SlideShare a Scribd company logo
1 of 15
Ekspresi Gen Pada
Prokariotik
Azka Azalia Azzam 4401420063
Gen Prokariotik terdiri dari tiga bagian:
1. Promoter
2. RNA Coding sequence
3. Terminator
Struktur Gen Prokariot
Promoter
❑ Promoter adalah urutan DNA spesifik yang
berperan dalam mengendalikan transkripsi
gen struktural
❑ Region 5’ dari promoter disebut urutan
upstream.
❑ Region 3' dari terminator disebut barisan
downstream.
❑ Berada pada bagian upstream.
❑ Fungsi promoter sebagai tempat awal
pelekatan RNA polimerase
❑ Pada prokariot, bagian penting promoter
disebut Pribnow box pada urutan nukleotida
-10 dan - 35.
Coding region
❑ Gen struktural merupakan bagian yang mengkode urutan nukleotida RNA.
❑ Transkripsi dimulai dari sekuens inisiasi ATG sampai kodon stop (TAA/ TGA/ TAG).
❑ Pada prokariot tidak ada sekuens intron sehingga semuanya adalah sekuen ekson
Operator
❑ Operator merupakan urutan nukleotida yang terletak di antara promotor dan bagian
struktural
❑ Tempat pelekatan protein represor (penekan atau penghambat ekspresi gen).
❑ Jika ada represor yang melekat di operator maka RNA polimerase tidak bisa melakukan
transkripsi sehingga ekspresi gen tidak berlangsung.
Terminator dan RNA Polimerase
❑ Terminator dicirikan sebagai struktur hairpin dan lengkungan yang kaya akan urutan
GC yang terbentuk pada molekul RNA hasil transkripsi.
❑ RNA polimerase merupakan enzim yang mengkatalisis proses transkripsi
❑ Salah satu ciri dari regulasi
ekspresi gen pada sel prokariotik
adalah adanya struktur operon.
❑ Operon adalah sekumpulan gen
yang ekspresinya dikendalikan
oleh satu promoter.
Ekspresi Gen Prokariot
❑ Operon lac merupakan salah satu organisasi gen pada prokariot untuk menghasilkan
enzim β-galaktosidase.
❑ Operon lac terdiri dari 3 gen struktural: lac Z, lac Y, lac A.
❑ Proses transkripsi pada sel prokariot akan menghasilkan satu mRNA yang membawa
kode genetik untuk polipeptida yang berbeda beda, disebut mRNA polisistik.
Ekspresi Gen Pada Sel Prokariotik
Operon lac dapat diatur secara transkripsi
– 1. Dengan protein represor
– 2. Oleh protein aktivator
Model mekanisme induksi kontrol negatif
– Melibatkan protein represor lac
– Penginduksinya adalah alolaktosa
• Mengikat represor lac dan menonaktifkannya
Operon lac Diatur Oleh Protein Represor
Represi katabolit
• Saat terpapar laktosa dan glukosa
– E. coli menggunakan glukosa terlebih dahulu, dan represi katabolit
mencegah penggunaan laktosa
– Ketika glukosa habis, represi katabolit terjadi diringankan, dan operon lac
diekspresikan
• Penggunaan dua gula secara berurutan oleh bakteri disebut diauxic growth
Operon lac juga Diatur Oleh Protein Aktivator
• Regulasi melibatkan molekul kecil, cyclic AMP (cAMP)
– dihasilkan dari ATP melalui enzim adenylyl siklase
– cAMP mengikat protein aktivator yang dikenal sebagai Catabolite Activator
Protein (CAP)
• Kompleks cAMP-CAP adalah contoh regulasi genetik yang dapat diinduksi dan
di bawah control positif
– Kompleks cAMP-CAP mengikat ke CAP site dekat lac promoter dan
meningkatkan transkripsi
• Dengan adanya glukosa, enzim adenylyl siklase dihambat
– Ini menurunkan kadar cAMP dalam sel
– cAMP tidak lagi tersedia untuk mengikat CAP
– Tingkat transkripsi menurun
Terima kasih.

More Related Content

What's hot

What's hot (20)

Sintesis protein
Sintesis proteinSintesis protein
Sintesis protein
 
Kel 3 perbedaan transkripsi dan translasi pada prokariot dan eukariot
Kel 3 perbedaan transkripsi dan translasi pada prokariot dan eukariotKel 3 perbedaan transkripsi dan translasi pada prokariot dan eukariot
Kel 3 perbedaan transkripsi dan translasi pada prokariot dan eukariot
 
Jaringan Ikat
Jaringan Ikat Jaringan Ikat
Jaringan Ikat
 
Kloroplas
KloroplasKloroplas
Kloroplas
 
Transkripsi
TranskripsiTranskripsi
Transkripsi
 
Glikogenolisis
Glikogenolisis Glikogenolisis
Glikogenolisis
 
Ekspresi gen
Ekspresi genEkspresi gen
Ekspresi gen
 
Jaringan epitel dan Jaringan Ikat
Jaringan epitel dan Jaringan IkatJaringan epitel dan Jaringan Ikat
Jaringan epitel dan Jaringan Ikat
 
Tanya Jawab Biologi Molekuler
Tanya Jawab Biologi MolekulerTanya Jawab Biologi Molekuler
Tanya Jawab Biologi Molekuler
 
Bioteknologi kesehatan (insulin)
Bioteknologi kesehatan (insulin)Bioteknologi kesehatan (insulin)
Bioteknologi kesehatan (insulin)
 
Struktur enzim
Struktur enzimStruktur enzim
Struktur enzim
 
Biokimia
BiokimiaBiokimia
Biokimia
 
Komunikasi sel
Komunikasi selKomunikasi sel
Komunikasi sel
 
Vektor bioteknologi
Vektor bioteknologiVektor bioteknologi
Vektor bioteknologi
 
Ppt DNA
Ppt DNAPpt DNA
Ppt DNA
 
Sintesis protein
Sintesis proteinSintesis protein
Sintesis protein
 
KROMOSOM, GEN, DAN DNA
KROMOSOM, GEN, DAN DNAKROMOSOM, GEN, DAN DNA
KROMOSOM, GEN, DAN DNA
 
materi pertumbuhan dan perkembangan tumbuhan
materi pertumbuhan dan perkembangan tumbuhanmateri pertumbuhan dan perkembangan tumbuhan
materi pertumbuhan dan perkembangan tumbuhan
 
Materi Genetik (DNA & RNA)
Materi Genetik (DNA & RNA)Materi Genetik (DNA & RNA)
Materi Genetik (DNA & RNA)
 
Anabolisme karbohidrat
Anabolisme karbohidratAnabolisme karbohidrat
Anabolisme karbohidrat
 

Similar to Kelompok 1_Ekspresi Gen Pada Prokariotik.pptx

Mol genet-6a-gene regulation
Mol genet-6a-gene regulationMol genet-6a-gene regulation
Mol genet-6a-gene regulationS'Roni Roni
 
Biomol 6-transkripsi 1
Biomol 6-transkripsi 1Biomol 6-transkripsi 1
Biomol 6-transkripsi 1S'Roni Roni
 
357316120-Regulasi-Ekspresi-Gen-pptx.pptx
357316120-Regulasi-Ekspresi-Gen-pptx.pptx357316120-Regulasi-Ekspresi-Gen-pptx.pptx
357316120-Regulasi-Ekspresi-Gen-pptx.pptxNovhyALfinoNezious
 
Ppt ekspresi gen klp 9 b
Ppt ekspresi gen klp 9 bPpt ekspresi gen klp 9 b
Ppt ekspresi gen klp 9 bevasujiati
 
Kimia bahan makanan yang lebih lengkap "ENZIM"
Kimia bahan makanan yang lebih lengkap "ENZIM"Kimia bahan makanan yang lebih lengkap "ENZIM"
Kimia bahan makanan yang lebih lengkap "ENZIM"Kristina Fide Chynaga
 
Regulasi_Ekspresi_Gen_Pada_Eukariot-.ppt
Regulasi_Ekspresi_Gen_Pada_Eukariot-.pptRegulasi_Ekspresi_Gen_Pada_Eukariot-.ppt
Regulasi_Ekspresi_Gen_Pada_Eukariot-.pptAgathaHaselvin
 
Mol genet-7-ekspresi gen 1-transkripsi
Mol genet-7-ekspresi gen 1-transkripsiMol genet-7-ekspresi gen 1-transkripsi
Mol genet-7-ekspresi gen 1-transkripsiS'Roni Roni
 
C13 Sintesis Protein dan Protein Targetting
C13 Sintesis Protein dan Protein TargettingC13 Sintesis Protein dan Protein Targetting
C13 Sintesis Protein dan Protein TargettingCatatan Medis
 
03_BiotekS1-Dogma Central Biologi.pptx.pdf
03_BiotekS1-Dogma Central Biologi.pptx.pdf03_BiotekS1-Dogma Central Biologi.pptx.pdf
03_BiotekS1-Dogma Central Biologi.pptx.pdfssuser860120
 
Kontrol Inisiasi Transkripsi.pptx
Kontrol Inisiasi Transkripsi.pptxKontrol Inisiasi Transkripsi.pptx
Kontrol Inisiasi Transkripsi.pptxYulizaAriani1
 
TRANSKRIPSI TRANSLASI DNA OK.pdf
TRANSKRIPSI TRANSLASI DNA OK.pdfTRANSKRIPSI TRANSLASI DNA OK.pdf
TRANSKRIPSI TRANSLASI DNA OK.pdfmozaisnaini733
 
III. Replikasi dan ekspresi Gen.ppt
III. Replikasi dan ekspresi Gen.pptIII. Replikasi dan ekspresi Gen.ppt
III. Replikasi dan ekspresi Gen.pptWan Na
 
Sintesis Protein.ppt
Sintesis Protein.pptSintesis Protein.ppt
Sintesis Protein.pptAkhiyatSuyudi
 
Ppt genetika pengaturan ekspresi gen dan perkembangan gen
Ppt genetika pengaturan ekspresi gen dan perkembangan genPpt genetika pengaturan ekspresi gen dan perkembangan gen
Ppt genetika pengaturan ekspresi gen dan perkembangan genDesirinnawatiSinaga
 
6. the lac operon
6. the lac operon6. the lac operon
6. the lac operonS'Roni Roni
 
Presentase Kimia Bahan Makanan "ENZIM"
Presentase Kimia Bahan Makanan "ENZIM"Presentase Kimia Bahan Makanan "ENZIM"
Presentase Kimia Bahan Makanan "ENZIM"Kristina Fide Chynaga
 

Similar to Kelompok 1_Ekspresi Gen Pada Prokariotik.pptx (20)

Mol genet-6a-gene regulation
Mol genet-6a-gene regulationMol genet-6a-gene regulation
Mol genet-6a-gene regulation
 
Biomol 6-transkripsi 1
Biomol 6-transkripsi 1Biomol 6-transkripsi 1
Biomol 6-transkripsi 1
 
357316120-Regulasi-Ekspresi-Gen-pptx.pptx
357316120-Regulasi-Ekspresi-Gen-pptx.pptx357316120-Regulasi-Ekspresi-Gen-pptx.pptx
357316120-Regulasi-Ekspresi-Gen-pptx.pptx
 
Ppt ekspresi gen klp 9 b
Ppt ekspresi gen klp 9 bPpt ekspresi gen klp 9 b
Ppt ekspresi gen klp 9 b
 
Sintesis protein 3
Sintesis protein 3Sintesis protein 3
Sintesis protein 3
 
Kimia bahan makanan yang lebih lengkap "ENZIM"
Kimia bahan makanan yang lebih lengkap "ENZIM"Kimia bahan makanan yang lebih lengkap "ENZIM"
Kimia bahan makanan yang lebih lengkap "ENZIM"
 
Regulasi_Ekspresi_Gen_Pada_Eukariot-.ppt
Regulasi_Ekspresi_Gen_Pada_Eukariot-.pptRegulasi_Ekspresi_Gen_Pada_Eukariot-.ppt
Regulasi_Ekspresi_Gen_Pada_Eukariot-.ppt
 
Materi genetik
Materi genetikMateri genetik
Materi genetik
 
Mol genet-7-ekspresi gen 1-transkripsi
Mol genet-7-ekspresi gen 1-transkripsiMol genet-7-ekspresi gen 1-transkripsi
Mol genet-7-ekspresi gen 1-transkripsi
 
C13 Sintesis Protein dan Protein Targetting
C13 Sintesis Protein dan Protein TargettingC13 Sintesis Protein dan Protein Targetting
C13 Sintesis Protein dan Protein Targetting
 
03_BiotekS1-Dogma Central Biologi.pptx.pdf
03_BiotekS1-Dogma Central Biologi.pptx.pdf03_BiotekS1-Dogma Central Biologi.pptx.pdf
03_BiotekS1-Dogma Central Biologi.pptx.pdf
 
Kontrol Inisiasi Transkripsi.pptx
Kontrol Inisiasi Transkripsi.pptxKontrol Inisiasi Transkripsi.pptx
Kontrol Inisiasi Transkripsi.pptx
 
TRANSKRIPSI TRANSLASI DNA OK.pdf
TRANSKRIPSI TRANSLASI DNA OK.pdfTRANSKRIPSI TRANSLASI DNA OK.pdf
TRANSKRIPSI TRANSLASI DNA OK.pdf
 
RNA
RNARNA
RNA
 
III. Replikasi dan ekspresi Gen.ppt
III. Replikasi dan ekspresi Gen.pptIII. Replikasi dan ekspresi Gen.ppt
III. Replikasi dan ekspresi Gen.ppt
 
Sintesis Protein.ppt
Sintesis Protein.pptSintesis Protein.ppt
Sintesis Protein.ppt
 
Ppt genetika pengaturan ekspresi gen dan perkembangan gen
Ppt genetika pengaturan ekspresi gen dan perkembangan genPpt genetika pengaturan ekspresi gen dan perkembangan gen
Ppt genetika pengaturan ekspresi gen dan perkembangan gen
 
PPT RNA ( ALIFA & SAKIRO)
PPT RNA ( ALIFA & SAKIRO)PPT RNA ( ALIFA & SAKIRO)
PPT RNA ( ALIFA & SAKIRO)
 
6. the lac operon
6. the lac operon6. the lac operon
6. the lac operon
 
Presentase Kimia Bahan Makanan "ENZIM"
Presentase Kimia Bahan Makanan "ENZIM"Presentase Kimia Bahan Makanan "ENZIM"
Presentase Kimia Bahan Makanan "ENZIM"
 

Recently uploaded

MATERI IPA KELAS 9 SMP: BIOTEKNOLOGI ppt
MATERI IPA KELAS 9 SMP: BIOTEKNOLOGI pptMATERI IPA KELAS 9 SMP: BIOTEKNOLOGI ppt
MATERI IPA KELAS 9 SMP: BIOTEKNOLOGI pptAnggitBetaniaNugraha
 
Dana Setiawan (Paparan terkait Konstruksi Jalan )
Dana Setiawan   (Paparan terkait Konstruksi Jalan )Dana Setiawan   (Paparan terkait Konstruksi Jalan )
Dana Setiawan (Paparan terkait Konstruksi Jalan )RifkiAbrar2
 
e-Book Persepsi dan Adopsi-Rachmat Hendayana.pdf
e-Book Persepsi dan Adopsi-Rachmat Hendayana.pdfe-Book Persepsi dan Adopsi-Rachmat Hendayana.pdf
e-Book Persepsi dan Adopsi-Rachmat Hendayana.pdfIAARD/Bogor, Indonesia
 
bagian 2 pengujian hipotesis deskriptif 1 sampel
bagian 2 pengujian hipotesis deskriptif 1 sampelbagian 2 pengujian hipotesis deskriptif 1 sampel
bagian 2 pengujian hipotesis deskriptif 1 sampelbaiqtryz
 
Petunjuk Teknis Penggunaan Aplikasi OSNK 2024
Petunjuk Teknis Penggunaan Aplikasi OSNK 2024Petunjuk Teknis Penggunaan Aplikasi OSNK 2024
Petunjuk Teknis Penggunaan Aplikasi OSNK 2024SDNTANAHTINGGI09
 
PERCOBAAN 3 Dissolved Oxygen-Kimia Lingkungan.docx
PERCOBAAN 3 Dissolved Oxygen-Kimia Lingkungan.docxPERCOBAAN 3 Dissolved Oxygen-Kimia Lingkungan.docx
PERCOBAAN 3 Dissolved Oxygen-Kimia Lingkungan.docxMuhammadSatarKusumaS
 
tranformasi energi atau perubahan energi
tranformasi energi atau perubahan energitranformasi energi atau perubahan energi
tranformasi energi atau perubahan energiZulfiWahyudiAsyhaer1
 
PPT KLONING (Domba Dolly), perkembangan kloning hewan, mekanisme kloning hewa...
PPT KLONING (Domba Dolly), perkembangan kloning hewan, mekanisme kloning hewa...PPT KLONING (Domba Dolly), perkembangan kloning hewan, mekanisme kloning hewa...
PPT KLONING (Domba Dolly), perkembangan kloning hewan, mekanisme kloning hewa...rofinaputri
 
Lampiran 4 _ Lembar Kerja Rencana Pengembangan Kompetensi DIri_Titin Solikhah...
Lampiran 4 _ Lembar Kerja Rencana Pengembangan Kompetensi DIri_Titin Solikhah...Lampiran 4 _ Lembar Kerja Rencana Pengembangan Kompetensi DIri_Titin Solikhah...
Lampiran 4 _ Lembar Kerja Rencana Pengembangan Kompetensi DIri_Titin Solikhah...TitinSolikhah2
 
Dampak Bioteknologi di Bidang Pertanian.pdf
Dampak Bioteknologi di Bidang Pertanian.pdfDampak Bioteknologi di Bidang Pertanian.pdf
Dampak Bioteknologi di Bidang Pertanian.pdfssuser4743df
 

Recently uploaded (10)

MATERI IPA KELAS 9 SMP: BIOTEKNOLOGI ppt
MATERI IPA KELAS 9 SMP: BIOTEKNOLOGI pptMATERI IPA KELAS 9 SMP: BIOTEKNOLOGI ppt
MATERI IPA KELAS 9 SMP: BIOTEKNOLOGI ppt
 
Dana Setiawan (Paparan terkait Konstruksi Jalan )
Dana Setiawan   (Paparan terkait Konstruksi Jalan )Dana Setiawan   (Paparan terkait Konstruksi Jalan )
Dana Setiawan (Paparan terkait Konstruksi Jalan )
 
e-Book Persepsi dan Adopsi-Rachmat Hendayana.pdf
e-Book Persepsi dan Adopsi-Rachmat Hendayana.pdfe-Book Persepsi dan Adopsi-Rachmat Hendayana.pdf
e-Book Persepsi dan Adopsi-Rachmat Hendayana.pdf
 
bagian 2 pengujian hipotesis deskriptif 1 sampel
bagian 2 pengujian hipotesis deskriptif 1 sampelbagian 2 pengujian hipotesis deskriptif 1 sampel
bagian 2 pengujian hipotesis deskriptif 1 sampel
 
Petunjuk Teknis Penggunaan Aplikasi OSNK 2024
Petunjuk Teknis Penggunaan Aplikasi OSNK 2024Petunjuk Teknis Penggunaan Aplikasi OSNK 2024
Petunjuk Teknis Penggunaan Aplikasi OSNK 2024
 
PERCOBAAN 3 Dissolved Oxygen-Kimia Lingkungan.docx
PERCOBAAN 3 Dissolved Oxygen-Kimia Lingkungan.docxPERCOBAAN 3 Dissolved Oxygen-Kimia Lingkungan.docx
PERCOBAAN 3 Dissolved Oxygen-Kimia Lingkungan.docx
 
tranformasi energi atau perubahan energi
tranformasi energi atau perubahan energitranformasi energi atau perubahan energi
tranformasi energi atau perubahan energi
 
PPT KLONING (Domba Dolly), perkembangan kloning hewan, mekanisme kloning hewa...
PPT KLONING (Domba Dolly), perkembangan kloning hewan, mekanisme kloning hewa...PPT KLONING (Domba Dolly), perkembangan kloning hewan, mekanisme kloning hewa...
PPT KLONING (Domba Dolly), perkembangan kloning hewan, mekanisme kloning hewa...
 
Lampiran 4 _ Lembar Kerja Rencana Pengembangan Kompetensi DIri_Titin Solikhah...
Lampiran 4 _ Lembar Kerja Rencana Pengembangan Kompetensi DIri_Titin Solikhah...Lampiran 4 _ Lembar Kerja Rencana Pengembangan Kompetensi DIri_Titin Solikhah...
Lampiran 4 _ Lembar Kerja Rencana Pengembangan Kompetensi DIri_Titin Solikhah...
 
Dampak Bioteknologi di Bidang Pertanian.pdf
Dampak Bioteknologi di Bidang Pertanian.pdfDampak Bioteknologi di Bidang Pertanian.pdf
Dampak Bioteknologi di Bidang Pertanian.pdf
 

Kelompok 1_Ekspresi Gen Pada Prokariotik.pptx

  • 1. Ekspresi Gen Pada Prokariotik Azka Azalia Azzam 4401420063
  • 2. Gen Prokariotik terdiri dari tiga bagian: 1. Promoter 2. RNA Coding sequence 3. Terminator Struktur Gen Prokariot
  • 3. Promoter ❑ Promoter adalah urutan DNA spesifik yang berperan dalam mengendalikan transkripsi gen struktural ❑ Region 5’ dari promoter disebut urutan upstream. ❑ Region 3' dari terminator disebut barisan downstream. ❑ Berada pada bagian upstream. ❑ Fungsi promoter sebagai tempat awal pelekatan RNA polimerase ❑ Pada prokariot, bagian penting promoter disebut Pribnow box pada urutan nukleotida -10 dan - 35.
  • 4. Coding region ❑ Gen struktural merupakan bagian yang mengkode urutan nukleotida RNA. ❑ Transkripsi dimulai dari sekuens inisiasi ATG sampai kodon stop (TAA/ TGA/ TAG). ❑ Pada prokariot tidak ada sekuens intron sehingga semuanya adalah sekuen ekson
  • 5. Operator ❑ Operator merupakan urutan nukleotida yang terletak di antara promotor dan bagian struktural ❑ Tempat pelekatan protein represor (penekan atau penghambat ekspresi gen). ❑ Jika ada represor yang melekat di operator maka RNA polimerase tidak bisa melakukan transkripsi sehingga ekspresi gen tidak berlangsung.
  • 6. Terminator dan RNA Polimerase ❑ Terminator dicirikan sebagai struktur hairpin dan lengkungan yang kaya akan urutan GC yang terbentuk pada molekul RNA hasil transkripsi. ❑ RNA polimerase merupakan enzim yang mengkatalisis proses transkripsi
  • 7. ❑ Salah satu ciri dari regulasi ekspresi gen pada sel prokariotik adalah adanya struktur operon. ❑ Operon adalah sekumpulan gen yang ekspresinya dikendalikan oleh satu promoter. Ekspresi Gen Prokariot
  • 8. ❑ Operon lac merupakan salah satu organisasi gen pada prokariot untuk menghasilkan enzim β-galaktosidase. ❑ Operon lac terdiri dari 3 gen struktural: lac Z, lac Y, lac A. ❑ Proses transkripsi pada sel prokariot akan menghasilkan satu mRNA yang membawa kode genetik untuk polipeptida yang berbeda beda, disebut mRNA polisistik. Ekspresi Gen Pada Sel Prokariotik
  • 9. Operon lac dapat diatur secara transkripsi – 1. Dengan protein represor – 2. Oleh protein aktivator Model mekanisme induksi kontrol negatif – Melibatkan protein represor lac – Penginduksinya adalah alolaktosa • Mengikat represor lac dan menonaktifkannya Operon lac Diatur Oleh Protein Represor
  • 10.
  • 11. Represi katabolit • Saat terpapar laktosa dan glukosa – E. coli menggunakan glukosa terlebih dahulu, dan represi katabolit mencegah penggunaan laktosa – Ketika glukosa habis, represi katabolit terjadi diringankan, dan operon lac diekspresikan • Penggunaan dua gula secara berurutan oleh bakteri disebut diauxic growth Operon lac juga Diatur Oleh Protein Aktivator
  • 12. • Regulasi melibatkan molekul kecil, cyclic AMP (cAMP) – dihasilkan dari ATP melalui enzim adenylyl siklase – cAMP mengikat protein aktivator yang dikenal sebagai Catabolite Activator Protein (CAP) • Kompleks cAMP-CAP adalah contoh regulasi genetik yang dapat diinduksi dan di bawah control positif – Kompleks cAMP-CAP mengikat ke CAP site dekat lac promoter dan meningkatkan transkripsi • Dengan adanya glukosa, enzim adenylyl siklase dihambat – Ini menurunkan kadar cAMP dalam sel – cAMP tidak lagi tersedia untuk mengikat CAP – Tingkat transkripsi menurun
  • 13.
  • 14.