1. CORPORACIÓN UNIVERSITARIA DEL HUILA CORHUILA
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
PROFESOR: ESP. RAFAEL HERNANDEZ FLOREZ
LABORATORIO NRO 2 CARBOHIDRATOS, ENZIMAS Y VITAMINAS
LLEVAR: ZUMOS DE VARIAS FRUTAS CITRICAS, MAIZENA.
Indispensable diligenciar debidamente el prelaboratorio, solución de
cuestionarios, secuencias en una carpeta oficio, elaborado a mano,
en hojas de examen y PRESENTARLO ANTES DE INICIAR EL
LABORATORIO
Llevar la bata como elemento de protección
Ser puntuales a la hora de iniciar el laboratorio
OBJETIVO
El alumno aplicara algunas pruebas químicas, para detectar la presencia de
carbohidratos que se hallen presentes sea como mono, oligo, o polisacáridos.
INFORMACION GENERAL
Los carbohidratos, químicamente son derivados aldehídicos o cetonicos de
alcoholes polihidroxilados.
De acuerdo con esta definición tenemos dos grandes familias de carbohidratos,
las ALDOSAS (contienen en su molécula al radical aldehído):
Y las CETOSAS (contienen en su molécula al radical ceto):
A los carbohidratos, también se les da el nombre de hidratos de carbono,
glúcidos y azucares.
Se hallan ampliamente distribuidos en la naturaleza, tanto en vegetales como
en animales, en los primeros realiza fundamentalmente una función plástica

2. (forman pared de los tejidos de la planta), y en menor grado una función de
reserva de energía (como el almidón de las plantas)
En los animales, los carbohidratos constituyen la fuente primaria para la
obtención de energía, esta es su principal función; también se les encuentra
formando parte de numerosas moléculas, y son a la vez una fuente de reserva
de energía a corto plazo (en forma de deposito de glucógeno hepático y
muscular).
De acuerdo con el numero de moléculas de que constan, los carbohidratos se
pueden clasificar en :
a) Monosacáridos.---formados por solo una unidad (monómeros), ejemplo la
glucosa
b) Oligosacáridos. ------ Formados por dos o hasta 8 unidades. Reciben el
nombre entonces de di, tri, tetrasacáridos, etc.
Ejemplo: Lactosa (el azúcar de la leche), formada por la unión de glucosa +
galactosa (es un disacárido).
Una molécula de un carbohidrato, se une a otro carbohidrato por medio de un
enlace llamado glucosidico.
c) Polisacáridos. --- formados por mas de 8 unidades o monómeros, por
ejemplo: el almidón (es una cadena formada solo por glucosa, unidas a otras
moléculas de glucosa, por enlaces llamados glucosidicos).
MATERIALES REACTIVOS
18 Tubos de ensayo 120 x 10 mm.
1 gradilla
1 vaso p.p 250 ml

3. 1 mechero
1 tripie
1 tela de asbesto
5 pipetas 5 ml
6 pipetas 1 ml
1 pinza p/ tubo de ensayo Agua destilada
H2SO4 conc.
HCL conc
HNO3 conc
Sol. De lugol
Sol. De cromato de potasio 5%
Ácido fosforico 85%
Sol. Al 1% de glucosa, fructosa y almidón.
Sobres con 30 mg de glucosa, sacarosa, lactosa, NaCl.
Sol. Alcohólica timol 5%
Alfa naftol sol. Alcohólica al 2%
DESARROLLO DE LOS EXPERIMENTOS

4. 4.1- PRUEBA DEL TIMOL PARA CARBOHIDRATOS.
Disponer de tres tubos de ensayo, numerarlos y proceder como muestra el
siguiente esquema.
REACTIVO TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3
Glucosa 3ml X
Lactosa 3 ml X
Cloruro de Sodio 3 ml X
Agua destilada 2ml 2ml 2ml
Sln alcohólica de Timol 5% 2ml 2ml 2ml
AGITAR LA MEZCLA DE CADA TUBO
INCLINAR LOS TUBOS, INTRODUCIR H2SO4 concentrado. Con una pipeta,
de tal forma que 0.5 ml de ácido queden bajo la solución acuosa.
Hacer este pasó para cada uno de los tres tubos. SIN AGITAR.
4.1 Resultados esperados
1. En que tubos observo un cambio?
2. En que consistió dicho cambio?
3. A que se debe este cambio?
4.2 – PRUEBA DE ÁCIDO NICRÓMICO PARA CARBOHIDRATOS

5. Disponer de tres tubos de ensayo, numerarlos, y proceder como se muestra en
el siguiente esquema.
REACTIVO TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3
Glucosa 3ml X
Almidón 3ml X
Cloruro de Sodio 3ml X
Agua destilada 3ml X X X
Acido Nítrico3ml X X X
Cromato de potasio al 5% 5 gotas X X X
AGITAR Y DEJAR EN REPOSO POR DOS MINUTOS. OBSERVAR COLOR
1. En que tubos observo un cambio?
2. En que consistió dicho cambio?
3. A que se debe este cambio?
4.3- PRUEBA DEL ÁCIDO FOSFÓRICO PARA CETOSACÁRIDOS
Marque dos tubos de ensayo y proceda según el esquema.
REACTIVO TUBO 1 TUBO 2
Sacarosa 3 ml X
Glucosa 3 ml X
Ac fosfórico 85% 1 ml X X
AGITAR LA MEZCLA, COLOCAR EN BAÑO MARIA POR 1 MIN, RETIRAR Y
OBSERVAR COLOR DESARROLLADO
.
1. En que tubos observo un cambio?

6. 2. En que consistió dicho cambio?
3. A que se debe este cambio?
4.4-PRUEBA DE MOLISCH.
Numere 3 tubos de ensayo y, y proceda según el siguiente esquema.
REACTIVO TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3
Glucosa 2ml X
Fructosa 2ml X
Agua destilada 2ml X
Reactivo de Molisch 5 gotas X X X
MEZCLAR , INCLINAR CADA TUBO Y AÑADIR CON CUIDADO ELAC.SULFURICO
Ácido sulfúrico 2ml X X X
1. En que tubos observo un cambio?
2. En que consistió dicho cambio?
3. A que se debe este cambio?
4.5 PRUEBA DE LUGOL PARA ALMIDÓN Y GLUCÓGENO
Numere 3 tubos de ensayo y, y proceda según el siguiente esquema.
REACTIVO TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3
Glucosa 2ml X
Fructosa 2ml X
Almidón 2ml X
Ac. Sulfúrico 3 gotas X X X
Lugol X X X

7. MEZCLAR
1. En que tubos observo un cambio?
2. En que consistió dicho cambio?
3. A que se debe este cambio?
PARTE II ENZIMAS
ACCION HIDROLITICA DE LAS AMILASAS DE SEMILLAS DE GRAMINEAS
INTRODUCCION
Las fuentes más importantes como materia prima para la obtención de energía
son los polisacáridos, el almidón y el glucógeno. En los vegetales el almidón
constituye el polisacárido de reserva más abundante, sintetizándose en los
cloroplastos de las células fotosintéticas y en los amiloplastos de las células del
parénquima de almacenamiento.
El camino típico para la movilización del almidón de reserva es a través de la
actividad hidrolítica de las alfa y beta amilasas, cuya acción conduce a la
formación de maltosa. El desdoblamiento de la maltosa hasta glucosa está a
cargo de la maltasa, que se encuentra junto con las amilasas.
Las amilasas pueden extraerse de los granos de cereales en germinación
mediante maceración con agua. Su acción hidrolítica puede seguirse mediante
los reactivos de Lugol y de Fehling.
PARTE EXPERIMENTAL
REACTIVOS:
- Semillas de gramíneas en germinación
- Mortero.
- Cristalería.
- Termostato.
- Reactivos de Lugol, Fehling, Tollens y Benedict.
- Mechero.
PROCEDIMIENTO:
1. Prepare 30 mL de un macerado acuoso con 10 g de semillas de
gramíneas germinadas teniendo en cuenta que el agua debe estar
caliente (50 grados). Añada 5 gotas de glicerina para extraer lo más
posible los enzimas.

8. 2. Deje reposar de 15 - 20 minutos de 30 - 45 grados Celsius y filtre el
extracto.
3. En un tubo de ensayo, introduzca 5 ml de disolución de almidón y de 1 - 2
ml del extracto. A intervalos de 5 minutos, comprobar la degradación del
almidón por las amilasas ensayando una muestra del sistema de reacción
en una placa con excavaduras con el reactivo de Lugol. Para reconocer la
presencia de azúcares reductores (maltosa y glucosa), realizar la reacción
con los reactivos de Fehling, Tollens o Benedict de una muestra de 1 - 2
ml del sistema de reacción.
REPORTE DE LABORATORIO
1- Represente a través de una ecuación la acción hidrolítica de las amilasas del
almidón (amilosa).
Nota : Utilice las estructuras químicas.
2- Clasifique las amilasas de acuerdo con el Sistema Internacional.
3-¿ Qué objetivo persigue realizar la reacción con el reactivo de Lugol cada
cierto intervalo de tiempo?
4-¿ Qué objetivo persigue realizar al final del experimento la reacción con el
reactivo de Fehling? Represente la ecuación.
PARTE III VITAMINAS
Material necesario
• Normalmente se utiliza un reactivo de
laboratorio que recibe el nombre de lugol
(disolución de yodo al 5 % y yoduro de potasio
al 10%, en agua). Pero también podemos
desarrollar esta técnica en casa a partir de los
productos farmacéuticos yodados que se
utilizan habitualmente para tratar las heridas.
Así, se utiliza la tintura de yodo (disolución de
yodo en alcohol).
• Fécula o almidón de maiz (comercialmente maicena)
• agua
• vaso de precipitados de 500 mL

9. • tubos de ensayo
• cuentagotas
• varilla agitadora
• placa calefactora
• zumos o bebidas de frutas
Procedimiento
El primer paso consiste en preparar la disolución indicadora del
contenido de vitamina C. Para ello se deben seguir las siguientes
indicaciones:
1. mezcla una cucharada de almidón de maíz con suficiente agua hasta
formar una pasta.
2. añade 250 mL de agua a la pasta y hiérvela durante 5 minutos. 3
3. añade 10 gotas de la solución hecha con almidón a 75 mL de agua.
4. añade suficiente disolución de yodo hasta observar un color
púrpura/azul oscuro.
Una vez preparada la disolución indicadora se puede comenzar la
experimentación.
- Añade 5 mL de la disolución indicadora en un tubo de ensayo de 15
mililitros de capacidad (un tubo de ensayo para cada muestra a
estudiar).
- Usando un cuentagotas limpio, añade 10 gotas del zumo de fruta o
de la bebida seleccionada al tubo de ensayo y agita suavemente.
- Compara el color de la mezcla frente a un fondo blanco.
- Organiza los tubos en orden del color más claro al más oscuro.
1. En que tubos observo un cambio?
2. En qué consistió dicho cambio?

10. 3. A que se debe este cambio?
CUESTIONARIO
1. MEDIANTE QUE METODOS SE PUEDEN IDENTIFICAR LOS
CARBOHIDRATOS?
2. QUE ES EL TIMOL Y PARA QUE SIRVE?
3. QUE FUNCIÓN CUMPLE EL CROMATO DE POTASIO EN LA
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS?
4. CUAL ES LA FUNCIÓN DEL ACIDO FOSFÓRICO PARA LA
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS?
5. QUE ES EL REACTIVO DE MOLISCH Y QUE UTILIDAD TIENE PARA
LA IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS?
6. QUE ES EL LUGOL Y QUE UTILIDAD TIENE PARA LA
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS?
7. QUE SON LAS AMILASAS Y CUAL ES SU IMPORTANCIA?
8. QUE OCURRE AL REACCIONAR UN COMPLEJO DE YODO AMILOSA
CON LA VITAMINA C?
9. QUE IMPORTANCIA TIENEN LOS REACTIVO SE FEHLING,LUGOL, ,
TOLLENS Y BENEDICT.PARA LA IDENTIFICACION DE ENZIMAS?
10. CUÁNTAS CLASES DE AMILASAS EXISTEN?
11. QUE ES UN AZÚCAR REDUCTOR?