El documento describe los pasos de un experimento de laboratorio para transformar la bacteria E. coli con un plásmido que contiene el gen GFP, causando que las bacterias transformadas exhiban fluorescencia verde bajo luz ultravioleta. Los pasos incluyen colectar bacterias E. coli, agregar el plásmido pGLO que contiene el gen GFP, someter a un choque térmico, y sembrar en una placa con antibiótico y sustrato para permitir el crecimiento de bacterias transformadas. El resultado final muestra colonias fluorescentes verdes

1. Iniciamos el Laboratorio Virtual con imágenes obtenidas por los alumnos de la E.E.M. N° 20 AÑO 2007 CURSOS: 3° DECIMA (Cs. Naturales) 2° SEPTIMA (Cs. Sociales)

2. Crustáceo: Daphnia (pulga de agua)

3. Crustáceo: Copépodo Cyclops

4. Larva de mosquito Capturando una Daphnia.

5. Protozoo Ciliado

6. Protozoo Ciliado Visto en detalle.

7. Protozoo Ciliado

8. Saccharomyces cerevisiae Levadura del pan y la cerveza.

9. Células CHO de ovario de hámster chino

10. Células CHO Células de ovario de hámster chino (en detalle).

11. Células Wish

12. Laboratorio de Genética Transformación de la bacteria E.coli con un plásmido (ADN circular) pGLO que contiene el gen GFP (proteína verde fluorescente) que proviene de la medusa de las profundidades Aequorea victoria.

13. PRIMER PASO Colectar una colonia de bacterias E.coli y dispersarlas en un tubo que contenga solución de transformación (Cloruro de calcio 50 mM). El plásmido pGLO contiene el gen GFP de la proteína verde fluorescente, el gen bla de resistencia al antibiótico Ampicilina y el gen araC que se activa cuando esta presente el hidrato de carbono Arabinosa. El gen GFP se activa si se activa también el gen araC en presencia de Arabinosa.

14. SEGUNDO PASO Agregado del plásmido pGLO que contiene el gen de la proteína verde fluorescente y reposo en hielo durante 30 minutos.

15. TERCER PASO Choque térmico: En presencia de una solución facilitadora (cloruro de calcio 50 mM) la membrana adquiere la permeabilidad suficiente para la entrada del plásmido. 50 segundos a 42° C, luego se vuelve a colocar el tubo en hielo durante dos minutos.

16. CUARTO PASO Sembrar en una placa de Petri conteniendo Agar, el antibiótico Ampicilina y el hidrato de carbono Arabinosa para favorecer su crecimiento.

17. RESULTADO FINAL En presencia de luz ultravioleta se observa una placa (a la izquierda de la foto) con colonias de E.coli normales y otras (a la derecha de la imagen) transformadas con el plásmido pGLO.