Nouveaux outils de mesure pour un screening rapide des mycotoxines. Céline CEZAR (Phytocontrol)

1. Sûreté alimentaire
Quelles innovations pour
la maîtrise des contaminants
et l'authentification des produits
agricoles et alimentaires ?
> 13 & 14 novembre 2013
> Montpellier SupAgro INRA
www.rencontres-qualimediterranee.fr

2. ACCREDITATION
COFRAC N° 1-1904
PORTÉE
DISPONIBLE SUR
WWW.COFRAC.FR
MÉTHODE DE DOSAGE SIMULTANÉE RAPIDE DE 23
MYCOTOXINES PAR UHPLC‐MS/MS
CEZAR Céline / Laboratoire PHYTOCONTROL

3. ENJEUX
Définition: Les mycotoxines sont des composés toxiques produits par divers types de
champignons. En milieu favorable et à des niveaux de température et d’humidité
propices, ces champignons prolifèrent et peuvent produire des mycotoxines.
Généralement, celles‐ci pénètrent dans la chaîne alimentaire après contamination de
cultures alimentaires destinées à l'alimentation humaine et animale, principalement les
céréales.
Sécurité du consommateur: La présence de mycotoxines dans les denrées alimentaires et
les aliments pour animaux peut avoir de graves répercussions sur la santé humaine et
animale. Il est donc impératif d’effectuer des contrôles sur les matrices sensibles.
 Réglementation UE: 1881/2006 et ses modifications successives
CEZAR Céline / Laboratoire PHYTOCONTROL

4. REGLEMENTATION UE
Type de matrices contaminées:
‐ Fruits à coques
‐ Céréales
‐ Café
‐ Épices
‐ Boissons
‐ Compotes
‐ Lait
‐ Alimentation infantile
Quelles sont les mycotoxines concernées?
6 Mycotoxines règlementées à ce jour + Toxines T2 et HT2 avec des teneurs recommandées
(2013/165/UE)
Règlement 1881/2006
Modifier successivement par les règlements (UE) 1126/2007,165/2010 et 594/2012
Mycotoxines en surveillance:
‐ Alcaloïdes de l’ergot: ergocristine, ergotamine, ergocryptine, ergométrine, ergosine,
ergocornine
Recommandations 2012/154/UE

5. MATERIEL ET METHODE
Préparation des échantillons:
Protocole adapté de la méthode Quechers: Prise d’essai de 5 g pour les céréales ou
aliments pour animaux + 10 ml d'eau et 10 g de fruits) + 10 ml d'acétonitrile.
Après macération, ajout de sels pour permettre la séparation des phases.
Dilution par 5 du surnageant avec phase mobile + Ajout étalon interne
Matériel chromatographique UHPLC‐MS/MS:
Température colonne 50°C
Deux phases mobiles:
A: eau + 0.5% acide acétique
B: Isopropanol + 0.5% acide acétique
Débit: 0.4mL/min
Ionisation: ESI positif et négatif

6. MATERIEL ET METHODE
Temps de Run: 6.5min
Transitions MRM: 2 pour
chaque mycotoxines

7. MATERIEL ET METHODE
225000
0
200000
0
175000
0
150000
0
125000
0
100000
0
75000
0
50000
0
25000
0
0
1.00
1.25
1.50
1.75
2.00
2.25
2.50
2.75
3.00
min

8. AVANTAGES DE CETTE METHODE
 Innovation technique permettant d’obtenir le meilleur compromis entre nombre
de mycotoxines recherchées et LQ
Permet le dosage de mycotoxines, avec une limite de quantification de :
‐ 10 µg/kg pour la Zéaralénone
‐ 50 µg/kg pour la Déoxynivalénol (DON), T2 toxin, HT2
‐ 25 µg/kg pour chacune des Fumonisines B1et B2
‐ 1 µg/kg pour Aflatoxines B1, B2, G1 et G2
‐ 1 µg/kg pour l’Ochratoxine A (OTA)
Durée d’analyse très rapide

9. w w w . r e n c o n t r e s ‐ q u a l i m e d i t e r r a n e e . f r