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Desarrollo de Metodología para la Extracción Asistida por Microondas de Polifenoles de Semillas de
Linaza (Linum usitatissimum).
Muñoz Ociel1, Sanhueza Mauricio1, Cid Hector1, Figuerola Fernando1, Estevez, Ana2,
1 Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos, Facultad de Ciencias Agrarias,
Universidad Austral de Chile.
2 Departamento de Agroindustria y Enología, Facultad de Ciencias Agronómicas
Universidad de Chile.
INTRODUCCIÓN

El objetivo de este trabajo fue obtener un método para la extracción de polifenóles desde
semillas de linaza el cual fuera rápido y de bajo costo, por lo cual se evaluó un método de
extracción asistido por microondas (MAE), utilizando un microondas domestico,
aprovechando la exposición a las ondas electromagnéticas de microondas que provoca la
generación de calor así como el movimiento de las moléculas en el sistema.

Figura 1: Semillas de linaza (linum usitatissimum).
METODOLOGIA
Extracción de Polifenóles (MAE).
Para este trabajo se utilizaron semillas de linaza (linum usitatissimum) de la variedad
“Celestina” cosecha 2007,las que fueron molidas y posteriormente desgrasadas con éter etílico
en un extractor soxhlet por 2.5 h. La extracción de los polifenóles se llevó a cabo en un vaso
de teflón con tapa rosca de 100 ml, en el cual se agrego 1 gr de harina de linaza desgrasada
con 5 ml de una solución de 70% de metanol y 30% NaOH 0,1 M y 1,0 M. Se utilizo un
microondas domestico (LG modelo MS-1948 JL) al cual antes de su utilización se le realizó
un mapeo de los puntos de mayor incidencia de irradiación, sitio donde se coloco el vaso de
teflón con la muestra. El reactor fue sometido a 8 ciclos de 30 segundos a 700 W de potencia
(Figura 1), con intervalos de 120 segundos entre cada ciclo, después el solvente se extrae con
micropipeta y es centrifugado por 2 minutos a 3000 rpm para la obtener la muestra con los
polifenóles disueltos. Se realizaron múltiples ensayos para obtener muestras en cada ciclo, lo
cual permitió obtener un perfil de extracción de polifenóles a medida que transcurría el
tiempo.

Cuantificación de polifenóles.
Se uso el método de Folin-Ciocalteau . En tuvo de ensayo se tomaron 40 μL de
muestra; 3,16 mL de agua destilada y 200 μL de reactivo Folin-Ciocalteauen.
Posteriormente se agregan 600 μL de solución de carbonato de sodio 20%, y se
dejo en oscuridad por dos horas. La absorbancia fue determinada a 765 nm. Se
cuantifico utilizando curvas de calibración con ácido gálico, por lo que la
relación de concentración se expresan en función del ácido gálico.
RESULTADOS
Con el objeto de determinar cual era la forma óptima de extracción de polifenóles
con el MAE se evaluaron dos concentraciones distintas de NaOH 0,1 M y 1, 0
M para la mezcla de solvente.
Con la medición de polifenóles totales realizadas en cada ciclo, como se puede
observar en la figura 3, al utilizar la solución de 70% MeOH y 30% NaOH 0.1
M se obtuvieron valores crecientes de concentración, alcanzando 360 ppm
aproximadamente en el octavo ciclo, con una notoria línea recta representada en
la figura 2, pero al comparar los resultados con la solución 70% MeOH y 30%
NaOH 1 M esta ultima presenta una mejor extracción de polifenóles. Como se
aprecia en la figura 2 desde el cicló 5 al 8 se registraron niveles similares de
extracción (ciclo 5: 499 ppm, ciclo 6: 503 ppm, ciclo 7: 485 ppm, ciclo 8: 490
ppm) en donde al sexto ciclo hay un leve aumento de concentración y posterior
a este punto comienza a mantenerse dentro de los mismos rangos.
Concentracion de polifenoles ( ppm )

Las semillas de Linaza son ampliamente consumidas como alimento, ya que son altamente
saludables, al prevenir enfermedades del corazón y cáncer gracias a su alta composición de
fibra y especialmente por sus propiedades antioxidantes, esta característica se deben a la gran
cantidad de polifenóles que poseen estas semillas, ya que este grupo de compuestos actúan
frente a los radicales libres protegiendo al organismo del daño causado por la oxidación,
evitando el daño degenerativo que producen los radicales libres. Por estas razones la
determinación de estas moléculas sea crucial al evaluar las propiedades bioactivas de la
linaza.. En general la mayoría de los tratamientos de extracción para las distintos compuestos
fenolicos no son muy efectivos y requieren mucho tiempo, además la semilla de linaza
presenta en su estructura una goma que se coextrae con metanol, la cual interfiere en las
determinaciones de polifenóles totales.

600

500

400

300

200

100
0

50

100

150

200

250

300

Tiempo ( seg )
NaOH 1 M
NaOH 0,1 M

Figura 3: Grafico comparativo de concentración promedio de polifenóles en
tratamiento de extracción asistido por microondas (MAE) con soluciones de 0,1M
y 1,0 M de NaOH.
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados obtenidos en este estudio, las concentraciones de
polifenóles totales de las muestras de semillas de linaza que fueron sometidas a la
extracción asistida con microondas, indican que el método de extracción mas
adecuado es con NaOH 1 M, con 6 ciclos en el microondas a 700 W, con 120
segundos entre ciclo. El sistema MAE desarrollado, demostró que en corto tiempo
se obtiene una alta extracción de polifenóles, además de ser un método barato al
no necesitar de gran implementación.
AGRADECIMIENTOS
A la Universidad Austral de Chile y al proyecto Fondecyt 1080277

Figura 2: Microondas domestico utilizado para el mae y el vaso de teflón con
tapa rosca que se utilizo para realizar la extracción asistida por microondas
(MAE).

BIBBLIOGRAFIA
• Beejmohun, V., & Finiaux O. (2007). Microwave-assisted Extraction of the Main
Phenolic Compounds in Flaxseed. Phytochemical Analysis. 18: 275–282.
• Kaufmann B., and Christen P. (2002). “Recent extraction techniques for natural
products: microwave-assisted extraction and pressurised solvent extraction”.
Phytochem. Anal. 13, 105–113.

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Para este trabajo se utilizaron semillas de linaza (linum usitatissimum) de la variedad “Celestina” cosecha 2007,las que fueron molidas y posteriormente desgrasadas con éter etílico en un extractor soxhlet por 2.5 h. La extracción de los polifenóles se llevó a cabo en un vaso de teflón con tapa rosca de 100 ml, en el cual se agrego 1 gr de harina de linaza desgrasada con 5 ml de una solución de 70% de metanol y 30% NaOH 0,1 M y 1,0 M. Se utilizo un microondas domestico (LG modelo MS-1948 JL) al cual antes de su utilización se le realizó un mapeo de los puntos de mayor incidencia de irradiación, sitio donde se coloco el vaso de teflón con la muestra. El reactor fue sometido a 8 ciclos de 30 segundos a 700 W de potencia (Figura 1), con intervalos de 120 segundos entre cada ciclo, después el solvente se extrae con micropipeta y es centrifugado por 2 minutos a 3000 rpm para la obtener la muestra con los polifenóles disueltos. Se realizaron múltiples ensayos para obtener muestras en cada ciclo, lo cual permitió obtener un perfil de extracción de polifenóles a medida que transcurría el tiempo. Cuantificación de polifenóles. Se uso el método de Folin-Ciocalteau . En tuvo de ensayo se tomaron 40 μL de muestra; 3,16 mL de agua destilada y 200 μL de reactivo Folin-Ciocalteauen. Posteriormente se agregan 600 μL de solución de carbonato de sodio 20%, y se dejo en oscuridad por dos horas. La absorbancia fue determinada a 765 nm. Se cuantifico utilizando curvas de calibración con ácido gálico, por lo que la relación de concentración se expresan en función del ácido gálico. RESULTADOS Con el objeto de determinar cual era la forma óptima de extracción de polifenóles con el MAE se evaluaron dos concentraciones distintas de NaOH 0,1 M y 1, 0 M para la mezcla de solvente. Con la medición de polifenóles totales realizadas en cada ciclo, como se puede observar en la figura 3, al utilizar la solución de 70% MeOH y 30% NaOH 0.1 M se obtuvieron valores crecientes de concentración, alcanzando 360 ppm aproximadamente en el octavo ciclo, con una notoria línea recta representada en la figura 2, pero al comparar los resultados con la solución 70% MeOH y 30% NaOH 1 M esta ultima presenta una mejor extracción de polifenóles. Como se aprecia en la figura 2 desde el cicló 5 al 8 se registraron niveles similares de extracción (ciclo 5: 499 ppm, ciclo 6: 503 ppm, ciclo 7: 485 ppm, ciclo 8: 490 ppm) en donde al sexto ciclo hay un leve aumento de concentración y posterior a este punto comienza a mantenerse dentro de los mismos rangos. Concentracion de polifenoles ( ppm ) Las semillas de Linaza son ampliamente consumidas como alimento, ya que son altamente saludables, al prevenir enfermedades del corazón y cáncer gracias a su alta composición de fibra y especialmente por sus propiedades antioxidantes, esta característica se deben a la gran cantidad de polifenóles que poseen estas semillas, ya que este grupo de compuestos actúan frente a los radicales libres protegiendo al organismo del daño causado por la oxidación, evitando el daño degenerativo que producen los radicales libres. Por estas razones la determinación de estas moléculas sea crucial al evaluar las propiedades bioactivas de la linaza.. En general la mayoría de los tratamientos de extracción para las distintos compuestos fenolicos no son muy efectivos y requieren mucho tiempo, además la semilla de linaza presenta en su estructura una goma que se coextrae con metanol, la cual interfiere en las determinaciones de polifenóles totales. 600 500 400 300 200 100 0 50 100 150 200 250 300 Tiempo ( seg ) NaOH 1 M NaOH 0,1 M Figura 3: Grafico comparativo de concentración promedio de polifenóles en tratamiento de extracción asistido por microondas (MAE) con soluciones de 0,1M y 1,0 M de NaOH. CONCLUSIONES De acuerdo a los resultados obtenidos en este estudio, las concentraciones de polifenóles totales de las muestras de semillas de linaza que fueron sometidas a la extracción asistida con microondas, indican que el método de extracción mas adecuado es con NaOH 1 M, con 6 ciclos en el microondas a 700 W, con 120 segundos entre ciclo. El sistema MAE desarrollado, demostró que en corto tiempo se obtiene una alta extracción de polifenóles, además de ser un método barato al no necesitar de gran implementación. AGRADECIMIENTOS A la Universidad Austral de Chile y al proyecto Fondecyt 1080277 Figura 2: Microondas domestico utilizado para el mae y el vaso de teflón con tapa rosca que se utilizo para realizar la extracción asistida por microondas (MAE). BIBBLIOGRAFIA • Beejmohun, V., & Finiaux O. (2007). Microwave-assisted Extraction of the Main Phenolic Compounds in Flaxseed. Phytochemical Analysis. 18: 275–282. • Kaufmann B., and Christen P. (2002). “Recent extraction techniques for natural products: microwave-assisted extraction and pressurised solvent extraction”. Phytochem. Anal. 13, 105–113.