Guia protocolos de investigacion

Edmundo Resenos DÍAZ

Guía para la elaboración de protocolos de investigación

Instituto Politécnico Nacional m é x i c o

INTRODUCCIÓN

MI AÑO SABÁTICO 1993-1994 lo gocé como profesor visitante en el Departamento de
Contaduría y Finanzas de la Universidad de las Américas-Puebla. Una de las preocu-
paciones del Departamento es iniciar las actividades de investigación. Tal vez, es difícil
explicar por qué no han iniciado esta actividad. Una de las explicaciones que encuentro es la
tradición. La escuela se constituyó para satisfacer la demanda de estos profesionales en la
zona de influencia de la Universidad, al menos así lo infiero de diversas conversaciones con
los colegas. Desde luego, no era mi propósito averiguar estas razones, ni lo es ahora que
inicio este tema. Considero que éstas no afectan la intención de elaborar esta guía, ni su
posible uso. Pero sí explica el motivo de hacerla.
Se pretende que esta guía sea útil para toda persona que desea hacer investigación formal. El
protocolo consiste en un formulario que elabora una institución para sistematizar la
presentación de los proyectos de investigación que recibe para su estudio, análisis y
dictamen. En general, el formulario se elabora para aquellos proyectos que concursan por
apoyos financieros. El proyecto debe convencer a comités, comisiones o jurados, de que el
alcance o el resultado de la investigación puede llegar a constituir una apor-ración a la
ciencia, a la tecnología, o a ambas. En su mayoría los proyectos de investigación
proporcionan en su mismo
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INTRODUCCIÓN
informe datos, entre otros, acerca de qué tipo de proyecto es, qué problema se aborda, la
teoría en la que se sustenta, la metodología que se seguirá, los recursos que se requieren para
su realización, así como la mención de los casos donde se presente de los recursos con los
que ya se cuenta.
La experiencia ha mostrado que cada investigador proporciona esta información de manera
diferente. Algunas de éstas se hacen evidentes en la secuencia del informe; otras por la
omisión de información y algunas por el exceso de ésta. Esto dificulta tanto la evaluación de
los proyectos como los criterios para seleccionarlos y apoyarlos.
Tal problemática llevó tanto a las instituciones como a los organismos encargados del apoyo
a las actividades de investigación a diseñar formularios que les permitan sistematizar la
información que se requiere, a fin de facilitar el seguimiento. Estos formularios se conocen
como "protocolos".
La guía que se propone es de orientación general. Está enfocada a proyectos de
investigación relativamente complejos y para personas que se inician en estas actividades.
Lo que implica que se reconoce que los investigadores experimentados ya no requieren
guías, pues ellos mismos son una guía para los iniciados; asimismo se reconoce que en la
práctica actual no existen guías para proyectos complejos o extremadamente complejos, ya
que éstos son elaborados por los propios investigadores experimentados.
En virtud de que la fecha de culminación de mi estancia académica está próxima, se tomó la
decisión de elaborar la guía con base en la experiencia personal, sin acudir a la

INTRODUCCIÓN

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bibliografía existente, que es muy amplia y numerosa. Por lo tanto, al usuario de ésta se le
recomienda consultarla y estudiarla, para las adecuaciones pertinentes a su caso particular.
Se pretende que sea una guía práctica y de fácil utilización.

JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

La actividad de +}´´investigación pone de manifiesto el uso de la inteligencia humana como
uno de los elementos diferenciadores de otros seres vivos, y concretamente dentro del reino
animal. El hombre ha sido capaz de transformar el medio ambiente, la faz de la tierra para
satisfacer sus necesidades.
Hoy día quien decida hacer investigación deberá incrementar sus estudios sobre ciencia,
tecnología y desarrollo, método de investigación, lógica, filosofía de la ciencia y estadística,
entre otros, y en particular la ciencia y la actividad sobre la cual va a investigar. Además,
pasar un periodo de entrenamiento al lado de un investigador con algún grado de experiencia.
En términos sencillos, investigación es la actividad humana que se realiza para conocer la
realidad (creación del conocimiento, lograr descubrimientos) y para usar ese conocimiento en
el manejo de la realidad o en la creación de nuevas realidades (modificaciones a lo existente e
invenciones) .
No entraremos ahora en la cuestión de si es para bien o para mal. Simplemente lo hemos
hecho, hemos sido capaces de. No estoy seguro de las fechas o épocas que estudiosos de la
historia y evolución de la investigación dan como nacimiento de esta actividad humana, y lo
que a continuación voy a decir puede ser muy cuestionable. Sin embargo,

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puede ser sencillo, útil e ilustrativo para las pretensiones de esta guía. Además, también
puede ayudar a desmitificar y clarificar algunas concepciones de la investigación:
Tal vez, y guardando las debidas proporciones, la investigación nace cuando el hombre
primitivo logra sus primeros conocimientos. Por ejemplo, cuando observa y concluye que
golpea más fuerte con el puño cerrado que con la mano abierta (observación, prueba,
comprobación, conclusión en un conocimiento). Más tarde descubre que con una piedra en
su mano golpea aún más fuerte. Pero no se queda ahí, es probable que la observación de la
unidad total: brazo, mano y piedra golpeando, lo haya conducido a amarrar una piedra a un
palo y crear así la primera extensión del hombre. No es posible asegurar que haya sido exac-
tamente de esta manera, en esa secuencia y tan rápido, pues posiblemente fue un leño
primero, y entre cada paso pasaron muchas cosas y muchos años, pero lo útil es que el
proceso de adquirir el conocimiento y aplicarlo para satisfacer mejor nuestras necesidades y
tener mayor capacidad de influencia en el medio ambiente, es algo que se reproduce
continuamente y ahora mucho más sofisticado, complejo y riguroso. Muchos conocimientos
científicos ya son conocimiento común; muchos inventos son ya obras comunes. Todo ello,
con los conocimientos científicos y los desarrollos tecnológicos actuales, constituyen el
acervo, el "background", para la investigación que cada vez se inicia.
Hoy día, toda investigación está basada en los conocimientos y tecnologías existentes,
tanto de dominio común como del científico y tecnológico. Por lo mismo, toda in-

vestigación expresará claramente y con la mayor precisión posible cuál es su contribución al
conocimiento o a la tecnología, o a ambos a la vez.
Esto es lo que justifica la investigación, sea científica, tecnológica o bien una combinación
de ambas: la contribución la aportación que se desea lograr. Esta contribución o aportación
no necesariamente ha de ser grandiosa o espectacular. Como explica Thomas Khun en su
libro en el que hace referencia a las revoluciones científicas; entre una ruptura del
conocimiento y otra siempre ha existido una gran cantidad de investigación. Muchas de ellas
con aportaciones significativas, otras con contribuciones modestas algunas de ellas casi
imperceptibles y otras que fueron juzgadas como fracasos, pero todo este trabajo científico
va conformando, desarrollando y cultivando el conocimiento hasta Ilegal al momento de la
ruptura, de la revolución. Lo mismo ha sucedido con los desarrollos tecnológicos. Por
ejemplo, imagínese cuánto trabajo de investigación científica se realizó antes de llegar a
conocer la estructura del ADN; y cuánto desarrollo tecnológico gradual, muchas veces
imperceptible, año tras año, se llevó a cabo sobre el carburador de los automóviles, antes de
llegar al "full injection".
De manera paralela al desarrollo científico del conocimiento de la genética, también se
realizarla el desarrollo tecnológico que permitiera y apoyara la investigación científica, por
ejemplo los microscopios e instrumentos más potentes y precisos para su observación y
manipulación. Asimismo, paralelo a los desarrollos tecnológicos de la in-

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yección de gasolinas a los motores de autos que incrementaban los conocimientos de la
combustión interna de los motores y del comportamiento de ciertos elementos de los
combustibles en diferentes condiciones de trabajo, se estaban desarrollando maquinarias,
instrumentos y procesos nuevos para fabricar estos nuevos motores. Estos ejemplos nos
pueden ayudar a visualizar, cómo se entreteje la complicadísima red de la investigación y
de sus resultados, y además lo importante que ésta es para la vida actual y futura del
hombre.
Lo anterior también nos permite percatarnos de que casi es imposible pensar que sobre tal
o cual tema no hay nada escrito y que se parte de cero. Pero también resulta difícil imaginar
que en la actualidad se agotan los temas de investigación. A cada momento, los resultados de
cualquier investigación abren nuevas fuentes de investigación.

DEFINICIÓN DEL TEMA DE INVESTIGACIÓN

CONSISTE EN DEFINIR lo que se va a investigar. Su enunciado se hace de la manera más
concreta que sea posible, sin apartarse del objetivo de transmitir con precisión la idea de lo
que se pretende aportar.
De manera general, tratándose de investigación científica o básica se observan algunos
lineamientos, sin que éstos constituyan una limitación a las posibilidades de la definición de
temas, simplemente se anuncian como una orientación y pueden ser los siguientes:
1. La existencia de un elemento en el fenómeno que se estudia.
2. La relación o relaciones que tiene un elemento con otros elementos dentro de un
fenómeno. Cuando existen varias relaciones, en la mayoría de los casos conviene iniciar
su estudio una por una y después todas a la vez. O bien, realizar un estudio genérico de
todas a la vez y después una por una.
3. Determinar cuáles son los elementos que integran un fenómeno particular, las relaciones o
funciones entre ellos, de qué tipo son cada una de ellas, criterios con los cuales se pueden
jerarquizar o clasificar los elementos y las relaciones que establecen, las estructuras que
conforman según su jerarquización y clasificación y, las relaciones que guardan. Una
investigación de estas caractetís-
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ticas es conveniente planearla en varias investigaciones sucesivas o complementarias.
4. Descubrir criterios de clasificaciones, tipificaciones, caracterizaciones de fenómenos,
elementos, componentes, relaciones, funciones.
5. Descripción y explicación de estructuras.

6. Proposición de parámetros de medición.

Ejemplos:
a) (Del 1 y 2) Taylor descubre y demuestra que la división del trabajo* (elemento de la
administración) incrementa (relación casual) la productividad'(elemento de la admi-
nistración) .
b) (Del 3) Fayol encontró que la administración está inte- ■ grada por cinco principales
funciones (determinación de elementos): planeación, organización, dirección, coordinación
y control.
c) (Del 4 y 6) Las investigaciones de Likert aporran una clasificación del liderazgo y una escala
para su evaluación y clasificación.
d)(Del 5) Uno de los hallazgos de los estudios de-Hawthorne que dirigió Elton Mayo, fue el
de la estructura de los grupos informales dentro de las empresas.
Como se puede apreciar, no hay investigaciones totalmente puras de cada tipo; sin embargo,
contar con un esque-

* Las cursivas son del autor para fines explicativos.


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ma, el que sea, al menos de los más usuales, permite iniciar la búsqueda del tema que se
desea investigar y si ya se tiene experiencia en los más comunes se puede incursionar en
esquemas más particulares.
No se investiga lo obvio, lo que va se sabe, lo que ya es conocimiento común, a menos que
se tenga una teoría suficientemente sustentada en investigaciones que plantean una duda
razonable acerca de lo considerado obvio, y que lo que todo mundo acepta como algo
conocido, no es así; es decir, de que existe la duda fundamentada de que estamos
equivocados. Tampoco se investiga la importancia, la "importancia" es un resultado natural
de la investigación, no un propósito de la investigación. Lo que es o no importante, o el
grado de importancia, generalmente se determina en las investigaciones sobre las
estructuras.

ESTADO DEL ARTE

EL ESTADO DEL ARTE o marco teórico {background para los estadounidenses) es el acervo de
conocimientos y experiencia que se tiene sobre el ámbito de estudio donde se ubica la
investigación a realizar. Consiste en describir los antecedentes teóricos, el trabajo de
investigación, los estudios o ensayos que se han realizado y que permiten fundamentar,
justificar y buscar la investigación propuesta.
Esto implica que se conoce el campo del conocimiento relativo a la investigación. Asimismo
que se cuenta con una bibliografía que ha sido estudiada, lo que demuestra un cierto dominio
sobre ese campo del conocimiento, y se hace evidente cuando se redacta. Es decir, el estado
del arte o marco teórico constituye una investigación bibliográfica.
Entre los requisitos que debe cumplir toda investigación está el de que sea verificable y
replicable. Estos también son aplicables a la investigación bibliográfica. Verificable significa
que pueda comprobarse lo que se afirma en forma oral o escrita. Por replicable se entiende
que otro investigador esté en posibilidad de realizar la misma investigación con las mismas
condiciones.
Para cumplir lo anterior, durante el discurso científico se debe hacer evidente el uso de la
bibliografía que se utilizó haciéndola figurar en las notas de pie de página. No son
convenientes ni recomendables frases como: "muchos estudiosos dicen...", "se ha establecido
que ...", "algunos

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ESTADO DEL ARTE
tratadistas han concluido ...", si nunca se indica quienes son los estudiosos, quién o quiénes
han establecido o quiénes son los tratadistas, y se pretende llenar este hueco en los discursos
relacionando la bibliografía al final del documento. Lo recomendable y la práctica más
generalizada universal-mente es que se indique quién o quiénes dicen, establecen o
concluyen, mencionando su primer apellido y el año de la publicación, cuando menos.
Algunos más rigurosos indican la página o páginas. Por ejemplo: "Apoyados en el modelo del
equilibrio (Miller y Friesen, 1980; Tushman y Romanelli, 1985) han argumentado que las
organizaciones ...", "en una investigación que realizaron Rosen, Templetony Kichiine (1981)
encontraron que las mujeres gerentes ...". Sin embargo, es imprescindible citar la página o las
páginas cuando se hace una cita textual, p. e. "la relativa importancia de estos factores en una
decisión de promoción particular o a través de las decisiones, ha recibido poca atención"
(Stumpf and London, 1981b: 543).
Otro aspecto que es recomendable cuidar es el estilo de redacción. Las ideas deben ser
expresadas de manera directa; con un uso conecto de las palabras que evite utilizarlas con los
significados gráficos que tienen en el lenguaje popular; a menos que sea un hecho, dato o
información que va a ser sujeto de análisis, entonces se cita entrecomillado y con el menor
número de palabras posible sin perder la claridad, p. e.:
"es importante tener en cuenta que cuando se está en el estudio de la reputación de las
actuaciones, el enfoque estructu*-

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ESTADO DEL ARTE
ral nos permite examinarlas de la manera en que se analiza la estructura de
relaciones en una organización completa." (39 palabras).
"el enfoque estructural sugiere examinar la reputación de las actuaciones en términos
de la estructura de relaciones en una organización completa." (21 palabras).
Obsérvese que se eliminan algunos adjetivos no necesarios y consideraciones que
están implícitas en la idea que se transmite y no se afecta la información ni la
comunicación. En el discurso científico la transmisión de las ideas se estructura de la
manera más directa y concisa que sea posible.
Al final de este capítulo deberá relacionarse cuando menos la bibliografía utilizada.
Sin embargo, es recomendable indicar con que bibliografía complementaria se cuenta.

PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

EL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN no es el tema de la investigación. El tema es la
denominación del problema. El problema es el objeto de la investigación y está
constituido por el conjunto de implicaciones, efectos, significados que tienen o provocan
los fenómenos, los elementos, las relaciones que se pretenden estudiar. Es la descripción
analítica del tema. El problema se infiere del análisis que se realiza en el estado del arte.
Es común que se constituya con una descripción de las hipótesis. El planteamiento del
problema permite enunciar las hipótesis que se pretende probar. Las hipótesis son
enunciados concretos de los cuestionamientos que se plantean en el problema o
proposiciones que se pretende probar, tratándose de una investigación básica, por
ejemplo: "entre mayor sea el tamaño de una organización, mayor es el nivel de
responsabilidad de los empleados": o las aseveraciones a priori en que se sustenta la
investigación aplicada o el desarrollo tecnológico, por ejemplo: "las firmas que
secuencialmente entran a los mercados extranjeros, se moverán de su línea de negocios
hacia nuevas líneas de negocios".
Puede observarse que en el primer caso se plantea una proposición que trata de probar una
relación causal entre el tamaño de las organizaciones y el nivel de responsabilidad de los
empleados, lo que tal vez permita plantear una teoría en torno del tamaño de las
organizaciones y la con-

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PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

ducta de los miembros. En el segundo caso se trata de una aseveración, proveniente de otra
u otras investigaciones en la que se podrían sustentar ciertos planes o restructuraciones
organizacionales específicas u otros desarrollos tecnológicos administrativos. Se insiste
nuevamente en que deben revisarse las investigaciones publicadas en revistas especializadas
extranjeras y nacionales a fin de familiarizarse con la diversidad de planteamientos de
problemas y de hipótesis que ha sido posible formular y que son sugestivas para expresar
el problema y las hipótesis que se pretenden abordar en el protocolo que se está
elaborando.

JUSTIFICACIÓN

LA JUSTIFICACIÓN ES LA EXPOSICIÓN de las implicaciones que puede llegar a tener el
conocimiento que se espera lograr, explicando en qué consiste el avance y qué duda o
sospecha pretende resolver. Desde luego, se debe referenciar con notas de pie de página
hasta donde haya quedado el último avance, o de qué trabajos proviene la duda o qué
trabajos científicos insinúan la existencia de escaso o nulo conocimiento. Tratándose de
investigaciones aplicadas o de desarrollo tecnológico, la justificación consiste en explicar,
de preferencia con referencias bibliográficas, el problema que se resuelve, su utilidad
práctica y las ventajas que tiene. De ser posible, acompañarlo de comparaciones y
evaluaciones (cuantitativas o cualitativas y de preferencia ambas), la posibilidad de
aplicaciones y usos inmediatos y potenciales, ordenándolos, de preferencia, bajo algún
criterio de jerarquización.

BIBLIOGRAFÍA
La presentación de la bibliografía debe hacerse observando los convencionalismos más
generalizados, que son publicados en manuales o guías de redacción y en algunos libros de
metodología, los cuales es recomendable consultar. Aquí se mencionarán las más usuales: las
de libros y revistas.
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JUSTIFICACIÓN

Libros
Christensen, C.R., K.R. Andrews, J.L. Bower, R.G. Hamermesh y M.E. Porter, (1982),
Busines Policy: Text and Cases (5th ed.) Homewood, II, Irwin.
Rousseau, D., (1983), "Technology in Organizations: A Constructive Review and Analitical
Framework", en S.E. Seashore, E.E. Lawler, III, y C. Cammann (comps.), Assessing
Organizational Change, Nueva York, John Wiley, 229-253.

Revistas
Woodman, R.W., J.E. Sawyer y R.W. Griffin, (1993), "Toward a Theory of Organizarional
Creativity", Academy of Management Review, 18: 293-321.

Observaciones
En ambos casos obsérvese que el uso de las letras mayúsculas se limita a lo estrictamente
necesario; se inicia con el apellido de los autores; en cuanto a los nombres, únicamente la
letra inicial con mayúscula; a continuación el año de la publicación. Tratándose de libros, el
título de éste se destaca usando letra cursiva. Si no se cuenta con computadora y un
procesador de textos, subrayar o escribir entre comillas. A continuación la edición, sólo a
partit de la segunda cuando es la primera no se acostumbra indicarlo, es decir si no se indica
la edición, se sobreentiende que es la

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JUSTIFICACIÓN
primera. Después la ciudad donde se editó el libro y finalmente la casa editora,
mencionándola por su nombre comercial, no por su denominación social, por ejemplo, no
es usual "Prentice-Hall, Inc.", lo acostumbrado es: "Prentice-Hall". Cuando se trata de un
trabajo publicado en un libro (véase el segundo ejemplo de libros), se inicia indicando el
autor del trabajo y el título del trabajo, en seguida la indicación "en" y la cita del libro en la
forma acostumbrada, destacándose el título de éste.
Por lo que hace a revistas, después de indicar los autores y el año, el título del trabajo: el
nombre de la revista, destacándolo con letra cursiva y negrita o en la forma ya indicada en
libros; el volumen de la revista, o en su defecto el número o la fecha; y finalmente las
páginas donde se encuentra el artículo de referencia, incluyendo desde la página del título
hasta la página de la bibliografía. La mayoría de las revistas tienen los siguientes datos:
volumen, número y fecha.

OBJETIVOS

LOS OBJETIVOS EXPRESAN LOS LOGROS que se pretende alcanzar con la investigación.
Tratándose de una investigación básica, pueden consistir en lo siguiente (de manera
enunciativa, no limitativa):
• un hallazgo,
• una comprobación,
• una demostración,
• la aportación de una clasificación,
• la descripción de una estructura,
• una refutación,
• la aportación de una teoría o una hipótesis.
Tratándose de una investigación aplicada o de desarrollo tecnológico, de la misma manera
enunciativa, pueden ser los siguientes:
• la invención de un producto nuevo,
• la invención de un proceso nuevo,
• la sustitución de materiales,
• la invención de equipos e instrumentos de trabajo,
• la mejora (innovación gradual) de productos, procesos, materiales, equipos o
instrumentos,
• la experimentación de un producto, proceso, material, equipo o instrumento nuevo o
mejorado,
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OBJETIVOS

• el diseño de un producto, proceso, material, equipo o instrumento,
• el diseño de modelos o sistemas operativos,
• la construcción de plantas piloto.
También son frecuentes los proyectos de desarrollo tecnológico complejos o altamente
complejos que involucran varios propósitos o todos los anteriores y algunos otros más, en
ese caso estamos frente al desarrollo tecnológico de un sistema, aún cuando generalmente
no se indica así, y simplemente se le da un nombre que únicamente tiene significado para
los involucrados, por ejemplo: proyecto apolo, proyecto satélite solidaridad.
En cualquiera de los casos, en el protocolo de investigación se debe indicar el objetivo
principal y los secundarios en orden jerárquico.
Para el enunciado de los objetivos en una investigación básica es de mucha ayuda el
planteamiento hipotético. Tratándose de una investigación aplicada o de desarrollo tec-
nológico, es útil apoyarse en la problemática que pretende resolver y en las utilidades que
se vislumbran, también bajo un criterio de jerarquización.

METAS

LAS METAS SON LAS ETAPAS o pasos que se planea realizar para llevar a cabo los objetivos del
proyecto de investigación. Generalmente son expresados en forma muy concreta y dentro
de un criterio secuencial, de manera que den una idea clara de lo que se va a realizar en cada
etapa de la investigación. Algunas de éstas ofrecen resultados parciales tangibles que deben
mencionarse. De manera ilustrativa se ofrece un ejemplo sencillo (desde luego no
constituye ningún patrón a seguir, pues cada investigación tiene sus propias metas):
1. Acopio de bibliografía.
2. Análisis, crítica y discusión de la bibliografía.
3. Elaboración de artículo o artículos.
4. Participación con ponencia en foros académicos.
Comentario: Es recomendable que el estudio de la bibliografía que se hizo no quede
únicamente en la memoria del investigador. La forma en que la analiza, la interpreta, la
cuestiona, la aplica, la utiliza para su problema, debe divulgarse para utilidad de la
comunidad científica a la que pertenece. Si recibe críticas o comentarios ¡enhorabuena!
pues ha interesado a su comunidad y constituyen una retroalimentación a su proyecto.
Algunos investigadores utilizan esta etapa para construir el o los primeros manuscritos del
estado del arte.
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META
5. Selección y elaboración de instrumentos de observación y medición.
6. Elaboración de artículo o artículos.
7. Participación con ponencia en foros académicos.
Comentario: Los artículos y las ponencias se elaboran generalmente para dar a conocer los
instrumentos de observación o de medición que se han construido. En estos artículos se
expone la justificación teórica y problemática que sustentan su construcción, sus usos
inmediatos y los potenciales, sus limitaciones y condiciones restrictivas bajo las que opera.
8. Universo de estudio y selección de la muestra.
9. Observaciones, experimentos, mediciones [...]

10.Análisis y discusión de los resulrados obtenidos.
11.Elaboración de artículo.
12.Participación con ponencia en foros académicos.
Comentario: La difusión de los resultados y conclusiones de una investigación en revistas
especializadas es ineludible. Este trabajo se simplifica cuando se han realizado pu-
blicaciones y ponencias previas sobre diversas etapas o aspectos de la investigación.

PLAN DE TRABAJO

EL PLAN DE TRABAJO es la descripción con cierto grado de detalle del proceso que se
pretende seguir para realizar la investigación. Consiste en el enunciado concreto de cada
uno de los procesos (conjunto de actividades que tienen un fin predeterminado) necesarios
en que se ha subdividido el trabajo de investigación. Su enunciado se hace atendiendo a la
secuencia lógica de eslabonamiento y a la continuidad propia de cada uno de ellos. El uso
de técnicas de programación como la ruta crítica y las barras de Gantt son un buen apoyo
para este proceso y ios siguientes.

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CALENDARIO DE ACTIVIDADES

EL CALENDARIO DE ACTIVIDADES es la programación cronológica de las actividades que se
van a realizar para llevar a cabo el proyecto de investigación.
Comentario: Para elaborar el plan de trabajo y el calendario de actividades es conveniente
tener en cuenta la metodología que se definió seguir (que deberá estar explícita en algún
documento publicado o inédito) y las metas. La elaboración de la metodología, las metas,
el plan y el calendario están impregnadas del grado de creatividad e innovación que es
capaz de desarrollar el investigador, en función de la infraestructura y recursos con que
cuenta y por lo mismo tienen un alto grado de originalidad. Fernando Ibarra, amigo y
colega, dijo en alguna ocasión que existen tantas metodologías como investigaciones hay.
No lo he verificado, pero como consecuencia de las investigaciones que he conocido,
encuentro mucho de verdad en su aseveración.

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INFRAESTRUCTURA DISPONIBLE

EN ESTE CAPÍTULO se relacionan las instalaciones, equipos, instrumentos y sistemas de
apoyo, tanto físicos como humanos, con que se cuenta para tealizar la investigación.
Incluye expertos, técnicos, edificaciones, laboratorios, equipamientos, instrumentos de
trabajo, sistemas de cómputo y comunicación incluyendo tedes, bibliotecas.
Es importante tener en cuenta este aspecto desde el momento en que se genera la idea;
ya que si se desea genuina-mente realizar la investigación, ésta deberá planearse de
manera que sea realizable con los recursos con que se cuenta o porque sea muy alta la
certeza de adquirir lo que falta. El grado de viabilidad de un proyecto de investigación, en
buena parte está en función del grado de dependencia de la adquisición de infraestructura.

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FORMACIÓN DE INVESTIGADORES

LA FORMACIÓN DE INVESTIGADORES o formación de recursos humanos (sin entrar en la
polémica sobre si el hombre es o no un recurso, prefiero la primera descripción) se refiere
a las acciones concretas que se llevan a cabo durante ia realización de las investigaciones
para satisfacer la necesidad social de incrementar el número de investigadores en activo.
Además de realizar los estudios formales convenientes para que las personas se capaciten
y habiliten en la actividad de investigación, es indispensable que realicen trabajos con
investigadores experimentados.
La investigación se aprende trabajando en ella. Ahí se forja el investigador. Estudios y
trabajo son complementarios, no obstante ante la falta de uno de ellos, lograr la formación
de los investigadores es mayor cuando se trabaja desarrollando la propia investigación. En
la actualidad existen grupos donde se puede aprender a investigar. La opción "echando a
perder se aprende" debe tomarse en casos muy extremos. Las instituciones educativas que
imparten estudios de postgrado sin programas de investigación, tienen la posibilidad de
acudir a las que sí cuentan con ellos, y, de manera creativa, negociar estrategias y acciones
que satisfacen sus necesidades de formación de investigadores, ya que todas las
investigaciones permiten y requieren la incorporación de personas en formación a
diferentes niveles.
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FORMACIÓN DE INVESTIGADORES

El supuesto más generalizado es que una investigación es realizada por un equipo de
investigadores, constituido por: directores, asociados, asistentes, técnicos, tesistas, estudian-
tes.
El tamaño del equipo, su experiencia y madurez, incrementan la viabilidad del proyecto
de investigación.
En general, en el proyecto se integra un resumen de la curricula de cada uno de los
participantes, misma que destaca la formación académica a partir de licenciatura: la(s) tesis
que ha dirigido, membresías de asociaciones académicas y profesionales a las que
pertenece, reconocimientos académicos que le han otorgado, actividades como consultor o
experto y relación de publicaciones a la fecha.

RECURSOS NECESARIOS PARA EL PROYECTO

ESTE CAPÍTULO TRATA acerca del informe relativo a la cantidad, tipo de personas y recursos
físicos que son necesarios para la realización de la investigación que se propone.
Por lo que respecta a personas, de manera general se refiere a asesores, investigadores,
especialistas, técnicos, tesistas, alumnos. El director del proyecto determinará el perfil de
capacidades y habilidades que debe cubrir cada persona.
En cuanto a recursos físicos, generalmente son los relativos a construcciones, equipos,
aparatos, instrumentos, herramientas, hardware, software, materiales, sustancias, etcétera.
El director debe conocer ampliamente lo relativo a las especificaciones y características de
cada uno de estos recursos, así como el precio aproximado y posibles proveedores.
Es conveniente que dutante la gestación de la idea el director inicie las negociaciones con
autoridades y organismos de financiamiento que lo lleven a obtener cuando menos un
compromiso moral que le dé un alto grado de seguridad de que apoyaron el proyecto y las
adquisiciones necesarias.

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PRESUPUESTO

EL PRESUPUESTO CONSISTE en la evaluación monetaria, lo más aproximada posible, del costo
de las inversiones necesarias para la realización de la investigación. Los conceptos más
comunes son:
• director(es) del proyecto,
• investigadores,
• personal,
• expertos,
• bibliografía (libros, revistas, compra de artículos y otros documentos),
• consultas a bancos de información,
• pasajes y viáticos (trabajos de campo, visitas a investigadores con los que se trabaja
conjuntamente, asistencia a foros académicos, etc.),
• terrenos y construcciones,
• equipo de laboratorio,
• sustancias y materiales,
• maquinaria y equipo para talleres,
• herramientas y accesorios,
• equipo de computación y paquetes para procesamiento de datos.
Es necesario indicar cuáles son las instituciones que participarán en el financiamiento del
proyecto, determinando
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PRESUPUESTO

montos y porcentajes que aportarán cada una de ellas y las partidas que cubre cada
aportación.
Éstos son los puntos más generales que requieren los protocolos de investigación. Las
diferencias entre los protocolos de una institución a otra pueden consistir en informaciones
específicas adicionales, entre ellas curriculum del director y/o responsable del proyecto y de
los participantes; o bien, información sobre el centro de investigación donde trabajan tanto
el director y/o el responsable del proyecto. Si se trata de un proyecto de investigación
conjunta donde participan dos o más instituciones, generalmente se informa sobre las
aportaciones y responsabilidades de cada institución y el papel que asumen sus
representantes. En fin, cada institución particular tiene elaborado su protocolo con sus
propias especificaciones respecto de los tipos de apoyos que ofrece a la investigación. Cada
proyecto de investigación tiene sus propias características, por ejemplo, no es lo mismo un
proyecto de investigación básica que un proyecto de investigación aplicada. Por lo tanto, el
investigador que llena el protocolo deberá tener una concepción clara y completa del
proyecto de investigación que se va a realizar, ya que el protocolo es únicamente un
formulario o formato que se ha elaborado, con especificaciones propias de cada proyecto de
investigación.
Recuérdese al llenar el protocolo, éste puede ser un formulario en papel o estar
incorporado en un disket, que es el único medio y tal vez la única vía que se tiene para de-
mostrar y convencer a quien está dirigido, de la capacidad del investigador, de lo
importante del proyecto y el porqué debe ser apoyado. De manera que el protocolo debe y
merece ser llenado con todo cuidado y rigor. ¡Buena suerte!

EJEMPLO I*
EXPRESIÓN Y REGULACIÓN

DEL GEN DE COLAGENASA EN
CÉLULAS
HEPÁTICAS EN CULTIVO

* En este ejemplo se eliminan hojas de información detallada. Se conserva una página de cada
tipo de información como muestra ilustrativa para el lector.

EXPRESIÓN Y REGULACIÓN DEL GEN

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
DATOS GENERALES
NO ESTÁ ASOCIADO A NINGÚN PROGRAMA

Título;
Expresión y regulación del gen de colagenasa en células hepáticas en cultivo
Comité a evaluarlo: Ciencias de la salud
Disciplina: Ciencias de la salud
Especialidad: Biología molecular en medicina
Duración del proyecto: 6 cuatrimestres
Monto solicitado a Conacyt: 291,000 (nuevos pesos)
Datos de la institución solicitante:
Universidad de Guadalajara
Dependencia: Centro Universitario de Ciencias de la Salud (C.U.C.S.)
R.F.C.: UGU250907-MH5
Domicilio: Juárez núm. 975 Sector Juárez C.P.:.
Rector o responsable ante Conacyt:
Dr. en C. Víctor Manuel González Romero
Nombramiento: Rector General de la Universidad de Guadalajara

Director de la dependencia
Dr. Raúl Vargas López
Datos del responsable del proyecto
R.F.C.: AEBJ-570309
Dr. Juan Socorro Armendáriz Borunda
Nombramiento: Profesor e Investigador titular, C, tiempo completo
Domicilio laboral: Sierra Mojada s/n Independencia C.P. 44340
Teléfono laboral: 913 617-4159 Extensión: 0 Fax: 915 617-4159
Domicilio particular: López Cotilla 1542 Int. 7 Moderna, Sector Hidalgo C.P.:
Teléfono particular: 915 616-9441
Datos del administrador del proyecto
Med. Esp. Víctor Manuel Lara Vélez
Nombramiento: Secretario Administrativo del C.U.C.S.
47

48 EJEMPLO I

SOLICITUD DE APOYO
DESGLOSE FINANCIERO

Gasto corriente
Honorarios por servicios profesionales20,000
Viáticos 0
Pasajes 0
Gastos de trabajo de campo 0
Ediciones e impresiones 6,000
Servicios externos y comerciales 0
Cuotas de inscripción 0
Profesores visitantes 0
Becas para proyectos de investigación 0
Artículos, materiales y útiles diversos163,000
Documentos y servicios de información5,000
Libros 5,900
Animales para rancho y granja 0

Total gasto corriente 199,900

Gasto de inversión

Equipo de 236,5
laboratorio Equipo 00
de cómputo 54,60
Herramientas y 0 291,10
accesorios Total 0 0
gasto de inversión
491,00
Total solicitado 0

EXPRESIÓN Y REGULACIÓN DEL GEN 49

PROTOCOLO DEL PROYECTO ANTECEDENTES
PATOFISIOLOGÍA DE LA CIRROSIS HEPÁTICA

LA CIRROSIS DEL HÍGADO es un padecimiento que lleva necesariamente a la muerte si el
paciente no recibe oportunamente un adecuado tratamiento de soporte. Datos de 1993 indi-
can que la cirrosis hepática y otras enfermedades crónicas del hígado se situaron como
tercera causa de mortalidad hospitalaria en México (SS, 1993).
La cirrosis del hígado es "un proceso difuso caracterizado por fibrosis y una conversión
de la arquitectura en nódulos estructuralmente anormales" (Boyer, 1994). Con este proceso
se asocian cambios vasculares importantes que conllevan a una alteración en el suministro
sanguíneo y por ende en la nutrición de la célula hepática.
Una de las características principales de la fibrosis y cirrosis hepática es la deposición en
exceso de varias proteínas de matriz extracelular (MEC) (particularmente colágena tipo I)
(Aycock y Seyer, 1989) en diversos sitios del lóbulo hepático (periportal, perisinusoidal y
pericentral), lo que ha su vez es un determinante principal de los efectos patológicos en la
función hepática. La fibrosis periportal distorsiona la triada portal (ducto biliar, vena
portal, y arteria hepática) restringiendo así el flujo biliar y sanguíneo. La fibrosis
perisinusoidal, en la cual las proteínas de matriz se acumulan entre los hepatocitos y el
endotelio sinusoidal, altera la función celular y puede alterar el flujo de los nutrientes a

50 EJEMPLO I

los hepatocitos. La fibrosis pericentral puede impedir el flujo sanguíneo sinusoidal e
incrementar la presión portal en la cirrosis (Friedman y Bisell, 1990).
Las nuevas perspectivas terapéuticas en el tratamiento de la cirrosis se basan en el
conocimiento de la biología de la modulación de la MEC en la fibrosis hepática, compren-
diendo las bases moleculares de la síntesis y degradación de las proteínas de matriz y de las
citocinas envueltas en la fibrogénesis hepática.

MECANISMOS PATOMOLECULARES EN LA CIRROSIS
HEPÁTICA

En el proceso fibrogénico están involucrados diversos tipos celulares presentes en el
microambiente hepático. Se ha descrito ampliamente la participación de las células de Ito
como la principal fuente celular de síntesis de MEC durante la fibrogénesis hepática
(Melani etal., 1989; Armendáriz-Borunda etai, 1994). La participación de las células de Ito
en este proceso depende de su previa activación por diversos factores bioquímicos, entre
los que se cuentan: la propia MEC, mediadores solubles como los factores de crecimiento
transformante beta (TGF-B, por sus siglas en inglés), de crecimiento derivado de plaquetas
(PDGF), de necrosis tumor al alfa (TNF-a), derivado de las células de Kupffer, de
crecimiento epidemial, corticosteroides y el acetaldehido (Friedman y Bisell, 1990;
Armendáriz-Borunda et ai, 1992). Asimismo, las células de Kupffer

51

presentes en el sinusoide desarrollan un papel fundamental en la activación de las células
de Ito al secretar algunas de las atocinas descritas e incluso al contactar directamente con
ellas con la emisión de prolongaciones a través de las fenestraciones de las células
endoteliales del sinusoide (Armendáriz-Borunda et al., 1989).
Diversos cambios se presentan en el microambiente hepático ante el exceso de proteínas
colagénicas en el espacio subendotelial; entre estos cambios se cuentan la pérdida de
vellosidades del hepatocito, la aparición de una membrana basal y, finalmente, la pérdida
de fenestraciones de las células endoteliales, un proceso conocido también como
capilarización de sinusoides. Con el cierre de este espacio, se impide el libre intercambio
de nutrientes entre la sangre sinusoidal y el hepatocito; de igual manera se ven impedidas
la destoxificación de diversas sustancias por el hepatocito, así como también la
incorporación de metabolitos producidos por el hígado al torrente sanguíneo. Estos
fenómenos explican algunas de las características clínicas de la cirrosis hepática como
analbuminemia, disminución en la sangre de algunos factores de coagulación y la
encefalopatía hepática, entre otros.
En el hígado, en condiciones normales existe un equilibrio entre las proteínas de
colágena y la coiagenasa, enzima intersticial que degrada de manera específica las
colágenas tipo I, II o III y que es secretada por los hepatocitos, las células de Ito y los
fibroblastos y neutrófilos circundantes (Hasty et ai, 1990); esta homeostasis se ve alterada
por el incremento de las primeras durante la cirrosis; es por ello

52

EJEMPLO I

que una de las estrategias terapéuticas para la eliminación del exceso de colágena se haya
enfocado en la inducción de la síntesis y de la actividad de la enzima colagenasa por las célu-
las hepáticas. Diversos tratamientos se han efectuado en este sentido con relativo éxito, sin
embargo, no se ha logrado la reversión total del padecimiento, probablemente debido a que
no se ha alcanzado la cantidad suficiente de la enzima en el espacio subendotelial, o bien su
actividad es reducida.

TRANSFECCION DE CÉLULAS EUCARIÓTICAS

Una de las formas para lograr cantidades suficientes de la enzima colagenasa en el
microambiente hepático es a través del incremento en la transcripción del gen que la codi-
fica en las células hepáticas, mediante la incorporación de un mayor número de copias de
dicho gen en el ADN cromosómico de la célula.
Para ello, y gracias al desarrollo de diversas herramientas de biología molecular, ahora es
posible la modificación transitoria o estable del genotipo de casi cualquier tipo de célula
mediante la introducción de ADN exógeno, de una manera tal que se pueden incrementar o
disminuir funciones específicas e incluso desarrollar nuevas funciones en una célula que
contenga la maquinaria transcripcional requerida para la síntesis de la nueva pro teína
(Martínez-Fong etal, 1994).
Al proceso de introducción de ADN exógeno a una célula eucariótica se le conoce como
transfección y consiste en la incorporación de un gen deseado a una célula a través


de un vector de expresión dado. Entre los vectores más utilizados para este fin se
encuentran los plásmidos; los cuales son segmentos circulares extracromosomales de ADN
que contienen regiones donde se inserta el gen de interés (sitios de clonación múltiple),
regiones que promueven la expresión general o específica del gen insertado (promotores),
regiones donde se localiza la capacidad de resistencia a antibióticos y regiones que
codifican a alguna enzima utilizada para la identificación de las células transfretadas.

Figura 1. Regiones componentes de un plásmico tipo (pUC19). Amp: gen de resistencia a
ampicilina; O: origen de replicación del plásmido pBR322 P: secuencia codificante de
poli-Adenosina; lac Z: gen estructural de E. coli de la enzima metabolizante del azúcar
galactosa (B-galactosidasa). Dentro de la región de lac Z hay una secuencia que contiene
varios sitios de reconocimiento único para enzimas de restricción, en la cual se inserta el
gen de interés. El gen se presenta en forma de ADN complementario (cADN), producto de
la transcripción inversa del ARN mensajero (mARN) que codifica para la proteína de
interés. Cuando los fragmentos de ADN se clonan en esta región, el gen de lac es
inactivado, lo cual se utiliza para la identificación de las células transformadas con este
plásmido (ensayo colorido de actividad de B-galactosidasa sobre el sustrato X-gal). Una
vez incorporado el plásmido al ADN de la célula eucariótica, ésta transcribe al gen
exógeno, lo que finalmente se traduce en la síntesis de la proteína deseada completamente
funcional.

54 EJEMPLO I

Se han utilizado diversos promotores con características particulares dentro de los vectores de
expresión, según sea la necesidad de controlar el grado de expresión de un gen determinado
o la de expresarlo en un tejido específico. Así por ejemplo, el promotor de albúmina (p alb)
dirige la expresión del gen que le acompaña únicamente en las células que cuentan con los
factores transcripciones que interactúan específicamente con esta región (í.e., hepato-cítos).
Además, diversos plásmidos tienen insertada la región promotora del gen de
fosfoenolpiruvato carboxicinasa (PEPCK, por sus siglas en inglés), enzima citosólica que par-
ticipa en la gluconeogénesis hepática. Esta secuencia, además de interactuar específicamente
con los factores transcripciones del hepatocito, puede ser regulada positiva o negativamente
por ciertos elementos presentes en el entorno celular (e.g., insulina, glucocorticoides, AMPc),
característica que la hace atractiva para el manejo experimental del nivel de expresión de un
gen deseado controlado bajo el mencionado promotor (Tilghman et al. 1974; McGrane et
al., 1988). Por ejemplo, en roedores en los que se les ha transfectado un gen dado con el
promotor de PEPCK, se puede lograr a voluntad la expresión de dicho gen, variando el
contenido de azúcares o proteínas en la dieta, ya que se conoce plenamente que ante
decrementos en el nivel de azúcar (glucosa) en el organismo o incrementos en el nivel de
proteínas, el gen de PEPCK del hepatocito se activa y por ende se induce la expresión del gen
asociado a dicho promotor (Martínez-Fong etal, 1994; Perales etai, 1994).

56
EJEMPLO I

lizar pruebas en modelos in vitro en condiciones experimentales controladas.
Se han utilizado para este fin líneas celulares en cultivo, las cuales retienen aún algunas
características propias del tipo celular de la que derivan y facilitan el control de variables
con respecto al origen de las células que provienen. La línea celular HepG2, proveniente de
células hepáticas humanas, contiene la maquinaria transcripcional específica del hepatocito
requerida para la síntesis de nuevas moléculas proteicas. Con ello, y utilizando plásmidos
con regiones promotoras específicas para hepatocitos, (e.g., promotor de albúmina) se
puede dirigir la transcripción del gen de interés insertado en el mismo vector de expresión.
Además, con la finalidad de regular experimentalmente la expresión del mismo, en nuestro
caso la expresión de la colagenasa, el gen de la enzima puede estar bajo el control de la
región promotora de PEPCK, de tal forma que mediante la adición de diversos compuestos
como insulina, AMPc y glucocorticoides, seamos capaces de modular el grado de expresión
de la enzima.

BIBLIOGRAFÍA

Armendáriz-Borunda, J., P. GreenwelyM. Rojkind (1989),
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Hanson (1994), Proc. Nati. Acad. Sci., EUA, 91:4086-
4090. Tilghman, S.M., R.W. Hanson, O. Meyuhas, L. Reshef y
FJ. Ballard (1974), Proc. Nati Acad. Sci. EUA, 71:1304-
1308. Secretaría de Salud (SS) (1993).

58

EJEMPLO I

OBJETIVOS

LOS OBJETIVOS A ALCANZAR en este proyecto de investigación son los siguientes:

1. Dirigir específicamente la expresión del gen reportero
cloranfenicol acetil transferasa (Cat) a células hepáticas en
cultivo mediante el empleo de un promotor exclusivo de cé
lulas hepáticas (promotor de albúmina) en el vector de ex
presión p9.12 alb CAT

Además de conocer la eficiencia de la transfección transitoria de ADN a diversas líneas
celulares en nuestras condiciones experimentales, es necesario corroborar que la línea
celular HepG2, tipo celular en donde se enfocará principalmente nuestro estudio, aún
retiene algunas de las características propias de las células de las que derivaron (Le.,
células del parénquima hepático); puesto que deben contener aún los factores
transcripcionales específicos requeridos para la expresión de albúmina, proteína que es
producida fundamentalmente por las células hepáticas.

2. Evaluar la eficiencia de transfección del gen exógeno de
colagenasa y del gen reportero CAT a células en cultivo.

Por la transfección con el plásmico pUCl 9/colagenasa se determinará el grado de
expresión de la enzima colagenasa

EXPRESIÓN Y 59
REGULACIÓN DEL GEN

y se relacionará con ia actividad de CKT producto de CAT. cotransfección con el
plásmido pSV2CAT en la misma célula. Con este ensayo se evaluará la eficiencia de
la trans-fección de ADN exógeno así como la capacidad de producción de la enzima
colagenasa por la célula hepática a partir de la integración del gen exógeno en su
genoma.

3. Regular la expresión in vitro del gen exógeno de colagenasa en células hepáticas en
cultivo mediante el control de sustratos que interactúan con la región promotora del
gen transfectado.

Es importante poder controlar a voluntad la expresión, o no, del gen de colagenasa,
dependiendo de la respuesta presentada por la célula transfectada; debido a ello es que
se plantea la necesidad de regular este gen exógeno bajo el promotor de PEPCK. El
promotor de PEPCK controlaría al gen de la colagenasa, expresándola cuando
estuviese en presencia de factores tales como AMPc y glucocorticoides, y no
haciéndolo cuando hubiere insulina.
De esta forma, si se requiriese un aumento o disminución de la enzima en el
microambiente celular, bastaría con adicionar al medio de cultivo algunos de los
compuestos mencionados.

60
EJEMPLO I

METAS

DENTRO DE LAS METAS a alcanzar por este proyecto se contemplan:

1. Establecer y optimizar la metodología de introducción de ADN exógeno a células
eucarióticas en cultivo (proceso de transfección).
2. Conocer los mecanismos de expresión del gen de cola-genasa controlado bajo una
región promotora regulable y específica para las células hepáticas en cultivo, para
posteriormente intentar in vivo la incorporación y regulación de dicho gen en un modelo
experimental de cirrosis hepática.
3. Apoyar la formación de recursos humanos con los conocimientos y la capacidad de
análisis en diversos tópicos del área de biología molecular, capacitados en el manejo de
las técnicas de frontera de la biología molecular. Cómo parte de ello se involucrará a
diversos estudiantes del doctorado en Biología Molecular en Medicina, recayendo
particularmente en el M. en C. Fernando Siller una participación fundamental en el
desarrollo de este proyecto, del cual se pretenderá la producción de su tesis doctoral.
4. Crear un polo de desarrollo regional en el país, dedicado a la investigación básica y
clínica de la biología molecular en los problemas de salud que son de importancia rele-
vante para México.

6l

5. Divulgar los resultados obtenidos por este trabajo en publicaciones de circulación
nacional e internacional, así como en los principales foros de comunicación del área.
6. Establecer relaciones de apoyo e intercambio a niveles nacional e internacional, con los
expertos en el área del trabajo que se pretende desarrollar.

OBJETIVO PRINCIPAL

Transfectar el gen exógeno de colagenasay regular su expresión en células hepáticas en cultivo.

62 EJEMPLO I

METODOLOGÍA

CULTIVO DE LÍNEAS CELULARES

SE PROPAGARÁN LAS DIVERSAS LÍNEAS celulares en las condiciones óptimas de cultivo,
con el objetivo de proveer de una población adecuada de ellas a cada uno de los diferentes
ensayos de transfección.
Para este fin, se incubarán células HepG2, provenientes de una línea celular de
hepatoma humano (células parenquimatosas), a 37°C en aire 95% y C025%, mantenidas a
80% de confluencia en medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) con 10% de
suero bovino fetal.
Bajo condiciones similares se mantendrán células de Ito, provenientes del mesénquima
hepático y células COS-7, línea celular descendiente de riñón de mono, utilizadas como
control en los ensayos de transfección.

TRANSFECCIÓN DE CÉLULAS

Uno de los métodos que más se utilizan para la introducción de genes a células
eucariónticas es la transfección de ADN con fosfato de calcio, en la cual el ADN exógeno
se deposita como un precipitado fino sobre la superficie de la célula en suspensión, para
posteriormente ser incorporado por la célula e integrado transitoriamente en el ADN
cromosomal.
Para ello, se crecerán las células HepG2, de Ito y COS-& en monocapa a
aproximadamente un 70% de confluen-


cia y serán transfectadas, según corresponda, individual o conjuntamente, con los
plásmidos p9.12albCAT, (promotor de albúmina y gen reportero CAT —específico para la
expresión en células hepáticas—), pSVoCAT (plásmido sin promotor—control
negativo—), pSV2CAT (plásmido con el promotor fuerte del virus de SV40 —control
positivo—), pSV2CAT (plásmido con el promotor fuerte del virus de SV40 —control
positivo—) pUC19/colagenasa (plásmido con el promotor de SV4 y el gen de colagenasa)
y PEPck/ colágena (plásmido con el promotor d PEPck y el gen de colagenasa). La
transfección se hará, por el método de precipitación de fosfato de calcio (Chen y Okayama,
1988; Armendariz-Borunda et ai, 1994). En breve: A las células en cultivo se adiciona el
precipitado recién formado de la solución de CaC12 con el ADN a ser transfectado y una
solución salina de HEPES. Se incuban de 4 a 16 h bajo condiciones estándar de
crecimiento para permitir que el precipitado se adhiera a la superficie de las células y el
ADN se integre a los cromosomas de las células huésped, posteriormente se lavan y
siembran con medio completo. Se recolectan las células a las 2-48 h posteriores a la
transfección, para determinar la expresión del gen incorporado.

ENSAYOS DE EXPRESIÓN TRANSITORIA USANDO EL SISTEMA REPORTERO
DE CLORANFENICOL ACETILTRANSFERASA (CAT)

Este sistema determina la actividad de la enzima CAT como una medida del nivel de
expresión del gen de interés

64 EJEMPLO I

transfectado conjuntamente con el gen que codifica para dicha enzima. La CAT es una
enzima bacteriana que cataliza la transferencia del grupo acetil proveniente de la acetil CoA
al cloranfenicol.
Las células transfectadas son recolectadas y Usadas en varios pasos de
congelación/descongelación. Se adicionan a los Usados celulares acetil CoA y
cloranfenicol marcado radiactivamente y los productos modificados del antibiótico son
separados del material original por cromatografía de capa fina. Finalmente se expone la
placa cromatográfica a una película autorradiográfica y los productos acetilados son
analizados cualitativamente y cuantitativamente por análisis de las bandas de la placa
cromatográfica correspondiente a las de la impresión autorradiográfica mediante
espectroscopia de líquidos de centelleo (Gorman et al., 1982).

REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DEL GEN DE
COLAGENASA

La región promotora del gen de fosfoenolpiruvato carboxicinasa (PEPCK) controla la
expresión del cADN un gen dado cuando ambos se encuentran en el mismo vector de
expresión. La secuencia de PEPCK tiene la característica de incrementar o disminuir la
expresión del gen cuando están presentes ciertos compuestos que interactúan
directamente con ella; la ventaja de ello radica en la posibilidad de regular
experimentalmente el grado de expresión


mediante la adición de insulina, AMPc o glucocorticoldes a las células transfectadas.
La regulación de la expresión del gen de colagenasa se realizará en las células HepG2
transfectadas con el plásmido PEPCK/colagenasa (Valera y Bosch, 1994). Se adicionarán
de manera individual los compuestos insulina, glucocorticoldes y AMPc a las células
hepáticas y después de un tiempo de incubación se recolectarán las células para determinar
en ellas el nivel de expresión de la colagenasa por análisis de Northern blot así como por
análisis de su actividad enzimática.

PURIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE ARN DE
COLAGENASA

Se extraerá el contenido total de ARN de las células en cultivo utilizando el sistema de
aislamiento de ARNzol (Biotecx, 1992) para realizar el análisis del ARN específico de
colagenasa con la técnica de Northern blot (Thomas, 1980). En un gen desnaturalizante de
agarosa se coloca una alícuota de ARN total, se somete el gen a electroforesis y
posteriormente se transfiere el ARN a filtros de nitrocelu-losa. Se hibridiza el filtro con una
sonda radiactiva de ADN de colagenasa, de manera que complemente específicamente con
el ARN de mismo gen. Los filtros se lavan y secan y posteriormente son expuestos a una
película autorradiográ-fica para observar la banda de ARN específica de colagenasa.
Finalmente, se efectúa el análisis densitométrico de las ban-

66 EJEMPLO I

das en las placas autorradiográficas para cuantificar el contenido de ARN de cada
muestra (Armendáriz-Borunda et aL, 1993; Shapiro et al, 1993)

ENSAYO DE ACTIVIDAD DE COLAGENASA

El análisis de la actividad enzimática de la colagenasa es necesario para determinar
la funcionalidad de la enzima producida, ya que esta proteína pudiera encontrarse
enzimáticamente inactiva, lo que no se podría conocer a través de la determinación
única del ARN que la codifica.
Después de 24 h de mantener a las células en cultivo en un medio libre de
suero, el medio de cultivo se recolecta y se determina en éste la actividad de
colagenasa secretada por las células, siguiendo el método descrito por Hasty y
cois. (1986). En breve: se incuba el medio con fibrillas solubles de colágena
radiactiva (marcada con 14C), se adiciona acetato 4-aminofenilmercúrico para
activar la colagenasa latente y se somete a centrifugación para precipitar la
colágena no degradada. Del sobrenadante se toma una alícuota para determinar
por espectrometría de líquido de centelleo la radiactividad residual.

BIBLIOGRAFÍA

Armendáriz-Borunda, J., C.P. Simkevich, N. Roy, R. Raghow, H. Kang y].
Seyer (1994), "Activation of Ito

Cfí'G

EXPRESIÓN Y 67
REGULACIÓN DEL GEN

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Collagen Gene Expression", Biochem. /., 304:817-824.
Armendáriz-Borunda, J., C. Michael, J.M. Seyer, A.H. Kang, R. Raghow
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Enhaced at a Critical Stage During Liver Regeneration After CC14 Treatment",
Lab. Invest., 69:283-294.
Biotecx (1992), "Ultraspec ARN Isolation System. A New and Improved
Method for the Isolation of Total ARN from
Tissues/Cells/Bacteria/Plant/Yeast and Biological Fluids", Biotecx Bulletin,
27.
Chen, C. y H. Okayama (1988), "Calcium-Phosphate Mediated Gene Transfer:
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Gorman, C.M., L.E Moffat y B.H. Howard (1982), "Recombinant Genome
which Express Chloramphenicol Acetyltransferase in Mammalian Cells",
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Hasty, K.A., M.S. Hibbs, A.H. Kang y C.L. Mainardi (1986), "Secreted Forms
of Human Neutrophil Collagenase",/. Biol. Chem., 261-5645-5650.
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Induces Glucose Uptake and is Rate Limiting in Glucose Utilization", Eur. J.
Biochem., 222:533-539.
Shapiro, S.D., D.K. Kobayashi, A.P. Pentland y H.G. Welgus (1993),
"Induction of Macrophage Metallopro-

68 EJEMPLO I

teinases by Extracellular Matrix. Evidence for Enzyme-and Substrate-Specific Responses
Involving Rostaglan-din-DependentMechanisms"./. Biol. Chem., 268-8170-8175. Thomas,
P.S. (1980), "Hybridization of Denatured ARN and Small ADN Fragments Transferred to
Nitrocellu-lose". Proc. Nati. Acad. Sel, EUA, 77:5201-5205.

EXPRESIÓN Y .REGULACIÓN DEL GEN 69

INFRAESTRUCTURA Y APOYO TÉCNICO DISPONIBLE

EL INSTITUTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR (IBM) del C.U.C.S., cuenta con las áreas de
trabajo y el equipo de laboratorio que a continuación se describen:

Área de cultivo de células
— Campana de flujo laminar. Labconco mod. Purifier Class II.
— Microscopio óptico. Zeiss.
— Microscopio invertido. Zeiss mod. Axiovert 135.
— Incubadora de C02. Labline.

Área de análisis
— Espectrofotómetro UV-VIS. Beckman mod. DU650.
— Contador de líquido de centelleo Beckman mod. LS6500.

Área de extracción y análisis de ARNy ADN
— Transiluminador ultravioleta. UVP.
— 1 Cámara de electrofóresis.

Área común
— Congelador REVCO. VWR Scientific.
— Refrigerador. Roper.
— Centrífuga Beckman mod. J2-MI.
— Ultracentrííuga Beckman mod. XL-90.
— Centrífuga Hermle mod. ZK 364.

70 EJEMPLO I

El grupo de investigación del Instituto de Biología Molecular está conformado por
especialistas de varias disciplinas, gracias a lo cual se puede abordar un mismo problema
desde diversas perspectivas. Dentro de este grupo se cuentan médicos, farmacólogos,
toxicólocos, bioquímicos, inmunólogos, biólogos celulares y biólogos moleculares.

EXPRESIÓN Y 7
REGULACIÓN DEL GEN

CALENDARIO DE ACTIVIDADES CUATRIMESTRE 1

Durante el primer cuatrimestre se emprenderán las actividades que a continuación se
describen:

• Adquisición del equipo y material de laboratorio faltante.

En tanto se consiguen, se efectuará el resto de las actividades programadas, en las
cuales no se involucra la necesidad de los mismos.

• Estandarización de las técnicas bioquímicas y moleculares
a utilizar.

Para identificar las variables que pudieran estar involucradas en cada tipo de ensayo y
así lograr una total confiabilidad de los resultados a obtener, se requiere la
estandarización de los mismos bajo las condiciones experimentales de nuestro la-
boratorio.

• Cultivo de líneas celulares.

La base principal de los ensayos a realizar son los cultivos celulares y de aquí la
importancia de estandarizar las condiciones óptimas para el crecimiento de las líneas
celulares a utilizarse. Una vez obtenida la confluencia de las células en las cajas de
cultivo, una alícuota de las mismas se guardará en congelación (-70°C) para mantener
un stock constante de células destinadas a los ensayos subsecuentes.

72 EJEMPLO I


• Efectuar la amplificación de los plásmidos pSV2CAT,
pSVoCAT, p9.12albCAT y pUC19/colagenasa en bacterias en cultivo.

Es necesario contar con la suficiente cantidad de plásmidos para realizar cada uno de los
ensayos de transfección. Para ello se requiere efectuar su amplificación en bacterias en
cultivo (e.g.j E. coli), en las cuales, después de un tratamiento de choque para lograr la
entrada del plásmido a las células, se multiplican por la adición de un antibiótico dado y
posteriormente se recuperen en el centrifugado del lisado de la célula bacteriana.

• Desarrollo de los ensayos preliminares de transfección
de plásmidos a las líneas celulares.

Periodo donde se evaluará la integridad y funcionalidad de cada uno de los elementos
participantes en las reacciones de transfección. Esta etapa es crítica, ya que permite corro-
borar tempranamente la factibilidad y viabilidad de la hipótesis del trabajo postulado.

• Análisis estadístico de resultados.



Una vez establecidas las condiciones experimentales óptimas, se iniciarán los ensayos
bioquímicos y moleculares propuestos para la resolución del problema al que nos hemos
enfocado, los que a continuación se mencionan:

• Transfección del gen reportero cloranfenicol acetiltrans-ferasa (CAT a las líneas
celulares en cultivo).
• Ensayos de actividad de CAT.


• Transfección del gen de colagenasa a células en cultivo.
• Determinación del contenido de ARNm y la actividad de la enzima colagenasa.
• Ensayo de actividades de CAT


• Transfección del plásmido PEPCK/colagenasa a células
HepG2.

74
EJEMPLO I

• Regulación de la expresión del gen de colagenasa.
• Análisis del contenido de ARNm y la actividad de la enzima colagenasa.


• Conclusión de experimentos y en su caso comprobación de resultados con amplias
desviaciones estándar.
• Publicación y divulgación de resultados en foros y revistas nacionales e internacionales.

76 EJEMPLO I

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA RESPONSABLE

CONCENTRADO DE DATOS CURRICULARES

R.F.C.: AEBJ-570309-
Nobilis: Dr. en C. Nombre: Juan Socorro
A. Paterno: Armendáriz
A. Materno: Borunda
Nombramiento: Profesor e investigador titular C. Tiempo completo

Nivel del SNI: 1

Relación de grados obtenidos

GRADO INSTITUCIÓN AÑO

L Universidad Autónoma de Chihuahua 79
M CINVESTAV-IPN 84
D CINVESTAV-IPN 87
D POST-DOC, University of Tennessee 91
D Research Associate, U. of Tennessee 93

Total de tesis dirigidas

Licenciatura: 0 Maestría: 0 Doctorado: 0

Otros datos académicos relevantes:
Becario Conacyt para maestría y doctorado, becario NIH (National Institutes of Health,
USA) para postdoctorado, receptor de donativos del NIH; SNI nivel I, revisor de las
revistas internacionales: Hepatology, Gastroenterology y Life Sciences.

EXPRESIÓN Y 77
REGULACIÓN DEL GEN

DR. EN C. JUAN SOCORRO ARMENDÁRIZ BORUNDA
RESPONSABLE
RELACIÓN DE PUBLICACIONES

5 últimas publicaciones
Artículo
Autores: J. Armendáriz-Borunda, C.P. Simkevich, N. Roy, A.H. Kang y J.M.
Seyer Título del artículo: "Activation of Ito Cells Involves Regulation of AP-1
Binding
Proteins and Induction of Type I Co..."
Nombre de revista: Biochemistry Journal
Páginas: 817-824 Año: 1994 Volumen: 304 Número:
Artículo;
Autores: D. Martínez, J.E, Mullersman, A.F. Purchio, J. Armendáriz y A.
Martínez Título del artículo: "Nonenzymatic Glycosylation of Poly-L-Lysine:
A New Tool
for Targeted Gene Gelivery"
Nombre de revista: Hepatology
Páginas: 1602-1608 " Año: 1994 Volumen: 20 Número: 6
Artículo
Autores: J. Armendáriz-Borunda, H. Katay, C. Michael, J.M. Seyer, A.H. Kang
y R. Raghow Título del artículo: "Transforming Growth Factor B Gene
Expression is Transiently
Enhanced at a Critical Stage During..."
Nombre de tevista: Laboratory Investigation
Páginas: 283-294 Año: 1993 Volumen: 69 Número 3
Artículo
Autores: K. Katayama, J. Armendáriz-Borunda, R. Raghow y J.M. Seyer
Título del artículo: "A Pentapeptide From Type I Procollagen Promotes Extracelluíar
Matrix Production"
Nombre de revista: Journal ofBiologkal Chemistry
Páginas: 9941-9944 Año: 1993 Volumen:-268 Número:
Artículo
Autores: J. Armendáriz-Borunda, K. Katayama y J.M. Seyer
Título del artículo: "Transcriptional Mechanism of Type I Collagen Expression are
Diferentially Regulated by Interle..."
Nombre de revista: Journal ofBiologkal Chemistry
Páginas: 14316-14321 Año: 1992 Volumen: 267 Número: 20

78
EJEMPLO I

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA SOLICITUD DE
APOYO

DESGLOSE AÑO:
FINANCIERO 1
Cuatrimestre Cuatrimestre
Cuatrimestre Total
1 2 3
Gasto corriente
Honorarios por servicios 10,00 C 0 10,0
profesionales 0 0 0 0
Viáticos 0 00
0 0 0 0
Pasajes c 0 0 0
Gastos de trabajo de 0 0 6,00 6,00
campo 0 0 0 0 0
Ediciones e impresiones 0 0 0 0
Servicios externos y 0 0 0 0
comerciales 0 0 0 0
Cuotas de inscripción 40,75 40,750 0 81,5
Profesores visitantes 5,000
0 0 0 5,00
00
Becas para proyectos de 5,900 0 0 5,90
0
investigación 0 0 0 0
Artículos, materiales y 61,65 40,750 6,00 108,
útiles diversos 0 0 400
Documentos y servicios
de información
Libros
Animales para rancho y
granja
Total gasto corriente
Gasto de
inversión 59,12 59,125 0
Equipo de 54,60 3 0
laboratorio 5 118,250
0 0 0 0
54,600
Equipo de 0
cómputo
Herramientas y
accesorios 59,125

Total gasto de 113,725
inversión: Total 0 172,850
solicitado año: 1 281,250
(Nuevos
Pesos)

EXPRESIÓN Y 79
REGULACIÓN DEL GEN

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA
Y TECNOLOGÍA
SOLICITUD DE APOYO
JUSTIFICACIÓN DE REQUERIMIENTOS
FINANCIEROS

Honorarios por servicios profesionales Importe solicitado:
20,000

El apoyo a este rubro con el monto de N$ 20,000.00 se dedicará al pago de servicios
profesionales de dibujante y fotógrafo, así como para el pago de personal de apoyo
especializado de limpieza y mantenimiento de equipo de laboratorio y de oficina.

Ediciones e impresiones Importe solicitado: 6,000

El apoyo solicitado en este rubro es para solventar los gastos de publicación de
artículos de investigación y divulgación en revistas internacionales.

Artículos, materiales y útiles diversos Importe solicitado:
163,000

El monto solicitado se requiere principalmente para la compra de los reactivos de
laboratorio de calidad en biología molecular o de la mayor pureza disponible, así
como de los compuestos radiactivos, entre los que se cuentan:

80 EJEMPLO I

— vectores (plásmidos) comerciales: pUCl9, PEPCK/ bHG, p9.12albCAT, etcétera,
— enzimas de restricción (EcoRI, Sma I, Hind III, etcétera),
— medios de cultivo para crecer bacterias,
— medios de cultivo para crecer células eucariónticas,
— suero fetal de ternera para cultivo de células,
— antibióticos para medios de cultivo,
— tanques de C02 y aire ultrapuro,
— cloranfenicol marcado con 14C,
— colágena tipo I marcada con 14C,
— acetil CoA,
— reactivos para la extracción de ARN (ARNzol),
— membranas de nitrocelulosa para análisis de Northern blots,
— solventes y reactivos para la cromatografía de capa fina,
— película y emulsión fotográfica para la revelación de radiactividad,
— coctel para líquidos de centelleo,
— reactivos para la preparación de soluciones amortiguadoras, etcétera.

Documentos y servicios de información Importe solicitado: 5,000

Se requiere el monto de N$ 5,000 para el pago de consultas a bases de datos
especializadas como SECOBI, así como para la compra de software de discos compactos
con información específica en el área de biología molecular.

EXPRESIÓN Y 81
REGULACIÓN DEL GEN

Libros
Importe solicitado: 5,900

En este rubro se solicitan 5,900 nuevos pesos para la compra de material
bibliográfico de consulta básica de ediciones actualizadas en el área de biología
molecular y terapia génica, para apoyo didáctico del programa de doctorado de
biología molecular en medicina.
Algunos de los libros que se pretende adquirir son:

— The Liver. Biology and Pathobiology, 3a. ed, T.W. Arias, H. Popper, W.B.
Jakoby, D. Schachter, D. Shafrit, (comps.), Raven Press, Nueva York.
— Gene Expression, Cell and Tissue Specificity M. Karin Ed.,
— Molecular cell biology, 2nd Ed. J. Darnell Jr., H.
Lodish,
Molecular Cloning: A laboratory Manual, 2nd Ed. Vols l,2y3
J. Sambrook, E.E Fritsch y T. Maniatis; Cold Spring Harbor Laboratory,
Nueva York, 1989.
— Genes V
B. Lewin, Ed Oxford University Press, Oxford, Inglaterra, 1994.
— Human Pharmacoiogy: Molecular to Clinical. T. Brody,
M. Llarner, M. Kenneth. 2nd Ed.
—Methods in pharmacoiogy: Molecular and cellular biology of
pharmacological targets. Glossmann H, StriessningJ (Eds).

82 EJEMPLO I

Equipo de laboratorio Importe solicitado: 236,500

Se solicitan $ 236,500.00 en este rubro para adquirir diversos equipos de laboratorio que se
requieren directa o indirectamente para la realización de gran parte de los ensayos
experimentales.
El tanque de almacenamiento de nitrógeno líquido ($ 9,164) se requiere para la
congelación instantánea y la conservación de diversas muestras biológicas por nitrógeno
líquido. En este recipiente se puede almacenar por periodos prolongados el nitrógeno
líquido, en el cual se sumergerán las muestras.
Desionizador de agua ($ 22,750), equipo indispensable para la obtención de agua de alta
calidad, utilizada para la preparación de soluciones.
La máquina de hielo frappé también es un equipo de amplio uso dentro de un
laboratorio; necesaria para la producción continua de hielo, la cual se emplea durante el
desarrollo de experimentos en los que se requiere mantener a temperaturas bajas las
muestras biplógicas.
El pH metro ($ 14,761) es un equipo de medición básico necesario en la preparación de
soluciones amortiguadoras y de medios de cultivo entre otros, en los cuales recae
importantemente la buena funcionalidad de las líneas celulares con las que se pretende
trabajar.
Las cámaras de electroforesis ($ 3,887 c/u) junto con sus fuentes de poder respectivas ($
3,700 c/u) son indispensables para la separación y resolución de las muestras de ARN
sometidas a análisis de Northern lot.

84 EJEMPLO I

Una de las formas de comunicación que cada día va siendo más utilizada por las ventajas que
presenta, es la comunicación electrónica a través de redes computacionales de ámbito local e
internacional, donde la obtención de datos diversos y el establecimiento de comunicaciones
personales interactivas, por decir algunas de las funciones posibles, se ha vuelto una de las
tareas enormemente facilitadas por el uso de este medio.
El Centro de Documentación y de Sistemas de Información (CEDOSI) del Centro
Universitario de Ciencias de la Salud de la U. de G., forma parte de la red de cómputo de la
Universidad de Guadalajara y cuenta con el acceso a la red de cómputo internacional y con
la capacidad para brindar conección a gran número de redes locales dentro de la misma
Universidad.
La formación de una red electrónica local dentro del Instituto de Biología Molecular
conectada al CEDOSI y configurada para satisfacer los requerimientos específicos de
nuestra área de Investigación permitirá el acceso directo a las fuentes de generación de
conocimientos del área, obteniendo, finalmente, un auxilio rápido y efectivo en la in-
vestigación desarrollada por nuestro grupo.


CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y
TECNOLOGÍA

Equipos de laboratorio Importe solicitado:
236.50
Valor
Valor
Descripción Cantidad Unidad
unitario total

Tanque de nitrógeno theo
20,21 Lt. dimensiones 62.7% 36 1.00 1 9,164
9,164

País de origen: Estados
Unidos Valor Unitario en 1,409.90 US
moneda extranjera: Valor Dolar
total en moneda 1,409.90 US
extranjera: Proveedor: Dolar
Bioselec, S. R

Dehionizador Barnstead con 4 cartuchos 1.00 1
22,750 22,750

Unidos Valor unitario en 3,500.00 US
moneda extranjera: Valor Dolar 3,500.00
total en moneda US Dolar
extranjera: Proveedor:
Casa Rocas
Máquina para hielo 1.00 1 49,208
Frappe. Marca 49,208
Cole-Parker
Unidos Valor unitario en 7,570.00 US
moneda extranjera: Valor Dolar
total en moneda 7,570.00 US
extranjera: Proveedor: Dolar
1.00 1 17,222
17,222
Unidos Valor unitario en
moneda extranjera: Valor 2,650.00 US
total en moneda Dolar 2,650.00
extranjera: Proveedor: Bio US Dolar
S.A. de R.L.

86 EJEMPLO I

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y
TECNOLOGÍA

Equipo de cómputo Importe solicitado:
54.6ÍK

Descripción Cantidad Unidad
Valor Valor
unitario total

Drive 1.2 KB 5 1/4 1.00 1 472
472

Proveedor: Capacitación y
soluciones en computación
y redes (Comlex)
Impresora HP LaserJet II 1.00 1 4,000
4.00C
Proveedor: MHS, S.A. de C.V
Modem Fax 14,400 BPS, Hayes Int 1.00 1 780
780
Proveedor: Hersymac Sistemas
Scanner Genius GS-CI05+color 1.00 1 2,050
2,050
Ptoveedon Hersymac Sistemas
CD Rom Interno Mitsumi doble velocidad 1.00 1
1,590
1,590
Proveedor: Comlex
Servidor Hewlett-Packard 486 DX2/66
Mhz, 20 MB ram, 720 MB 1.00 1 17,680
17,680

Proveedor: Hersymac Sistemas

EJEMPLO II

MODELO DE CONTROL
PARA ORGANISMOS DE INVESTIGACIÓN
APLICADA Y DE DESARROLLO TECNOLÓGICO

1 Antecedentes y Justificación
Especificar las razones por las que se desea llevar a cabo este proyecto y
los beneficios científicos que se espera se deriven del mismo. Señalar
los antecedentes que existen en la literatura al respecto relacionando en
el texto la bibliografía pertinente. (Anexar hojas).
2 Objetivos y Metas
Señalar los objetivos, tanto generales como particulares, así como las
metas que se deriven de ellos. (Anexar hojas).
3 Propuesta del plan de trabajo, incluyendo metodología y procedimientos.
(Anexar hojas).
4 Calendario de actividades
Llenar la forma I adjunta. UNA POR AÑO.
5 Resumen del proyecto Llenar
la forma II adjunta.
6 En caso de proyectos de riesgo compartido, suministrar la información
sobre el oferente y el usuario, así como de la industrialización y
comercialización. (Anexar hojas).
7 Cooperación internacional
Únicamente para proyectos de este tipo, especifique las acciones en las
que se prevé la participación internacional, indicando en su caso las
gestiones realizadas y su grado de avance. (Anexar hojas). Incluir cartas
de intención de las instituciones con las que se desee colaborar.
8. Incluya en anexos toda la información que considere relevante para la
evaluación de su proyecto, además de la aquí solicitada.
IV. VINCULACIÓN CON EL SECTOR PRODUCTIVO DE
BIENES O SERVICIOS (En caso de proyectos de
desarrollo tecnológicos)
1 INSTITUCIONES, EMPRESAS O PERSONAS QUE ESTÁN
INTERESADAS EN EL APROVECHAMIENTO DE LOS
RESULTADOS DEL PROYECTO (anexar documentos oficiales

MODELO DE CONTROL PARA ORGANISMOS DE INVESTIGACIÓN 93

2 ENTIDADES QUE ESTÁN DESARROLLANDO ACTIVIDADES SIMILARES O
RELACIONADAS CON EL PROYECTO PROPUESTO:

3 EN CASO DE QUE ESTE PROYECTO ORIGINE DESARROLLO(S) O
INNOVACIÓN(ES) INDUSTRIAL(ES), SEÑALE SI EXISTEN (anexar
documentación comprobatoria):

PERFIL DE FACTIBILIDAD SI
ESTUDIO DE MERCADO SI
DISPONIBILIDAD DE MATERIA PRIMA SI
ESTUDIOS DE PREINVERSIÓN SI

V. FORMACIÓN DE RECURSOS HUMANOS
1 Indicar las áreas de especialización, niveles académicos y el número de los recursos
humanos que se forman a través del proyecto. (Anexar hojas).

VI. RECURSOS Y PRESUPUESTOS
1 Infraestructura con que cuenta la institución para desarrollar el presente proyecto, tal
Como instalaciones, equipo, materiales, información bibliográfica, etc. (Anexar
hojas).
2 Personal académico y de apoyo con el que cuenta la institución para la realización de
este proyecto. (Anexar hojas),
3 Llenar con cifras expresadas en MILES DE PESOS, las formas III y IV anexas de
PRESUPUESTO TOTAL DEL PROYECTO Y DEGLOSE DEL PRESUPUESTO
REQUERIDO. Tomar en cuenta que del presupuesto total otorgado por CONACyT se
retendrá el 10%, que se entregará después de la recepción de los informes finales
técnicos y financiero.
4 justifica! la necesidad, para la realización del proyecto, de los conceptos incluidos
como participación del CONACyT en las formas de PRESUPUESTO TOTAL DEL
PROYECTO Y DESGLOSE DEL PRESUPUESTO REQUERIDO. (Anexar hojas).

EJEMPLO II

III. PROTOCOLO

ANTECEDENTES

Una de las características de nuestra sociedad moderna es el predominio que han tomado
las organizaciones en su estructura; y tan es así, que se reconoce que nuestra sociedad es
una sociedad de organizaciones (Etzioni, 1972; Resenos, 1976). Esto se debe, en buena
medida, a que, a través de las organizaciones, el hombre ha encontrado la forma de realizar
las grandes empresas que demandan las necesidades modernas; casi para atender cualquiera
de ellas se requiere de una organización, incluso para realizar investigación científica y
tecnológica requerimos de organizaciones.
Una característica común a las organizaciones es que todas ellas son administrables
(Resenos, 1976). Por ello la actividad de administración ha cobrado tanta importancia en
nuestros días. Dentro de este proceso administrativo está el proceso del control de gestión.
Si bien todas las organizaciones son administrables, lo cierto es que no todas se
administran en la misma forma. No es lo mismo administrar fábricas de calzado, de autos,
de televisores, que administrar empresas cinematográficas, de publicidad, firmas de
ingeniería u organismos de investigación científica y tecnológica (Mintzberg, 1982;
Perrow, 1967). La característica común de las primeras es que son


organizaciones de producción masiva, en serie, donde el proceso de control pone énfasis
en el cumplimiento de las rutinas preestablecidas, en el logro de las cuotas de producción y
ventas convenidas, en general, está todo calculado y predeterminado para realizarse con
una tecnología que estandariza las actividades y que el control cuida de que así suceda.
En cambio, la característica común de las segundas es que producen artículos únicos
donde se ha puesto en juego la creatividad, la innovación, la originalidad, y no hay una
tecnología conocida, ésta se va adaptando o creando, a la vez que se produce el artículo,
por lo tanto, el control descansa en la adaptación mutua de los expertos que trabajan en
forma independiente para perfeccionar sus habilidades, de tal manera que propicie el
empleo de los medios de enlace. La autoridad no se ejerce en la forma tradicional de las
empresas de producción masiva, sino más bien, se trata de que los expertos ocupen el lugar
que les corresponde dentro de otros equipos y la potestad, o el control están basados en la
experiencia, no en la autoridad lineal administrativa. En esencia, las operaciones se
autodirigen y se autocontrolan, la administración apoya el cambio, la innovación, la
creatividad, la cooperación, por lo cual generalmente se controla el dilema de la eficacia a
través de la ineficiencia y en atención a las necesidades de los expertos y los costosos
medios de enlace. Parece que nada puede realizarse si antes no se ponen todos de acuerdo,
es decir, se controla, lo que ocurre sólo una vez. Estas organizaciones, que llamaremos
creativas, son a las que los investigadores

96 EJEMP
LO II

han tenido menos oportunidad de estudiar. (Mintzberg, 1982:13).
En la teoría de control se han desarrollado estructuras teóricas útiles, como son los lazos
de retroalimentación hipotétizados en la cibernética (Wiener, 1948), que en su forma
consta de cuatro elementos: normas o metas de referencia, sensor o función de entrada,
comparador, y ejecutor o función de salida (Powers, 1973). Para ilustrar este modelo,
frecuentemente se toma como referencia el ejemplo del termostato que controla la
temperatura de una habitación. Este es un modelo mecánico simplista. En los sistemas de
control humano, la retroalimentación involucra algo más que un sensor mecánico del
ambiente, ya que las metas y normas humanas no son tan inflexibles y tan predeterminadas
y casi siempre hay alternativas para reducir las discrepancias (Lord y Hanges, 1987).
En la teoría del comportamiento, la teoría de control tiene dos elementos primarios: el
cognoscitivo y el afectivo. El componente cognoscitivo consiste en metas internalizadas, el
procesamiento de la información relativa al propio estado en curso y a la comparación de
ese estado con las metas. El componente afectivo emerge de las discrepancias percibidas
entre los propios deseos y los estados en curso, y la conducta es iniciada desde el propio
deseo de resolver aquellas discrepancias (Carver y Scheier, 1982. En Klein, 1989). Las
conductas complejas se intenta explicarlas a partir de la jerarquía de los lazos de
retroalimentación, donde dada una cadena de metas, submetas y normas, las discrepancias
de la retroalimentación de orden elevado pa-


san a ser las normas de orden bajo. Por ejemplo un plan jerárquico para aumentar las
ventas a través de incrementar los contactos (Klein, 1989).
Varios autores han reconocido el poder explicativo de la teoría del control y la han
usado para examinar la conducta en las organizaciones (por ejemplo, Campion y Lord,
1982; HollenbeckyWilliam, 1987; Tayloro, Fisher eligen, 1984). No obstante que alguno
de estos autores ha trabajado para elaborar un modelo de la teoría de control de la motiva-
ción del trabajo, un examen de estos modelos revelará algunas inconsistencias. El
problema no es que los modelos sean incongruentes con los principios de la teoría de con-
trol o con los hallazgos empíricos, sino que las diferentes perspectivas los limitan para
proporcionar un modelo comprensivo. Además, la inconsistencia de las suposiciones y
tratamientos, no permiten aterrizar en un modelo coherente a través de la simple mención
de la literatura disponible (Klein, 1989).
La teoría del conjunto de metas que ha adoptado la teoría del control, proporciona
explicaciones importantes de aspectos, tales como: el origen de las metas personales, la
importancia de las metas comprometidas, las formas de caracterizarlas, incluyendo la
existencia de la interdependencia y las acciones recíprocas de submetas, la competencia de
metas múltiples, la jerarquización de las metas, las tareas estratégicas y la modificación de
metas sobre la marcha (Campion y Lord, 1982).
La teoría del aprendizaje social aborda, más que una teoría del control,
fundamentalmente la autorregulación. Sin

98 EJEMP
LO II

embargo, existen paralelismos entre las dos perspectivas, incluyendo las similitudes entre
expectativas de eficacia y expectativas de resultados. De acuerdo con la teoría del
aprendizaje social, la motivación involucra un proceso cognoscitivo en el cual las metas
son comparadas con conocimiento de la propia actuación (Bandura, 1977; Bandura y
Cervone, 1983). Además, las discrepancias negativas son percibidas como lo que crea
disatisfacción y motiva cambios correctivos (Klein, 1989).
La teoría de la satisfacción aborda las reacciones afectivas que predice la teoría de control,
y que dependen primeramente de la dirección y magnitud de la discrepancia actua-
ción-meta y la importancia de la meta (Taylor etai, 1984). La retroalimentación indica que
si uno va más allá de la norma, esto producirá reacciones positivas; pero si se está abajo de
la norma, resultarán efectos negativos. Lo más valioso de la meta es la fuerza de la
reacción. Observando las atribuciones, las reacciones emocionales pueden ser amplificadas
cuando el éxito o fracaso es atribuido a causas internas, y, en cambio, atenuadas cuando se
atribuye a causas externas.
La teoría de control de gestión o administrativo está más allá de verse como un simple
mecanismo de regulación, aunque es probable que muchos de los administradores que
desconocen la teoría tengan este concepto limitado. El desarrollo de un modelo de control
incluye una nueva estructura conceptual que abarque los conceptos de regulación;
autorregulación por aprendizaje, metas, implicaciones, categorías, combinaciones,
complejidad, y sus interacciones

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