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Dr. Juan Carlos Munévar N. Odontólogo, MSc, D.E.A. Biología ósea. Biólogo Oral Especialista en Bioética, Postgrado en Docencia Universitaria Dr. Diego Fernando Gualtero. Biólogo, MSc Bioquímica Universidad Nacional Dr. Sebastián Bernau. Biólogo Universidad El Bosque.
Aspectos biológicos del Plasma Rico en Plaquetas relevantes para la práctica quirúrgica en odontología
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
REGENERACION TISULAR & ODONTOLOGIA REGENERATIVA INGENIERIA TISULAR  Las raíces de la Ingeniería Tisular existen antes que la ciencia comenzara como tal.  El versículo de la Biblia Génesis II:21-22 reporta el primer registro de Ingeniería Tisular:  “Entonces Jehovah Dios hizo que sobre el hombre cayera un sueño profundo; y mientras Dormía, Tomó una de sus costillas y Cerró la carne en su lugar. Y de la costilla que Jehovah Dios Tomó del hombre, hizo una mujer y la trajo al hombre.”
Hércules y  la  Hidra de múltiples cabezas Durante siglos el hombre ha tratado de comprender la capacidad del cuerpo para reparar o reemplazar las células y tejidos del organismo. Historia Animalium, Aristóteles.
Tissue engineering Meeting, National Science Foundation. Colorado. USA. 1980. No se enfocaron en 1980 en la síntesis  in vitro  de tejidos nuevos (BIOMIMETICOS), utilizando solamente células  o  combinándolas con materiales que sirvan de soporte y transporte (MATRICES) El empleo del concepto actual de Ingeniería Tisular se produjo en un artículo titulado  “Functional Organ Replacement; The New Technology of Tissue Engineering”   Surgical Technology International. USA. 1991. INGENIERIA TISULAR Vacanti Charles. History of Tissue engineering and a glimpse into its future. Tissue engineering. Vol 12. 5. 1137 – 1143. 2006. LA INGENIERIA TISULAR fue concebida, nació y se gesto como disciplina científica en los laboratorios de investigación en Boston y Cambridge, Massachusetts.
Area interdisciplinaria del conocimiento que aplica los principios de la ingeniería y las ciencias de la vida hacia el desarrollo de sustitutos biológicos que restauren, mantengan o mejoren el funcionamiento de los tejidos o de un órgano. El conocimiento de los principios del crecimiento de los tejidos y su aplicación para producir tejidos de reemplazo funcionales para uso en la práctica clínica El empleo de la biología de los sistemas orgánicos que permitirá el éxito en el desarrollo de estrategias terapéuticas diseñadas para reemplazar, regenerar, mantener y/o mejorar la función de los tejidos.  REGENERACION TISULAR Joseph Vacanti Robert Langer Society for Tissue Engineering. Journal “Tissue Engineering”
GENERALIDADES El propósito de la Ingeniería Tisular es la regeneración de tejidos mediante el uso combinado de biomateriales y mediadores biológicos como estrategias para la medicina regenerativa. ( Plasma Rico en Plaquetas ,  Células Troncales, Factores solubles recombinantes humanos) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],D’Aquino R, De Rosa A, Lanza V, Tirino V, Papaccio G. Human mandible bone defect repair by the grafting of dental pulp stem/progenitor cells and collagen sponge biocomplexes. European Cells and Materials. 18. 2009.
La Ingeniería Tisular ha evolucionado desde una ciencia de los biomateriales hacia un área del conocimiento multidisciplinario a través de la integración de la biología, la medicina, la odontología, la bioinformática y la ingeniería. ,[object Object],[object Object],Estos trasplantes poseerán patrones predecibles de vascularización e inervación, fundamentales para recuperar la función óptima. Los productos de Ingeniería Tisular se basan en biomateriales novedosos que integran células Stem/ progenitoras capaces de auto-renovarse o bien de diferenciarse en tipos celulares específicos.  (neuronas, osteoblastos, condrocitos, queratinocitos) Thirumala S, Goebel W. S, Woods E. Clinical grade adult stem cell banking. Organogenesis. 5: 3. 143 – 54. 2009
Moléculas & células de interés en Odontología Regenerativa
 
 
REGENERACION TISULAR  &  ODONTOLOGIA REGENERATIVA
Aproximadamente 1’500.000 sujetos se someten a reconstrucción cráneo facial por año: * Malformaciones congénitas. * Resección de tumores. * Deformaciones post-traumáticas. De los cuales el 20% presentan pérdida de función pese a la reconstrucción. 30.000 de esos pacientes sufren problemas de morbilidad del sitio relacionados con reconstrucción de injertos.  Las estructuras pérdidas con el defecto tienen funciones especificas y el  reemplazo es complicado. Ej: El cierre de un defecto óseo se asocia con la transferencia de  tejido (un colgajo) que no restaura totalmente la función de la  parte pérdida. La transferencia de tejido se relaciona con morbilidad del sitio  donante , acompañada de infección y pérdida de función. García- Godoy F. Tissue engineering. DENTAL CLINICS OF NORTH AMERICA. Vol 50. 2. 2006 Baum B, Mooney D. The impact of tissue engineering on dentistry. JADA.  131. 309 – 18. 2009.
[object Object],El reemplazo y la regeneración tisular en CIRUGIA MAXILOFACIAL es complejo porque: Se deben tener en cuenta funciones  basadas en estructuras  tridimensionales  constituidas por tejidos duros  (esqueleto  craniofacial, dientes)  y blandos  (piel,  mucosa, músculos):  - la expresión facial,  - la fonación,  - la masticación. Se deben diseñar enfoques biotecnológicos novedosos que estimulen la regeneración tisular evitando efectos colaterales por materiales biocompatibles y/o relacionados con la remoción ósea
ESTRATEGIAS  DE  INGENIERIA  TISULAR  EN ODONTOLOGIA  REGENERATIVA ENFOQUES CONDUCTIVOS ENFOQUES INDUCTIVOS TERAPIA GENICA Baum B, Mooney D. The impact of tissue engineering on dentistry. JADA.  131. 309 – 18. 2009. IMPLANTES DENTALES REGENERACION TISULAR GUIADA FACTORES SOLUBLES SCAFFOLDS Transferencia  de  genes  por medio  de  vectores  a  células  diferenciadas Fibrosis quística, distrofia muscular, neoplasias, etc. Próximos 10 – 20 años
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],CELULAS  MATRICES FACTORES SOLUBLES (BMP’s; TGF B; PDGF; IGF) (TNF; IL-6; IL-4) (Sustancia P, CGRP, VIP)
 
 
 
INJERTOS DE HUESO HUMANO DISEÑADOS ANATOMICAMENTE POR INGENIERIA Las reconstrucciones óseas frecuentemente involucran injertos autólogos : * Dificultades de obtención. * Morbilidad del sitio donante. * Habilidad de los clínicos para contornear la forma 3D. La  capacidad para ingeniar correctamente estructuras y órganos anatómicos de hueso humano funcional y viable tiene un enorme potencial para las reconstrucciones  óseas en casos como:
[object Object],[object Object],[object Object],Reportan el diseño  in vitro  por ingeniería tisular de un injerto viable, funcional con forma anatómica y clínicamente disponible  del cóndilo humano de la ATM  empleando:  ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Se selecciono el cóndilo de la ATM por: Las matrices anatómicamente configuradas en 3D se generaron a partir de hueso trabécular descelularizado mediante:
A y B; Tomografía computarizada  para obtener imágenes de alta resolución que permiten reconstruir la geometría exacta del cóndilo  C . Incorporación de las imágenes en el software MasterCAM para maquinar las matrices con forma de cóndilo de ATM. D. Geometría compleja de las matrices terminadas con diferencias notorias en cada proyección. E.  Cultivo estático  in vitro  con 3 millones de hMSC /matriz  a 1 semana y posterior perfusión por 4 semanas. Ingeniería tisular de injertos de hueso anatómicamente diseñados .  Preparación de la matriz descelularizada
RESULTADOS Constructo  in vitro  bajo condiciones estáticas Constructo  in vitro  por perfusión de medio Reconstrucción 3D de imágenes de µTC Arquitectura de la matriz ósea mineralizada  (CAMBIOS EN LA ESTRUCTURA)   desarrollada en una manera dependiente del tiempo y de las condiciones de cultivo.  Osteogénesis estimulada por perfusión en una manera dependiente del patrón de flujo de fluido  in vitro.
Evaluación de los parámetros morfológicos por µTomografía Computarizada Modelos computacionales que revelan la morfología de la matriz ósea correlacionada con los patrones de perfusión del flujo de medio de cultivo a través de los constructos de ATM.
 
Nakao K,  Morita R, Saji Y, Ishida K, Tomita Y, Ogawa M, Saitoh  M, Tomoka Y. The development of a bioengineered organ germ method.  Nature  Methods. 4: 3. 227 - 30. 2007
Análisis histológico durante la erupción y oclusión del Biodiente. Esquema de la tecnología de trasplante del biomimético Erupción & oclusión del Biodiente Día 5 – cultivo órganotipico: Microfotografía del germen del biodiente. Fotografías durante la erupción y oclusión del Biodiente.
Fotografía clínica de un diente  normal  y el  biodiente en Oclusión Microfotografía del constructo mediante la combinación de células epiteliales de un ratón normal y células Stem mesenquimales de un ratón transgénico GFP. µTomografía computarizada  de la oclusión de un diente normal y el Biodiente
Respuesta al dolor por stress mecánico mediante evaluación Inmunohistoquímica de NF (verde) y NPY (rojo) Evaluación de la dureza del esmalte y la dentina del Biodiente. Movimiento Ortodóntico del Constructo ,[object Object],[object Object]
PLASMA RICO EN PLAQUETAS
RECUENTO DE PLAQUETAS EN SANGRE PERIFERICA Valores disminuidos : Por debajo de 50.000 se pueden producir sangrado espontáneo, si baja a 5.000 puede ser fatal por hemorragia en el sistema nervioso central o hemorragia masiva del tracto gastrointestinal Valores aumentados : En algunas enfermedades hemoproliferativas
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Medicamentos que pueden alterar los resultados
RECUENTO DE PLAQUETAS EN PRP Aplicación en cirugía oral Regiones de aplicación facial de PRP Aplicación en cirugía plástica Estimula la oseointegración
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],PROPIEDADES DE LOS FACTORES DE CRECIMIENTO  PRESENTES EN PRP
[object Object],[object Object],[object Object],VENTAJAS DEL PRP
APLICACIONES CLINICAS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Síntesis  in vitro:  PRP
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Dohan DM ., 2009 Clasificación de métodos para obtención de PRP
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Dohan DM ., 2009 Protocolo para la obtención de PRP
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Protocolo  PRF de Choukroun ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Protocolo  PRF de Choukroun Dohan DM ., 2009
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Dohan DM ., 2009
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BIOGEL ,[object Object],Los Factores de crecimiento son  la clave para el pasaje de la fase hemostática a la regenerativa. Esta última la disparan mediadores mitóticos de las células mesenquimales y promotores de la angiogénesis.   ®
FACTORES DE CRECIMIENTO PRESENTES EN  BIOGEL. ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],®
APLICACIONES
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Plasma Pobre en plaquetas
 
INSTRUCTIVO DE ACTIVACIÓN DE BIOGEL -PLASMA RICO EN PLAQUETAS y LEUCOCITOS (L-PRP) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
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REGENTECH S.A.S. Biotecnología al alcance de sus manos Te interesan nuestros productos? Comunícate ya con nuestro asesor al 316 834 2670; 3153902704 O escríbenos a   [email_address]

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REGENTECH SAS

  • 1. Dr. Juan Carlos Munévar N. Odontólogo, MSc, D.E.A. Biología ósea. Biólogo Oral Especialista en Bioética, Postgrado en Docencia Universitaria Dr. Diego Fernando Gualtero. Biólogo, MSc Bioquímica Universidad Nacional Dr. Sebastián Bernau. Biólogo Universidad El Bosque.
  • 2. Aspectos biológicos del Plasma Rico en Plaquetas relevantes para la práctica quirúrgica en odontología
  • 3.
  • 4. REGENERACION TISULAR & ODONTOLOGIA REGENERATIVA INGENIERIA TISULAR Las raíces de la Ingeniería Tisular existen antes que la ciencia comenzara como tal. El versículo de la Biblia Génesis II:21-22 reporta el primer registro de Ingeniería Tisular: “Entonces Jehovah Dios hizo que sobre el hombre cayera un sueño profundo; y mientras Dormía, Tomó una de sus costillas y Cerró la carne en su lugar. Y de la costilla que Jehovah Dios Tomó del hombre, hizo una mujer y la trajo al hombre.”
  • 5. Hércules y la Hidra de múltiples cabezas Durante siglos el hombre ha tratado de comprender la capacidad del cuerpo para reparar o reemplazar las células y tejidos del organismo. Historia Animalium, Aristóteles.
  • 6. Tissue engineering Meeting, National Science Foundation. Colorado. USA. 1980. No se enfocaron en 1980 en la síntesis in vitro de tejidos nuevos (BIOMIMETICOS), utilizando solamente células o combinándolas con materiales que sirvan de soporte y transporte (MATRICES) El empleo del concepto actual de Ingeniería Tisular se produjo en un artículo titulado “Functional Organ Replacement; The New Technology of Tissue Engineering” Surgical Technology International. USA. 1991. INGENIERIA TISULAR Vacanti Charles. History of Tissue engineering and a glimpse into its future. Tissue engineering. Vol 12. 5. 1137 – 1143. 2006. LA INGENIERIA TISULAR fue concebida, nació y se gesto como disciplina científica en los laboratorios de investigación en Boston y Cambridge, Massachusetts.
  • 7. Area interdisciplinaria del conocimiento que aplica los principios de la ingeniería y las ciencias de la vida hacia el desarrollo de sustitutos biológicos que restauren, mantengan o mejoren el funcionamiento de los tejidos o de un órgano. El conocimiento de los principios del crecimiento de los tejidos y su aplicación para producir tejidos de reemplazo funcionales para uso en la práctica clínica El empleo de la biología de los sistemas orgánicos que permitirá el éxito en el desarrollo de estrategias terapéuticas diseñadas para reemplazar, regenerar, mantener y/o mejorar la función de los tejidos. REGENERACION TISULAR Joseph Vacanti Robert Langer Society for Tissue Engineering. Journal “Tissue Engineering”
  • 8.
  • 9.
  • 10. Moléculas & células de interés en Odontología Regenerativa
  • 11.  
  • 12.  
  • 13. REGENERACION TISULAR & ODONTOLOGIA REGENERATIVA
  • 14. Aproximadamente 1’500.000 sujetos se someten a reconstrucción cráneo facial por año: * Malformaciones congénitas. * Resección de tumores. * Deformaciones post-traumáticas. De los cuales el 20% presentan pérdida de función pese a la reconstrucción. 30.000 de esos pacientes sufren problemas de morbilidad del sitio relacionados con reconstrucción de injertos. Las estructuras pérdidas con el defecto tienen funciones especificas y el reemplazo es complicado. Ej: El cierre de un defecto óseo se asocia con la transferencia de tejido (un colgajo) que no restaura totalmente la función de la parte pérdida. La transferencia de tejido se relaciona con morbilidad del sitio donante , acompañada de infección y pérdida de función. García- Godoy F. Tissue engineering. DENTAL CLINICS OF NORTH AMERICA. Vol 50. 2. 2006 Baum B, Mooney D. The impact of tissue engineering on dentistry. JADA. 131. 309 – 18. 2009.
  • 15.
  • 16. ESTRATEGIAS DE INGENIERIA TISULAR EN ODONTOLOGIA REGENERATIVA ENFOQUES CONDUCTIVOS ENFOQUES INDUCTIVOS TERAPIA GENICA Baum B, Mooney D. The impact of tissue engineering on dentistry. JADA. 131. 309 – 18. 2009. IMPLANTES DENTALES REGENERACION TISULAR GUIADA FACTORES SOLUBLES SCAFFOLDS Transferencia de genes por medio de vectores a células diferenciadas Fibrosis quística, distrofia muscular, neoplasias, etc. Próximos 10 – 20 años
  • 17.
  • 18.  
  • 19.  
  • 20.  
  • 21. INJERTOS DE HUESO HUMANO DISEÑADOS ANATOMICAMENTE POR INGENIERIA Las reconstrucciones óseas frecuentemente involucran injertos autólogos : * Dificultades de obtención. * Morbilidad del sitio donante. * Habilidad de los clínicos para contornear la forma 3D. La capacidad para ingeniar correctamente estructuras y órganos anatómicos de hueso humano funcional y viable tiene un enorme potencial para las reconstrucciones óseas en casos como:
  • 22.
  • 23. A y B; Tomografía computarizada para obtener imágenes de alta resolución que permiten reconstruir la geometría exacta del cóndilo C . Incorporación de las imágenes en el software MasterCAM para maquinar las matrices con forma de cóndilo de ATM. D. Geometría compleja de las matrices terminadas con diferencias notorias en cada proyección. E. Cultivo estático in vitro con 3 millones de hMSC /matriz a 1 semana y posterior perfusión por 4 semanas. Ingeniería tisular de injertos de hueso anatómicamente diseñados . Preparación de la matriz descelularizada
  • 24. RESULTADOS Constructo in vitro bajo condiciones estáticas Constructo in vitro por perfusión de medio Reconstrucción 3D de imágenes de µTC Arquitectura de la matriz ósea mineralizada (CAMBIOS EN LA ESTRUCTURA) desarrollada en una manera dependiente del tiempo y de las condiciones de cultivo. Osteogénesis estimulada por perfusión en una manera dependiente del patrón de flujo de fluido in vitro.
  • 25. Evaluación de los parámetros morfológicos por µTomografía Computarizada Modelos computacionales que revelan la morfología de la matriz ósea correlacionada con los patrones de perfusión del flujo de medio de cultivo a través de los constructos de ATM.
  • 26.  
  • 27. Nakao K, Morita R, Saji Y, Ishida K, Tomita Y, Ogawa M, Saitoh M, Tomoka Y. The development of a bioengineered organ germ method. Nature Methods. 4: 3. 227 - 30. 2007
  • 28. Análisis histológico durante la erupción y oclusión del Biodiente. Esquema de la tecnología de trasplante del biomimético Erupción & oclusión del Biodiente Día 5 – cultivo órganotipico: Microfotografía del germen del biodiente. Fotografías durante la erupción y oclusión del Biodiente.
  • 29. Fotografía clínica de un diente normal y el biodiente en Oclusión Microfotografía del constructo mediante la combinación de células epiteliales de un ratón normal y células Stem mesenquimales de un ratón transgénico GFP. µTomografía computarizada de la oclusión de un diente normal y el Biodiente
  • 30.
  • 31. PLASMA RICO EN PLAQUETAS
  • 32. RECUENTO DE PLAQUETAS EN SANGRE PERIFERICA Valores disminuidos : Por debajo de 50.000 se pueden producir sangrado espontáneo, si baja a 5.000 puede ser fatal por hemorragia en el sistema nervioso central o hemorragia masiva del tracto gastrointestinal Valores aumentados : En algunas enfermedades hemoproliferativas
  • 33.
  • 34. RECUENTO DE PLAQUETAS EN PRP Aplicación en cirugía oral Regiones de aplicación facial de PRP Aplicación en cirugía plástica Estimula la oseointegración
  • 35.
  • 36.
  • 37.
  • 38. Síntesis in vitro: PRP
  • 39.
  • 40.
  • 41.
  • 42.
  • 43. Protocolo PRF de Choukroun Dohan DM ., 2009
  • 44.
  • 45. Dohan DM ., 2009
  • 46.
  • 47.
  • 48.
  • 50.
  • 51.  
  • 52. REGENTECH 2010 Biotecnología al alcance de sus manos Obtención y activación de L-PRP Autólogo
  • 53.
  • 54.
  • 55.
  • 56.
  • 57.
  • 58.
  • 59.
  • 60.
  • 61.
  • 62. Plasma Pobre en plaquetas
  • 63.  
  • 64.
  • 65.
  • 66.
  • 67. REGENTECH S.A.S. Biotecnología al alcance de sus manos Te interesan nuestros productos? Comunícate ya con nuestro asesor al 316 834 2670; 3153902704 O escríbenos a [email_address]