Polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (RFLP)

2.  En 1985, Sir Alec Jeffreys descubrió los “polimorfismos
de longitud de fragmentos de restricción (RFLP) por
sus siglas del inglés Restriction Fragment Length
Polymorphism)

3.  El ADN de distintos individuos rara vez tienen la misma disposicion
de sitios de restriccion y de distancias entre estos sitios. Por lo
tanto se dice que la poblacion es polimorfa (con muchas formas)
con respecto a los sitios de restriccion
 Estas diferencias se conocen con la denominacion: Polimorfismo
de longitud de fragmento por enzimas de restriccion (RFLPS)
 Los RFLPS se refieren a secuencias específicas de nucleótidos en
el ADN que son reconocidas y cortadas por las enzimas de
restricción

4.  Es aquella que puede reconocer una
secuencia característica de nucleótidos
dentro de una molécula de ADN y cortar el
ADN en ese punto en concreto, llamado sitio
o diana de restricción.
 Los sitios de restricción cuentan con entre 4
y 12 pares de bases, con las que son
reconocidos.

7. • la palabra polimorfismo viene del griego y significa
con muchas formas, gracias a Landsteiner se inició
la comprensión del polimorfismo de las proteínas
que sería luego trascrito al polimorfismo genético.
• La última definición de Cavalli-Sforza y Bodmer
(1971) es la que se usa actualmente: «El
polimorfismo genético es la presencia en la misma
población de dos o más alelos en un locus, con una
frecuencia apreciable», donde la frecuencia mínima
generalmente es el 1%

8. • se reveló la existencia de aproximadamente 10
millones de polimorfismos de nucleótido sencillo
• La mayoría de los polimorfismos no tiene efecto sobre
el fenotipo cuando están en regiones no codificantes
pueden afectar nuestro fenotipo como la estatura, el
color del cabello o el color de los ojos etc..
• y algunos están son responsables de enfermedades
congénitas

9. • La gran mayoría de los SNP’s tienen dos alelos
los cuales están representados por una
sustitución de base por otra.
• este tipo de alelos se clasifican en alelo
principal o “silvestre” y alelo raro o mutante.

10. • Actualmente, en el “dbSNP” (base publica de datos de
PNS, dbSNP’s por sus siglas en ingles) se han
catalogado más de 9 millones de variantes en la
secuencia de ADN.7,8 Se describe que los SNP’s se
presentan uno cada 200 pares de bases en el genoma
humano.

11. • Los SNP’s pueden estar presentes en regiones
codificantes y provocar un cambio en un aminoácido; a
este tipo de SNP’s les conoce como “no sinónimos”.
• y afectan directamente la función de la proteína.

12. • Pueden estar localizados en la región promotora del
gen.
• Influenciando la actividad transcripcional del gen
(modulando la unión de factores de transcripción)
• En intrones (modulando la estabilidad de la proteína)
• En sitios de “splicing” (sitios donde ocurre la
eliminación de intrones y unión de exones)
• En regiones intragénicas.

13. • Según su localización en el genoma, los SNP’s se
clasifican en:
• iSNP: si están localizados en regiones intrónicas.
• cSNP: en regiones codificantes (exones).
• rSNP: en regiones reguladoras.
• gSNP: localizados en regiones intergenómicas.

15. • tiene una mayor aplicación en el diagnóstico genético y
son conocidos como:
• VNTR- minisatélites
• VNTR-microsatélites o STR (del inglés, short tandem
repeats).
• En ambos casos se van a presentan un número variable
de repeticiones en tándem

16. • son loci que corresponden a secuencias de ADN de
unas pocas decenas de nucleótidos repetidas en
tándem y su repetición varia de cromosoma a
cromosoma.
• una singularidad de este, está en que cada loci puede
presentar muchos alelos distintos

17. • No van a estar distribuidos por todo el genoma y solo
pueden ser utilizados en el diagnostico de un numero
muy reducido de enfermedades.
• Están distribuidos de forma casi homogénea por todo el
genoma.
• Presentan un número elevado de alelos y con
frecuencias similares entre sí.

19. • son por excelencia los polimorfismos anónimos
utilizados en el diagnóstico genético. Corresponden a la
repetición en tándem de secuencias de entre 2 y 5
nucleótidos.

21. • El estudio de los polimorfismos tiene muchas
aplicaciones en medicina, investigaciones biológicas y
procesos jurídicos.
• como marcadores de ciertas enfermedades.

22. • pueden utilizarse en mapeos genéticos (En este proceso
el investigador está en búsqueda de polimorfismos que
son heredados junto con la enfermedad, tratando de
delimitar estos polimorfismos en regiones más y más
pequeñas del cromosoma. Así́, la región del cromosoma
implicada en la enfermedad puede ser progresivamente
delimitada, y el gen responsable finalmente puede ser
localizado)

24. • Los fragmentos de adn debes de tener un tamaño medio
de unas 400 pares de bases.
• El primer paso es amplificar por PCR la region del gen
de interes que queremos estudiar.
• El producto de la PCR se desnaturaliza calentandolo a
94°c y se enfria rapidamente en hielo

25. • El cambio de temperatura debe ser brusco para que las
moléculas de cadena simple no vuelvan a hibridar entre
sí.
• y el cambio en alguna de las bases en la secuencia
puede cambiar completamente su conformación.
• Finalmente, los fragmentos reasociados se someten a
electroforesis no desnaturalizante en gel de acrilamida,
pudiéndose detectar tanto en geles de poliacrilamida
como mediante electroforesis capilar con control de la
temperatura.

26. • cuando no hay mutación en el gel se detectarán
únicamente las bandas correspondientes al homodúplex
(este va a estar formado por la reasociación parcial de
dos hebras de ADN complementarias que se han vuelto
a unir durante la electroforesis) haciendo que las
cadenas monocatenarias se junten y formen un
conformación tridimensional concreta.

28.  http://www.medigraphic.com/pdfs/iner/in-2007/in073h.pdf
 http://centrodeartigo.com/articulos-para-saber-mas/article_41423.html
 http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/dermatologia/v09_sup1/tecnicas_2.
htm