Extracção do DNA

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Extracção do DNA

  1. 1. Cebola Kiwi FígadoEscola Secundária de BocageCiências Naturais – 9º ano – 2011/ 2012 Prof. Gabriela Bruno
  2. 2. Extracção do DNA Toda a informação necessária para criar um organismo encontra-se no DNA. Esta molécula é usada durante o período de vida de um organismo para fornecer instruções para milhões de processos celulares que ocorrem constantemente. Para estudar o modo como essas informações são comunicadas à célula, os cientistas isolaram o DNA e estudaram o modo de interacção do DNA com as proteínas e RNAs.
  3. 3. Extracção do DNA Este trabalho laboratorial usa um processo semelhante ao utilizado pelos cientistas quando começaram as primeiras investigações sobre DNA. Para isolar o DNA os cientistas separaram-no dos outros componentes celulares. As células são fragmentadas e o DNA separado do conteúdo lipídico das membranas da célula e dos organitos. Em seguida o DNA é separado das proteínas.
  4. 4. Extracção do DNA Pode-se realizar um procedimento muito simples para extracção de DNA com coisas comuns existentes na cozinha. Ao fim de 40 minutos pode-se observar aquilo que os cientistas levaram muitos anos a descobrir. Embora nesta actividade se utilizem procedimentos e instrumentos muito simples que, não permitindo a separação do DNA de proteínas e de RNA, possibilita a visualização do conteúdo nuclear, sob a forma de filamentos brancos. Vão ser utilizados diferentes tecidos e ficarás apto a observar DNA de várias origens, uma vez que todas as células contêm DNA.
  5. 5. Extracção do DNAObjectivo:Isolar DNA de células vegetais e animais.
  6. 6. Extracção do DNAProcedimento1º Passo :Materiais  100ml de água a 60 ̊C  4 gr de sal (NaCl)  10 ml (1 colher de chá) de detergente  Álcool etílico (Etanol) frio  1 kiwi ou ½ cebola ou 25 gr de fígado.
  7. 7. Extracção do DNAProcedimento1º Passo : Materiais  Copo  Gobelé misturador  Tubos de (para o ensaio fígado)  Gaze ou  Almofariz filtros de  Colher de chá café  Bisturi  Marcador ou  Espátula etiquetas
  8. 8. Extracção do DNAExecução Cortar em pedaços pequenos o kiwi; Reduzir a uma pasta, no almofariz; Adicionar o sal e o detergente; Adicionar água a 60 ̊C; Filtrar para o gobelé, previamente identificado, utilizando a gaze; Agitar suavemente a mistura e por 5 ou 10 minutos; Passar cerca de 2,5 ml para um tubo de ensaio, previamente identificado; Manter o tubo aquecido na mão enquanto introduz cerca de 5 ml de etanol; Deixar repousar durante cerca de 5 minutos. Observar.
  9. 9. Extracção do DNAFoto 1 – Manter o tubo aquecido para que hajacontraste de temperaturas.
  10. 10. Extracção do DNAFoto 2Separação do DNA do kiwi
  11. 11. Extracção do DNAFoto 3 – A mistura de kiwi é mais densa que o álcool.
  12. 12. Extracção do DNAFoto 4Separação do DNA do fígado.
  13. 13. Extracção do DNAFoto 5Separação do DNA da cebola
  14. 14. Extracção do DNAFoto 6Separação do DNA do kiwi.
  15. 15. Extracção do DNATópicos para discussãoQuais são as estruturas celulares e qual a sua composição? As membranas, celular e nuclear são compostas principalmente por lípidos. As proteínas encontram-se aprisionadas na bicamada lipídica. Os organitos celulares são compostos por proteínas, ácidos nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos por uma membrana. As paredes celulares das células vegetais são compostas essencialmente por polissacarídeos. As pequenas estruturas celulares são compostas por substâncias com diferentes propriedades químicas, pelo que os procedimentos experimentais devem ser definidos de modo a separar um determinado constituinte celular das restantes partes, sem causar muitos danos.
  16. 16. Extracção do DNA Onde se encontra o DNA na célula? Cerca de 99% do DNA encontra-se no núcleo da célula. O restante DNA encontra-se em locais específicos como, por exemplo, organitos (as mitocôndrias e os cloroplastos possuem o seu próprio DNA).
  17. 17. Extracção do DNA Qual a função dos reagentes usados na experiência?  Sal (NaCl)?  Detergente?  Álcool?
  18. 18. Extracção do DNA Quais as semelhanças e as diferenças entre o DNA de origem animal e o de origem vegetal? Porque motivo não se pode ver a dupla hélice que constitui a molécula de DNA?

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