de mayor presencia en la leche son la Lecitina, la cefalina y los fosfoesfingolipidos. Sólo como ilustración o ejemplo de un fosfolipido, se muestra la estructura de la Lecitina. O ║ O CH2  O  C ¾R1 ║ R2  C  O  CH O ║ CH2  O  P  O  CH2  CH2  N+ (CH3)3  OH Estas sustancias tienen mucha afinidad con el agua y con los lípidos, y esta es la causa de la estabilidad de la emulsión de triglicérido en la fase acuosa de la leche. c) Sustancias no saponificables: Son constituyentes de las grasas que no saponifican con NaOH o KOH. Los más importantes son los esteroles, los carotenoides y los tocoferoles. Entre los esteroles* están el colesterol, el ergosterol y el 7-dehidro-colesterol (este último es útil, para la elaboración de la vitamina D3). En el grupo de los carotenoides se hallan sustancias coloreados, rojas, amarillas, que son solubles en grasa, en la leche vacuna los principales son -caroteno, -caroteno y vitamina A. Los carotenoides se hallan en la leche unidos a una proteína y forman lipoproteinas. Los carotenos son los que le dan un cierto color crema a la materia grasa de la leche.
  • 3. MATERIA PRIMA E INSUMOS -LÁCTEOS Ing. Nilza Ciriaco Reyes Por último, los tocoferoles son sustancias muy complejas, en particular es importante el a-tocoferol que es la vitamina E. En general son resistentes a altas temperaturas y resultan buenas antioxidantes natural de la leche. La materia grasa de la leche tiene una densidad que varía entre 0.91 a 0.96 g/cm3 , un punto de fusión entre 31 y 36ºC y un punto de solidificación entre 25 y 30ºC, siendo insoluble en agua, poco en alcohol y muy soluble en disolventes orgánicos como éter, benceno, acetona, etc. La materia grasa se halla en la leche en emulsión formando pequeños glóbulos de grasa de forma esférica de diámetro entre 2 y 10  (micrones), dependiendo este tamaño de la raza vacuna, así también como de la cantidad de grasa en la leche, pues cuanto mayor sea el porcentaje de materia grasa existente, mayor será el diámetro medio del glóbulo. Los glóbulos de grasa en el proceso de homogeneización son reducidos facilitando la emulsión y evitando la formación de una línea de crema característica que se forma en la leche no homogeneizada. Los glóbulos de grasa en la leche se hallan recubiertos de una membrana protectora; esta membrana es de naturaleza lipoproteicos, estando constituida por trigliceridos de alto punto de fusión, fosfolipidos (lecitinas y cefalina y protidos). También, pero en menos porcentaje hay carotenos, colesterol, minerales y enzimas). En cuanto a la parte central del glóbulo de grasa está formada por trigliceridos y los no saponificables; esta parte central no es homogénea, ya que los trigliceridos no saturados y los líquidos están en el centro del glóbulo, mientras que los triglicérido saturados se hallan en la periferia de esa parte central. La estabilidad de la materia grasa en la leche depende de la integridad del glóbulo de grasa y en partículas de la membrana protectora, esta membrana puede romperse por acción de algún ácido o por la acción de ciertos microorganismos tales como Bacillus cereus y Bacillys mgcoids que lo hacen por la acción de la enzima lecitinasa que esos mucroorganismos segregan provocando la adherencia de los glóbulos formando verdaderos racimos que ascienden a la superficie. la membrana también puede romperse por un brusco enfriamiento pues provoca la cristalización de trigliceridos que al contraerse rompe la membrana. Siempre que se produzca el aglutinamiento o adherencia de los glóbulos, la emulsión de la materia grasa pierde estabilidad y es un fenómeno irreversible. IV. ANALISIS FISICO-QUÍMICO EN LA LECHE 4.1. DETERMINACIÓN DE LA GRASA La determinación de la grasa en la leche se realiza mediante la técnica volumétrica de Gerber empleando el butirómetro de Gerber según el método oficial de análisis de leche y productos lácteos (Presidencia de Gobierno, 1977). La determinación de la grasa de la leche es importante no solamente, por que denota su pureza sino también porque demuestra buen cuidado en la alimentación, calidad de pastoso y es más valiosa por los sub productos que salen de ella. El análisis más sencillo para medir la grasa es el conocido como Método Gerber y se fundamenta en el uso del ácido sulfúrico para quemar todos los compuestos de la leche excepto la grasa y, dejar separada la grasa que no esa atacada por el ácido.
  • 4. MATERIA PRIMA E INSUMOS -LÁCTEOS Ing. Nilza Ciriaco Reyes 4.2. DESARROLLO DE LA PRACTICA A. MUESTRAS, MATERIALES Y EQUIPOS MATERIAL - Centrífuga Gerber - Pipetas de 11 mL. - Dosificador de 10 mL para el H2SO4. - Dosificador de 1 mL para el alcohol isoamílico. - Butirómetros Gerber, tapones y vástago de ajuste. - Guantes. - Gradilla. REACTIVOS - Ácido sulfúrico 90-91%. - Alcohol isoamílico. MUESTRAS  1 litro de leche descremada pasteurizada  1 litro de leche entera pasteurizada  1 litro de leche fresca de establo B. PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR EL CONTENIDO DE GRASA Se colocan en un butirómetro de Gerber graduado y siguiendo este orden: - 10 mL de la disolución de H2SO4, - 11 mL de leche de forma cuidadosamente para que no se mezclen y - 1 mL de alcohol isoamílico Se coloca el tapón en el butirómetro con la ayuda del vástago y se agita enérgicamente hasta la disolución total de la fase proteica de la leche. Se centrifuga en la centrífuga Gerber termostatizándola a 65ºC. Se sacan los butirómetros con cuidado de la centrífuga para no mezclar la capa de grasa separada y se procede a leer rápidamente el porcentaje de grasa sobre la escala del butirómetro. 4.3. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS  Los resultados obtenidos de las muestras evaluadas, deben reportarse en el cuadro siguiente.  Los resultados finales deben ser evaluadas y analizadas en función a las Normas técnicas. DESCREMADA ENTERA FRESCA DENSIDAD % GRASA 4.4. CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es la importancia del contenido de grasa en la leche? 2. ¿Cómo se encuentra la grasa en la leche? 3. ¿Qué importancia tiene la homogenización en la leche? 4. ¿Cuál es la finalidad de la normalización en la leche?