1. COMO DETECTAR RESISTÊNCIA BACTERIANA NA ROTINA DE UM LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS Marilene Rodrigues Chang & Ana Cláudia Souza Rodrigues

2. Métodos de Teste de Sensibilidade aosAntimicrobianos (TSA) Dra. Marilene Rodrigues Chang Departamento de Farmácia e Bioquímica da UFMS Mestre em Análises Clínicas, área de Micologia, FCF/USP-SP Doutora em Ciências, área de Bacteriologia, IOC/FIOCRUZ- RJ

3. Resistência Bacteriana a Antimicrobianos

4. Atividade Antimicrobiana: Primeira Observação Alexander Fleming 1920

5. Ensaios Biológicos Reprodução da descoberta de Fleming Reprodução da placa de Fleming para a prova de sensibilidade aos antibióticos Susceptibilidade Antimicrobiana

7. Isolado cuja susceptibilidade não é preditiva

8. Isolado capaz de exibir resistência

9. Orientação terapêutica

12. ETEST

16. Método de crescimento0,5 McFarland 1a 2x108 UFC/mL

17. Teste de sensibilidade aos antimicrobianos Procedimento Bactéria e Inóculo

19. Incubar 33 a 35oC - (2 a 6h)*

20. Ajustar a turbidez 0,5 McFarland 1 a 2x108 UFC/mL

23. Confirme a Diferença!

24. TESTE DE DISCO DIFUSÃO EM ÁGAR Fácil execução Flexibilidade na escolha dos antibióticos Padronização dos resultados Baixo custo

29. Evitar umidade

31. Inoculação homogênea

34. Aplicar e pressionar o disco

37. TESTE DE DIFUSÃO EM ÁGAR Leitura e Interpretação mm

39. Precisão

40. Vantagens

41. DesvantagensÉ a menor concentração da droga que inibe completamente o crescimento bacteriano.

42. MIC g/mL 100 50 25 12.5 6.25 3.12 .16 . 8 .4 controle • • • • • • • • • • • • • • • • • • • MBC Concentração Bactericida Mínima MACRODILUIÇÃO

43. MICRODILUIÇÃO Conc. decrescente do antimicrobiano Antimicrobianos testados

46. Interpretação do Etest

47. Interpretação do Etest

50. Antibiograma não padronizado para todas as bactérias

51. Mudança de MIC, software novo demora chegar

52. Falsa sensibilidade

54. Interpretação do Resultado Intermediária (I) A categoria intermediária inclui isolados cujos MICs são próximos aos do sangue e tecidos. Ela permite a aplicabilidade do antimicrobiano em infecções em sítios onde as drogas são fisiologicamente concentradas ou quando doses maiores podem ser utilizadas.

55. Interpretação do Resultado Resistente (R) A categoria resistente inclui isolados que não são inibidos pelas concentrações usuais do antimicrobiano na dosagem padrão e/ou falha quando um específico mecanismo de resistência é expressado.

57. O constante aparecimento de novos mecanismos bacterianos de resistência e novos antimicrobianos tornam os testes cada vez mais complexos

58. É necessário uma atualização constante dos protocolos e a freqüente implementação de novos testes e metodologias.