1. UNIVERSIDAD DE CUENCA
Escuela de Medicina Veterinaria y Zootecnia
VIROLOGÍA E INMUNOLOGÍA
CATEDRATICO:
Dr. Félix Chuzán
2. Capitulo I
1.1. Introducción
1.1.1. Objetivos
1.1.2.Desarrollo de la materia
1.2. Virología y si relación con las demás
ciencias
1.3. Historia
1.4. Conceptos acerca de los virus
1.4.1. Otras definiciones
1.5. Métodos de purificación de los virus
1.6. Características generales
1.7. Términos relacionados
3. 1.8. Morfología de los virus
1.8.1. Dimensiones de los virus
1.8.2. Estructura de los virus; componentes
1.8.3. Virus no envueltos
1.8.4. Virus envueltos
1.8.5. Microscopio electrónico y Aparato de difracción de rayos X
1.8.6. Métodos utilizados para determinar el tamaño de los virus
1.9. Fisiología y Química de los Virus
1.9.1. Características observadas en los ácidos nucleico en forma
aislada
1.9.2. Fundamentos bioquímicos celulares
1.10. Mecanismo de síntesis proteica celular.
1.11. Clasificación antigua de los Virus
4. INTRODUCCIÓN
Los virus no son organismos celulares
Utilizan organelos y moléculas de la célula
para sus funciones.
Contienen toda la información necesaria
para reproducirse.
El elemento viral es el genoma.
DNA o RNA, dependiendo del tipo de virus.
5. Obligado crecimiento intracelular.
Dependencia estructural de la célula
hospedadora.
Son parásitos estrictos
No poseen enzimas metabólicas,
necesitan del metabolismo celular.
6. Virología: definición
Rama de la microbiología
Estudio de los virus y las
enfermedades que éstos causan.
9. Los virus tienen un ciclo de vida de dos
fases:
1.- Extracelular se denomina Virión.
2.- Intracelular Virus esta en la cápside
proteica y en el interior de la célula infectada.
Latencia.
10. El material genético de un retrovirus es
ARN,posee además, una enzima ADN
polimerasa, Transcriptasa Inversa o
Retrotranscriptasa, que puede utilizar el
ARN vírico como molde para fabricar ADN.
El ADN vírico puede integrarse por sí
mismo en el genoma de la célula huésped.
12. Dimitri Ivanowsky
◦ Demostró que el agente
causante de la
enfermedad no era
retenido por un filtro de
porcelana utilizado para
remover bacterias.
13. Martinus Beijerinck
Agente causante más
pequeño que una
bacteria.
Acuño el término Virus
14. FriederichLoeffler y
Paul Frosch
Agente causante no
podía ser retenido por
los filtros para retener
bacterias.
15. Vilhem Ellerman y Olaf Bang
◦ Identificó virus como agentes
causante de leucemia
Peyton Rous
◦ Virus como agentes
causantes de tumores
cancerosos sólidos
◦ “Rous Sarcoma Virus”
16. Frederick Twort
◦ 1915
◦ Describió un virus
◦ Virus de la viruela
Felix d’ Hérelle
◦ 1917
◦ Acuño el término bacteriofago
Habilidad de formar placas de
lisis en sembrados de bacterias
en placas Petri.
18. Ruska y knel (1931)
Inventan el microscopio
electrónico
Permite comprobar la
existencia de los virus y
MICROSCOPIO OPTICO
apreciar su morfología.
Good Pasteur
Comprueba que algunos
virus son capaces de
reproducirse en el embrión
de pollo
MICEROSCOPIO ELECTONICO
19. Frederick Twort
◦ Describió un virus
◦ Virus de la viruela
Felix d’ Hérelle
◦ Acuño el término bacteriofago
20. En 1955 Stanley,
Se logra la cristalización
del virus del mosaico del
tabaco.
En 1950 Jack
Debruck, Inicia los
estudios con los
bacteriófagos.
21. En 1957 Alexat y Jean
Linneman,
Descubren la proteína inducida
por los virus en las células
invadidas por ella, esta proteína
inhibe el crecimiento de las
células malignas o tumorales.
En 1975 y 1984 tres
investigadores
Descubren los anticuerpos
monoclonales. Esto sirvió para
poder conocer el tamaño
aproximado de los virus.
22. Definición de virus
Son entidades submicroscópicas capaces de
introducirse en células vivas específicas y
multiplicarse en el interior de esta. (Dogma
indispensable).
24. Los virus actúan en dos formas distintas:
1.- Reproduciéndose en el interior de la célula
infectada
2.- Uniéndose al material genético de la célula
25. A los virus se pueden considerar como:
1. Agentes infecciosos van a producir
enfermedades .
2. Agentes Genéticos alteran el material hereditario
de la célula huésped.
26. METODOS FISICOS Y QUIMICOS EMPLEADOS PARA EL
ESTUDIO DE LOS VIRUS:
Se obtenen virus en
forma pura, libres de utilizando sustancias
otros microorganismos como antibióticos que
como bacterias, sirven para separar virus
hongos, etc. de bacterias
27. 1. MEMBRANA DE COLODION
Es un método físico permite ej. El vírus de La encefalitis
conocer el tamaño que tiene 28um, aftosa 22um,
los virus aprovechando su parvovirus 16-32um
diminuto tamaño
28. 2. METODOS DE CENTRIFUGACION
para lo cual se
aprovecha la
Sirve para velocidad de
consiste en obtener
purificar sedimentación en
concentrados víricos
los virus el tubo de los virus
y las fuerzas de
centrifugación
29. 3. CULTIVOS HISTICOS
introducidas en
un medio de
sirven para multiplicar a los cultivos a base de
nutrición que
virus; para lo cual se fragmentos de
contienen
aprovechado la posible tejidos, órganos o
antibióticos,
afinidad hística de los virus células puras
antimicóticos
hidratos de
carbono,
vitaminas y
minerales, etc
Eje: el virus de la
Cultivo de A. pleuropneumoniae en medios sólidos. 2 A: aftosa tiene afinidad
colonias en agar chocolate. 2B: colonias en agar PPLO
enriquecido con NAD; 2C: satelitismo en agar sangre. 2D.
por las células
Efecto CAMP; 2E: colonias hemolíticas en la presencia sangre. linguales del bovino,
30. 4. ADAPTACIÓN VÍRICA A EMBRIÓNES DE
POLLOS
Eje. virus de la aftosa
ha sido adaptado al
embrión de pollo, y
Se obtienen virus en grandes cantidades virus mediante la técnica
que se los a podido adaptar a una de pases sucesivos se
multiplicación dentro del embrión de pollo los ha logrado
atenuar en cuanto a
virulencia
31.
32. PRUEBAS SEROLOGICAS
consisten en una cuando se investiga
cuando se investiga a la
reacción antígeno anticuerpos
partícula vírica se llama
anticuerpo serológicos se
Directa
especifico, llama Indirecta
Fijación, Inmunofluorecencia en Pruebas
placas, Elisa en pocillos, realizadas en
Inmunodifución, Neutralización suero serológico:
(antígeno - anticuerpo)
33. BRUCELOSIS: Rosa de Bengala
modificado (Dilución 75 µl de suero
problema / 25 µl de Rosa de Bengala).
34. Ultrafiltración
sirve para conocer el tamaño de
se obtienen los virus por lo que se a utilizado
virus puros la membrana de colodión
elaborados a base de
nitrocelulosa o colodión
disuelto en sustancias solventes
orgánicas como el éter, alcohol
acético entre otros.
35. Dispersión de luz:
Consiste en que una
suspensión de virus
expuesta a la acción de Depende del
un rayo de luz incidente volumen y el tamaño
este dispersa otro rayo de las partículas
de luz en un grado tal víricas en suspensión
36. Electroforesis
mide la velocidad de
método empleado para la migración de las
obtención, purificación de la partículas víricas a un
proteína y estudio de los virus. campo eléctrico
determinado
dependiendo de las cargas
positivas o negativas que
posean estas y de la
disociación electrolítica de los
grupos ácidos o básicos
37. Método de sedimentación inducida en
centrifuga de alta velocidad
Permite separar a se aplican sustancias de alta densidad como
los virus de otros la glicerina, sacarosa, sales de alta densidad:
componentes cloruro de cesio, sulfato de cesio, cloruro
dentro de una de rubidio.
solución vírica
separa a los virus en
forma de estratos o
copas de acuerdo a su
densidad y viscosidad
de las partículas víricas.
Entre las enzimas
Adición de enzimas.- se
tenemos las nucleasas
aplican cantidades adecuadas
como la ribonucleasa y
de enzimas para no alterar o
la desoxiribonucleasa;
dañar la estructura de los
también la tripsina
virus.
38. Método de emulsificacion
Sirvió para conocer si utiliza sustancias orgánicas como: el
los virus poseen en su éter y cloroformo en cantidades
envoltura externa adecuadas: 20% por 30 minutos a 4° C
lípidos o grasas en agitación constante
39. Método de adición de enzimas
Se añaden virus a las Encimas como:
enzimas, virus puros nucleasas y
haciendo un tratamiento proteasas para
adecuado su purificación.
Tripsina
sirven para separar a las células
del tejido conectivo o tejido
intracelular utilizando enzimas al
0.125% o 0.25%.
41. ESTRUCTURA DE LOS VIRUS
Capside: Capa que contiene el genoma
nucléico ácido.
Capsomeros: Aglomerados de polipeptídos
que están en la superficie del icosaédricas de
giro de partículas,
La envoltura: Membrana que contiene el
lipido que rodea algunos giros de las
partículas.
42. Nucleocapsíde: Envoltura proteica viral.
Subunidad: Cadena polipeptídica viral doblada.
La unidad de organización: Unidades
estructurales.
Vírion: Partícula viral completa e infecciosa.
Vírus defectuoso: Partícula viral funcionalmente
deficiente de algun aspecto de replicacion.
43. Ejemplo de virus de
geometria icosaedrica.
A virus sin membrana
B virus con membrana
1 Capside
2 Acido Nucleico
3 Capsomero
4 Nucleocapside
5 Virione
6 Rivestimento proteico
7 Rivestimento glicoproteic
44.
45. Cuerpos Partícula vírica en forma
elementales aislada
Agregados
virales
Conjunto de partículas
víricas
46. 1.- Virus de forma circular o
redonda:
Afectan
Vesículas Helicoidal
Form a
a Form
Rabia Animales
Rabdovirus
Estomatitis Hombre
Fo ARN
vesicular rm
a
Filamentosa
Newcastle
moquillo
Moquillo canino canino.
47. 2.- Forma de Afecta Vegetales
poliedro
Forma
Varilla o bastón
cilindro hueco
50. DIMENSIONES DE LOS VIRUS:
1.- Virus pequeños (50 um)
Parvovirus 15-
30um
Poliomielitis 37 um
2.- Virus medianos (50-200 um)
peste aviar de 70um, newcastle de 150 -180um
51. 3.- Virus grandes
200-300 um
Familia poxviridae
viruela de los animales.
52. Tamaño: 20 a 300 nm de diámetro
(tienden a la forma esférica):
< 25 nm
180-200 nm
> 250 nm
53. MÉTODOS PARA DETERMINAR EL
TAMAÑO DE LOS VIRUS
Usan Filtros de porosidad
conocida
Tinción negativa
técnicas
Tinción positiva:
sedimentación
calculo de las partículas
víricas
54. RMINOS RELACIONADOS CON LOS VIRUS
Encefalopatías espongiformes como el Scrapie en
VIROIDES
corderos.
Epilepsia,
PRION
Eemencia senil el kuru, Esclerosis múltiple.
57. VIRUS
Simetría Helicoidal
DESNUDOS
Simetría Cúbica
Simetría Binaria o Compleja
se desconoce
58.
59. 2.- Aparato de disfracción de rayos X
Queda establecido los detalles de la morfología y
estructura de los virus.
60. ácido nucleico + cápside viral
Nucleocápside
Peplómeros
Cápside viral
Estructura
Forma de espícula,
nucleico + proteínas.
parte externa del virus
Capsómero
Cubierta proteica, hacia la parte central
del virus
61. FORMAS DE PRESENTACIÓN DE LOS ÁCIDOS
NUCLEICOS DE ACUERDO AL NÚMERO DE
FILAMENTOS VIRUS QUE AFECTAN A
Vegetales Bacterianos
ARN único o hombre y ARN doble
doble animales
ADN único o doble
ARN único o doble
63. Atendiendo al tipo de ácido
nucleico:
Tipo I: ADN bicatenario, es decir,
de dos hebras de ADN.
Tipo II: ADN monocatenario, es
decir, de una hebra de ADN.
Tipo III: ARN binatenario. Se
transcribe de ARN a ARN
mensajero.
Tipo IV: ARN monocatenario (+).
No es necesaria su transcripción. Se
lee directamente como ARN
mensajero.
Tipo V: ARN monocatenario (-). El
ARN vírico debe ser transcrito a
ARN mensajero.
Tipo VI: ARN monocatenario (+). El
ARN es transcrito a ADN
utilizando una enzima llamada
tanscriptasa inversa. Virus de la gripe. Presenta envoltura
Posteriormente, el ADN sintetizado
es transcrito a ARN.
64. Atendiendo a la forma de la
cápsida del virus:
Virus helicoidales: cápsidas
alargadas, donde los
capsómeros se disponen de
forma helicoidal en torno al
ácido nucleico. Estos virus
infectan células vegetales.
Virus (poliédricos)
icosaédricos: cápsidas
redondeadas con capsómeros
triangulares. Estos virus
infectan células animales.
Virus mixtos, o complejos:
cápsidas con una zona
icosaédrica, seguida de otra
zona helicoidal. estos virus
Virus helicoidal del mosaico del tabaco
infectan bacterias.
65. Atendiendo a la célula
que infectan:
Virus vegetales: atacan
células vegetales.
Cápsidas de forma
helicoidal.
Virus animales: atacan
células animales.
Cápsidas de forma
icosaédrica.
Virus bacterianos,
bacteriófagos o, fagos:
atacan bacterias.
Cápsidas de forma Virus bacteriófagos
mixta.
67. CLASIFICACIÓN DE LOS VIRUS
Grupo de Lugar de Tamaño Cubierta Simetría
virus maduración aprox.
y ácido nucleico
Poxvirus Citoplasma ADN 200- Si Compleja
Herpesvirus Núcleo ADN 300um Si Cúbica
Adenovirus Núcleo ADN 110um No Cúbica
Papovavirus Núcleo ADN 70-80um No Cúbica
Mixovirus Citoplasma ARN 40-50um Si Helicoidal
Arbovirus Citoplasma ARN 80- Si - no Cúbica-
Picornavirus Citoplasma ARN 200um No helicoidal
Reovirus Citoplasma ARN 40-80um No Icosaédrica
Picornavirus Núcleo ADN 15-35um ? Cúbica
No --------- --- 75um ---- Icosaédrica
clasificados 20-24um ------------
-------
68. PROPIEDADES DE ALGUNOS
MICROORGANISMOS CON RELACIÓN A LOS
VIRUS
Escala Crecimiento División ADN Susceptibilidad Susceptibilida
microbiológica del medio binaria y a los d al interferón
artificial ARN antibióticos
Bacterias + + + + -
Micoplasma + + + + -
s + + + + -
Rikettsias + + + + +
Clamidias - - - - +
Virus
69. Virus que contienen ADN
Parvoviridae N 22 ADN lineal ss Kilham de la
rata
Adenoviridae N 70-90 ADN lineal ds Adenovirus
humano
Iridoviridae N 130-300 ADN lineal ds Tipula
iridescent
Hepadnaviridae E 42 ADN circular Hepatitis B
ds
Papovaviridae N 45-55 ADN circular Polyoma
ds
Herpesviridae E 150-200 ADN lineal ds Herpes
simplex
Poxviridae E 200-390 ADN lineal ds Sarampión
70. Virus que contienen ARN
Calciviridae N 40 ADN lineal ss Norwalk
Picornaviridae N 22-30 ADN lineal ss Polio
Reoviridae N 60-80 ADN lineal ds Rotavirs
Arenaviridae E 50-300 ADN lineal ss Fiebre
Lassa
Filoviridae E 800-900 ADN lineal ss Ebola
x 80
Bunyaviridae E 100 ADN lineal ss Encefalitis
California
Coronaviridae E 60-220 ADN lineal ss Coronavirus
OC43
Ss una hebra, ds doble hebra
78. Informacion genetica de los acidos nucleicos
virales para su replicación:
1.Para la replicación del propio tipo de ácido
nucleído.
2.Para la producción de subcomponentes del
virus.
3.Para la producción de enzimas, cumple un
papel muy importante dentro de este proceso
79. CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS EN LOS
ÁCIDOS NUCLEICOS EN FORMA AISLADA
b.- Clase de huésped al que infectan es
a.- Inefectividad
amplia:
baja en relación
Hay multiplicación baja y los virus
con la partícula
resultantes no pueden seguir
vírica entera
replicándose Ejm: células del pollo
80. e.- La inefectividad ,no
d.- Los que son Inactivados por el pueden ser neutralizados
calor, determinan una mayor por anticuerpos
resistencia, que las partículas víricas (neutralizantes) presentes
en forma intacta. en los sueros sanguíneos
82. Síntesis proteica a partir de
Función aminoácidos, mediante el
enlace de poli péptidos.
Constituidas:
Adenina,
Contienen en el núcleo
La célula guanina,
celular dos macromoléculas
citosina y
ADN y ARN
Timina.
83. Pueden estar ordenadas en
grupos de tres o múltiplos de
tres.
ARN Cuatro tipos de bases
nitrogenadas:
adenina, guanina
citosina y uracilo
Proporcionan las
letras para formar las
palabras, códigos o
modelos
85. Las bases nitrogenadas La célula lo transcribe,
que conforman el se copia la serie de
ADN ARN mensajero
Se requiere de la enzima ARN polimerasa,
(núcleo).
86. MOLÉCULA DE viaja al
(ARN)M FORMADA citoplasma
lleva la
Se pone en contacto
Para la síntesis información
con los ribosomas
de proteínas genética
(poliribosomas)
ARN mensajero es Hace reaccionar con
lleva la activado por una otras moléculas de
información molécula de ARN que vienen
genética, trifosfato (ATP) recorriendo el
citoplasma celular;