Este documento describe los métodos de cultivo para detectar bacterias en la sangre, tracto gastrointestinal, aparato respiratorio, orina y las bacterias más comúnmente asociadas con infecciones en cada sitio. Explica que la presencia de bacterias donde normalmente no deberían estar indica una infección y la importancia de los cultivos para diagnosticar y tratar las infecciones bacterianas.
2. Nunca debemos de encontrar bacterias de ningún
tipo en torrente sanguíneo. Ya que las bacterias
son eliminadas rápidamente.
Bacteriemia: Denota la presencia de bacterias en
la sangre.
La presencia de bacterias en la sangre indica
habitualmente infección generalizada.
3. La clásica infección en la sangre es conocida
como septicemia.
Septicemia: Es la entrada en la sangre de un
microorganismos a partir de un foco séptico, que
se multiplica y se propaga a distintos tejidos del
organismo para iniciar nuevas infecciones.
Sus síntomas son fiebre, y escalofríos seguidos
de postración. Pero puede llevar a la muerte por
intensa reducción en la presión sanguínea y fallo
en el funcionamiento de órganos (choque
séptico).
4. Método de cultivo.
o Se le conoce como hemocultivo al cultivo microbiológico
de la sangre.
o Extraer asépticamente 10 a 20 ml de sangre de una
vena.
o Debe de utilizarse isodine para desinfectar el área.
o Puede utilizarse anticoagulante.
o Se debe de sembrar en un medio de cultivo rico en
nutrientes como agar sangre complementado con
tripticasa (Medio de cultivo para aeróbicos).
o Además se debe de sembrar en el medio de cultivo de
agar sangre con tioglicolato. (Medio de cultivo para
anaerobios).
o Se siembran por estría (cualitativamente) o por placa
vertida (cuantitativamente).
5. BACTERIAS RELACIONADAS CON EL DIAGNOSTICO
CLINICO.
o Pseudomonas aeruginosa.
o Escherichia coli.
o Klebsiella pneumoniae.
o Staphilococcus aureus y Streptococcus beta hemolítico ( Infec.
Piel)
o Streptococcus pyogenes.
o Haemofilus influenzae y Neisseria meningitidis (Meningitis).
o Streptococcus alfa hemolitico (endocarditis).
o Proteus (Complicaciones vías urinarias y quemaduras externas).
o Salmonella tifi, Salmonella partifi y Shigella (Infec. Tracto
digestivo).
6. Falsos positivos.
o Estafilococcus albus y Estafilocuccus epidermidis dan un
significado dudoso por lo que se requiere estudiar de nuevo la
muestra o tener una considerable experiencia microbiológica y
clínica para interpretar ya que algunas veces pueden causar
infección la pared del corazón.
7. El tubo digestivo contiene abundante flora
bacteriana normal que producen una función
beneficiosa.
El 99.9% son microorganismos anaeróbicos.
Pero existen microorganismos (protozoos,
bacterias y virus que pueden causar cuadros
gastrointestinales caracterizados por diarrea
acompañados en ocasiones por vómitos, dolor
abdominal y fiebre.
8. Se le conoce a la inflamación, infección o
irritación del estomago o intestinos causada por
bacterias como gastroenteritis bacteriana.
La manera de aislar e identificar el
microorganismos causante es través de un
coprocultivo.
9. Método de cultivo.
o Las heces fecales se recogen en un frasco estéril, con
boca ancha y rosca. Pero pueden recolectarse mediante
raspado anal con un hisopo.
o Las heces fecales deben de protegerse contra la
desecación.
o Deben de analizarse de inmediato, si no fuera posible
debe de mantenerse un medio de conservación y
transporte para mantener vivos a los microorganismos.
o Las heces fecales deben de mantenerse a 4°C.
o Los medios de cultivo que se utilizaran son agar sangre,
agar Mc Conkey, Agar S-S, Agar EMB, Manitol, Agar
Hektoen, entre otros.
10. Método de cultivo.
o La siembra se realiza a través de estría en todos los
medios de cultivo.
o El crecimiento debe de llevarse a cabo por 24 horas a
37°C.
11. BACTERIAS RELACIONADAS CON EL DIAGNOSTICO
CLINICO.
o Bacterias que producen diarrea sanguinolenta.
• Salmonella .
• Shigella.
• Yersinia enterocolitica.
• Yersinia psedotuberculosis.
• Campylobacter jenuni.
• Escherichia coli.
o Bacterias que lesionan el tubo digestivo por la acción de toxinas.
• Clostridium difficile
• Clostridium perfringens.
• Vibrio cholerae.
• Staphylococcus aureos.
• Escherichia coli.
12. El aparato respiratorio
inferior es normalmente
estéril.
Lo cual lleva a concluir
que cualquier especie
bacteriana se considera
como infección en
cualquier numero
presente.
13. Para el análisis del aparato respiratorio inferior se
toma como muestra el esputo.
El esputo es la secreción que se produce en los
pulmones y bronquios que puede ser expulsada
por tos profunda.
Las principales enfermedades que se pueden
analizar son neumonía y tuberculosis.
14. Método de cultivo.
o Antes de la recolección de la muestra es necesario
enjuagar la boca con solución salina o agua templada
para reducir la contaminación con saliva.
o En un recipiente estéril recoger el esputo tras una
expectoración profunda, si es posible por la mañana.
o Realizar análisis inmediatamente o refrigerar hasta su
envió.
o No debe de exponerse a temperatura ambiente por que
puede provocar la perdida de algunos microorganismos
causantes de las enfermedades.
15. Método de cultivo.
o Con el esputo fresco realizar los frotis necesarios para
tinción Gram y Tinción Ziehl-Neelsen.
o Sembrar por estría medios de cultivo como agar sangre,
agar chocolate, agar Mc Conkey y agar manitol.
o El tiempo de incubación es de 24 horas a 37 °C.
o Si hay un crecimiento escaso resembrar todos medio de
cultivo a excepción del agar Mc Conkey. Por un tiempo
adicional de 24 horas a 37°C.
16. BACTERIAS RELACIONADAS CON EL DIAGNOSTICO
CLINICO.
o Klebsiella pneumoniae.
o Staphylococcus aureus.
o Streptococcus pneumoniae.
o Streptococcus pyogenes.
o Haemofilus influenzae.
o Haemofilus parainfluenzae
o Mycobacterium tuberculosis.
17. Normalmente la orina de la vejiga es estéril.
Así que cuando se sospecha de una infección
bacteriana es necesario el cultivo que se le conoce
como urocultivo.
El urocultivo tiene la finalidad de detectar y cuantificar
los microorganismos causante de la infección.
Cuando hay presencia de bacterias en la orina se le
denomina bacteriuria.
18. Se debe tener mucho cuidado en la toma de
muestra de orina ya que puede ser contaminada
fácilmente.
En los hombres la orina atraviesa (uretra,
genitales y periné) que poseen una flora
bacteriana normal. Aquí predominan los cocos
Gram negativos.
En las mujeres las vías urinarias tienen contacto
con la zona vaginal en la que predominan
Lactobacilos y estreptococos.
Por tal razón se utiliza el método de recolección
llamado porción media.
19. Método de cultivo.
o Debe de recolectarse la porción media de la primera
micción del día.
o Recolectarse en frascos estériles con tapón de rosca.
o La orina debe de procesarse lo mas rápidamente posible
ya que es un buen medio de cultivo para la proliferación.
o Si no fuera posible mantenerse a 4°C nunca mas de un
tiempo de 18 a 24 horas de almacenaje.
20. El urocultivo incluye tres fases.
o 1. Aislamiento e identificación de microorganismos.
o 2. Cuenta viable (recuento de bacterias por ml de orina).
o 3. Antibiograma.
Aislamiento e identificación de microorganismos.
Se toman 10 ml de orina y se centrifugan.
Desechar el sobrenadante y colocar unas gotas de la orina
residual en un portaobjetos y realizar tinción Gram y/o Ziehl-
Nieelsen.
Observar al microscopio y además de observar tinciones se
busca identificar leucocitos, eritrocitos, parásitos, etc.
21. Aislamiento e identificación de microorganismos.
o Sembrar por estría en agar EMB para el aislamiento de
bacterias.
o Incubar por 24 horas a 37 °C.
o Si no se presenta crecimiento dejar por 24 horas mas.
o Si existiera crecimiento se prepara frotis bacterianos para tinción
gram.
o Se preparan pruebas bioquímicas para identificación (
Indol,oxidasa,catalasa, urea).
22. Cuenta viable.
o Se utiliza una asa calibrada de 4 mm de diámetro por 0.01 ml de
capacidad, con ella se toma la muestra de orina y se realizan
estrías por toda la caja petri que contenga agar sangre.
o Se incuba a 37 °C durante 24 horas (en caso de ser necesario
otras 24 horas).
o Cuando se presente el crecimiento bacteriano se cuentan las
colonias que se formaron y se realizan los cálculos necesarios
para calcular cuantas colonias hay en un mi litro de orina.
o Se considera como bacteriuria significativa si el resultado es
mayor a 100 000 UFC por ml de orina.
o Si el resultado es de 10 000 a 100 000 UFC se tendría que
repetir el urocultivo para comprobar.
23. Antibiograma.
o Es un método de difusión en agar en la que se realiza un
prueba de sensibilidad de las bacterias hacia algunos
antibióticos.
o Para realizarse se deben de hacer estrías por toda la
caja petri que contenga agar mueller-hinton. Y agregar
discos de papel filtro que absorbieron el antibiótico.
o Se debe de cultivar a 37°C entre 18 a 24 horas.
o Solo es adecuado para bacterias patógenas de rápido
crecimiento.
24. BACTERIAS RELACIONADAS CON EL DIAGNOSTICO
CLINICO.
o Escherichia coli.
o Proteus.
o Psedomonas.
o Klebsiella.
o Staphylococcus.