2. ¿ que es una incubadora biológica?
• Una incubadora es un dispositivo que sirve para
mantener y hacer crecer cultivos microbiológicos
o cultivos celulares.
Incubadora para bacterias.
3. Objetivo
• El objetivo de estos equipos es proporcionar
una cantidad elevada de microorganismos
para que realicen un trabajo específico y son
las incubadoras las que propician las
condiciones adecuadas de
temperatura, agua, oxígeno y los
complementos nutritivos necesarios para
precipitar el ciclo.
4. •
Tipos de incubadora
1- Incubadora seca: es precisa para cuando no Cuando no disponemos de un recinto cuya temperatura
asegure el crecimiento celular
•
2-Incubadora húmeda de CO2 : son aquellas con un ambiente controlado, con una humedad alta y
una presión parcial de CO2elevada.
Un incubador de este tipo dispone de:2
• Dispositivos de control de temperatura, con termostato de seguridad.
• Dispositivo de inyección de una mezcla de aire y CO2, en la proporción deseada, entre el 4 y el
7 %, controlado mediante un dispositivo IRGA ("infra-red gas analyzer").
• Dispositivo de control de la humedad ambiente. La mejor forma consiste en inyectar agua estéril y filtrada.
• Dispositivo de recirculación de aire con filtros HEPA intercalados.
3-Incubadora roller: Son incubadoras o estufas que poseen un rotor de baja velocidad en su interior. Se
utilizan con cultivos que no requieren CO2, dispuestos en botellas cerradas (roller bottles), con una gran
superficie de crecimiento.,2 con la finalidad de disponer de una gran superficie para la adhesión de las
células.
5. TECNICAS MICROBIOLOGICAS
TÉCNICAS DE INCUBACION.
El crecimiento en las bacterias depende de varios factores entre los que cabe
destacar la aireación y la temperatura.
Aireación
Según los requerimientos de 02, las bacterias se clasifican en:
- Aerobios: dependen del 02
- Aerobios facultativos: lo usan si está disponible pero pueden crecer en su
ausencia.
- Anaerobios: no pueden utilizarlo.
Anaerobios estrictos u obligados: el 02 es tóxico para ellos.
Anaerobios aerotolerantes: no mueren en contacto con él.
- Microaerófilos: requieren bajas concentraciones de 02
6. Bacterias aerobias
• Para incubar bacterias aerobias se puede emplear diversos
métodos:
-Medió líquido: Tubo (tumbado y/o con agitación)
Matraz (con poca cantidad de medio, con agitación y/o
burbujeo)
• -Medio sólido: Tubo (agar inclinado).
Placa (en superficie).
Para incubar bacterias anaerobias la dificultad es mayor
y, entre otras, se pueden utilizar las siguientes técnicas:
-Medio líquido: Tubo vertical (con tioglicolato sódico)
• -Medió sólido: Tubo (PRAS)
Placa Garra de anaerobios o estufa de anaerobios).
7. cultivo líquido
• Un cultivo líquido puede ser transferido mediante un asa
microbiológica, un hisopo, pipeta o pipeta pasteur; el
inóculo se deposita dentro del caldo omedio líquido. En
este tipo de cultivos los microorganismos presentan un
desarrollo particular que se manifiestaen la superficie o a
través de todo el líquido. Una de las ventajas que presenta
este tipo de cultivo se refiere a laposibilidad de agitarlos
acelerando la velocidad de microorganismos
anaerobios, por otra parte, en este tipo decultivos, las
poblaciones se encuentran suspendidas y e fácil
homogenizarlas, lo que permite estandarizar la
concentración del inóculo. La desventaja que presentan, e
que en ellos e difícil detectar contaminación a simplevista.
8. Medios semisolidos
• Los medios semisólidos e preparan en tubos, se
inoculan con aguja de siembra (asa recta) o
pipeta pasteur; eneste último caso es necesario
calentar el medio y cuando se encuentra en
estado líquido y a una temperatura
deaproximadamente 42ºC se agrega el inóculo, se
homogeniza y se deja solidificar. Estos medios se
emplean paraestudiar la movilidad de los
microorganismos y para favorecer la separación
de microorganismos con
diferentesrequerimientos de oxígeno
9. Medios semisolidos
• Los medios semisólidos e preparan en tubos, se
inoculan con aguja de siembra (asa recta) o
pipeta pasteur; eneste último caso es necesario
calentar el medio y cuando se encuentra en
estado líquido y a una temperatura
deaproximadamente 42ºC se agrega el inóculo, se
homogeniza y se deja solidificar. Estos medios se
emplean paraestudiar la movilidad de los
microorganismos y para favorecer la separación
de microorganismos con
diferentesrequerimientos de oxígeno
10. Medios solidos
• Los medios sólidos e preparan en tubos o matraces
dependiendo de la cantidad o de las
necesidades, despuésde esterilizarlos, estos se inclinan
o vierten en cajas de petri. La siembra se realiza con el
asa, inoculando lasuperficie del agar con mucha
suavidad; en estos medios, los microorganismos al
multiplicarse forman agregadosque
se hacen visibles a simple vista; a estos agregados
se les denominan colonias, las que
presentancaracterísticas que varían con el tipo
de microorganismo cultivado y el medio de cultivo
empleado.
11. temperatura
• Las bacterias en general tienen un margen de temperatura en el cual
pueden crecer. Podemos distinguir tres temperaturas cardinales:
- Máxima: Temperatura a partir de la cual la bacteria no es capaz de crecer
e incluso muere.
• -Óptima: Temperatura a la cual la bacteria presenta el mejor crecimiento.
- Mínima: Temperatura por debajo de la cual la bacteria no es capaz de
crecer pero generalmente no muere.
Según sus temperaturas de crecimiento las bacterias se pueden clasificar
en:
- Hipertermófilas (>700C)
- Termófilas (40-70-C)
- Mesófilas (10-50T)
- Psicrófilas (0-20-C)
Estos márgenes de temperatura son sólo aproximados para la mayor parte
de las bacterias ya que no se puede hacer una división precisa en este
aspecto.
12. procedimiento
•
Evaluación de la temperatura de crecimiento
Disponemos de dos placas de agar nutritivo y un
cultivo de microorganismos del ambiente del
laboratorio.
Inoculamos las placas sembrando por cualquiera
de las técnicas anteriormente explicadas e
incubamos las placas, una a 50'C y otra en la
nevera, a 4'C. Incubar durante 24 horas.
Utilizaremos las placas del apartado anterior que
se incuban a 37C para comparar resultados.
