Origine des repas de sang des anophèles : techniques, intérêts et limites - Présentation de la 8e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - RAHASIVELO TSIMAHOLY Zanah - Madagascar - zrahasivelotsimaholy@yahoo.fr

1. ORIGINE REPAS DE SANG-
TECHNIQUES,INTERETS et LIMITES
RAHASIVELO T. Zanah
Médecin responsable site sentinelle de surveillance de
fièvre Maevatanana
8e EDITION ATELIER PALUDISME Mots clés : repas de sang _ anophèles_ détection 1

2. PLAN
• INTRODUCTION:
• Définition: anthropophile et zoophile
• Les maladies humain à transmission vectorielle
• Intérêts de connaitre l’origine de repas sanguin
• Indice anthropophile (HBI)
• LES TECHNIQUES D’IDENTIFICATION : INTERET ET LIMITE
• CONCLUSION:
• Méthode la plus utilisée
• Sa place dans la lutte anti-vectorielle
2

3. Introduction
La préférence alimentaire des anophèles: importance sur
épidémiologie et transmission paludisme
Anthropophile=vecteur +repas de sang sur l’homme
Zoophilie=vecteur +repas de sang sur les animaux
Les vecteurs majeurs des paludismes humains : repas
homme mais animal (disponibilité des hôtes)(An.
Gambiae,An. Funestus, etc…)
Evaluation des préférences trophiques et des taux d’
antropophilie des vecteurs est nécessaire
I Dia,al ,bull soc pathol exotic. 2001 ; impact malaria methode enthomologie 2009 3

4. Pourquoi préférence alimentaire?
ponte ovulaire des vecteurs.
Intérêt de connaitre origine repas de sang:
• Préférence trophique
• Indice a =nombre de personne piquées par
un anophèle en un jour
• Taux d’ anthropophilie
Etudes épidémiologiques
WHO ,aide-mémoire 207,thème de santé 2010; M Alcaide ,al PLoS One. 2009 Sep 21; 4 (9): e7092
;;; 4

5. L’indice d’ anthropophile (Human
Blood index HBI)
• La proportion des moustiques ayant pris de repas sanguin sur
l’homme par rapport au spécimen testé.
• Indicateur entomologique : suivi de l’efficacité de lutte
• Anthropophile > zoophilie
• Exemple d’ étude en Maroc:
Les femelles gorgées d’An. labranchiae: 0,033 (test
antisérums du bœuf ,mouton, chien, homme)
Etude à Madagascar:
An.gambiae=0,98
Pierre Carnevale , al ,Les anophèles 2009; FARAJ C., OUAHABI S., ADLAOUI E. ET AL.
Parasite, 2008, 15, 605-610 . Bibliographie Anophele 2006
5

6. « a »= nombre desujets humains
Taux d’ anthropophile
piqués en 1jour par un anophèle
femelle
• a=taux d’ anthropophile/durée du (nombre de repas pris sur
cycle gonotrophique l’homme/nombre de spécimen
étudiée )*100
Pierre Carnevale et al, les anophèles 2009 6

7. TECHNIQUE D’IDENTIFICATION DE REPAS
DE SANG :INTERET ET LIMITE
TEST SEROLOGIQUE : ELISA REPAS DE SANG
BIOLOGIE MOLECULAIRE : PCR
7

8. Différentes méthodes :l'observation directe, la capture sur
appâts humains ou la caractérisation de la nature du sang
par sérologie
Tests sérologiques :
1. Tests de précipitation
2. ELISA
3. Agglutination du latex
4. Tests en bandelettes
Identification du type d'immunoglobuline présent: l'IgG est
l'antigène sanguin le plus commun.
8
IMPACT MALARIA : 2008:Méthodes d’entomologie médicale

9. ELISA REPAS DE SANG
(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)
loin la méthode la plus pratiquée
INTERETS LIMITES
ELISA est en train de devenir
plus populaire
Utilisation : anti-
immunoglobulines disponibles Difficulté: oiseaux ,reptile
commercialement
Sensibilité plus élevée % précipitine
Utilisation facile: homme , vache,
chèvre
Impact malaria,2008 ,meth .anthomol.; Pierre C. et al les anophèles ,2009
9

10. ELISA REPAS DE SANG : Image montrant l’ensemble du kit
utilisé pour une identification sérologique du repas sanguin
des moustiques
L'abdomen de la femelle gorgée est La première étape de l’identification du
repas sanguin est la collection des
séché sur papier filtre et amené au abdomens de moustiques gorgés, qui sont
laboratoire écrasés sur du papier filtre
Image montrant une lame de double diffusion type
Ouchterlony utilisée pour le test de précipitines
Crédits : Liverpool School of Tropical Medicine Image Collection
Le test de précipitines (soit test en double diffusion de type
Ouchterlony) est l'une des méthodes habituelles
10
IMPACT MALARIA : méthode enthomol ogique: OCTOBRE 2008

11. Origin of blood-fed mosquitoes captured in Mataral
ELISA repas de sang
Outside Inside
CDC light Houses House Residual
Host Cave Drum-trap 1Drum-trap 2 TOTAL
trap (human (human fauna
landings) landings)
Donkey (Horse) 0 2 (1) 0 1 27 (2) 1 5 (2) 36 (5)
Dog 1 4 (1) 4 (1) 0 10 (2) 1 2 (2) 22 (6)
Human 1 30 (2) 25 (8) 9 31 (3) 2 7 (3) 105 (16)
Goat (Sheep) 4 19 (4) 22 (7) 5 88 (13) 5 36 (3) 179 (27)
Pig 0 3 (1) 4 (1) 0 3 (1) 1 7 18 (3)
Chicken 0 0 (2) 0 0 0 0 1 1 (2)
Cow 1 1 (1) 3 (1) 0 5 (5) 0 2 12 (7)
Other
1 0 0 0 7 2 1 11
(unidentified)
Total 8 59 (12) 58 (18) 15 171 (26) 12 61 (10) 384 (66)
HBI 45.1% 43.4% 60.0% 17.2% 16.7% 14.1% 26.8%
Number of single bloodmeals and mixed bloodmeals (in brackets) per host and collection method. The total number of bloodmeals per category should be calculated as number
of single meals + number of mixed meals/2 11
Lardeux et al. Malaria Journal 2007

12. PCR ( Polymerase Chain Reaction)
l'identification de l'ADN de l'hôte vertébré
INTERETS LIMITES
échantillons de différentes classes de Rapidité : An.gambiae
vertébrés (mammifères, Aves, Reptilia et (recours ELISA repas de
Amphibia) et les ectoparasites invertébrés sang)
(Arachnides et Insecta)
la résolution des repas de sang
mélangé.(electropherogramme
outil universel ,haut débit de diagnostic
PCR-RFLP, sensible, rapide, simple et peu
restriction
coûteuse
fragment length
polymorphism
12
M Alcaide, al, PLoS One. 2009 Sep 21;4(9):e7092 Kim KS, al , J Med Entomol. 2009 Sep;46(5):1230-4

13. COMPARAISON
Test de précipitation ont montré une meilleure spécificité et la précision et le test
ELISA a montré une sensibilité plus ( Aedes aegypti ou Ae. fluviatilis )
Au Sénégal : ELISA repas de sang :. les préférences trophiques et comparative
capacités vectorielles d'Anopheles
gambiae, Anopheles arabiensis et
Anopheles melas
Technique de PCR : Identification des espèces du complexe
Anopheles gambiae
A Madagascar : ELISA Repas de sang
Fontenille D, al, ORSTOM, Dakar, Sénégal.2006 Gomes LA, al ,Mem Inst Oswaldo Cruz. 2001
13

14. CONCLUSION
La méthode la plus utilisée : la caractérisation de la nature du
sang par sérologie : ELISA Repas de sang puis PCR
Evaluation des préférences trophiques et des taux d’
anthropophile des vecteurs.
stratégies de contrôle des vecteurs
14

15. MERCI DE VOTRE ATTENTION
15

16. REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUE
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• FARAJ C.,al. Parasite, 2008, 15, 605-610 risque de réémergence du
paludisme au Maroc étude de la capacité vectorielle d’ anopheles
labranchia dans une zone rizicole au nord du pays
• IMPACT MALARIA identification des repas sanguin 01 octobre 2008
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• WHO: Aide-mémoire N°207 :Révisé en mai 2010 WHO M thème de sante
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laboratory verification and application to Culex sasai (Diptera: Culicidae) collected in
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Bloodmeal identification and detection of avian malaria parasite from mosquitoes
(Diptera: Culicidae) inhabiting coastal areas of Tokyo Bay, Japan.
Lardeux et al. Malaria Journal 2007 6:8 doi:10.1186/1475-2875-6-8
Host choice and human blood index of Anopheles pseudopunctipennis in a village
of the Andean valleys of Bolivia
18