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GUIÓN –ÍNDICE
1. METODOLOGÍA DE LA TOMA DE MUESTRAS
2. MÉTODOS Y EQUIPOS PARA LA TOMA DE MUESTRA
2.1. Toma de muestras sólidas
2.2. Toma de muestras líquidas
2.3. Toma de muestras gaseosas
2.4. Toma de muestras especiales
3. ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DE LA TOMA DE MUESTRA
3.1. Manipulación, conservación, transporte y almacenamiento de la muestra
3.2. Registro, etiquetado y marcado de las muestras
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1. METODOLOGÍA DE LA TOMA DE MUESTRAS
Un plan de toma de Muestra debe asegurar que la muestra obtenida refleje
adecuadamente las propiedades que interesan del lote del que proviene, es decir la
muestra final debe ser:
• Tan similar como sea posible a la población global a analizar
• Poseer sus características esenciales
• Ser reproducible
Para conseguir todo esto es necesario seleccionar subareas y métodos de toma de
muestra en base a criterios estadísticos y/o la experiencia previa.
Básicamente hay cuatro formas de tomar las muestras, de las que tres están basadas
en métodos estadísticos o criterios probabilísticos, el muestreo aleatorio, la toma de
muestras sistemática y la toma de muestras estratificada, siendo la cuarta a criterio del
técnico, un método de toma de muestra arbitrario (no probabilístico) basado en la
experiencia y que puede servir para una estimación inicial, por ejemplo, en la medida
de la contaminación, determinar los puntos de toma de muestra en base a las zonas
que se estiman más afectadas.
Toma de muestras aleatoria
Se suele emplear cuando se tiene poca información del lote a muestrear. Se divide el
lote en zonas y se toman muestras de las zonas seleccionadas empleando tablas o
programas generadores de números aleatorios. Para minimizar la posibilidad de que
los números aleatorios seleccionen porciones de una sola zona del lote (figura.1), este
método se suele complementar con la estratificación del lote. Esta estrategia obliga a
tomar mayor número de muestras que las otras.
Figura 1
Toma de muestras sistemática
Cuando se trata de tomar muestras en grandes áreas, se establecen sobre ella
patrones de toma de muestra en forma de W, X ó S, útiles para lotes homogéneos o
para una primera prospección (a), (b).
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a) b)
También pueden ser mallas regulares donde los puntos de toma de muestra pueden
distribuirse regularmente (c), (d), agruparse (e) o distribuirse, en un caso de estudio de
contaminación, de forma radial alrededor de una fuente localizada del analito (f).
c) d) e) f)
en caso de zonas más irregulares puede trazarse un eje y desde él trazar perfiles
transversales (g).
g)
Toma de muestras estratificada
Se divide a la población en estratos, cuando es posible de manera que cada estrato
sea homogéneo respecto en cuanto a propiedades de la muestra. Dentro de cada
estrato se procede a tomar las muestras siguiendo cualquiera de los procedimientos
vistos anteriormente, generalmente probabilísticos y de manera que la cantidad
resultante, en masa o volumen, de muestra de cada estrato este ponderada respecto
del total del lote.
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2. MÉTODOS Y EQUIPOS PARA LA TOMA DE MUESTRA
Es imposible sistematizar las técnicas e instrumental necesario para la toma de
muestra; cada tipo de material necesita una tecnica e instrumental específico, que
depende del estado físico del mismo (sólido, líquido o gas), tamaño de partícula,
propiedades físicas (dureza, densidad, viscosidad, etc...) y otros muchos factores.
En la mayoría de los casos, los protocolos de toma de muestra se van a encontrar
recogidos en las normas ASTM, ISO, EPA, UNE o UNE-EN, que son de carácter
internacional, y en las que se encontrará protocolizado todo el proceso, desde la etapa
de toma de muestra, reducción, envasado, conservación y método o métodos de
aplicación para efectuar la determinación de que se trate, en orden a asegurar la
calidad del proceso. De todas formas, vamos a ver a continuación algunos
procedimientos de toma de muestra dividiéndolos en función del estado físico de la
matriz.
2.1. Toma de muestras sólidas
En general, la heterogeneidad de las muestras sólidas obliga a diseñar la toma de
muestra de forma que la muestra final tenga la máxima representatividad con el mínimo
coste económico.
Además se deberán tener en cuenta otros factores adicionales tales como el estado de
agregación, ya que pueden ser materiales particulados o compactados y si se
encuentran estáticos o en movimiento. Veamos diferentes casos:
Materia que tiene partículas y que se mueve El flujo de un material particulado tiene
características que dependen de su tamaño. Debido a ello, cada incremento tendrá que
ser amplio para poder tomar las partículas más grandes.
Para minerales, carbón, granos (semillas) y similares que se mueven por cintas
transportadoras, los incrementos se pueden completar por medio de submuestras
formadas por secciones transversales escogidas a mano.
Materia particulada estática Ejemplos de este tipo pueden ser el suelo o el grano que
se han apilado en camiones o en contenedores. El muestreo debe garantizar que se
toman incrementos en todos los lugares donde ha estado esa muestra, para
compensar la variabilidad debida a esas localizaciones. Por ello, si no hay utensilios
adecuados, lo más adecuado sería movilizar la muestra, por medio de una cinta
transportadora o semejante. De esta forma, estaríamos en la situación descrita
anteriormente.
Si la materia estuviese recogida en montones específicos, como sacos, recipientes etc.,
el muestreo sería más fácil dado que se podrían tomar incrementos de esos
recipientes. Para ello, los utensilios que se utilizan suelen ser las bayonetas, tanto las
de un tubo único como las de tubo con agujeros (figura 2).
Sólidos compactos Con este nombre se denominan una clase amplia de sólidos.
Pueden ser rocas, piedras, arcilla, aleaciones, fibras, etc. Los instrumentos para
muestrear sólidos compactos tienen que ser capaces de romper, hacer agujeros o
cortar. Debido a ello, los taladros, tornos, tijeras y utensilios semejantes serán los que
se utilicen para su muestreo.
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Figura 2: Bayonetas para recoger muestras sólidas: i) de tubo unico ii) de tubo con agujeros
• Submuestreo
Cuando los tamaños de las partículas de una muestra sólida tienen mucha variabilidad
el tamaño del lote resulta demasiado grande y entonces es necesario hacer un
submuestreo. Aceptando que todos los incrementos que se utilicen compondrán una
muestra única, cuando el laboratorio no pueda recibir esa muestra tan grande es
obligatorio dividir esa muestra.
Esto, en general, conlleva los siguientes pasos:
- La molienda de la muestra sólida hasta que se logre el tamaño de partícula
adecuado
- El tamizado: es el procedimiento para lograr un tamaño homogéneo de la
materia particulada
- La homogeneización por medio de un molino de bolas
- La subdivisión por el procedimiento del cuarteo o por medio de aparatos
especiales para dividir muestras (figura 3)
(a) (b)
Figura 3. (a) Cuarteo de la muestra; (b) Subdivisión de la muestra
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2.2. Toma de muestras líquidas
Una regla general en el muestreo de líquidos es que la homogeneidad no debe ser
supuesta.
La toma de muestra se realiza de manera diferente según el líquido se halle en reposo
en un solo recipiente o en varios, o que se trate de líquidos en movimiento.
Cuando hay corrientes, la muestra se toma a contracorriente como es el caso de ríos,
tuberías, etc.
En líquidos homogéneos suele bastar con introducir varias veces una pipeta y tomar
las cantidades de líquido precisas para completar el volumen de muestra requerida.
Para muestrear botellas o pequeños contenedores se pueden utilizar jeringas.
Si las características del líquido
permiten suponer la existencia de zonas
de distintas composición, se procede a
efectuar tomas a distintas
profundidades por medio de sondas
para líquidos.
Los muestreadores de profundidad
contienen algún tipo de mecanismo
para quitar el tapón del recipiente
cuando éste se encuentra a una
determinada profundidad. Uno de estos
puede ser una botella de 1 litro sujeta
con una cuerda y un contrapeso para
que se hunda. El tapón va sujeto con
una cuerda para que en un momento
determinado se abra la botella (figura
4). Las cuerdas pueden sustituirse por Figura 4. Utensilio para el muestreo de líquidos en
alambres o varillas metálicas en el caso sistemas abiertos.
de muestreo de depósitos.
Los muestreadores automáticos se abren cuando una varilla toca el fondo del
depósito o cuando una pesa mensajero se desliza sobre la guía actuando sobre un
mecanismo que permite la entrada del líquido. El aire es expulsado a través de un tubo
al exterior.
La toma de líquidos en movimiento puede efectuarse de manera continua o intermitente
mediante la colocación de una derivación en la tubería. Se pueden obtener muestras
en distintos puntos con llaves que a tal efecto se dispongan en las tuberías. Cuando el
líquido se bombea, pueden tomarse muestras de líquido a intervalos regulares de
tiempo.
Cuando el líquido contiene materias insolubles en suspensión, pero es posible obtener
por agitación una suspensión uniforme y estable por lo menos durante el tiempo
necesario para tomar la muestra, se practica en ella la toma por uno de los
procedimientos anteriores.
En mezclas de líquidos inmiscibles lo mejor es dejar separar las distintas capas y
efectuar diversas tomas de los componentes de cada capa, mezclándolas después en
las proporciones adecuadas.
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2.3. Toma de muestras gaseosas
En el muestreo de gases se usan recipientes que “atrapan” el gas. Para ello se hace
circular el gas a través de una ampolla de vidrio (250-1000 ml de capacidad) que se
cierra por los dos extremos. A veces es necesario arrastrar el gas y esto se consigue
con un frasco de agua, que mediante desplazamiento consigue una depresión o
también con una jeringa y otro dispositivo mecánico que desplace el aire del toma
muestras.
Figura 5. Muestreo de gases
En el caso de muestreo de aire, se hace pasar una cantidad de aire a través de un
tren de muestreo que contiene:
- Filtro: consta de una membrana (0,45 µm) que retiene las partículas sólidas.
- Bomba de aspiración: es una bomba de vacío que hace que circule el aire a
través de todo el sistema.
- Medidor de flujo: pueden ser de dos tipos:
• Los que miden velocidad: son pequeños y de bajo costo, pero tienen la
desventaja de medir la velocidad puntualmente y deben vigilarse con
frecuencia durante el periodo de muestreo. El más simple es el rotámetro que
consta de un flotador esférico de acero inoxidable en el interior de un tubo en
forma cónica con una escala. El flotador se eleva y desciende en proporción
directa a la velocidad de flujo.
• Los que miden volumen: registran el flujo total y son más útiles. Un ejemplo
es el contador de gas y su mecanismo es un conjunto de fuelles de plástico
que se llenan y se vacían alternativamente, haciendo que se muevan las
agujas de las carátulas mediante un sistema de palancas.
- Dispositivos de muestreo: el tercer componente del tren de muestreo es el
colector, que puede ser de dos tipos dependiendo de los contaminantes:
• Si los contaminantes están en forma de aerosol la muestra se recoge
mediante un filtro de fibra de vidrio o vidrio fritado. Otro dispositivo colector
para contaminantes en aerosol es el muestreador de impacto, que consiste
en presentar superficies de choque en el recorrido del gas.
• Si los contaminantes están en forma gaseosa, los gases pueden escogerse
por absorción en un líquido, sólido, o llenado de un recipiente evacuado al
vacío. Entre los dispositivos utilizados en la absorción están los frascos
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lavadores que pueden contener líquidos o sólidos que retengan el
componente a analizar. El dispositivo de absorción más eficiente es el frasco
lavador de vidrio fritado que permite una dispersión eficiente del gas.
2.4. Toma de muestras especiales
En este apartado veremos algunos ejemplos de toma de muestra que requieren de
especial atención por la variabilidad en la composición que presenta el material objeto
del muestreo, la posibilidad de alteración, etc.
- Toma de muestra de planta: para conocer la composición química tenemos que
especificar la zona de la planta que hemos elegido, lo mas utilizado es el análisis
foliar (de las hojas).
Hay que tener en cuenta que la composición química puede variar por muchos
factores como el cambio de estación, del día a la noche, etc.
- Toma de muestra de materiales higroscópicos y peligrosos: se utiliza la “caja
seca”, una caja con atmósfera de nitrógeno de tal modo que no sea alterada la
muestra por la humedad o el oxígeno atmosférico. Cualquier recipiente en el que
eliminemos el oxígeno previamente, puede servir.
- Toma de muestra de aleaciones: Hay que tener en cuenta que a medida que se
enfría la aleación, los metales de punto de fusión más alto se irán solidificando
primero. Por tanto, en la superficie que se enfría mucho antes habrá una mayor
pureza del metal con un punto de fusión más alto y en el interior habrá mayor
riqueza del material con un punto de fusión más bajo.
3. ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DE LA TOMA DE MUESTRA
Prácticamente todos los conceptos y prácticas para asegurar la calidad de los datos y
resultados analíticos pueden en un principio ser aplicados a la etapa de toma de
muestra, aunque esto pueda conllevar un aumento de su coste. El aseguramiento de la
calidad de la toma de muestra se fundamentará en una planificación adecuada, en la
documentación y en el control del proceso.
Los métodos de toma de muestra, especialmente en análisis de rutina, deberán estar
escritos y estandarizados en forma de procedimientos normalizados de trabajo. Éstos
no han de corresponder únicamente a etapas específicas y detalladas de la toma de
muestra, sino que también tienen que incluir un esquema de toma de decisiones
asociadas a la estrategia general de la toma de muestra.
Es obligatorio tener una documentación detallada y formalizada de todo el proceso,
para posibilitar el reconocimiento y el control de los posibles errores.
Dentro del control de calidad habrá que considerar también una serie de muestras
adicionales, blancos de muestra y replicados, para corregir posibles errores
sistemáticos y poder estimar la variabilidad de la operación de la toma de muestra.
3.1. Manipulación, conservación, transporte y almacenamiento de la muestra
Cuando el transporte de la muestra al laboratorio se realiza después de unas horas de
ser tomada generalmente es suficiente el mantenerlas a 4° pero para tiempos
C;
superiores, en especial para muestras biológicas, es aconsejable transportarlas
debidamente congeladas. El material de los contenedores debe ser cuidadosamente
seleccionado para evitar posible contaminación o pérdida de analitos (el polietileno
y el teflón son materiales por lo general bastante aconsejables). Debe tomarse las
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debidas precauciones para evitar la exposición de las muestras a humedades
extremas. En el transporte de sólidos debe evitarse que tengan lugar problemas de
segregación, y si sucede, rehomogeneizar las muestra después del transporte.
Una mención especial merece el transporte de fluidos biológicos tales como la sangre,
en los que se aconseja rehomogeneizar las muestras después del transporte.
La muestra debe conservarse de forma que se reduzca al mínimo los riesgos de
alteraciones que ésta pueda experimentar antes del análisis, bien sea por adsorción
de H2O, de CO2, o por oxidaciones por contacto con la atmósfera. Como norma general
se recomienda evitar al máximo su exposición al aire y a la luz y su manipulación.
En condiciones normales la congelación constituye el método más adecuado para
conservar las muestras durante largos períodos de tiempo, pero para tiempos
cortos suele ser suficiente el mantenerlas a temperaturas comprendidas entre 2-4°
C.
Un proceso importante a considerar antes de guardar la muestra es someterla al
proceso de secado. La humedad que puede contener la muestra depende del tamaño
de las partículas que la constituyen, grado de humedad en el ambiente y, lo que es más
importante, de la naturaleza de la muestra. Un elevado exceso de humedad en
muestras sólidas puede dar lugar a reacciones irreversibles que alteren de forma
importante la composición de la muestra. Por todo ello, los sólidos deben
conservarse secos, eliminando previamente su contenido en agua en una estufa a 90-
11O° en desecador o en un lugar relativamente sec o.
C,
No obstante, por regla general, la conservación de muestras sólidas es menos
problemática que la de materiales biológicos, líquidos y gases. Para la conservación de
materiales biológicos, alimentos, etc., durante largos períodos de tiempo, se
recomienda el realizarlo: a) en bolsas de plástico congeladas a la temperatura del
nitrógeno líquido y b) liofilizarlas y mantenerlas en un lugar convenientemente seco.
El tipo de tratamiento para la conservación de muestras líquidas depende de los
análisis a realizar en las mismas. Por lo general, la estabilización de iones orgánicos
se consigue por acidulación con ácido nítrico u otro ácido estabilizante. No obstante, si
en la muestra se pretende realizar una especiación de metales, debe tenerse muy en
cuenta que los reactivos estabilizantes ácidos no produzcan cambios significativos en
la forma original de los mismos (bien sea en el grado de oxidación en que se encuentra
o en los compuestos a los que se encuentra unido). El tiempo que puede transcurrir
hasta el análisis dependerá de la estabilidad de los analitos a determinar, hecho que en
muchas ocasiones no sólo depende de los estabilizantes sino también de la naturaleza
o componentes de la matriz. En muchas ocasiones es aconsejable utilizar
recipientes opacos, no transparentes a la radiación ultravioleta, y mantener las
muestras en contacto con gas inerte.
El almacenaje de las muestras es en numerosas ocasiones inestable, especialmente
cuando éstas no se pueden analizar inmediatamente después de llegar al laboratorio.
En numerosas ocasiones, es de sumo interés preparar un duplicado de la muestra, el
cual se guarda, y puede utilizarse con el tiempo como de chequeo de los resultados
obtenidos en los análisis iniciales.
Para la conservación de la muestra durante largo períodos de tiempo se recomienda
que el aire en el espacio libre del recipiente sea mínimo y que la naturaleza de éste
sea hidrófoba, la superficie sea lisa y no porosa (teflón, polietileno). El
preacondicionamiento de la superficie, especialmente del cuarzo y de los recipientes de
vidrio se lleva a cabo sumergiéndolo en un baño ácido (HNO3, HCl, HF diluido), o en un
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reactivo quelante (EDTA), u oxidante (H2O2) seguido de sucesivos lavados con agua de
elevada pureza.
Los materiales que se utilizan, en orden decreciente de importancia son los siguientes:
Polímeros:
Polifluorohidroxicarbonos (teflón)
Polietileno (se prefiere el preparado a elevada presión)
Polipropileno
Goma de silicona (riesgo de contaminación de Zn)
Polimetilmetacrilato (plexiglás)
Vidrios:
Cuarzo sintético
Borosilicato de vidrio
Metales:
Papel de aluminio de elevada pureza
Platino
Titanio de elevada pureza
Una elección adecuada del tipo del material y de la forma del mismo puede prevenir de
numerosos errores posibles en la conservación de la muestra.
A pesar de todas las indicaciones observadas es siempre conveniente el determinar
(si no se conoce con anterioridad) la estabilidad de la muestra en las condiciones
preseleccionadas. Dicha evaluación puede llevarse a cabo mediante un simple
procedimiento estadístico: se analizan por duplicado incrementos de la muestra
recién tomada y en intervalos prefijados de tiempo. La diferencia de los resultados de
las réplicas permite estimar la desviación estándar de las medidas. Para obtener el
tiempo que puede considerarse estable una muestra, se representa gráficamente la
concentración del determinado en función del tiempo, y de la recta obtenida se estima
el máximo tiempo por el valor de la abscisa que corresponde a la concentración inicial
de la muestra menos tres veces la desviación estándar.
Si el tiempo de estabilidad de la muestra es demasiado corto deben variarse las
condiciones de conservación y determinarlo de nuevo.
3.2. Registro, etiquetado y marcado de las muestras
Toda la información necesaria para llevar a cabo la etapa de muestreo, de los
métodos seguidos en la actualidad, debe ser de fácil acceso a los muestradores y
analistas. Otros métodos seguidos en épocas anteriores deben conservarse en libros
especiales para posibles estudios de trazabilidad.
Tan pronto como ha sido tomada la muestra, debe pegarse al recipiente una etiqueta,
conteniendo toda la información posible, que sea inalterable con el tiempo e
indestructible por la muestra (nunca debe adherirse a la tapa del recipiente, por la
posibilidad de intercambio con las de otros recipientes).
La mínima información que debe incluirse en la etiqueta es la siguiente:
- Numeración de la muestra
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- Descripción del tipo de material
- Lugar de muestreo
- Hora, día, mes y año en que se ha realizado el muestreo
- Muestreador y método de muestreo llevado a cabo
- Información adicional tal como la temperatura, pH, etc., puede incluirse si resulta
de utilidad a la hora de interpretar los resultados.
Toda esta información y otra adicional debe incluirse en los registros del laboratorio
recién llega la muestra: símbolo inambiguo de la muestra, nombre de la persona o
entidad que ha solicitado los análisis, nombre del muestreador, método de muestreo,
naturaleza de la muestra, análisis requeridos, lugar y condiciones de conservación de
la muestra.
ACTIVIDADES:
a) Indicar qué método de toma de muestra sería el más apropiado para analizar el suelo de
un terreno para cultivo de 4 hectáreas.
b) Sí se tuviese que determinar la extensión de terreno contaminado en un campo que ha
sufrido la detonación de un artefacto.
c) Se pretende determinar el contenido de un determinado herbicida en una fruta cultivada en
una misma zona agrícola, que produce un total de 10.000 kg de fruta, incluyendo naranjas
(2.000 kg), manzanas (5.000 kg) y peras (3.000 kg). Si por razones de costes se pretende
analizar sólo el 1% de la producción agrícola, indicar la mejor estrategia (metodología)
de toma de muestra para estimar el contenido medio del herbicida procedente de la zona
agrícola.
d) ¿Qué cantidad de muestra habría que tomar? ¿Y como se seleccionarían los puntos de
muestreo?
e) En una empresa de elaboración de helados se ha recibido un lote de azúcar envasada en
sacos, suponiendo que dicha partida ha de ser sometida a control antes de pasar al
almacén para su posterior uso, ¿cómo supones que se realizará la toma de muestra?, ¿qué
instrumentos toma muestras serían los más apropiado?.
f) Si se trata de embalajes (sacos) de un lote, una regla aproximada para determinar el nº de
x
embalajes (Y) a muestrear, es aplicar la siguiente fórmula Y = , donde x es el nº de
2
embalajes del lote. Y la fórmula N=x/Y nos daría el espaciamiento entre embalajes. Según
esto ¿cuántos sacos serán objeto de muestreo en el caso anterior?, ¿cada cuantos sacos
habría que coger una muestra?
g) ¿Cómo se obtendría muestra para análisis de un líquido con gran cantidad de suspensión
sólida de un bidón de 140 litros?
h) ¿Cómo se muestrean los líquidos cuya agitación es difícil?
i) Cuáles son los principales componentes de un tren de muestreo de gases?
j) ¿Porqué las muestras sólidas deben conservarse secas?
k) ¿Con qué fin deben conservarse blancos y replicados de muestra?
l) ¿Porqué no debe adherirse la etiqueta identificativa de la muestra a la tapa del contenedor
de la misma?
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