Résistance de Plasmodium falciparum à la chloroquine - Présentation de la 4e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - Amina YSSOUF - Biologiste/Entomologiste - Ministère de la Santé des Comores, Union des Comores - yssoufamina@yahoo.fr

1. Atelier Paludisme 2006Atelier Paludisme 2006
RRéésistance dusistance du PlasmodiumPlasmodium
falciparumfalciparum
àà la chloroquinela chloroquine
PrPréésentsentéé par Yssouf Aminapar Yssouf Amina
Union des ComoresUnion des Comores
EVALUATION
par les FACILITATEURS
EVALUATION
par les FACILITATEURS
EVALUATION
par les FACILITATEURS

2. RRéésistance dusistance du P.falciparumP.falciparum àà
la chloroquine (Plan)la chloroquine (Plan)
IntroductionIntroduction
DDééfinition: rfinition: réésistancesistance
RRéépartition gpartition gééographiqueographique
Mode dMode d’’action de la chloroquineaction de la chloroquine
MMéécanisme de la rcanisme de la réésistancesistance
ConsConsééquencesquences
MMééthodes dthodes d’é’évaluation de la rvaluation de la réésistancesistance
ExempleExemple
ConclusionConclusion

3. IntroductionIntroduction
LL’’introduction de la chloroquine comme traitement duintroduction de la chloroquine comme traitement du
paludismepaludisme éétait untait un éévvéénement majeur dans le monde.nement majeur dans le monde.
LL’’utilisation accrue a rendu inefficace contre leutilisation accrue a rendu inefficace contre le
P.falciparumP.falciparum dans beaucoup de rdans beaucoup de réégions.gions.
Apparition rApparition réésistance (1950)sistance (1950)
Emergence des mutations:Emergence des mutations:
pression mpression méédicamenteusedicamenteuse
traitementstraitements àà dose incompldose incomplèète de chloroquinete de chloroquine
migration des populations de parasitesmigration des populations de parasites

4. RRéésistancesistance
CC’’est la capacitest la capacitéé dd’’une souche de parasiteune souche de parasite àà sese
multiplier ou survivre en prmultiplier ou survivre en préésence dsence d’’une dose deune dose de
mméédicament qui ddicament qui déétruit normalement lestruit normalement les
parasites de la même espparasites de la même espèèce.ce.
LiLiééee àà ll’’incapacitincapacitéé dd’’accumulation deaccumulation de
mméédicament dans la vacuole digestive dudicament dans la vacuole digestive du
parasite suiteparasite suite àà des mutationsdes mutations
Une mutation au niveau du chromosome 7,Une mutation au niveau du chromosome 7,
codon76 du gcodon76 du gèènene PfcrtPfcrt rréésistant confsistant confèèrere àà uneune
rréésistancesistance àà la chloroquinela chloroquine
Accumulation de mutations dAccumulation de mutations déétermine le degrtermine le degréé
de rde réésistancesistance

5. RRéépartition gpartition gééographiqueographique

6. Mode dMode d’’action de la chloroquineaction de la chloroquine
PhasePhase éérythrocytairerythrocytaire
!"
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( $ ) *
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7. MMéécanisme de la rcanisme de la réésistance (1)sistance (1)
Expulsion de la CQ de la vacuole digestive duExpulsion de la CQ de la vacuole digestive du
parasite par laparasite par la PFCRT.PFCRT.
Association de multiple mutations dans leAssociation de multiple mutations dans le PfcrtPfcrt
de la membrane vacuolaire:de la membrane vacuolaire:
--modification de lmodification de l’’efflux de CQefflux de CQ
--rrééduction de liaison CQduction de liaison CQ--hhéématine parmatine par

8. MMéécanisme de la rcanisme de la réésistance (3)sistance (3)
- #$ . / °01* 2341 3550

9. ! "
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10. ConsConsééquences de la rquences de la réésistancesistance
Augmentation:
-prévalence parasitaire
-gamétocytogénèse
-Transmission
-Morbidité et mortalité

11. MMééthode dthode d‘é‘évaluation (1)valuation (1)
Test in vivo:Test in vivo:
Test de 14 ou 28jTest de 14 ou 28j
Observation rObservation rééponse parasitaire/ rponse parasitaire/ réésistance (patientsistance (patient
traittraitéé avec une dose fixe de mavec une dose fixe de méédicamentdicament
Suivi clinique, parasitologique, TSuivi clinique, parasitologique, T°°C,hC,héématocrite (OMS)matocrite (OMS)
Test in vitroTest in vitro
Quantification de la sensibilitQuantification de la sensibilitéé et la ret la réésistance dusistance du
parasite aux antipaludiquesparasite aux antipaludiques
Tester sur le même prTester sur le même prééllèèvement diffvement difféérentsrents
antipaludiquesantipaludiques
DegrDegréé dd’’inhibition de la schizogonie en prinhibition de la schizogonie en préésence desence de
doses croissantes de mdoses croissantes de méédicamentsdicaments
Elimine certains facteurs confondant observElimine certains facteurs confondant observéé dans ledans le
test in vivotest in vivo

12. MMééthode dthode d‘é‘évaluation (2)valuation (2)
Test molTest molééculaireculaire
Mesure la chimiorMesure la chimioréésistancesistance
DDéétection de mutations ponctuelles danstection de mutations ponctuelles dans
le gle géénome du parasite rnome du parasite réésistantsistant

13. Exemple (Comores)Exemple (Comores)
Objectif:Objectif:
surveiller lsurveiller l’’apparition et la dissapparition et la disséémination des souchesmination des souches
plasmodiales mutantes et rplasmodiales mutantes et réésistantessistantes àà la chloroquinela chloroquine
Etude du polymorphisme des gEtude du polymorphisme des gèènesnes PfcrtPfcrt
Méthode
30 enfants impalud30 enfants impaludéés des de --15ans trait15ans traitééss àà la chloroquinela chloroquine
(14j) avec suivi (OMS)(14j) avec suivi (OMS)
RRéésultatsultat::
-- DDéétection chez 83% dtection chez 83% d’’enfants,des souchesenfants,des souches
P.falciparumP.falciparum mutant T76 demutant T76 de PfcrtPfcrt
-- Les mêmes parasites ontLes mêmes parasites ont ééttéé typtypéés pour codon 86s pour codon 86 PfmdrPfmdr
-- PrPréésence des parasites mutant 86Y rsence des parasites mutant 86Y réésistant aux aminasistant aux amina--44
quinolquinolééineine

14. ConclusionConclusion
La diversitLa diversitéé ggéénnéétique des populations detique des populations de
plasmodium falciparumplasmodium falciparum est un obstacleest un obstacle
pour le contrôle du paludisme (traitement)pour le contrôle du paludisme (traitement)
LL’’apparition de la rapparition de la réésistance amsistance amèènene
beaucoup de paysbeaucoup de pays àà adopter la bithadopter la bithéérapierapie
(ACT)(ACT)
La PECADOM avec ACTLa PECADOM avec ACT
Mutations multiplesMutations multiples
Résistance?
Réversion?

15. RRééfféérences (1)rences (1)
DominiqueDominique LabieLabie RRéésistance dusistance du PlasmodiumPlasmodium àà la chloroquinela chloroquine : vers: vers
un ciblage de lun ciblage de l’’attaque M/S nattaque M/S n°°5, vol.21, 2005, 27 avril 20065, vol.21, 2005, 27 avril 2006
http://http://www.pathexo.frwww.pathexo.fr//pdfpdf/1999n4//1999n4/Lebras.pdfLebras.pdf
Jacques Le BrasJacques Le Bras MMéécanismecanisme et dynamique des chimioret dynamique des chimioréésistances dusistances du
P.falciparumP.falciparum, Institut pasteur Paris G, Institut pasteur Paris Géénnéétique et maladie infectieusestique et maladie infectieuses
dans ldans l’’environnement tropical lenvironnement tropical l’’environnement tropical1999, 27marsenvironnement tropical1999, 27mars
20062006 http://www.pathexo.fr/pdf/1999n4/Lebras.pdfhttp://www.pathexo.fr/pdf/1999n4/Lebras.pdf
Roland A. Cooper, MichaelRoland A. Cooper, Michael T.FerdigT.Ferdig, et, et alal, Alternative Mutation, Alternative Mutation atat
Position 76Position 76 ofof thethe VacuolarVacuolar TransmembraneTransmembrane ProteinProtein Pfcrt ArePfcrt Are
AssociatedAssociated withwith ChloroquineChloroquine ResistanceResistance andand UniqueUnique StereospecificStereospecific
QuinineQuinine andand QuinidineQuinidine ResponseResponse inin Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum, 2001, 2001
Anonyme,Anonyme,ResistanceResistance aux antipaludiques in:Biodiversitaux antipaludiques in:Biodiversitéé du paludismedu paludisme
dans le monde, Mouchet Jdans le monde, Mouchet J……etet alal,Biodiversit,Biodiversitéé Paris,JohnParis,John LibbeyLibbey
EurotestEurotest, 2004;page 358,359, 2004;page 358,359

16. RRééfféérences 2rences 2
Cooper RACooper RA,, FerdigFerdig MTMT,, Su XZSu XZ,, UrsosUrsos LMLM,, Mu JMu J,, NomuraNomura TT,, FujiokaFujioka HH,,
FidockFidock DADA,, RoepeRoepe PDPD,, WellemsWellems TETE ,Alternative mutations,Alternative mutations atat positionposition
7676 ofof thethe vacuolarvacuolar transmembranetransmembrane proteinprotein PfCRTPfCRT areare associatedassociated withwith
chloroquinechloroquine resistanceresistance andand uniqueunique stereospecificstereospecific quininequinine andand
quinidinequinidine responsesresponses inin Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum.. MolMol PharmacolPharmacol
2002,27 mars 2006 http://2002,27 mars 2006 http://www.ncbi.nlm.nih.govwww.ncbi.nlm.nih.gov
O.GayeO.Gaye, M., M. SoumarSoumaréé,,B.SambouB.Sambou, et, et alal,H,Hééttéérogrogéénnééititéé du paludismedu paludisme
chloroquinoresistantchloroquinoresistant au Sau Séénnéégal,Parasitologie,1999, mars 2006gal,Parasitologie,1999, mars 2006
L.RaharimalalaL.Raharimalala L.RandrianasoloL.Randrianasolo,, A.RatsimbasoaA.Ratsimbasoa,, F.ArieyF.Ariey,, detectiondetection
des mutations assocides mutations associééeses àà la rla réésistance aux antipaludiques,sistance aux antipaludiques,ReseauReseau
dd’’Etude de la REtude de la Réésistance du Paludisme,2002, 27 marssistance du Paludisme,2002, 27 mars
2006,http://2006,http://www.pasteur.mgwww.pasteur.mg//dpalub.htmldpalub.html