Tuberculosis.exp.mayo 2012

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA

Centro Internacional de Zoonosis

TUBERCULOSIS BOVINA

Expositores: Dr. Franklin Román Cárdenas
Dra. Jhuliana Luna Herrera

Quito- Ecuador
Abril 2012

INTRODUCCIÓN

• La Tuberculosis bovina (TBB) es una importante
zoonosis, causada por Mycobacterium bovis .

• Importancia económica debido a la disminución
de peso 36%, disminución en la producción láctea
13% y pérdidas en tasas de reproducción 12%; y,
de salud pública ( El 2% de las infección
tuberculosa pulmonar y el 9,4 % extrapulmonar,
en el hombre son causadas por M. bovis ).

Fuente: Acha & Szyfres, 2001; Kantor & Ritacco, 2006.; Suazo et al.,
2003

www.prensalibre.com

HISTORIA

Tuberculosis en
América Latina

Palomino, 2007 www.biografiasyvi
das.com

Migración de europeos

Agricultura primitiva y
domesticación del ganado

es.wikipedia.org/
Período paleolítico wiki/Historia_de_l
a_tuberculosis

HISTORIA

Año Acontecimiento
1882 Descubrimiento de M. tuberculosis por Koch.

1883 Zopf propuso el nombre “Bacterium tuberculosis”.
www.biografiasyvi
1896 Lehman & Neumann asignaron las especies al género das.com
Mycobacterium.

Finales del Reconocimiento de M. bovis por T. Smith.
Siglo XIX
1909 Se confirma bacteriológicamente el primer caso de
tuberculosis pulmonar bovina.

1970 El nombre fue oficialmente asignado por Karlson &
Lessel.

es.wikipedia.org/
wiki/Historia_de_l
Fuente: Rothschild B, 2001
a_tuberculosis

E T I O LO G Í A

GÉNERO MYCOBACTERIUM
MTC MOTT
M. tuberculosis Otras micobacterias
diferentes al Complejo
M. africanum Mycobacterium
M. bovis Tuberculosis.

M. canetti
M. bovis BCG
M. pinnipeddii
M. caprae
M. necroti

Fuente: Leâo et al., 2004.

E T I O LO G Í A

www.microbewiki.kenyon.edu/index.php/Myc es.wikipedia.org/wiki/Mycobacterium
obacterium_bovis _tuberculosis

E T I O LO G Í A . Estructura

http://es.scribd.com/doc/20179954/12-MYCOBACTERIUM

Hospederos de M. Bovis

www.prensalibre.com

Vías de Eliminación

http://gdrake.blogspot.com
www.prensalibre.com

Transmisión

http://gdrake.blogspot.com
www.engormix.com www.agrovetmarket.com Serrano J, 2009 www.prensalibre.com

SIGNOS CLÍNICOS Y LESIONES

Proaño Pérez, 2010 Cornell University College of Veterinary Medicine,
2010, tomado por UNAM, Tuberculosis Bovina.

PATOGENIA

COMPLEJO Bacilo --- Organismo
PRIMARIO Chancro de inoculación (Lesión
Foco latente primaria) Cura en el hombre
Bacilos en macrófagos libres
Ganglios linfáticos (Adenitis)

Generalización precoz inmediata
Vía linfática
Generalización precoz moderada o lenta o hemática Generalización precoz aguda

Tb perlada, Tb miliar
nodular PERIODO
aguda
SECUNDARIO
Tb miliar tardía, Tb
Diseminación por vía canicular pulmonar, acinosis
galopante, nefritis
TUBERCULOSIS CRÓNICA DE ÓRGANO
exudativa
(Lesiones características)

MUERTE

EPIDEMIOLOGÍA MUNDIAL

Países libres de tuberculosis: Australia, Islandia, Dinamarca, Suecia,
Noruega,…

Países con programas erradicación: Japón, Nueva Zelanda, EEUU,
México, algunos países de América Central y América de Sur.

En muchos países desarrollados se ha reducido o eliminado la TB
del ganado vacuno. (Bolsas de infección en la fauna del Canadá, el
Reino Unido, los Estados Unidos y Nueva Zelanda).

La prevalencia más elevada se registra en buena parte del
territorio de África y ciertas partes de Asia y las Américas.

Fuente: CFSPH, OIE, 2010

EPIDEMIOLOGÍA MUNDIAL

Mapa situacional de la tuberculosis bovina en 2008 (ene-jun A, jul-dic B) según la OIE.

EPIDEMIOLOGÍA EN LATINOAMÉRICA Y EL CARIBE

Se encuentra en la mayoría de países de Latinoamérica
y el Caribe (OIE, 2008)

Enfermedad Re-emergente, por aparecimiento de
nuevos casos (Ábalos & Retamal, 2004).

El 24% de la población bovina latinoamericana se
encuentra desprotegida (Gil & Samartino, 2001).

De aprox. 374 millones de ganado en producción, el 70
% se mantiene en áreas donde la infección por M. bovis
entre el ganado supera el 1%.

Fuente: Proaño & Benítez, 2011

EPIDEMIOLOGÍA EN ECUADOR

No se encuentra documentada, ni
cuantificada claramente.

No existe un programa que permita
estimar la prevalencia nacional, ni las
perdidas económicas.

Ecuador con prevalencia relativamente
alta (2006), pero con falta de reportes.


Estudios - CIZ
CANTONES PREVALENCIA
Otavalo, Espejo, El • 3,91 %.
Ángel y Cayambe Andino-Ashqui, 2001.
Mejía • 7,95 % (fincas
grandes)
• 3,40 % (fincas
medianas)
• 0,3 %(fincas
pequeñas). (Proaño-
Pérez et al., 2006)

PREVALENCIA REAL
7.13% en la misma zona en fincas grandes;
y, una tasa de incidencia anual de 1.7%.
(Proaño-Pérez et al., 2009)


1.Diagnóstico Directo
a. Macroscópico

b. Microscópico
c. Cultivo in
vitro
d. Pruebas
http://www.mycobacteria
Moleculares cultivo-demycobacterium-
tub/
http://www.bioscan.

http://www.guiatuberculosis.salud.gob
.mx/indre/interior/lab.mycobacteria.

2. Diagnóstico Indirecto
a. Skin Test

b. Prueba gamma-Interferón

c. Elisa Indirecto

d. Signos
http://www.sian.inia.gob.ve_a.htm

Diagnóstico Directo
a. Macroscopía

http://www.tuberculosis.bovina.preguntasyrespuestaspdf .

b. Microscopía: Baciloscopía

Las dos técnicas más comunes
son la tinción de Ziehl Neelsen y
la microscopía de fluorescencia

http://www.metodosdediagnostico/tuberculosis.pdf

Tinción de Ziehl-Neelsen
Colorante fucsina fenicada calentada, decolorada con ácido-
alcohol y contra teñida con azul de metileno.

http://www.cenavece.salud.go.mx/indre/interior/lab.mycobacteria.

Técnicas fluorocrómicas
Auramina-rodamina
Bacterias muestran
fluorescencia

amarilla anaranjada

Puede formar parejas o
grupos en forma de
cuerdas

http://www.oocites.diagnostico.tuberculosis.salud.htm.

Tiempo Máximo
Procedimiento Técnicas Tiempo para de Sensibilidad Especificidad
utilizado observar un campos
extendido observados

Coloració
Examen n de Ziehl-
24 H 15 min 300 22-80 % 99 %
Directo Neelsen

Coloració
Examen n
Directo Auramina/ 24 H 3 min 30 90-96 % 94-98 %
Rodamina

http://www.seimc.org/doc.tuberculosis.micobriologia/cap9a.pdf

REPORTE
Informe Tinción de Ziehl- Fluorocromo (x 250)
Neelsen(X1000)
No BAAR 0 0

Dudoso- 1-2 /300 campos (3 barridos) 1-2 / 30 campos (1 barrido)
repetir
Positivo (+) 1-9 /100 campos (1 barrido) 1-9 / 10 campos

Positivo (++) 1-9 /10 campos 1-9 / campo

Positivo 1-9 / campo 10-90 / campo
(+++)
Positivo >9 / campo >90 / campo
(++++)

http://www.uberculosis.bovinapdf-2

c. Cultivo in vitro

El pilar del diagnóstico de la TB se basa en la
identificación del agente causal

Medios sólidos clásicos.(Lowenstein-Jensen, Stonebrink y Middlebrook).

•Desarrollo lento entre 4 y 8 semanas.
•Se visualiza la morfología de las colonias.
•Se mejora crecimiento en incubación con un 5-10% de
CO2.

http://www.latat.org.ar/tuberculosis.htm.

Los medios líquidos
•Desarrollo más rápido de las micobacterias.
•No se aprecia la morfología de las colonias.

•Son de lectura automática o
semiautomática

•Basados en métodos radiométricos,
(BACTEC)

•Ó métodos colorimétricos (MGIT).

•Diagnóstico a 10 y 14 días

http://www.guiatuberculosis.salud.gob.mx/indre/interior/lab.mycobacteria.

Características de los medios

Medios Sensibilidad Especificidad

Medios sólidos 90 - 95% 90 -95%

Medios Líquidos 80 -95% 20 – 40%


Reporte del Cultivo
Contaminado Tubos inoculados con muestra contaminados

Negativo No se observan colonias

Positivo (+) De 20 a 100 colonias

Positivo (++) Más de 100 colonias sin cubrir toda la superficie
del medio.

Positivo (+++) Colonias incontables crecimiento confluente.


Muestras
ORIGEN RESPIRATORIO (Esputo, contenido gástrico, lavado bronquial y
broncoalveolar, biopsias endoscópicas o quirúrgicas).

NO RESPIRATORIAS (Orina, LCR, sangre, médula ósea).


Decontaminación de muestras
KUBICA N-acetil-L-cisteína (NALC) e D- suave. hasta al 3%. 15 min. más difundido EE UU.
(NaOH) 2%
TACQUET Y TISON Laurilsulfato sódico al 3% y D. suave. medios con huevo . utilizado en Europa.
NaOH al 1%

PETROFF NaOH D. agresiva. 15 min.
PETROFF NaOH D. agresiva.
al 4% min
15
KARLSON Fosfato trisódico al 13% y medios con huevo. Puede ser lesivo M. avium (CMA).
cloruro de benzalconio
LW -SUMIYOSHI A. sulfúrico al 4-5% Práctico en laboratorios con gran volumen de orinas.

CORPER Y UYEI A. oxálico al 5% Efectivo m.contaminadas con Pseudomonas y en la recuperación de
CMA a partir de heces.

SMITHWICK Cloruro de cetil-piridinio al D. suave. Para transporte de ms. 24 h de exposición. medios con
1% y ClNa al 2% huevo .


Decontaminación-Digestión CIZ
Eliminar
Esputo : 1 tubo , 2 ml centrifugar 10 min ., a 3000 rpm
sobrenadante
Hidróxido de sodio al 4%
Agitar 20 seg

Incubar 37 oC
20min
ag.c/5min
Centrifugar por
20 min

1-2 gotas rojo
fenol

HCL rosado a
amarillo

Homogenizar

http://www.diagnbaciloscop/lab.mycobacterias.html

Condiciones de Incubación

•La mayoría de las especies crecen a 35-37ºC.

•M. marinum, M. chelonae, M. haemphilum, M. ulcerans,
etc. temperatura de incubación óptima entre 25 y 33ºC.


Técnicas de Identificación
de Especie


Creci- Creci- Prueba %5 Preferencia Catalasa
Especie miento miento de la Reducción Pirazina- Ureasa NaCl de Oxígeno pH:7
en LJ en ST Niacina de Nitrato midasa 68°C

M. + + + + +/- +/- - Aerobio -
tubercul
osis
M. bovis (1) + - - +/- +/- - Microaeró- -
filo
M. + - +/- +/- +/- + - Microaeró- -
africanum filo

M. canetti + - - + + + - …….. ….

M. bovis + + (3) (3) - + ….. Aerobio -
BCG(2)
M. microti + - + +/- + +/- - Microaeró- -
filo

+, positivo/ -, negativo/ +/-, variable
Tomado de: (de Waard & Robledo, 2007; Prat, et al., 2003; SENASA, 2007)
(1) En el primocultivo generalmente no desarrolla
(2) M. bovis BCG comparte características bioquímicas similares con M. bovis. Un test confirmatorio para BCG es la resistencia a
cycloserina 20mg/L añadido al medio de Löwenstein-Jensen.
(3) Algunas subcepas BCG pueden dar resultados débilmente positivos en las pruebas de Niacina y Nitrato reducción

Pruebas de sensibilidad y
resistencia a medicamentos
Medio líquido. lectura semiautomática 1-2 semanas

Método Fluorométrico MGIT 960

Medio sólido. Lectura visual 3-4 semanas

Método de las proporciones en LJ

Método de las proporciones en Middlebrook 7H11


d. Pruebas moleculares
Sensibilidad 95% Especificidad 100%
PCR
Gen Probe (AMTD)
Amplicor MTB

IDENTIFICACIÓN
PCR enzima de restricción
Secuenciación genética

RESISTENCIA
Secuenciación de DNA
Hibridación
PCR punto final y tiempo real
Microarrays
http://www.diagnostico-de-tbc-por-el-laboratorio-3

2.Diagnóstico indirecto
a. Skin Test
El aspecto de piel en respuesta
positiva al PPD

Es el resultado de la
acumulación de células
inmunológicas, principalmente
de linfocitos, en la piel

http://www.publicaciones/prueba-tuberculinica.pdf.
http://www.pruebas_laboratorio/
mantux.


Prueba tuberculina.
Aplica. 0,1ml intradérmica
Ano caudal.
Cervical Simple.
Cervical comparativa.
Lectura: 72horas.


Interpretación Ano caudal Cervical simple
Positivo 5 mm o más 3 mm o más
Sospechoso 3 – 5 mm 2 – 3 mm
Negativo – 3 mm - 2 mm

Pruebas Sensibilidad Especificidad
Ano caudal 75 - 82 % 96 – 99 %
Cervical simple 70 – 74 % 97 – 99 %
Cervical 68 – 96% 88 – 99%
comparativa

Skin test en personas
Sensibilidad 65 % y especificidad de 42 %
Vía intradérmica en la cara anterior del brazo 0,1 ml con 2
unidades de PPD

Las reacciones deben leerse 48-72 positivo más de 5mm

http://www.oocites.diagnostico.tuberculosis.salud.htm.

b. Prueba gamma-Interferón
Sensibilidad 81 % - 100% y especificidad de 94%
- 100%

Se realiza con sangre completa.

Se emplean los mismos antígenos (PPD) y
detecta el mismo grupo de animales infectados.

Ventaja respecto a intradermo reacción. El animal
se maneja sólo una vez.

Inconvenientes: Costo, necesidad de procesar la
sangre inmediatamente después de su
extracción.


c. Prueba Elisa Indirecto
Sensibilidad 70-80 % Especificidad 98 %

Es muy fiable en la detección de vacas
"anérgicas" a las pruebas de la tuberculina y
gamma-Interferón.

http://www.sameens.dia.uned.es/tuberculosis/parte2

d. Signos y Síntomas

Pulmonar
Extra
Pulmonar
Tuberculosis
Diseminada

Tratamiento

http://www.companiamedica.com/salud_marcha_contra_la_tuberculosis

Fármacos antituberculosos para
personas en Ecuador
Rifampicina, isoniacida, pirazinamida, etambutol y
estreptomicina.

http://www.tratamiento+de+tuberculosis+en+ecuador_campania

Control
En el hombre.

•La prevención de la infección por M. bovis
radica en la pasteurización de la leche.

•La vacunación con BCG.

Control
El único enfoque racional para reducir y eliminar
las pérdidas que la infección ocasiona en el
ganado y para prevenir los casos humanos por
M. bovis
Es estableciendo un PROGRAMA DE CONTROL Y
ERRADICACIÓN DE LA TUBERCULOSIS BOVINA.
http://www.medicocointeractivo.com/ap1/emiold/tuberculosis.

El hombre nunca deja de soñar…deja de soñar;
cuando deja de existir… (Malcom Forbes)

GRACIAS

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