Citología intraoperatoria

1. CITOLOGIA
INTRAOPERATORIA
SEVERINO REY, MD, PhD
www.pathology-review.com

2. ESTUDIO INTRAOPERATORIO.
INDICACIONES
 1- LESION BENIGNA O MALIGNA
 2-EVALUACION DE MARGENES QUIRURGICOS
 3- METASTASIS LINFATICA. GANGLIO
CENTINELA MAMA
 4- PRESENCIA DE CELULAS GANGLIONARES
EN PARED INTESTINAL EN ENF DE
HIRSCHPRUNG

3. CITOLOGIA
INTRAOPERATORIA
 Leonard S. Dudgeon, informa por primera vez de
una técnica citológica rápida para el estudio
intraoperatorio de especímenes quirúrgicos. Sus
muestras, a las que denominó “wet films”, se
realizaban mediante raspado con bisturí de la
superficie de las piezas quirúrgicas y posterior
extensión del material obtenido en un
portaobjetos.
…. A very beautiful method of demostrating the apparence of malignant and other
cells showing the structural details of the Individual cells in a manner not seen in
the corresponding sections.
Dudgeon and Patrick, 1927

4. CITOLOGIA
INTRAOPERATORIA
 Después de que Dudgeon y Patrick
publicaran un estudio inicial de 200
muestras en 1927, en 1934 Dudgeon y
Barret describieron sus resultados con 1000
muestras. De 469 extensiones de lesiones
malignas, 462 fueron correctamente
diagnosticadas.
Dudgeon fue uno de los fundadores
del diagnóstico citológico
contemporáneo
Poco se ha añadido a su
descripción de 1934 sobre las
características citológicas de
malignidad.

5. CITOLOGIA INTRAOPERATORIA
 Las muestras citológicas se obtienen, habitualmente,
mediante tres procedimientos:
 A) raspado (“wet-film” de Dudgeon),
 B) improntas (“touch-preps”) y
 C) aplastamiento-extensión (“squash”).
 Las muestras obtenidas se fijan inmediatamente con
etanol al 95% (fijación húmeda) o se dejan secar al aire.
Las muestras húmedas son susceptibles de tinciones de
Papanicolaou y las secas, se tiñen con tinciones de
Romanovsky.

7. IMPRONTAS
 Las improntas (“touch preps”), pueden ser la
única técnica posible en casos de muestras
muy pequeñas, blandas o fragmentadas.
 Las improntas se hacen presionando
firmemente la superficie de corte del tejido
contra el portaobjetos (o presionando el
portaobjetos sobre el fragmento o
fragmentos). Algunos autores consideran
que no debe moverse el portaobjetos
mientras se realiza la presión para no
distorsionar la celularidad, otros, sin
embargo, no consideran esto un problema.

8. APLASTAMIENTO-
EXTENSION
 Preparación citológica muy útil en biopsias
pequeñas, blandas y altamente celulares, como
tumores cerebrales (“squash”).
 Un pequeño fragmento de tejido, normalmente
de un milímetro cúbico, se dispone en un
portaobjetos y con un segundo portaobjetos se
ejerce suficiente presión entre ellos para
extender el tejido entre ambos.

9. FIJACION
 La fijación inmediata (fijación húmeda) en etanol
(habitualmente al 95%) seguida por tinciones con
H-E o PAP proporcionan los mayores detalles
nucleares.
 Este método es el habitualmente utilizado en
América del Norte, pero en Europa es más
habitual el empleo de preparaciones secadas al
aire, (DQ) con resultados semejantes.
 Las muestras secadas al aire y teñidas con
técnicas de Romanovsky, ofrecen algunas
ventajas, sobretodo la presentación mucho más
clara de las características citoplásmicas y
elementos extracelulares metacromáticos

10.  El paso más crítico en las muestras
húmedas es la necesidad de una inmediata
fijación. Se requiere menos de un segundo
para que una extensión o una impronta se
sequen, artefactando el resultado.

11. TINCIONES SECADAS AL
AIRE
 La técnica de Diff-Quik®, es una técnica rápida de
tinción de tipo Romanovsky, consiste en tres
soluciones:
 un fijador alcohol metilo, una solución acuosa de
eosina y una solución acuosa de azul metileno y
azure A.
 La muestra citológica es sumergida en cada
solución, en el orden descrito, agitada brevemente
y dejada en cada solución entre 15 y 20 segundos.
Después de la tinción se lava con agua. Para un
estudio microscópico inmediato se puede colocar
un cubreobjetos sobre la muestra húmeda.

12. TUMOR DE CELULAS GRANULARES DE LA MAMA. DQ.

13.  Las extensiones fijadas al
aire son excelentes para la
mayoría de estudios
inmunohistoquímicos.

14. VENTAJAS CITOLOGIA
INTRAOPERATORIA
 La mayor ventaja es la capacidad para discernir
el detalle celular. Las células se fijan
inmediatamente y no se retraen como ocurre con
los estudios en parafina ni se distorsionan por la
congelación o el corte tisular.
 Detalles delicados de la estructura nuclear como
la calidad de la cromatina, el engrosamiento del
anillo cromatínico y las irregularidades de los
límites nucleares y nucleolares son fácilmente
apreciables.

15. VENTAJAS DE CITOLOGIA
INTRAOPERATORIA II
 Características citoplasmáticas útiles para un
diagnóstico como, por ejemplo, delicado pigmento
melánico, pueden encontrarse en extensiones e
improntas cuando incluso no pueden identificarse en
cortes por congelación o en secciones de parafina.
 Ej. Las células que constituyen las glándulas y ductos
de una adenocarcinoma pancreático asociado a una
reacción desmoplásica, generalmente son claramente
malignas, permitiendo su diferenciación de tejido
glandular benigno atrapado en un tejido fibroso
secundario a un proceso inflamatorio (ventaja sobre
congelación)

16. Linfadenitis dermatopática. Células de Langerhans y pigmento
melánico. Papanicolaou rápido (Pap-Quik).

17. Ganglio centinela. Infiltración por melanoma maligno.(Diff-Quik).

18. Ganglio centinela. Infiltración por carcinoma de mama. (Diff-Quik).

19. COMPARACION PAAF VS
INTRAOPERATORIA

20. VENTAJAS CITOLOGIA
INTRAOPERATORIA-III
 Un problema persistente de los cortes por congelación
es la dificultad de obtener secciones satisfactorias de
ciertos tejidos como grasa, tejidos necróticos,
calcificados y excesivamente blandos. Se pueden
obtener extendidos diagnósticos de calidad excelente
tanto de lesiones óseas como, incluso, de tejidos
densamente calcificados.
 Lesiones adiposas de órganos como la mama y
epiplón, pueden dar extendidos diagnósticos que
contienen un sorprendente número de células
fácilmente identificables.

21. Fondo tigroide" (glucógeno) en la imagen de la izquierda (Diff-Quik). Detalle
celular sin "fondo tigroide" (Papanicolaou). Sarcoma de Ewing/PNET.

22. La rapidez del estudio
citológico se ha citado
como una de sus
mayores ventajas.

23. El éxito de la citología intraoperatoria será la suma de diversos factores,
donde converjan:
 la adecuada selección del área a ser estudiada,
 la correcta técnica de muestreo citológico,
 fijación y coloración ágiles y correctamente realizadas,
 el entrenamiento del observador, y
 un constante trabajo de correlación cito-histológica tanto
intraoperatoria como diferida, para que de ésta manera los
conocimientos adquiridos con la experiencia sumados a los
conocimientos teóricos, permitan prestarle mayor importancia a dicha
técnica y no sea sólo un mero elemento más al cual se le reste
capacidad diagnóstica

24. Recordar que la citología intraoperatoria por sí sola, sin el
complemento de la biopsia por congelación, tiene como
objetivos determinar si las muestras son:
• Positivas para células neoplásicas
• Negativas para células neoplásicas
• Insatisfactorias y/o no concluyentes para diagnóstico.

25. DESVENTAJAS DE LA CITOPATOLOGIA
NO ES SIEMPRE POSIBLE:
 LOCALIZAR LA LESION NEOPLASICA
 DISTINGUIR PREINVASION DE CANCER INVASOR
 DISTINGUIR DISPLASIA REACTIVA DE CAMBIOS
NEOPLASICOS
 DETERMINAR EL TIPO DE TUMOR

26. SIEMPRE USAR LA HISTOPATOLOGIA
!!!!!!!!!!!!!!
!!!!!!!!!!!!!!
 PARA EXAMINAR LOS MARGENES DE RESECCION
 PARA EXAMINAR INVASION Y PROFUNDIDAD ESTROMAL
 DISCREPANCIA MACROSCOPICA/ CITOLOGICA

27. Herpesvirus
HPV CMV

28. CMV
DECOY CELL POLIOMA VIRUS ORINA
Decoy cells in urine from a kidney transplanted patients.
BKV nephritis was demonstrated in a posterior graft biopsy.
Papanicolau stain, X400.