1. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge
Jérémie Gras
Médecin Biologiste
GLEM CHR - jeudi 5 mai 2011
Clinique Saint-Luc
Laboratoire de Biologie Clinique
5004 Bouge

2. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge
PLAN
1. Contexte
2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
3. Présentation de quelques cas
4. Evaluation technique
5. Comparaison des systèmes automatisés
6. Conclusions
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3. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge
PLAN
1. Contexte
2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
3. Présentation de quelques cas
4. Evaluation technique
5. Comparaison des systèmes automatisés
6. Conclusions
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4. 1. Contexte
Laboratoire 24/7, fortement automatisé:
MPA
2 Modulars PPEE
2 Stagos on track
Jusqu à 1192 dossiers/ jours
Volonté d obtenir l accréditation
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5. 1. Contexte
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6. 1. Contexte
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7. 1. Contexte
Secteur sédiments urinaires en octobre 2010:
Non automatisé
Tigettes manuelles Roche, lecture manuelle, résultat
recopié sur liste puis encodé dans le LIS
Sédiments microscopiques
Jusqu à 120 sédiments pas jour
Presque deux personnes occupées à temps plein
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8. 1. Contexte
Secteur sédiments urinaires en octobre 2010:
Manque de traçabilité
Manque de standardisation
Risque important d erreurs
Prenant en termes de personnes
Tout cela a été pointé dans un audit interne d octobre 2010
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9. 1. Contexte
De plus:
Nécessité d une pièce isolée pour la biologie
moléculaire
Rapprochement du laboratoire de chimie
sans perdre la proximité avec la bactério
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10. 1. Contexte
Décision d automatiser le secteur
Décision d évaluer la chaîne Menarini:
« Continuous Loading, walk away » analyser
Plate- forme microscopique
Automatisation importante
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11. 1. Contexte
Décision d évaluer la chaîne Menarini:
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12. 1. Contexte
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13. 1. Contexte
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14. 1. Contexte
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15. 1. Contexte
Pourquoi pas un Sysmex ?
Automatisation incomplète
A réamorcer si standby
Soft subobptimal
Maintien de deux plates-formes parallèles
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16. 1. Contexte
Pourquoi pas un IQ 200 ?
Testé mais non-satisfaction des technologues
Principalement, difficultés avec les images
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17. 1. Contexte
SediMax Pont AutionMax
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18. 1. Contexte
AutionMax
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19. 1. Contexte
SediMax
Cuvette
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22. 1. Contexte
Période d évaluation:
Passage de 336 échantillons patient
Comparaison avec la microscopie et les tigettes
manuelles
Chaîne de démonstration
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23. 1. Contexte
Période d évaluation:
336 échantillons patient
23 « crowded »
Sédiments non édités !
Comparaison avec la microscopie et les tigettes
manuelles
Chaîne de démonstration
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24. 1. Contexte
Période d évaluation: Globules rouges
Tableau croisé RBC + or -, current method * RBC + or -, SediMax
RBC + or -, SediMax Total
Negative for RBC Positive for RBC with
with SediMax SediMax
RBC + or -, current method Negative for RBC with current 241 15 256
method
Positive for RBC with current 18 39 57
method
Total 259 54 313
Correspond à des pyuries concomitantes
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25. 1. Contexte
Période d évaluation: Globules blancs
WBC + or -, SediMax Total
Negative for WBC Positive for WBC
with SediMax with SediMax
WBC + or -, current method Negative for WBC with current 169 56 225
method
Positive for WBC with current 6 82 88
method
Total 175 138 313
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26. 1. Contexte
Période d évaluation: CVs:
CVs sur QC Kova-Trol:
GB: 9,88 %
GR: 8,88 %
A comparer avec les 30-40 % de la microscopie
manuelle
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27. 1. Contexte
Période de validation :
Passage de 86 échantillons patient
Comparaison
Sur notre chaîne
CVs sur Bio-Rad Quantify Plus:
GB: 11,43 %
GR: 9,37 %
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28. 1. Contexte
Implémentation:
Percement d une communication avec la bactério
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29. 1. Contexte
Implémentation:
Utilisation d un nouvel osmomètre Menarini
Création d un utilitaire LIS « gestion des échantillons
d urine)
Protéines urinaires sur Modular:
Si tigette > traces
Si < 5GB
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30. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge
PLAN
1. Contexte
2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
3. Présentation de quelques cas
4. Evaluation technique
5. Comparaison des systèmes automatisés
6. Conclusions
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31. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
1. Globules Blancs:
Neutrophiles le plus souvent
Rencontrés dans:
Infection urinaire
Glomérulonéphrite
Néphrite interstitielle
Polykystose
Problèmes urologiques
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32. GB
GB
GB
GB

33. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
2. Globules Rouges:
Globules rouges normaux:
Rencontrés dans:
» Lésions depuis les tubules rénaux jusqu à l urètre
Infections urinaires
Lithiases
Néoplasie de l urothélium
Hématurie d effort
Globules rouges dysmorphiques: origine glomérulaire
Rencontrés dans:
» Glomérulonéphrites
» Autres atteintes glomérulaires
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34. GR
GR
GR

35. Globules rouges dysmorphiques
Anomalies membranaires
Acanthocytes
Amas de globules rouges
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36. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
3. Cellules épithéliales squameuses:
Origine: vagin et urètre
Peu de valeur diagnostique
Rencontré:
Chez les femmes à l état normal
Si toilette insuffisante
Vaginite
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37. Cellule épithéliale
squameuse
Cellule épithéliale
squameuse

38. Amas de cellules épithéliales
squameuses

39. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
4. Cellules épithéliales non squameuses:
Type:
Cellules tubulaires rénales
» Rencontré dans:
Nécrose tubulaire
Néphrite interstitielle
Rejet de greffe
Cellules épithéliales transitionnelles
» Rencontré dans:
Néoplasie urothéliale
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40. Cellule épithéliale
non squameuse
Cellule épithéliale
non squameuse

41. Amas de cellules
épithéliales non
squameuses
Cellule épithéliale
non squameuse

42. NEC: atypies cellulaires !

43. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
5. Cylindres hyalins
Constitués de la protéine de Tamm-Horsfall
Rencontré chez:
Sujet normal
Exercice physique
Pyrexie
Déshydratation
Pathologies rénales
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44. Cylindres hyalins
Cylindres hyalins
Cylindres hyalins

45. Cylindres hyalins
Cylindre hyalin tortueux

46. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
6. Cylindres pathologiques
Cylindres:
Granuleux
Hyalino-granuleux
Leucocytaires
Rencontré dans:
Nécrose tubulaire aigue
Glomérulonéphrite
Saignement glomérulaire
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47. Cylindres hyalino-granuleux

48. Cylindres granuleux

49. Cylindre leucocytaire

50. Cylindre érythrocytaire

51. Cylindre érythrocytaire
GRD
GRD

52. Cylindre cellulaire mixte

53. QUELQUES CRISTAUX
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54. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
7.a. Cristaux d urate amorphe et de phosphate amorphe
Distingués en fonction du pH
Intérêt clinique pas net
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55. Echantillon 3920123:
Urates amorphes

56. Oxalate dicalcique
Bactéries
(coccobacilles)
Echantillon 3920123:
Après chauffage !

57. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
7.b. Cristaux d oxalate calcique
Rencontré chez:
Patient normal (nutrition: chocolat, cacahuètes, épinards )
Lithiases
Hyperoxalurie
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58. Oxalates dicalciques
Oxalates dicalciques

59. Oxalate dicalcique
Oxalate monocalcique

60. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
7.c. Phosphates triples
Rencontré chez:
Infections urinaires avec proteus, ureaplasma urealyticum,
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61. Phosphates triples
(ammoniaco-magnésiens)
Phosphates triples
(ammoniaco-magnésiens)

62. Phosphates triples
(ammoniaco-magnésiens)
Phosphates triples
(ammoniaco-magnésiens)

63. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
7.d. Acides uriques
Rencontré chez:
Patients normaux
Lithiases
Syndrome de lyse tumorale
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64. Acides uriques
Acides uriques

65. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
8. Bactéries
Rencontré dans:
Infections urinaires
Contaminations
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66. Bactéries (bacilles)

67. 2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
9. Levures
Rencontré chez:
Infections urinaires
Chez patients diabétiques ou immunodéprimés
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68. Levures

69. Levures

70. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge
PLAN
1. Contexte
2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
3. Présentation de quelques cas
4. Evaluation technique
5. Comparaison des systèmes automatisés
6. Conclusions
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71. Cas 1
Le sédiment en résumé:
GB: 76 / Champ (++)
GR: 19 / Champ (++)
Bactéries: ++
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72. Cas 1
GB
GR
GB

73. Cas 1 Enterobacter Aerogenes
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74. Cas 2
Le sédiment en résumé:
GB: 57 / Champ (++)
GR: 3 / Champ (+)
Bactéries: ++

75. Cas 2
GB
GB

76. Cas 2 Staphylocoque Saprophyticus

77. Cas 3
Le sédiment en résumé:
GB: 438 / Champ (+++)
GR: 19 / Champ (++)
Bactéries: ++

78. Cas 3
GB
GB

79. Cas 3 Pseudomonas Aeruginosa

80. Cas 4 Avant dilution

81. Cas 4 Après dilution

82. Cas 4
Le sédiment en résumé:
GB: 557 / Champ (+++)
GR: 3,5 / Champ (+)
Bactéries: +++

83. Cas 4 E. Coli

84. Cas 5
Le sédiment en résumé:
GB: 3,6 / Champ (+)
GR: 12,9 / Champ (++)
Cylindres hyalins : ++++
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85. Cas 5
Cylindres hyalins
GR

86. Cas 6
Le sédiment en résumé:
GB: 2 / Champ (+)
GR: 58 / Champ (++)
La tigette en résumé:
Protéines: ++ (200 mg/dL)
Blood: +++
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87. Cas 6
GRD
GRD
GRD
GR
GRD
GR

88. Cas 7
Le sédiment en résumé:
GB: 5 / Champ (+)
GR: 123 / Champ (+++)
La tigette en résumé:
Protéines: ++ (100 mg/dL)
Blood: +++
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89. Cas 7
Cylindre érythrocytaire
GRD
GRD

90. Cas 8
Le sédiment en résumé:
GB: 14 / Champ (+)
GR: 4061 / Champ (+++)
La tigette en résumé:
Protéines: ++ ( 200 mg/dL)
Blood: +++
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91. Cas 8 Avant dilution
GR

92. Cas 8
Après dilution
GR

93. Cas 8
Carcinomatose
péritonéale
Envahissement urétéral
Urétéro-hydronéphrose
bilatérale

94. Cas 9
Jeune patient (26 ans)
Urgences
AEG
Insuffisance rénale
Atteinte hépatique
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95. Cas 9
Le sédiment en résumé:
GB: 6 / Champ (+)
GR: 0 / Champ (Nl)
Cylindres granuleux ++
La tigette en résumé:
Protéines: ++ ( 100 mg/dL)
Urobilinogène: ++
Bilirubine: +
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96. Cas 9
Cylindres granuleux
Cylindres granuleux
GB

97. Cylindres granuleux
Cellules non identifiées
(NEC ?)

98. Cas 9
Même patient
Contrôle après hospitalisation
Sans traitement spécifique
Résolution de la symptomatologie et
des anomalies biologiques
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99. Cas 9

100. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge
PLAN
1. Contexte
2. Les composants du sédiment urinaire vus au SediMAX
3. Présentation de quelques cas
4. Evaluation technique
5. Comparaison des systèmes automatisés
6. Conclusions
Clinique Saint-Luc
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101. 4. Evaluation technique
Problèmes techniques rencontrés en 3 mois et demi:
1. Sur l AutionMAX:
1. Erreurs sur la bande de transport des tigettes (2x)
2. Nécessité de recalibrer le blanc des tigettes
3. Mauvaise alimentation des tigettes dans le feeder (3x)
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102. 4. Evaluation technique
Problèmes techniques rencontrés en 3 mois et demi:
2. Sur le SediMAX:
1. Erreur de boussole du sampler (débris métallique) (1x)
Problème le plus sérieux à ce jour
Résolu sans intervention de Menarini
2. Erreur d alimentation des cuvettes (1x)
3. Lenteur du programme en utilisation intensive
Edition des particules
Nécessité de terminer la tâche
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103. 4. Evaluation technique
Erreur de boussole du sampler (débris métallique) (1x)
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104. 4. Evaluation technique
Evaluation du soft:
Bonne reconnaissance des particules suivantes:
» GB
» GR
» Cylindres hyalins
» Cellules épithéliales squameuses
» Levures
Reconnaissance plus difficile
» Bactéries:
attention aux échantillons « limite crowded »
quelques discordances
Non reconnus, mais visualisés
» Cylindres pathologiques
Clinique Saint-Luc
» Précipités amorphes
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105. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge
PLAN
1. Contexte
2. Les composants du sédiment urinaire vus au Sedimax
3. Présentation de quelques cas
4. Evaluation technique
5. Comparaison des systèmes automatisés
6. Conclusions
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106. 5. Comparaison des systèmes automatisés
Sysmex UF SediMAX IQ-200
Plate-Forme Cytométrie en flux Microscopie Microscopie en flux
automatisée
Volume 0,8 mL 2 mL 3 mL
minimal
Avantages 1. Boîte noire 1. Coût 1. Visualisation des
2. Système expert 2. Visualisation des particules
3. Système répandu particules
3. Automatisation
totale
Inconvénients 1. Boîte noire 1. Pas de système 1. Images
2. Reviews microscopiques expert différentes
3. Automatisation incomplète 2. Système nouveau 2. Reviews
4. Coût microscopiques
5. Carry-Over 3. Carry-over
review 6-35 % <1 % ?
microscope
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107. 5. Comparaison des systèmes automatisés
Comparaisons:
Sysmex UF-1000 i:
CVs de 6,5 % RBC (QC mat.) (Shavanfar et al CCLM 2007)
CVs < 20 % pour la majorité des paramètres
(Jiang T et al Scand J Clin lab invest 2011)
Iris IQ 200:
CVs de 5,5 % RBC (QC mat.) (Shavanfar et al CCLM 2007)
CVs de 6,1 % à 32,4 % (QC mat) (Clin Chim Acta 2007)
Carry-over 0,21 % pour RBC et 1,92 % pour WBC (Park J et al
Korean J Lab Med 2008)
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108. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
expérience au laboratoire de la clinique Saint-Luc de Bouge
PLAN
1. Contexte
2. Les composants du sédiment urinaire vus au Sedimax
3. Présentation de quelques cas
4. Evaluation technique
5. Comparaison des systèmes automatisés
6. Conclusions
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109. 6. Conclusions
L automatisation avec la chaîne Menarini a permis de:
1. Augmenter significativement le niveau de qualité du
secteur
2. Réduire les besoins en personnel au poste
3. Faciliter la réalisation des sédiments lors des gardes
4. Réduire le temps de réponse
5. D obtenir un taux de reviews microscopiques très bas
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110. 6. Conclusions
Nouveaux développements sur le Sedimax:
1. Possibilité de travailler avec différents tubes
2. Nouvelles cartes hardware
3. Seringue Hamilton
4. Plus rapide (jusqu à 100 échantillons/ heure)
5. Software en 7 langues (dont français)
6. Module d évaluation M7: amélioration pour la
reconnaissance de:
1. Cellules épithéliales
2. NEC
3. Cylindres pathologiques et hyalins
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111. Clinique Saint-Luc
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112. Remerciements
Secteur sédiments urinaires: L équipe des biologistes:
Marjorie Jacques Philippe Gillion
Andrée Mathias Catherine Rosseels
Betty Rousseau Kim Laffineur
Christine Eucher
Equipe IT: Jean-Marie Gilson
Diana de Fabritiis
Laurence Rozen
Service technique:
Mr. Lissoir
Mr. Alexandre
et leurs collaborateurs
Tableaux croisés dynamiques
Olivier Collet
Menarini:
Claudine Pichot
Eric Frere
Clinique Saint-Luc
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113. Merci pour votre attention !
jeremie.gras@gmail.com
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114. Analyse urinaire par microscopie automatisée:
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