PRACTICA DE TOXICOLOGIA

1. UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
TOXICOLOGIA
BF.508-6
Docente: Bioq. Carlos García Gonzales Msc.
Nombre: Mendoza Ipiales Sara Beatriz
Curso:5to “B”
Grupo # 2
Fecha de práctica: Viernes 5 de agosto del 2016
Fecha de entrega: Viernes 12 de agosto del 2016
Trimestre: Segundo
Tema:
SINTOMATOLOGIA Y DIAGNOSTICO DE LAS
INTOXICACIONES, SINDROMES TOXICOS, TOXICOS
VOLATILES Y MINERALES.
Tema de la Practica:
TOXICOS MINERALES, INTOXICACIONES PRODUCIDAS POR
PLATA Y CADMIO.
Animal de experimentación: Viscers de Pollo
OBJETIVO.
 Adquirir destrezas y realizar pruebas de reacciones de identificación para la
presencia de cadmio en las vísceras de pollo, tomando como referencia la sol.
Madre
FUNDAMENTO TEÓRICO:
La toma por los humanos de cadmio tiene lugar mayormente a través de la comida. Los
alimentos que son ricos en cadmio pueden en gran medida incrementar la concentración
de cadmio en los humanos. Ejemplos son pates, champiñones, mariscos, mejillones, cacao
y algas secas.
Una exposición a niveles significativamente altas ocurren cuando la gente fuma. El humo
del tabaco transporta el cadmio a los pulmones. La sangre transportara el cadmio al resto
del cuerpo donde puede incrementar los efectos por potenciación del Cadmio que está ya
10

2. presente por comer comida rico en cadmio. Otra alta exposición puede ocurrir con gente
que vive cerca de los vertederos de residuos peligrosos o fabricas que liberan cadmio en
el aire y gente que trabaja en las industrias de refinerías del metal.
MATERIALES, REACTIVOS Y SUSTANCIAS.
PROCEDIMEINTO.
ENSAYO 1
REACCION CON HIDROXIDO DE SODIO
A una pequeña cantidad de muestras agregar algunas gotas de hidróxido de sodio.
 Colocar en tubo de ensayo la muestra madre y proceder a colocar gotas de
hidróxido de sodio, se repite para cada muestra.
Positivo: Precipitado Cd (OH)2
GRAFICOS:
MATERIALES REACTIVOS SUSTANCIAS
Guantes
Mascarilla
Gorro
Tubos de ensayo
Pipeta volumétrica
Mortero
Pilon
Varilla de vidrio
Pinzas
Hidróxido de sodio
Gas sulfhídrico
Hidróxido de amonio
Cianuro de sodio
Agua destilada
Vísceras de pollo

3. RESULTADOS:
VÍSCERAS FRUTAS
Positivo Negativo
ENSAYO 2
HIDROXIDO DE AMONIO
 A una pequeña cantidad de muestra adicionar unas gotas de NH4OH
Cl2Cd + NH4 (OH) Cd (OH)2+2Cl-
+2NH4+
Cd (OH)2 + NH4(OH) [Cd (NH3)4]++
GRAFICOS.
RESULTADOS.
Colocar las muestras
en los 3 tubos
colocar 2 gotas de
NH4OH al extracto
de albahaca
colocar 2 gotas de
NH4OH al pure de
papaya
colocar 2 gotas de
NH4OH al pure de
banano
colocar 2 gotas de
NH4OH al extracto
de visceras

4. MUESTRAS Positivo/ Negativo
Papaya NEGATIVO
Banano NEGATIVO
Albahaca NEGATIVO
Vísceras de pollo NEGATIVO
ENSAYO 3
REACCIÓN CON EL GAS SULFHIDRICO
1. Al hacer circular a una pequeña cantidad de muestra una buena corriente de gas
sulfhídrico, se observa la formación de un precipitado color amarillo intenso por
formación de SCd. El mismo que es insoluble en exceso de reactivo, y soluble en
NO3H diluido y caliente, dejando un depósito de azufre coloidal.
Cl2Cd + SH2 SCd +2H +2Cd-
GRAFICOS.

5. ENSAYO 4 Y 5
MUESTRAS DE FRUTAS Y VERDURAS
1. Recolectar muestras de banano, papaya, albahaca
2. Triturar hasta obtener la pulpa de las frutas y verduras
3. Proveer de muestras a los demás grupos para su respectiva reacción de
identificación.
GRAFICO
pesar alrededor de 2 gr
de pirita
diluir con agua destilada
y enrasar a 500 ml
colocar las muestras en
los tubos de ensayo
calentar el tubo con pirita y
pasar sus vapores a travez de
una varilla del vidrio hace la
muestra
repertir el procedimeinto
con la muestra de
banano
repertir el procedimeinto
con la muestra de
papaya
repertir el procedimeinto
con las visceras de pollo

6. PREPARACIÓN DE SOLUCION MADRE CON VÍVERES DE
POLLO:
1. Se procede a tritura pequeñas cantidades de víceras del animal en
experimentación.
2. Se pesa 1g de cloruro.
3. Se disuelve el cloruro en una pequeña cantidad de agua destilada.
4. Se añade las vísceras trituradas
GRAFICOS:
1.- Se procede a triturar pequeñas
cantidades de vísceras del animal
en experimentación.
2.- Pesar 1g de Cloruro
3.- Disolver el cloruro en una
pequeña cantidad de agua
destilada.
4.- Añadir vísceras trituradas.
1. Frutas y verduras 2. Trituramos la muestra
3. Se provee las muestras
a los diferesntes grupo

7. ENSAYO 6
Reacción con el Cianuro de Sodio
1. Cuando a una pequeña cantidad de muestra que contiene cadmio, se la hace
reaccionar con unas cuantas gotas de cianuro de sodio (CNNa) , debe producir un
precipitado blanco de (CN)2Cd, el mismo que es soluble en exceso de reactivo
por formación de complejo [Cd (CN)4] .
Cl2Cd + CNNa (CN) 2Cd +2Cl-+2Na+
(CN) 2Cd + CNNa [Cd (CN)4]
GRAFICOS.
RESULTADOS.
VISCERAS DE POLLO FRUTAS
POSITIVO NEGATIVO
colocar las muestras
en los tubos de
ensayo
preparar el cianuro de
sodio
colocar unas gotas de
cianuro de sodio
colocar cianuro de
sodio a los 4 tubos

8. CONCLUSIONES.
El Cadmio es toxico en menor proporción y de acción rápida, en la cual se realizó la
experimentación en un pescado administrando una dosis letal mínima, que por un periodo
de tiempo que el toxico actuó en el organismo, provocando la muerte. Mediante una
solución madre que se obtuvo por medio de un proceso de filtración, se le realizaron
pruebas de identificación para dar a conocer la presencia de cadmio presente en las
vísceras de pollo, frutas y hortalizas de experimentación.
RECOMENDACIONES
 Filtrar correctamente hasta obtener la solución madre que nos permita realizar las
reacciones de reconocimiento.
 Cumplir con todas las medidas de protección cuando se trabaja con componentes
tóxicos.
 Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar accidentes
__________________
Sara Beatriz Mendoza Ipiales

9. FOTOGRAFIA DE LA GUIA DE PRÁCTICA
FOTOGRAFIA DEL GRUPO DE PRÁCTICA

10. CUESTIONARIO
¿QUE ES LA CADMIO?
Elemento químico relativamente raro, símbolo Cd, número atómico 48; tiene relación
estrecha con el zinc, con el que se encuentra asociado en la naturaleza. Es un metal dúctil,
de color blanco argentino con un ligero matiz azulado. Es más blando y maleable que el
zinc, pero poco más duro que el estaño. Peso atómico de 112.40 y densidad relativa de
8.65 a 20ºC (68ºF). Su punto de fusión de 320.9ºC (610ºF) y de ebullición de 765ºC
(1410ºF) son inferiores a los del zinc. Hay ocho isótopos estables en la naturaleza y se
han descrito once radioisótopos inestables de tipo artificial
EFECTOS DEL CADMIO EN LA SALUD
El Cadmio puede ser encontrado mayoritariamente en la corteza terrestre. Este siempre
ocurre en combinación con el Zinc. El Cadmio también consiste en las industrias como
inevitable subproducto del Zinc, plomo y cobre extracciones. Después de ser aplicado
este entra en el ambiente mayormente a través del suelo, porque es encontrado en
estiércoles y pesticidas.
La toma por los humanos de Cadmio tiene lugar mayormente a través de la comida. Los
alimentos que son ricos en Cadmio pueden en gran medida incrementar la concentración
de Cadmio en los humanos. Ejemplos son patés, champiñones, mariscos, mejillones,
cacao y algas secas.
EFECTOS AMBIENTALES DEL CADMIO
Las aguas residuales con Cadmio procedentes de las industrias mayoritariamente termian
en suelos. Las causas de estas corrientes de residuos son por ejemplo la producción de
Zinc, minerales de fosfato y las bioindustrias del estiércol. El Cadmio de las corrientes
residuales pueden también entrar en el aire a través de la quema de residuos urbanos y de
la quema de combustibles fósiles. Debido a las regulaciones sólo una pequeña cantidad
de Cadmio entra ahora en el agua a través del vertido de aguas.
.GLOSARIO
Estiércol. Se denomina a los excrementos de animales que se utilizan
para fertilizar los cultivos. En ocasiones el estiércol está constituido por más de
un desecho orgánico
Dosis letal.- Necesaria para provocar la muerte de un determinado porcentaje de
individuos.
Tóxico: Se utiliza como adjetivo para designar y calificar a todos aquellos elementos o
sustancias que resulten nocivos y dañinos para algún tipo de organismo.
Toxicidad: Al grado de efectividad que poseen las sustancias que, por su composición,

11. se consideran tóxicas. Se trata de una medida que se emplea para identificar al nivel tóxico
de diversos fluidos o elementos.
BIBLIOGRAFÍA
Toxicologia Ambiental Dr Ramirez Cuello,H Funher.Editorial Cientifico-medico.Los
Angeles.California.
WEBGRAFIA
Medline. (15 de Mayo de 2012). Intoxicacion con Cadmio .Medlineplus.com.
http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs379/es/

12. ARTICULO CIENTIFICO
Cambios tisulares en el ostión Crassostrea virginica por
exposición y depuración al cadmio
Tissue changes of the oyster Crassostrea virginica due to cadmium
exposition and depuration
Xochitl Guzmán-García1, Alejandro Martínez-López1, Lizan Rodríguez-
Medina1, Humberto González-Márquez2 y Alfonso Vázquez-Botello3
1 Alumna del Doctorado en Biología Experimental. Laboratorio de Ecotoxicología,
Departamento de Hidrobiología. UAM-I. Av. San Rafael Atlixco 186, Col. Vicentina
Iztapalapa, C.P. 09340. México, D. F. Tel. (55) 5804 64 74 Fax (55) 5804 4738.
xgg@xanum.uam.mx
2 Laboratorio de Expresión Génica. Departamento de Ciencias de la Salud. UAM-I.
3 Laboratorio de Contaminación Marina, ICMyL, UNAM.
Recibido: 16 de octubre de 2005
Aceptado: 10 de julio de 2006
Resumen
Los niveles de cadmio se han incrementado en el Golfo de México, esto representa
un riesgo potencial para la sobrevivencia del ostión Crassostrea virginica y sus
consumidores, por lo que es importante evaluar los efectos del cadmio a través de
los cambios histopatológicos derivados de la exposición a este metal y durante su
depuración. Se analizaron ostiones expuestos a 100 µg/l de cadmio por 72 h y
depurados por 24, 48, 72, 96, 120, 144, 168, 192, 216 y 230 h. Las muestras de
ostión fueron incluidas en parafina, cortadas en microtomo y teñidas con la técnica
de Hematoxilina-Eosina. El análisis histopatológico del esófago, intestino, glándula
digestiva, branquia y manto mostró lesiones inflamatorias y la activación celular
que incluye, células cafés y hemocitos como un mecanismo de desintoxicación. Los
tejidos conjuntivos cercanos a esófago, intestino y glándula digestiva presentaron
más células cafés y hemocitos que la branquia y el manto. Los cambios
histopatológicos no fueron reversibles en 230 h, a pesar de que hay recuperación
de los epitelios de la glándula digestiva. Este trabajo recomienda la evaluación
histopatológica en la glándula digestiva para determinar el estado fisiológico del
ostión y tomar medidas preventivas en la comercialización y cultivo de sus
poblaciones naturales.
Palabras clave: Ostión, Crassostrea virginica, cadmio, histopatológico.
Abstract
Cadmium levels had increased in the Gulf of Mexico, this represents a potential risk
for the survival of oyster Crassostrea virginica and for those who eat them, so it is
important to evaluate the effects of cadmium trough histopathological changes

13. derived from the exposition to this metal and during its depuration. Oysters
exposed to 100 µg/l of cadmium for 72 h and depurated by 24, 48, 72, 96, 120,
144, 168, 192, 216, and 230 h were analyzed. Samples of oysters were included in
paraffin, cutted in a microtome and stained following the Hematoxilin-Eosin
technique. Histopathological analysis of oesophagus, intestine, digestive
diverticulum, gills and mantle, showed inflammatory lesions and cell activation,
including brown cells and haemocytes as a detoxification mechanism. The
conjunctive tissue next to oesophagus, intestine and digestive diverticulum
presented more brown cells and haemocytes than gills and mantle.
Histopathological damage was not reversible in 230 h, although there was a
recovery in epitheliums of digestive diverticulum. This work recommends the
histopathological evaluation of digestive diverticulum to determine t he physiological
state of oysters and to take preventive measures in the commercialization and
culture of their natural populations.
Key works: Oyster, Crassostrea virginica, cadmium, histopathological.
Introducción
El uso industrial de los metales ha provocado que la movilización antropogénica, en
algunos casos, sea mayor que la natural, siendo el aporte antropogénico el que más
daño ecológico causa (Gutiérrez-Galindo et al., 1991). Los estudios de la
contaminación por metales pesados en el medio ambiente marino tienen el
propósito de proteger los ecosistemas marinos costeros, en general, y la salud
humana, en particular. Con este fin, se ha propuesto el empleo de organismos
centinelas como organismos biológicos indicadores de la contaminación por metales
pesados en el medio marino.
Los moluscos bivalvos, tales como las ostras, juegan un papel ecológico importante
en los sistemas acuáticos. La filtración e ingestión que realiza de materia
particulada suspendida (algas y sedimentos) de la columna de agua remueve
contaminantes asociados con la materia suspendida. Las ostras son organismos
sésiles incapaces de evadir condiciones desfavorables, se alimentan por filtración y
se conoce que bioacumulan contaminantes como el cadmio (Cd), permitiendo el
diseño de experimentos para estimar la cinética de bioacumulación y transplante en
el laboratorio (Cruz-Rodríguez & Fu-Lin, 2002; Frías-Espericueta et al., 1999).
La bioacumulación de metales en bivalvos depende de las propiedades físico-
químicas de los elementos en cuestión, así como de las necesidades metabólicas de
los organismos y la disponibilidad de éstos en la columna de agua y/o alimentos
(Frías-Espericueta et al., 1999).
El Cd es un elemento estable que no se degrada en el ambiente, es considerado
como uno de los más tóxicos para un gran número de organismos marinos, siendo
acumulado por los bivalvos en proporciones que en algunos casos, pueden
constituir un serio peligro si son destinados a la alimentación humana (Gutiérrez-
Galindo et al., 1991; Establier et al., 1978; Fisher et al., 2000).
En México la legislación establece 0.1 mg/l de Cd como Límite Máximo Permitido
(LMP) en las descargas de aguas residuales en aguas y bienes nacionales (Diario
Oficial de la Federación, 1997). Sin embargo, Villanueva & Botello (1998) han
reportado concentraciones de Cd mayores al LMP en varias lagunas del Golfo de
México, así como concentraciones en el ostión Crassostrea virginica (Gmelin, 1791)
que superan los 2 µg/gps, recomendados para consumo humano.

14. El ostión Crassostrea virginica corresponde a una de las especies estuarinas
explotadas con mayor intensidad en las costas mexicanas del Golfo de México,
habita en aguas salobres, lagunas y esteros, tiene una amplia distribución y es una
especie comercialmente valiosa (Rogers & García-Cubas, 1981; Frías-Espericueta et
al., 1999). En el siglo pasado ocurrió la mayor declinación de poblaciones naturales
por una variedad de causas incluyendo la sobreexplotación, el daño del hábitat, la
degradación de la calidad de agua y el incremento en la susceptibilidad a
enfermedades (Matthew et al., 2002).
Engel (1999), sugiere que el ostión C. virginica utiliza diferentes estrategias
metabólicas en la captación o acumulación de metales. Diversos estudios señalan la
bioconcentración de Cd en estudios de laboratorio (Zaroogian & Morris, 1981); sin
embargo, la cuantificación de los contaminantes subestima el estado fisiológico de
los organismos, por lo que el objetivo de este trabajo fue analizar los cambios
histopatológicos durante la fase de desintoxicación en el ostión Crassostrea
virginica expuesto a concentraciones subletales de Cd.
Materiales y métodos
Se procesaron 66 muestras del ostión Crassostrea virginica, procedentes de un
bioensayo con exposición subletal a 100 µg/l de Cd y sus respectivos testigos. El
bioensayo se realizó en dispositivos experimentales de 40 l. La fase de intoxicación
tuvo una duración de 72 h y la fase de desintoxicación fue de 240 h con muestreos
de 3 organismos a las 24, 48, 72, 96, 120, 144, 168, 192, 216 y 230 h. Los
ostiones fueron fijados con formol al 10 %, posteriormente se deshidrataron,
aclararon e infiltraron en un procesador de tejidos automático modelo LEICA TP
1020. La inclusión del tejido se realizó en parafina con puntos de fusión de 49 - 51º
y de 58 - 60 °C utilizando el centro de inclusión modelo LEICA EG 1140 H y LEICA
EG 1140 C para la obtención de los bloques. Posteriormente se hicieron 3 cortes
seriados de 5-7 µm de grosor con un micrótomo modelo HM 315. Los cortes fueron
teñidos con la técnica de Hematoxilina-Eosina (H-E) y revisados en microscopio
óptico. Se trabajó el esófago, el intestino, la glándula digestiva, las branquias y el
manto. Para evaluar la fase de desintoxicación se utilizó como parámetro de
clasificación el número de las células cafés (llamadas así, porque contienen
vesículas con tinción café en el citoplasma; Zaroogian & Yevich, 1994) y hemocitos
presentes en los tejidos. Se determinó el número de células cafés realizando un
conteo en 6 campos a 100X, por corte y en sus réplicas (3). Un total de 18 campos
fueron revisados para cada tejido y se obtuvo en ellos el promedio de células cafés.
La densidad de hemocitos se utilizó para la evaluación cualitativa, ésta fue
clasificada en 4 categorías:
1 = hemocitos en tejido conjuntivo periférico al órgano.
2 = hemocitos con infiltración baja en el órgano.
3 = hemocitos con infiltración moderada en el órgano.
4 = hemocitos con infiltración elevada, no se distinguen límites entre tejidos.
Se graficaron el número de células cafés y la categoría de hemocitos presentes en
el tejido conjuntivo adyacente a esófago, intestino, glándula digestiva, branquia y
manto desde la intoxicación (72 h) hasta el final del periodo de desintoxicación
(230 h).
Resultados

15. El análisis histopatológico de ejemplares de Crassostrea virginica expuestos a Cd,
evidenció respuestas inflamatorias, degeneración de cilios en el intestino, daño en
los epitelios de los túbulos de la glándula digestiva, basofilia e hialinización. En el
esófago de los ostiones se observó tinción basófila en el epitelio de los palpos e
incluso algunas secreciones posiblemente mucosas (Fig.1A). En esta misma
estructura, el tejido conjuntivo presentó pigmentos cafés llamados en estos
organismos células cafés durante la fase de depuración (Fig.1a). En el intestino de
los organismos intoxicados se observó la degeneración de los cilios en la parte
luminar del epitelio que lo recubre (Fig.1B). Los organismos de la fase de
depuración presentaron edemas, ruptura del epitelio y presencia de células cafés en
el tejido conjuntivo que rodea el intestino (Fig.1b).
Los epitelios que revisten la luz de los túbulos de la glándula digestiva
prácticamente desaparecieron y sufrieron deformación (Fig.1C). Sin embargo, al
final del periodo de depuración se observó la recuperación de la apariencia ciliada
(Fig. 1c).
Las laminillas branquiales presentaron en la porción apical tinción basófila (Fig.2A)
muy probablemente por la presencia de hemocitos como una reacción de defensa
ante la presencia de Cd (Fig.2a). En el manto la respuesta fue similar, el lóbulo
sensorial externo presentó tinción basófila, en tanto que en la fase de depuración el
manto mostró aspecto hialino (Fig. 2B, b).

16. Algunas respuestas celulares inducidas se manifestaron a través de la presencia de
células cafés y hemocitos (Fig. 3A y 3B respectivamente). En el tejido conjuntivo de
los organismos expuestos a Cd, se observaron las células cafés, en tonalidades de
marrón a café claro con la tinción H-E (Fig. 3 A, a). Células cafés con diferente
tamaño (1 a 5 µm) se observaron también en los canales de hemolinfa. Las células
cafés de mayor tamaño presentaron forma de vesícula y tuvieron apariencia
granular en el interior. Éstas se cuantificaron en el esófago, intestino, túbulos de la
glándula digestiva y el manto (Fig. 4).

17. En el tejido conjuntivo, entre el intestino y los túbulos de la glándula digestiva, se
observaron hasta 35% más células cafés que en el esófago y el manto. El mayor
número de células cafés se registraron a las 96 h de depuración en el intestino (Fig.
4B), en tanto que la mayor incidencia de estas células en los túbulos de la glándula
digestiva se presentó a las 144 h (Fig. 4C). Posteriormente a estos plazos
prevaleció una tendencia hacia la disminución del número de células cafés. En las
últimas horas de la fase de desintoxicación el número de células cafés fue similar
en los organismos testigo, sin embargo la apariencia granulada de las vesículas
cafés en organismos intoxicados, sugiere la captación de material, es decir, de Cd.
Los ostiones presentaron una respuesta hemocítica, como se muestra en la Fig. 3
(B,b) paralela al incremento en el número de células cafés, como respuesta a la
inflamación aguda. Los hemocitos, posiblemente granulocitos por su actividad
protectora, se presentaron en esófago, intestino, glándula digestiva, branquia y
manto. La densidad de hemocitos fue mayor en el tejido cercano al intestino y las
branquias con respecto al esófago, túbulos de la glándula digestiva y el manto. Este
mecanismo de defensa fue evidente desde las 24 horas de la fase de
desintoxicación y disminuyó su densidad a las 230 h (Fig. 5).
Discusión
Las alteraciones en la anatomía y en la función de los organismos analizados se
relacionaron con diferentes reacciones histopatológicas, entre las que destaca la
inflamación. La inflamación es una reacción de los tejidos a diferentes formas de
lesión y entraña respuestas vasculares, neurológicas, humorales y celulares en el
foco que sufre daño (Rubin & Farber, 1990).
La célula expuesta a una agresión subletal persistente tiene un repertorio limitado
de respuestas (como son la producción de células cafés y los hemocitos en el caso
del ostión), cuya expresión se interpreta como evidencia de lesión celular.
Zaroogian & Yevich (1994) han señalado que la actividad de las células cafés de C.
virginica se relaciona con el proceso de incorporación, acumulación, desintoxicación
y degradación de material extraño de la hemolinfa y que aparecen conjuntamente
con amebocitos, los cuales fagocitan partículas y envuelven solutos, mientras que
las células cafés embeben solutos eficientemente como un mecanismo de defensa.

18. Los resultados de este trabajo señalan que se presentó un incremento de células
cafés y hemocitos en los ostiones intoxicados con respecto a los testigos. Esto
evidencia que, tanto las células cafés como los hemocitos participan en la
desintoxicación de Cd en los tejidos de C. virginica.
El intestino y los túbulos de la glándula digestiva forman parte de una de las
principales vías de incorporación de tóxicos, por lo que, se considera que la
activación de células cafés podría ser un mecanismo primario de defensa en estos
órganos. En la región del manto y en la branquia se observaron pocas células cafés,
posiblemente por ser un órgano externo más relacionado con el agua circundante
se favorece la eliminación de estas células.
En los organismos desintoxicados, la reparación se asumió como un proceso en
donde las células destruidas fueron substituidas por nuevas células. Si el estrés
desaparece a tiempo o, si la célula es capaz de soportar la agresión en la lesión
celular, se restablece la integridad estructural y funcional completa (Rubin &
Farber, 1990). La acción de las células cafés constituye un mecanismo importante
de protección ante la presencia del Cd. Zaroogian y Yevich (1994) han demostrado
que, en las llamadas células cafés existen algunas más pequeñas que son más
activas en la acumulación de metal que las células cafés grandes, las células
pequeñas contienen vesículas con lisosomas llamados "jóvenes" y las células cafés
más grandes presentan forma de vesículas con grandes lisosomas "viejos", menos
activos ó cuerpos residuales.
La activación de los hemocitos fue más notoria en los túbulos de la glándula
digestiva, así como en el intestino. Éstos actúan como un mecanismo de defensa en
los órganos internos análogo al de las células cafés. Otros autores han reportado un
incremento en la densidad de hemocitos en el ostión C. virginica por exposición a
Cd, estos hemocitos pueden captar iones de Cd de la hemolinfa que rodea los
tejidos y transportarlo al lecho epitelial para ser eliminado del organismo (Fisher et
al., 2000).
La presencia de hemocitos fue una respuesta claramente activada evidente en el
esófago, la branquia, el manto y la glándula digestiva. Existen reportes que señalan
el bloqueo de los canales de calcio por la acumulación de Cd en la branquia de C.
virginica (Roesijadi & Unger 1993), esto implicaría que existe un límite fisiológico de
captación de iones, que puede generar lesión y respuesta humoral. Posiblemente
por ello la branquia permaneció con una densidad de hemocitos constante a lo largo
de las observaciones. Otros autores han demostrado que la concentración de los
metales traza en C. virginica puede ser grande, pero la toxicidad llega a ser
neutralizada por el contenido de metales en granulocitos (Okazaki & Panietz, 1981;
Zaroogian & Morris, 1981).
Se consideró que existen diferencias histopatológicas importantes entre los tejidos
internos (el intestino y la glándula digestiva) y externos (el esófago, las branquias y
el manto) de estos moluscos. Es posible que en los tejidos internos los iones de Cd
se unan estrechamente a los grupos sulfhidrilo en láminas del mucus, en tanto que
los tejidos externos se encuentran con el agua marina por lo que la depuración
pasiva puede verse favorecida. La respuesta en los tejidos internos sugiere que su
principal función es el almacén y, posteriormente la eliminación de metales traza a
través de las células cafés, los hemocitos y el mucus. Es necesario ampliar este tipo
de estudios con la evaluación de inmunomarcadores: actividad fagocítica,
producción de especies oxígeno-reactivas (radicales libres) que provocan daño
celular, densidad de hemocitos y la relación del número y estabilidad lisosomal de
las células cafés (Matthew et al., 2002) de manera que se establezcan parámetros
útiles en la evaluación de la inmunocompetencia celular-mediada en ostiones.

19. El estado histopatológico de los túbulos de la glándula digestiva y del intestino
resultante de la exposición a Cd se asoció, de manera más clara, con los
mecanismos de desintoxicación en el ostión Crassostrea virginica por lo que la
evaluación en la glándula digestiva es recomendable en los estudios de la fisiología
y monitoreo ambiental. La activación de mecanismos de desintoxicación a través de
los macrófagos llamados células cafés y las células de la hemolinfa, disminuyó
paulatinamente con el tiempo de depuración. Las células cafés se mantuvieron
presentes hasta el final del periodo de depuración en forma de vesículas
granuladas, constatando la unión del metal. Diferentes mecanismos de
desintoxicación contribuyeron a la reparación de los tejidos epiteliales de los
túbulos de la glándula digestiva, sin embargo los cambios histopatológicos no
fueron reversibles completamente en 230 h de depuración, por lo que se sugiere en
futuros estudios prolongar este tiempo para la evaluación de la recuperación de
daños.
El uso de la herramienta histopatológica permitió realizar el diagnóstico de daños y
evidenció cambios importantes que facilitan la selección de inmunomarcadores en
tejidos específicos, así como, plazos de experimentación adecuados para la
interpretación de las respuestas biológicas. La evaluación de estas respuestas es
necesaria para la evaluación del impacto de enfermedades en las pesquerías y
puede ser usado como medida preventiva de riesgo de la salud pública por
ingestión de bivalvos contaminados.
Bibliografía
CRUZ-RODRÍGUEZ, A.L. & E.C. FU-LIN. 2002. Heat-shock protein (HSP70) response
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DIARIO OFICIAL DE LA FEDERACIÓN. 1997. Norma Oficial Mexicana NOM-001-
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ENGEL, W.E. 1999. Accumulation and cytosolic partitioning of metals in the
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ESTABLIER, R., M. GUTIÉRREZ & A. RODRÍGUEZ. 1978. Acumulación de cadmio en
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