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UNIVERSIDAD DE CUENCA
Escuela de Medicina Veterinaria y Zootecnia


VIROLOGÍA E INMUNOLOGÍA



           CATEDRATICO:
           Dr. Félix Chuzán
Capitulo I

1.1. Introducción
  1.1.1. Objetivos
  1.1.2.Desarrollo de la materia
1.2. Virología y si relación con las demás
  ciencias
1.3. Historia
1.4. Conceptos acerca de los virus
  1.4.1. Otras definiciones
1.5. Métodos de purificación de los virus
1.6. Características generales
1.7. Términos relacionados
1.8. Morfología de los virus
  1.8.1. Dimensiones de los virus
  1.8.2. Estructura de los virus; componentes
  1.8.3. Virus no envueltos
  1.8.4. Virus envueltos
  1.8.5. Microscopio electrónico y Aparato de difracción de rayos X
  1.8.6. Métodos utilizados para determinar el tamaño de los virus
1.9. Fisiología y Química de los Virus
  1.9.1. Características observadas en los ácidos nucleico en forma
    aislada
  1.9.2. Fundamentos bioquímicos celulares
1.10. Mecanismo de síntesis proteica celular.
1.11. Clasificación antigua de los Virus
INTRODUCCIÓN
  Los  virus no son organismos celulares
  Utilizan organelos y moléculas de la célula
   para sus funciones.
  Contienen toda la información necesaria
   para reproducirse.
  El elemento viral es el genoma.
  DNA o RNA, dependiendo del tipo de virus.
 Obligado crecimiento intracelular.

 Dependencia estructural de la célula
  hospedadora.

 Son parásitos estrictos

 No poseen enzimas metabólicas,
  necesitan del metabolismo celular.
Virología: definición


   Rama de la microbiología



   Estudio de los virus y las
enfermedades que éstos causan.
VIRUS
VIRUS
Los virus tienen un ciclo de vida de dos
fases:
1.- Extracelular  se denomina Virión.
2.- Intracelular  Virus esta en la cápside
proteica y en el interior de la célula infectada.
Latencia.
El material genético de un retrovirus es
ARN,posee además, una enzima ADN
polimerasa, Transcriptasa      Inversa   o
Retrotranscriptasa, que puede utilizar el
ARN vírico como molde para fabricar ADN.
El ADN vírico puede integrarse por sí
mismo en el genoma de la célula huésped.
Historia de la virologia
 Dimitri   Ivanowsky

  ◦ Demostró que el agente
    causante       de       la
    enfermedad      no    era
    retenido por un filtro de
    porcelana utilizado para
    remover bacterias.
Martinus   Beijerinck

    Agente causante más
     pequeño que una
     bacteria.
    Acuño el término Virus
FriederichLoeffler y
 Paul Frosch
    Agente causante no
     podía ser retenido por
     los filtros para retener
     bacterias.
 Vilhem Ellerman y Olaf Bang
  ◦ Identificó virus como agentes
    causante de leucemia
 Peyton Rous
  ◦ Virus como agentes
    causantes de tumores
    cancerosos sólidos
  ◦ “Rous Sarcoma Virus”
 Frederick Twort
  ◦ 1915
  ◦ Describió un virus
  ◦ Virus de la viruela
 Felix   d’ Hérelle
  ◦ 1917
  ◦ Acuño el término bacteriofago
     Habilidad de formar placas de
      lisis en sembrados de bacterias
      en placas Petri.
MICROSCOPIO
Ruska y knel (1931)
                           Inventan el microscopio
                            electrónico
                           Permite     comprobar la
                            existencia de los virus y
  MICROSCOPIO OPTICO
                            apreciar su morfología.

                          Good Pasteur
                           Comprueba que algunos
                            virus son capaces de
                            reproducirse en el embrión
                            de pollo
MICEROSCOPIO ELECTONICO
 Frederick Twort
  ◦ Describió un virus
  ◦ Virus de la viruela
 Felix   d’ Hérelle
  ◦ Acuño el término bacteriofago
En 1955 Stanley,
Se logra la cristalización
del virus del mosaico del
tabaco.



En      1950         Jack
Debruck,      Inicia   los
estudios      con      los
bacteriófagos.
En 1957 Alexat y Jean
Linneman,
Descubren la proteína inducida
por los virus en las células
invadidas por ella, esta proteína
inhibe el crecimiento de las
células malignas o tumorales.

En 1975 y 1984 tres
investigadores
Descubren    los    anticuerpos
monoclonales. Esto sirvió para
poder conocer el tamaño
aproximado de los virus.
Definición de virus
Son   entidades submicroscópicas capaces de
 introducirse en células vivas específicas y
 multiplicarse en el interior de esta. (Dogma
 indispensable).
Partícula
◦ Ácido nucleico
◦ Capa de proteínas
  Cápsula
  Capsómeros
◦ Parásito celular obligado
◦ Pequeño
◦ Infeccioso
Los virus actúan en dos formas distintas:

1.- Reproduciéndose en el interior de la célula
infectada

2.- Uniéndose al material genético de la célula
A los virus se pueden considerar como:



1.    Agentes   infecciosos      van   a    producir
     enfermedades .


 2. Agentes Genéticos  alteran el material hereditario
 de la célula huésped.
METODOS FISICOS Y QUIMICOS EMPLEADOS PARA EL
             ESTUDIO DE LOS VIRUS:




 Se obtenen virus en
 forma pura, libres de         utilizando sustancias
 otros microorganismos     como antibióticos que
 como         bacterias,   sirven para separar virus
 hongos, etc.              de bacterias
1. MEMBRANA DE COLODION




  Es un método físico permite   ej. El vírus de La encefalitis
  conocer el tamaño que tiene        28um, aftosa 22um,
   los virus aprovechando su        parvovirus 16-32um
        diminuto tamaño
2. METODOS DE CENTRIFUGACION




                                         para lo cual se
                                          aprovecha la
  Sirve para                              velocidad de
                consiste en obtener
   purificar                           sedimentación en
               concentrados víricos
  los virus                           el tubo de los virus
                                        y las fuerzas de
                                         centrifugación
3. CULTIVOS HISTICOS


                                                       introducidas en
                                                       un medio de
 sirven para multiplicar a los                                                 cultivos a base de
                                                       nutrición     que
virus; para lo cual se                                                           fragmentos de
                                                       contienen
aprovechado la posible                                                         tejidos, órganos o
                                                       antibióticos,
afinidad hística de los virus                                                     células puras
                                                       antimicóticos
                                                       hidratos       de
                                                       carbono,
                                                       vitaminas       y
                                                       minerales, etc




                                                                              Eje: el virus de la
    Cultivo de A. pleuropneumoniae en medios sólidos. 2 A:                  aftosa tiene afinidad
    colonias en agar chocolate. 2B: colonias en agar PPLO
    enriquecido con NAD; 2C: satelitismo en agar sangre. 2D.
                                                                               por las células
    Efecto CAMP; 2E: colonias hemolíticas en la presencia sangre.          linguales del bovino,
4. ADAPTACIÓN VÍRICA A EMBRIÓNES DE
    POLLOS


                                                Eje. virus de la aftosa
                                                 ha sido adaptado al
                                                 embrión de pollo, y
Se obtienen virus en grandes cantidades virus    mediante la técnica
     que se los a podido adaptar a una          de pases sucesivos se
 multiplicación dentro del embrión de pollo         los ha logrado
                                                 atenuar en cuanto a
                                                      virulencia
PRUEBAS SEROLOGICAS



 consisten en una                                             cuando se investiga
                                  cuando se investiga a la
reacción antígeno                                                 anticuerpos
                                  partícula vírica se llama
   anticuerpo                                                   serológicos se
                                          Directa
   especifico,                                                  llama Indirecta




                    Fijación, Inmunofluorecencia en                 Pruebas
                    placas, Elisa en pocillos,                    realizadas en
                    Inmunodifución, Neutralización              suero serológico:
                    (antígeno - anticuerpo)
BRUCELOSIS: Rosa de Bengala
 modificado (Dilución 75 µl de suero
 problema / 25 µl de Rosa de Bengala).
Ultrafiltración



                        sirve para conocer el tamaño de
se obtienen            los virus por lo que se a utilizado
virus puros               la membrana de colodión




                                               elaborados a base de
                                             nitrocelulosa o colodión
                                         disuelto en sustancias solventes
                                         orgánicas como el éter, alcohol
                                                acético entre otros.
Dispersión               de luz:

 Consiste en que una
  suspensión de virus
expuesta a la acción de                   Depende del
un rayo de luz incidente             volumen y el tamaño
este dispersa otro rayo                 de las partículas
 de luz en un grado tal              víricas en suspensión
Electroforesis


                                    mide la velocidad de
   método empleado para la            migración de las
 obtención, purificación de la      partículas víricas a un
proteína y estudio de los virus.      campo eléctrico
                                        determinado




                                     dependiendo de las cargas
                                      positivas o negativas que
                                        posean estas y de la
                                   disociación electrolítica de los
                                      grupos ácidos o básicos
Método de sedimentación inducida en
         centrifuga de alta velocidad


Permite separar a         se aplican sustancias de alta densidad como
los virus de otros        la glicerina, sacarosa, sales de alta densidad:
  componentes              cloruro de cesio, sulfato de cesio, cloruro
  dentro de una                             de rubidio.
  solución vírica
                                                                              separa a los virus en
                                                                              forma de estratos o
                                                                             copas de acuerdo a su
                                                                             densidad y viscosidad
                                                                            de las partículas víricas.
    Entre las enzimas
                                  Adición de enzimas.- se
tenemos las nucleasas
                                 aplican cantidades adecuadas
como la ribonucleasa y
                                 de enzimas para no alterar o
 la desoxiribonucleasa;
                                  dañar la estructura de los
   también la tripsina
                                             virus.
Método de emulsificacion



Sirvió para conocer si    utiliza sustancias orgánicas como: el
los virus poseen en su      éter y cloroformo en cantidades
  envoltura externa      adecuadas: 20% por 30 minutos a 4° C
   lípidos o grasas               en agitación constante
Método             de adición de enzimas



  Se añaden virus a las                    Encimas como:
  enzimas, virus puros                        nucleasas y
haciendo un tratamiento                     proteasas para
       adecuado                            su purificación.




                                               Tripsina




                                       sirven para separar a las células
                                         del tejido conectivo o tejido
                                      intracelular utilizando enzimas al
                                               0.125% o 0.25%.
FORMAS, TAMAÑOS Y
ESTRUCTURA DE LOS VIRUS
ESTRUCTURA DE LOS VIRUS

   Capside: Capa que contiene el genoma
  nucléico ácido.
  Capsomeros: Aglomerados de polipeptídos
  que están en la superficie del icosaédricas de
  giro de partículas,
  La envoltura: Membrana que contiene el
  lipido que rodea algunos giros de las
  partículas.
 Nucleocapsíde:       Envoltura proteica viral.

 Subunidad: Cadena polipeptídica viral doblada.

 La unidad de organización: Unidades
  estructurales.

 Vírion: Partícula viral completa e infecciosa.

 Vírus defectuoso: Partícula viral funcionalmente
  deficiente de algun aspecto de replicacion.
Ejemplo de virus de
geometria icosaedrica.
A virus sin membrana
B virus con membrana
1 Capside
2 Acido Nucleico
3 Capsomero
4 Nucleocapside
5 Virione
6 Rivestimento proteico
7 Rivestimento glicoproteic
Cuerpos                   Partícula vírica en forma
elementales                        aislada




Agregados
virales




 Conjunto de partículas
        víricas
1.- Virus de forma circular o
                         redonda:




                            Afectan
  Vesículas                                            Helicoidal
              Form                              a
                     a                     Form

   Rabia                 Animales
                                                        Rabdovirus
Estomatitis              Hombre
                                          Fo              ARN
 vesicular                                  rm
                                                 a

                                                     Filamentosa



                                                      Newcastle
                                                      moquillo
                                  Moquillo canino      canino.
2.- Forma de   Afecta     Vegetales
   poliedro




                              Forma
                        Varilla o bastón
                        cilindro hueco
3.- Forma
            Afecta   Insectos
esferoide
bacteriófagos




3.- Forma raqueta


                    Espermatozoide, con cabeza y
                     cola; son los bacteriófagos.
DIMENSIONES DE LOS VIRUS:
                       1.- Virus pequeños (50 um)




                             Parvovirus 15-
                             30um

                                                    Poliomielitis 37 um

                   2.- Virus medianos (50-200 um)




peste aviar de 70um,                      newcastle de 150 -180um
3.- Virus grandes
   200-300 um


             Familia poxviridae




          viruela de los animales.
Tamaño: 20 a 300 nm de diámetro
(tienden a la forma esférica):
   < 25 nm
   180-200 nm
   > 250 nm
MÉTODOS PARA DETERMINAR EL
   TAMAÑO DE LOS VIRUS

          Usan               Filtros de porosidad
                                   conocida




                              Tinción negativa
        técnicas
                              Tinción positiva:



                                    sedimentación
                   calculo          de las partículas
                                         víricas
RMINOS RELACIONADOS CON LOS VIRUS


             Encefalopatías espongiformes como el Scrapie en
  VIROIDES
                                corderos.




                                Epilepsia,
   PRION
                Eemencia senil el kuru, Esclerosis múltiple.
ESTRUCTURA DE LOS
VIRUS
   


  1.- El microscopio de alta resolución

   
VIRUS
                 ENVUELTOS




                               Herpesvirus
Ortomixovirus,




                    Poxvirus
 
         VIRUS
                                      Simetría Helicoidal
       DESNUDOS



                                  Simetría Cúbica

    Simetría Binaria o Compleja
            se desconoce
2.- Aparato de disfracción de rayos X




  Queda establecido los detalles de la morfología y
             estructura de los virus.
ácido nucleico + cápside viral




                                   Nucleocápside


                                                                     Peplómeros
  Cápside viral

                                     Estructura
                                                                 Forma de espícula,
nucleico + proteínas. 
                                                               parte externa del virus



                                     Capsómero

                         Cubierta proteica, hacia la parte central
                                        del virus
FORMAS DE PRESENTACIÓN DE LOS ÁCIDOS
         NUCLEICOS DE ACUERDO AL NÚMERO DE
           FILAMENTOS VIRUS QUE AFECTAN A




 Vegetales                               Bacterianos
ARN único o          hombre y             ARN doble
   doble             animales
                  ADN único o doble
                  ARN único o doble
CLASIFICACIÓN DE LOS VIRUS
Atendiendo      al   tipo   de   ácido
  nucleico:
   Tipo I: ADN bicatenario, es decir,
    de dos hebras de ADN.
   Tipo II: ADN monocatenario, es
    decir, de una hebra de ADN.
   Tipo III: ARN binatenario. Se
    transcribe de ARN a ARN
    mensajero.
   Tipo IV: ARN monocatenario (+).
    No es necesaria su transcripción. Se
    lee directamente como ARN
    mensajero.
   Tipo V: ARN monocatenario (-). El
    ARN vírico debe ser transcrito a
    ARN mensajero.
   Tipo VI: ARN monocatenario (+). El
    ARN es transcrito a ADN
    utilizando una enzima llamada
    tanscriptasa               inversa.    Virus de la gripe. Presenta envoltura
    Posteriormente, el ADN sintetizado
    es transcrito a ARN.
Atendiendo a la forma de la
  cápsida del virus:
 Virus helicoidales: cápsidas
  alargadas,       donde        los
  capsómeros se disponen de
  forma helicoidal en torno al
  ácido nucleico. Estos virus
  infectan células vegetales.
 Virus               (poliédricos)
  icosaédricos:            cápsidas
  redondeadas con capsómeros
  triangulares.     Estos     virus
  infectan células animales.
 Virus mixtos, o complejos:
  cápsidas con una zona
  icosaédrica, seguida de otra
  zona helicoidal. estos virus
                                      Virus helicoidal del mosaico del tabaco
  infectan bacterias.
Atendiendo a la célula
  que infectan:
 Virus vegetales: atacan
  células        vegetales.
  Cápsidas de forma
  helicoidal.
 Virus animales: atacan
  células         animales.
  Cápsidas de forma
  icosaédrica.
 Virus        bacterianos,
  bacteriófagos o, fagos:
  atacan         bacterias.
  Cápsidas de forma           Virus bacteriófagos
  mixta.
Atendiendo
a la envoltura
lipídica:

Virus  desnudos:
 sin envoltura

Virus           con
 envoltura
CLASIFICACIÓN DE LOS VIRUS
 Grupo de           Lugar de       Tamaño      Cubierta    Simetría
   virus          maduración        aprox.
                y ácido nucleico
Poxvirus       Citoplasma    ADN      200-        Si      Compleja
Herpesvirus    Núcleo       ADN     300um         Si      Cúbica
Adenovirus     Núcleo       ADN     110um         No      Cúbica
Papovavirus    Núcleo       ADN    70-80um        No      Cúbica
Mixovirus      Citoplasma    ARN   40-50um        Si      Helicoidal
Arbovirus      Citoplasma    ARN       80-      Si - no   Cúbica-
Picornavirus   Citoplasma    ARN    200um         No      helicoidal
Reovirus       Citoplasma    ARN   40-80um        No      Icosaédrica
Picornavirus   Núcleo       ADN    15-35um         ?      Cúbica
No             ---------    ---     75um         ----     Icosaédrica
clasificados                       20-24um                  ------------
                                     -------
PROPIEDADES DE ALGUNOS
         MICROORGANISMOS CON RELACIÓN A LOS
                       VIRUS


     Escala       Crecimiento    División   ADN   Susceptibilidad   Susceptibilida
 microbiológica    del medio     binaria     y        a los         d al interferón
                    artificial              ARN    antibióticos

Bacterias              +            +       +           +                 -
Micoplasma             +            +       +           +                 -
s                      +            +       +           +                 -
Rikettsias             +            +       +           +                 +
Clamidias              -            -       -           -                 +
Virus
Virus que contienen ADN
Parvoviridae              N   22      ADN lineal ss Kilham de la
                                                    rata
Adenoviridae              N   70-90   ADN lineal ds Adenovirus
                                                    humano
Iridoviridae              N   130-300 ADN lineal ds Tipula
                                                     iridescent
Hepadnaviridae            E   42      ADN circular Hepatitis B
                                      ds
Papovaviridae             N   45-55   ADN circular Polyoma
                                      ds
Herpesviridae             E   150-200 ADN lineal ds Herpes
                                                    simplex
Poxviridae                E   200-390 ADN lineal ds Sarampión
Virus que contienen ARN
Calciviridae                          N   40        ADN lineal ss   Norwalk

Picornaviridae                        N   22-30     ADN lineal ss   Polio

Reoviridae                            N   60-80     ADN lineal ds   Rotavirs

Arenaviridae                          E   50-300    ADN lineal ss   Fiebre
                                                                    Lassa
Filoviridae                           E   800-900   ADN lineal ss   Ebola
                                          x 80
Bunyaviridae                          E   100       ADN lineal ss   Encefalitis
                                                                    California
Coronaviridae                         E   60-220    ADN lineal ss   Coronavirus
                                                                    OC43


       Ss una hebra, ds doble hebra
74
75
FISIOLOGÍA O QUÍMICA FUNCIONAL
          DE LOS VIRUS
Nucleocápside:
Asociación del núcleo de la proteína y cápside
 viral, dentro esta el Ac. Nucleico que es donde
 reside la capacidad infectante.
Informacion genetica de los acidos nucleicos
virales para su replicación:
1.Para la replicación del propio tipo de ácido
nucleído.
2.Para la producción de subcomponentes del
virus.
3.Para la producción de enzimas, cumple un
papel muy importante dentro de este proceso
CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS EN LOS
    ÁCIDOS NUCLEICOS EN FORMA AISLADA




                    b.- Clase de huésped al que infectan es
a.- Inefectividad
                    amplia:
baja en relación
                    Hay     multiplicación baja y los virus
con la partícula
                    resultantes      no    pueden       seguir
  vírica entera
                    replicándose Ejm: células del pollo
e.- La inefectividad ,no
d.- Los que son Inactivados por el        pueden ser neutralizados
calor,    determinan    una     mayor     por             anticuerpos
resistencia, que las partículas víricas   (neutralizantes) presentes
en forma intacta.                         en los sueros sanguíneos
FUNDAMENTOS BIOQUÍMICOS
       CELULARES
Síntesis proteica a partir de
       Función                aminoácidos, mediante el
                              enlace de poli péptidos.




 
                                                              Constituidas:
                                                               Adenina,
                   Contienen en el núcleo
    La célula                                                  guanina,
                 celular dos macromoléculas
                                                               citosina y
                         ADN y ARN
                                                                Timina.
Pueden estar ordenadas en
                                            grupos de tres o múltiplos de
                                            tres.


ARN   Cuatro tipos de bases
         nitrogenadas:

                              adenina, guanina
                              citosina y uracilo




                                              Proporcionan       las
                                              letras para formar las
                                              palabras, códigos o
                                              modelos
                                               
MECANISMO DE SÍNTESIS
  PROTEICA CELULAR
Las bases nitrogenadas           La célula lo transcribe,
  que conforman el                se copia la serie de
        ADN                         ARN mensajero




                         Se requiere de la enzima ARN polimerasa,
                                             (núcleo).
MOLÉCULA DE                                            viaja al
  (ARN)M FORMADA                                       citoplasma




                                                         lleva la
Se pone en contacto
                            Para la síntesis          información
 con los ribosomas
                             de proteínas               genética
  (poliribosomas)




                      ARN mensajero es         Hace reaccionar con
     lleva la          activado por una        otras moléculas de
 información             molécula de           ARN que vienen
   genética,           trifosfato (ATP)        recorriendo         el
                                               citoplasma celular;

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Virologiacapituloi 1-120124144007-phpapp02

  • 1. UNIVERSIDAD DE CUENCA Escuela de Medicina Veterinaria y Zootecnia VIROLOGÍA E INMUNOLOGÍA CATEDRATICO: Dr. Félix Chuzán
  • 2. Capitulo I 1.1. Introducción 1.1.1. Objetivos 1.1.2.Desarrollo de la materia 1.2. Virología y si relación con las demás ciencias 1.3. Historia 1.4. Conceptos acerca de los virus 1.4.1. Otras definiciones 1.5. Métodos de purificación de los virus 1.6. Características generales 1.7. Términos relacionados
  • 3. 1.8. Morfología de los virus 1.8.1. Dimensiones de los virus 1.8.2. Estructura de los virus; componentes 1.8.3. Virus no envueltos 1.8.4. Virus envueltos 1.8.5. Microscopio electrónico y Aparato de difracción de rayos X 1.8.6. Métodos utilizados para determinar el tamaño de los virus 1.9. Fisiología y Química de los Virus 1.9.1. Características observadas en los ácidos nucleico en forma aislada 1.9.2. Fundamentos bioquímicos celulares 1.10. Mecanismo de síntesis proteica celular. 1.11. Clasificación antigua de los Virus
  • 4. INTRODUCCIÓN  Los virus no son organismos celulares  Utilizan organelos y moléculas de la célula para sus funciones.  Contienen toda la información necesaria para reproducirse.  El elemento viral es el genoma.  DNA o RNA, dependiendo del tipo de virus.
  • 5.  Obligado crecimiento intracelular.  Dependencia estructural de la célula hospedadora.  Son parásitos estrictos  No poseen enzimas metabólicas, necesitan del metabolismo celular.
  • 6. Virología: definición Rama de la microbiología Estudio de los virus y las enfermedades que éstos causan.
  • 9. Los virus tienen un ciclo de vida de dos fases: 1.- Extracelular  se denomina Virión. 2.- Intracelular  Virus esta en la cápside proteica y en el interior de la célula infectada. Latencia.
  • 10. El material genético de un retrovirus es ARN,posee además, una enzima ADN polimerasa, Transcriptasa Inversa o Retrotranscriptasa, que puede utilizar el ARN vírico como molde para fabricar ADN. El ADN vírico puede integrarse por sí mismo en el genoma de la célula huésped.
  • 11. Historia de la virologia
  • 12.  Dimitri Ivanowsky ◦ Demostró que el agente causante de la enfermedad no era retenido por un filtro de porcelana utilizado para remover bacterias.
  • 13. Martinus Beijerinck  Agente causante más pequeño que una bacteria.  Acuño el término Virus
  • 14. FriederichLoeffler y Paul Frosch  Agente causante no podía ser retenido por los filtros para retener bacterias.
  • 15.  Vilhem Ellerman y Olaf Bang ◦ Identificó virus como agentes causante de leucemia  Peyton Rous ◦ Virus como agentes causantes de tumores cancerosos sólidos ◦ “Rous Sarcoma Virus”
  • 16.  Frederick Twort ◦ 1915 ◦ Describió un virus ◦ Virus de la viruela  Felix d’ Hérelle ◦ 1917 ◦ Acuño el término bacteriofago  Habilidad de formar placas de lisis en sembrados de bacterias en placas Petri.
  • 18. Ruska y knel (1931)  Inventan el microscopio electrónico  Permite comprobar la existencia de los virus y MICROSCOPIO OPTICO apreciar su morfología. Good Pasteur  Comprueba que algunos virus son capaces de reproducirse en el embrión de pollo MICEROSCOPIO ELECTONICO
  • 19.  Frederick Twort ◦ Describió un virus ◦ Virus de la viruela  Felix d’ Hérelle ◦ Acuño el término bacteriofago
  • 20. En 1955 Stanley, Se logra la cristalización del virus del mosaico del tabaco. En 1950 Jack Debruck, Inicia los estudios con los bacteriófagos.
  • 21. En 1957 Alexat y Jean Linneman, Descubren la proteína inducida por los virus en las células invadidas por ella, esta proteína inhibe el crecimiento de las células malignas o tumorales. En 1975 y 1984 tres investigadores Descubren los anticuerpos monoclonales. Esto sirvió para poder conocer el tamaño aproximado de los virus.
  • 22. Definición de virus Son entidades submicroscópicas capaces de introducirse en células vivas específicas y multiplicarse en el interior de esta. (Dogma indispensable).
  • 23. Partícula ◦ Ácido nucleico ◦ Capa de proteínas Cápsula Capsómeros ◦ Parásito celular obligado ◦ Pequeño ◦ Infeccioso
  • 24. Los virus actúan en dos formas distintas: 1.- Reproduciéndose en el interior de la célula infectada 2.- Uniéndose al material genético de la célula
  • 25. A los virus se pueden considerar como: 1. Agentes infecciosos  van a producir enfermedades . 2. Agentes Genéticos  alteran el material hereditario de la célula huésped.
  • 26. METODOS FISICOS Y QUIMICOS EMPLEADOS PARA EL ESTUDIO DE LOS VIRUS: Se obtenen virus en forma pura, libres de utilizando sustancias otros microorganismos como antibióticos que como bacterias, sirven para separar virus hongos, etc. de bacterias
  • 27. 1. MEMBRANA DE COLODION Es un método físico permite ej. El vírus de La encefalitis conocer el tamaño que tiene 28um, aftosa 22um, los virus aprovechando su parvovirus 16-32um diminuto tamaño
  • 28. 2. METODOS DE CENTRIFUGACION para lo cual se aprovecha la Sirve para velocidad de consiste en obtener purificar sedimentación en concentrados víricos los virus el tubo de los virus y las fuerzas de centrifugación
  • 29. 3. CULTIVOS HISTICOS introducidas en un medio de sirven para multiplicar a los cultivos a base de nutrición que virus; para lo cual se fragmentos de contienen aprovechado la posible tejidos, órganos o antibióticos, afinidad hística de los virus células puras antimicóticos hidratos de carbono, vitaminas y minerales, etc Eje: el virus de la Cultivo de A. pleuropneumoniae en medios sólidos. 2 A: aftosa tiene afinidad colonias en agar chocolate. 2B: colonias en agar PPLO enriquecido con NAD; 2C: satelitismo en agar sangre. 2D. por las células Efecto CAMP; 2E: colonias hemolíticas en la presencia sangre. linguales del bovino,
  • 30. 4. ADAPTACIÓN VÍRICA A EMBRIÓNES DE POLLOS Eje. virus de la aftosa ha sido adaptado al embrión de pollo, y Se obtienen virus en grandes cantidades virus mediante la técnica que se los a podido adaptar a una de pases sucesivos se multiplicación dentro del embrión de pollo los ha logrado atenuar en cuanto a virulencia
  • 31.
  • 32. PRUEBAS SEROLOGICAS consisten en una cuando se investiga cuando se investiga a la reacción antígeno anticuerpos partícula vírica se llama anticuerpo serológicos se Directa especifico, llama Indirecta Fijación, Inmunofluorecencia en Pruebas placas, Elisa en pocillos, realizadas en Inmunodifución, Neutralización suero serológico: (antígeno - anticuerpo)
  • 33. BRUCELOSIS: Rosa de Bengala modificado (Dilución 75 µl de suero problema / 25 µl de Rosa de Bengala).
  • 34. Ultrafiltración sirve para conocer el tamaño de se obtienen los virus por lo que se a utilizado virus puros la membrana de colodión elaborados a base de nitrocelulosa o colodión disuelto en sustancias solventes orgánicas como el éter, alcohol acético entre otros.
  • 35. Dispersión de luz: Consiste en que una suspensión de virus expuesta a la acción de Depende del un rayo de luz incidente volumen y el tamaño este dispersa otro rayo de las partículas de luz en un grado tal víricas en suspensión
  • 36. Electroforesis mide la velocidad de método empleado para la migración de las obtención, purificación de la partículas víricas a un proteína y estudio de los virus. campo eléctrico determinado dependiendo de las cargas positivas o negativas que posean estas y de la disociación electrolítica de los grupos ácidos o básicos
  • 37. Método de sedimentación inducida en centrifuga de alta velocidad Permite separar a se aplican sustancias de alta densidad como los virus de otros la glicerina, sacarosa, sales de alta densidad: componentes cloruro de cesio, sulfato de cesio, cloruro dentro de una de rubidio. solución vírica separa a los virus en forma de estratos o copas de acuerdo a su densidad y viscosidad de las partículas víricas. Entre las enzimas Adición de enzimas.- se tenemos las nucleasas aplican cantidades adecuadas como la ribonucleasa y de enzimas para no alterar o la desoxiribonucleasa; dañar la estructura de los también la tripsina virus.
  • 38. Método de emulsificacion Sirvió para conocer si utiliza sustancias orgánicas como: el los virus poseen en su éter y cloroformo en cantidades envoltura externa adecuadas: 20% por 30 minutos a 4° C lípidos o grasas en agitación constante
  • 39. Método de adición de enzimas Se añaden virus a las Encimas como: enzimas, virus puros nucleasas y haciendo un tratamiento proteasas para adecuado su purificación. Tripsina sirven para separar a las células del tejido conectivo o tejido intracelular utilizando enzimas al 0.125% o 0.25%.
  • 41. ESTRUCTURA DE LOS VIRUS  Capside: Capa que contiene el genoma nucléico ácido.  Capsomeros: Aglomerados de polipeptídos que están en la superficie del icosaédricas de giro de partículas,  La envoltura: Membrana que contiene el lipido que rodea algunos giros de las partículas.
  • 42.  Nucleocapsíde: Envoltura proteica viral.  Subunidad: Cadena polipeptídica viral doblada.  La unidad de organización: Unidades estructurales.  Vírion: Partícula viral completa e infecciosa.  Vírus defectuoso: Partícula viral funcionalmente deficiente de algun aspecto de replicacion.
  • 43. Ejemplo de virus de geometria icosaedrica. A virus sin membrana B virus con membrana 1 Capside 2 Acido Nucleico 3 Capsomero 4 Nucleocapside 5 Virione 6 Rivestimento proteico 7 Rivestimento glicoproteic
  • 44.
  • 45. Cuerpos Partícula vírica en forma elementales aislada Agregados virales Conjunto de partículas víricas
  • 46. 1.- Virus de forma circular o redonda: Afectan Vesículas Helicoidal Form a a Form Rabia Animales Rabdovirus Estomatitis Hombre Fo ARN vesicular rm a Filamentosa Newcastle moquillo Moquillo canino canino.
  • 47. 2.- Forma de Afecta Vegetales poliedro Forma Varilla o bastón cilindro hueco
  • 48. 3.- Forma Afecta Insectos esferoide
  • 49. bacteriófagos 3.- Forma raqueta Espermatozoide, con cabeza y cola; son los bacteriófagos.
  • 50. DIMENSIONES DE LOS VIRUS: 1.- Virus pequeños (50 um) Parvovirus 15- 30um Poliomielitis 37 um 2.- Virus medianos (50-200 um) peste aviar de 70um, newcastle de 150 -180um
  • 51. 3.- Virus grandes 200-300 um Familia poxviridae viruela de los animales.
  • 52. Tamaño: 20 a 300 nm de diámetro (tienden a la forma esférica):  < 25 nm  180-200 nm  > 250 nm
  • 53. MÉTODOS PARA DETERMINAR EL TAMAÑO DE LOS VIRUS Usan Filtros de porosidad conocida Tinción negativa técnicas Tinción positiva: sedimentación calculo de las partículas víricas
  • 54. RMINOS RELACIONADOS CON LOS VIRUS Encefalopatías espongiformes como el Scrapie en VIROIDES corderos. Epilepsia, PRION Eemencia senil el kuru, Esclerosis múltiple.
  • 55. ESTRUCTURA DE LOS VIRUS   1.- El microscopio de alta resolución  
  • 56. VIRUS ENVUELTOS Herpesvirus Ortomixovirus, Poxvirus
  • 57.   VIRUS Simetría Helicoidal DESNUDOS Simetría Cúbica Simetría Binaria o Compleja se desconoce
  • 58.
  • 59. 2.- Aparato de disfracción de rayos X Queda establecido los detalles de la morfología y estructura de los virus.
  • 60. ácido nucleico + cápside viral Nucleocápside Peplómeros Cápside viral Estructura Forma de espícula, nucleico + proteínas.  parte externa del virus Capsómero Cubierta proteica, hacia la parte central del virus
  • 61. FORMAS DE PRESENTACIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS DE ACUERDO AL NÚMERO DE FILAMENTOS VIRUS QUE AFECTAN A Vegetales Bacterianos ARN único o hombre y ARN doble doble animales ADN único o doble ARN único o doble
  • 63. Atendiendo al tipo de ácido nucleico:  Tipo I: ADN bicatenario, es decir, de dos hebras de ADN.  Tipo II: ADN monocatenario, es decir, de una hebra de ADN.  Tipo III: ARN binatenario. Se transcribe de ARN a ARN mensajero.  Tipo IV: ARN monocatenario (+). No es necesaria su transcripción. Se lee directamente como ARN mensajero.  Tipo V: ARN monocatenario (-). El ARN vírico debe ser transcrito a ARN mensajero.  Tipo VI: ARN monocatenario (+). El ARN es transcrito a ADN utilizando una enzima llamada tanscriptasa inversa. Virus de la gripe. Presenta envoltura Posteriormente, el ADN sintetizado es transcrito a ARN.
  • 64. Atendiendo a la forma de la cápsida del virus:  Virus helicoidales: cápsidas alargadas, donde los capsómeros se disponen de forma helicoidal en torno al ácido nucleico. Estos virus infectan células vegetales.  Virus (poliédricos) icosaédricos: cápsidas redondeadas con capsómeros triangulares. Estos virus infectan células animales.  Virus mixtos, o complejos: cápsidas con una zona icosaédrica, seguida de otra zona helicoidal. estos virus Virus helicoidal del mosaico del tabaco infectan bacterias.
  • 65. Atendiendo a la célula que infectan:  Virus vegetales: atacan células vegetales. Cápsidas de forma helicoidal.  Virus animales: atacan células animales. Cápsidas de forma icosaédrica.  Virus bacterianos, bacteriófagos o, fagos: atacan bacterias. Cápsidas de forma Virus bacteriófagos mixta.
  • 66. Atendiendo a la envoltura lipídica: Virus desnudos: sin envoltura Virus con envoltura
  • 67. CLASIFICACIÓN DE LOS VIRUS Grupo de Lugar de Tamaño Cubierta Simetría virus maduración aprox. y ácido nucleico Poxvirus Citoplasma ADN 200- Si Compleja Herpesvirus Núcleo ADN 300um Si Cúbica Adenovirus Núcleo ADN 110um No Cúbica Papovavirus Núcleo ADN 70-80um No Cúbica Mixovirus Citoplasma ARN 40-50um Si Helicoidal Arbovirus Citoplasma ARN 80- Si - no Cúbica- Picornavirus Citoplasma ARN 200um No helicoidal Reovirus Citoplasma ARN 40-80um No Icosaédrica Picornavirus Núcleo ADN 15-35um ? Cúbica No --------- --- 75um ---- Icosaédrica clasificados 20-24um ------------ -------
  • 68. PROPIEDADES DE ALGUNOS MICROORGANISMOS CON RELACIÓN A LOS VIRUS Escala Crecimiento División ADN Susceptibilidad Susceptibilida microbiológica del medio binaria y a los d al interferón artificial ARN antibióticos Bacterias + + + + - Micoplasma + + + + - s + + + + - Rikettsias + + + + + Clamidias - - - - + Virus
  • 69. Virus que contienen ADN Parvoviridae N 22 ADN lineal ss Kilham de la rata Adenoviridae N 70-90 ADN lineal ds Adenovirus humano Iridoviridae N 130-300 ADN lineal ds Tipula iridescent Hepadnaviridae E 42 ADN circular Hepatitis B ds Papovaviridae N 45-55 ADN circular Polyoma ds Herpesviridae E 150-200 ADN lineal ds Herpes simplex Poxviridae E 200-390 ADN lineal ds Sarampión
  • 70. Virus que contienen ARN Calciviridae N 40 ADN lineal ss Norwalk Picornaviridae N 22-30 ADN lineal ss Polio Reoviridae N 60-80 ADN lineal ds Rotavirs Arenaviridae E 50-300 ADN lineal ss Fiebre Lassa Filoviridae E 800-900 ADN lineal ss Ebola x 80 Bunyaviridae E 100 ADN lineal ss Encefalitis California Coronaviridae E 60-220 ADN lineal ss Coronavirus OC43 Ss una hebra, ds doble hebra
  • 71.
  • 72.
  • 73.
  • 74. 74
  • 75. 75
  • 76. FISIOLOGÍA O QUÍMICA FUNCIONAL DE LOS VIRUS
  • 77. Nucleocápside: Asociación del núcleo de la proteína y cápside viral, dentro esta el Ac. Nucleico que es donde reside la capacidad infectante.
  • 78. Informacion genetica de los acidos nucleicos virales para su replicación: 1.Para la replicación del propio tipo de ácido nucleído. 2.Para la producción de subcomponentes del virus. 3.Para la producción de enzimas, cumple un papel muy importante dentro de este proceso
  • 79. CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS EN LOS ÁCIDOS NUCLEICOS EN FORMA AISLADA b.- Clase de huésped al que infectan es a.- Inefectividad amplia: baja en relación Hay multiplicación baja y los virus con la partícula resultantes no pueden seguir vírica entera replicándose Ejm: células del pollo
  • 80. e.- La inefectividad ,no d.- Los que son Inactivados por el pueden ser neutralizados calor, determinan una mayor por anticuerpos resistencia, que las partículas víricas (neutralizantes) presentes en forma intacta. en los sueros sanguíneos
  • 82. Síntesis proteica a partir de Función aminoácidos, mediante el enlace de poli péptidos.   Constituidas: Adenina, Contienen en el núcleo La célula guanina, celular dos macromoléculas citosina y ADN y ARN Timina.
  • 83. Pueden estar ordenadas en grupos de tres o múltiplos de tres. ARN Cuatro tipos de bases nitrogenadas: adenina, guanina citosina y uracilo Proporcionan las letras para formar las palabras, códigos o modelos  
  • 84. MECANISMO DE SÍNTESIS PROTEICA CELULAR
  • 85. Las bases nitrogenadas La célula lo transcribe, que conforman el se copia la serie de ADN ARN mensajero Se requiere de la enzima ARN polimerasa, (núcleo).
  • 86. MOLÉCULA DE viaja al (ARN)M FORMADA citoplasma lleva la Se pone en contacto Para la síntesis información con los ribosomas de proteínas genética (poliribosomas) ARN mensajero es Hace reaccionar con lleva la activado por una otras moléculas de información molécula de ARN que vienen genética, trifosfato (ATP) recorriendo el citoplasma celular;