Antibiograma2015rev10

567 visualizações

Publicada em

Trabalho elaborado pela equipe do Setor Técnico da Laborclin destinado à orientação para execução do antibiograma pela técnica de difusão em disco de Kirby & Bauer.

Publicada em: Educação
0 comentários
2 gostaram
Estatísticas
Notas
  • Seja o primeiro a comentar

Sem downloads
Visualizações
Visualizações totais
567
No SlideShare
0
A partir de incorporações
0
Número de incorporações
4
Ações
Compartilhamentos
0
Downloads
11
Comentários
0
Gostaram
2
Incorporações 0
Nenhuma incorporação

Nenhuma nota no slide

Antibiograma2015rev10

  1. 1. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 1 de 35 Trabalho elaborado pela equipe do Setor Técnico da Laborclin destinado à orientação para execução do antibiograma pela técnica de difusão em disco de Kirby & Bauer.
  2. 2. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 2 de 35 1. DEFINIÇÃO Técnica destinada à determinação da sensibilidade bacteriana in vitro frente a agentes antimicrobianos, também conhecido por Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos (TSA). 2. INTRODUÇÃO A realização do antibiograma e sua interpretação não é uma tarefa fácil, por suas limitações e principalmente pela crescente descoberta de novos mecanismos de resistência, o que exige cada vez mais atualização e treinamento dos profissionais. A metodologia de Kirby e Bauer para antibiograma é a mais difundida e utilizada até hoje na rotina de análises clínicas, devido a sua praticidade de execução, baixo custo e confiabilidade de seus resultados. Apesar de sua relativa simplicidade de execução, a técnica de Kirby e Bauer exige que as instruções sejam seguidas rigorosamente de forma que os resultados obtidos correspondam à realidade e possam ser comparados com as tabelas internacionais. A Laborclin oferece os discos impregnados com antimicrobianos em duas formas, como monodiscos (avulsos em frascos com 50 unidades) ou multidiscos (embalagens contendo 25 “estrelas” com 12 discos em cada). 2.1 Fatores determinantes para realização do TSA: - Material clínico – cuidado no isolamento de microbiota normal de determinado sítio anatômico, pois não é indicada a realização do TSA neste tipo de amostra; - Realização da técnica – verificar se todos os passos estão sendo seguidos rigorosamente conforme prescrito; - Escolha dos antimicrobianos – a escolha dos antimicrobianos deve ser adequado a realidade da instituição ou hospital; - Resistência intrínseca – cuidado ao reportar resultados errôneos; - Pesquisa e confirmação de mecanismos de resistência. - Atualização das recomendações dos grupos de antimicrobianos para cada grupo de micro-organismo e de seus halos de interpretação conforme indicado nas atualizações anuais das organizações internacionais (CLSI ou EUCAST). No Brasil a ANVISA padroniza a utilização do CLSI para os laboratórios. 3. AMOSTRA - Tipo de amostra Colônias puras de bactérias gram-positivas ou gram- negativas. Colônias provenientes de cultivo bacteriano recente de 18 a 24 horas, isoladas a partir de meios de cultura não seletivos. - Armazenamento e estabilidade As amostras mantem-se viáveis para a execução das análises até cerca de 24 horas de cultivo em meio não seletivo. Além deste prazo, deve-se fazer novo repique da cepa, cultivar por mais 24 horas em meio não seletivo para depois proceder ao exame. - Critério para rejeição As amostras que já ultrapassaram o prazo máximo de estabilidade devem ser rejeitadas para a análise, devendo ser repicadas em meio apropriado, e usadas colônias recentes. Outro cuidado importante consiste em verificar a pureza do inóculo, e na dúvida, sugere-se o repique da cepa. Em caso de contaminação, deve-se reisolar o micro-organismo a ser testado para evitar erros na medição dos halos. 4. INFORMAÇÕES SOBRE OS PRODUTOS a- Princípio da técnica O procedimento consiste no preparo de uma suspensão de bactérias de cultivo recente, inoculação desta suspensão na superfície de uma placa de Agar Mueller Hinton, e adição dos discos de papel impregnados com antimicrobianos. Após a incubação em estufa, é analisado o padrão de crescimento ou inibição ao redor de cada disco, sendo então medido o tamanho de cada halo e o resultado pesquisado em tabelas apropriadas segundo a espécie bacteriana em análise. b- Reagentes Discos de papel impregnados com antibióticos de forma a cada disco apresentar uma concentração padronizada. Cada disco possui impresso em uma de suas faces seu código e o valor numérico de sua concentração. O frasco contém um disco agente indicador de umidade, que consiste em um disco de coloração azul, que caso modifique para rósea indica impregnação por umidade. Neste caso, os discos devem ser inutilizados. Os multidiscos constituem uma boa alternativa para laboratórios com pequenas rotinas de antibiograma. As combinações disponíveis foram estabelecidas de forma a aproximar aos critérios de escolha do CLSI.
  3. 3. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 3 de 35 Na forma de multidiscos, estão disponíveis as seguintes combinações: GRAM NEGATIVO GRAM POSITIVO URINA Ampicilina Cefepime Ac. Nalidíxico Amicacina Ciprofloxacin Ampicilina Amoxicilina + Ac. Clavulânico Cloranfenicol Cefalotina Ceftazidima Clindamicina Cefepime Cefalotina Eritromicina Ciprofloxacin Cefepime Gentamicina Cloranfenicol Cefoxitina Oxacilina Levofloxacina Cefuroxima Penicilina-G Gentamicina Ciprofloxacina Rifampicina Norfloxacin Gentamicina Sulfazotrim Nitrofurantoína Meropenem Tetraciclina Sulfazotrim Sulfazotrim Vancomicina Tetraciclina c- Armazenamento e estabilidade No laboratório ao receber o material, colocar-lo imediatamente nas condições indicadas de armazenamento indicadas no rótulo, condição em que não ocorrendo contaminação microbiana ou umidificação, o produto se manterá estável até a data de validade expressa em rótulo. d- Precauções e cuidados especiais - Deixar que os discos atinjam a temperatura ambiente antes do uso (a abertura precoce dos mesmos causa condensação de água no interior do frasco, aumento da umidade e conseqüente inativação do antibiótico com queda em sua atividade); - Se no momento da abertura do frasco o indicador de umidade estiver com coloração rósea, descartar o produto (presença de umidade). No caso do frasco estar lacrado, entrar em contato com o Serviço de Assessoria ao Cliente (SAC - 0800 410027); - Usar pinças estéreis para manipulação dos discos, nunca as mãos. Cuidar para não utilizar pinça quente, pois os antimicrobianos são termosensíveis; - Não deixar o frasco desnecessariamente aberto ou por longos períodos em temperatura ambiente (pode haver inativação do produto); - A validade do produto expressa em rótulo refere-se ao frasco fechado e com o vácuo intacto. Após sua abertura, a validade do produto fica condicionada às boas condições de armazenamento e manipulação. Recomenda-se a execução do controle de qualidade com cepas padrão, e detectados desvios referentes aos discos, estes deverão ser descartados e substituídos (esta regra aplica-se principalmente aos discos de conservação em freezer). - O produto destina-se ao uso diagnóstico in vitro; - O material usado deverá ser descartado após sua esterilização pelo calor úmido a 121 °C (autoclave) por 20 minutos. Para acondicionamento do material usado, recomendamos o uso do Detrilab (códigos 570668 ou 570670); - Não usar materiais com o prazo de validade expirado, ou que apresentem selo de qualidade rompido ou violado no momento do recebimento. 5. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS (NÃO FORNECIDOS) - Estufa bacteriológica; - Alças bacteriológicas; - Bico de Bunsen; - Agar Mueller Hinton com e sem sangue em placas; - Tubo com escala 0,5 Mac Farland ou tubidímetro; - Solução salina estéril; - Swabs estéreis para espalhamento da suspensão; - Régua para medição; - Tabelas com os valores esperados de halos inibitórios. 6. PROCEDIMENTO TÉCNICO Retirar as placas e os discos da geladeira ou congelador cerca de 20 a 30 minutos para que adquiram a temperatura ambiente antes da execução da prova. a- Utilizar para o antibiograma, colônias provenientes de cultura recente. b- Com uma alça bacteriológica tocar na colônia a ser testada. Suspende-la em salina estéril (NaCl 0,85%) até se obter uma turvação compatível com a Escala 0,5 de Mac Farland (1x10 8 UFC/mL). Solicite a escala para seu vendedor. c- Embeber um swab estéril na suspensão bacteriana, comprimindo-o contra as paredes do tubo para tirar o excesso da suspensão. Semear em seguida de forma suave em pelo menos 5 direções na placa, abrangendo toda a superfície; d- Aguardar aprox. 10-15 minutos para a superfície do agar secar;
  4. 4. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 4 de 35 e- Com auxílio de uma pinça flambada e resfriada, colocar os monodiscos ou multidiscos, sobre a superfície do meio inoculado, exercendo uma leve pressão com a ponta da pinça para uma boa adesão dos discos; f- Incubar a placa com os discos em estufa bacteriológica a 36 o C por 18 a 24 horas; g- Resultados: Com o auxílio de uma régua, paquímetro ou dispositivo semelhante, medir o diâmetro dos halos inibitórios de cada disco, e consultar uma tabela apropriada para determinar se a bactéria em análise é sensível, intermediário ou resistente ao antimicrobiano testado. 7. PRECAUÇÕES E CUIDADOS ESPECIAIS - Seguir padronização técnica para execução da prova (CLSI); - O meio de Mueller Hinton utilizado deve estar com pH, composição química (íons cálcio, íons magnésio, timina e timidina) e espessura do agar adequados; - As placas devem ter espessura média de 4 mm não podendo ser inferiores a 3 mm ou superiores a 5 mm (respectivamente provocam resultados falsamente aumentados ou diminuídos); - Inóculos mais carregados (acima do padrão 0,5 da escala Mac Farland) fornecem resultados falsamente diminuídos e inóculos mais fracos resultados falsamente aumentados; - A pré-incubação da placa em estufa por 5 minutos após a inoculação com o swab é importante para remover o excesso de umidade, que pode causar a difusão errática do antibiótico após a implantação dos discos; - Observar critérios para escolha dos antibióticos apropriados para a bactéria em análise e suas resistências intrínsecas; - Aguardar para que os materiais atinjam a temperatura ambiente no momento do uso; - O uso de swabs com base de algodão e/ou haste de madeira não são recomendados. Vários trabalhos mostraram que os ácidos graxos naturais presentes no material interferirem no crescimento bacteriano; - A temperatura de incubação deve ser rigorosamente controlada; - O tempo de incubação indicado não deve ser nem abreviado nem aumentado, sob risco de se obterem resultados falsamente diminuídos (pouco tempo) ou falsamente aumentados (mais tempo); - Para as placas com tamanho 90x15 mm recomenda- se a colocação de no máximo 6 discos, já para a placa com 140x15 mm podem ser colocados até 12 discos. Esta sugestão visa impedir que o contato entre os antimicrobianos difundidos no meio, podendo fornecer distorções ligadas a sinergismo ou outros tipos de interação. 8. CONTROLE DE QUALIDADE - Materiais necessários Cepas padrão ATCC ou derivadas - utilizadas até o quinto repique. - Periodicidade Testar cada novo lote (dos discos e dos meios de cultura) em uso com a cepa padrão e em periodicidade definida pelo laboratório segundo sua rotina e necessidade, sendo sugerida realização semanal. - Interpretação e avaliação Espera-se que cada cepa testada produza um halo inibitório dentro dos limites estabelecidos para controle, definidos na Tabela 1. Considerando que depois de aberto o frasco a tendência do antibiótico é de ter sua potência diminuída com o passar do tempo, é normal o decréscimo dos valores dos halos de inibição. Uma vez que os valores atinjam pontos muito próximos ou inferiores aos limites mínimos preconizados, recomenda-se que os discos sejam desprezados. Resultados alterados no controle de qualidade implicam em revisão completa de todos os componentes do sistema analítico. Nestas circunstâncias não se recomenda a liberação dos resultados até que sejam investigadas as causas do desvio de controle. Não é recomendado o uso de cepas clínicas para controle de qualidade, uma vez que na maior parte dos casos estas cepas já passaram por diversos estágios de adaptação ao meio ambiente, exposição a antibióticos e outras drogas que determinam a modificação de seu comportamento. As cepas ATCC podem ser utilizadas apenas até o quinto repique, o que garante sua integridade de resposta para controle de qualidade.
  5. 5. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 5 de 35 9. SUGESTÕES DO CLSI PARA ESCOLHA DE DISCOS PARA ANTIBIOGRAMA As sugestões referem-se a padrões adotados nos Estados Unidos, e indicados pela ANVISA. São referenciados no grupo A as drogas de primeira escolha para o antibiograma, no grupo B as de segunda escolha e no grupo C as drogas suplementares, testadas quando o primeiro e segundo grupos não se mostrarem eficazes. Para amostras de urina, recomenda-se a adição das drogas que estão descritas no grupo Urinário. Como o próprio nome indica, sugestões para uma escolha mais racional de antibióticos. A recomendação original é a de que se o micro-organismo testado for sensível aos antibióticos do grupo A apenas estes resultados sejam liberados, assim, as drogas do grupo B são testadas apenas quando se verificar alto índice de resistência ao grupo A, o mesmo raciocínio aplicado ao grupo C em relação ao grupo B.
  6. 6. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 6 de 35 Tabela 1: Sugestão do FDA Clinical Indications para grupos de agentes antimicrobianos Enterobacteriaceae P. aeruginosa Staphylococcus spp. Enterococcus spp. GRUPOA (escolhaprimária- reportar) Ampicilina Ceftazidima Azitromicina ou Claritromicina ou Eritromicina Ampicilina Penicilina Clidamicina Oxacilina (*) Cefoxitina (substituto para teste da Oxacilina) *Cefazolina Gentamicina Tobramicina Penicilina Gentamicina Tobramicina Piperacilina Trimetropin-Sulfametoxazol GRUPOB(escolhaprimária–reportarseletivamente) Amicacina Amicacina Ceftarolina Daptomicina (*) * Daptomicina Aztreonam Linezolida Linezolida Amoxacilina-clavulanato Ampicilina-sulbactam Piperacilina-tazobactam Ticarcilina-clavulanato Cefepime Doxacilina Minociclina Tetraciclina Cefuroxima Ciprofloxacina Levofloxacina Vancomicina (*) Vancomicina Cefepime Doripenem Imipenem Meropenem Rifampina Cefotetam Cefoxitina Cefotaxima ou Ceftriaxona Ciprofloxacin Levofloxacin Ertapenem Imipenem Meropenem Doripenem Piperacilina- Tazobactam Piperacilina Trimetropin- Sulfametoxazol GRUPOC (reportarseletivamente) Aztreonam Ceftazidima Cloranfenicol Gentamicina (alto grau de resistência –somente screen) Ceftarolina Ciprofloxacina ou Levofloxacina ou Ofloxacina Moxifloxacina Estreptomicina (alto grau de resistência –somente screen) Cloranfenicol Gentamicina Tetraciclina GRUPOU(teste suplementarpara urina) Cefazolina (substituto para teste em UTI)) Norfloxacina Ofloxacina Nofloxacin Ciprofloxacina Levofloxacina Norfloxacina Fosfomicina (apenas para E. coli) Ofloxacian Norfloxacina Nitrofurantoína Fosfomicina (apenas para E. faecalis) Nitrofurantoína Sulfisoxazole Nitrofurantoína Sulfisoxazole TrimetropimTrimetropim Tetraciclina (*) somente para MIC, para teste de disco difusão não está disponível.
  7. 7. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 7 de 35 Tabela 1: Sugestão do FDA Clinical Indications para grupos de agentes antimicrobianos (continuação) Acinetobacter spp. Burkholderia cepacia Stenotrophomonas maltophilia * outras não-enterobactérias(e) GRUPOA (escolhaprimária- reportar) Ampicilina-sulbactam Trimetropin- Sulfametoxazol Trimetropin-Sulfametoxazol Ceftazidima Ceftazidima Ciprofloxacin Levofloxacin Imipenem Meropenem Doripenem Gentamicina Tobramicina Gentamicina Tobramicina Piperacilina GRUPOB(escolhaprimária–reportar seletivamente) Amicacina Ceftazidima Ceftazidima (*) Amicacina Cloranfenicol (*) Piperacilina-tazobactam Ticarcilina-clavulanato Levofloxacin (*) Cloranfenicol (*) Aztreonam Levofloxacin Cefepime Cefepime Meropenem Minociclina Ciprofloxacin Levofloxacin Cefotaxima Ceftriaxona Minociclina Ticarcilina- clavulanato (*) Ticarcilina-clavulanato (*) Doxiciclina Tetraciclina Imipenem Meropenem Minociclina Piperacilina Piperacilina-tazobactam Ticarcilina-clavulanato Trimetropin- Sulfametoxazol Trimetropin- Sulfametoxazol GRUPOC (reportar seletivamente) Cefotaxima Ceftriaxona Cloranfenicol GRUPOU (teste suplement arpara urina) Ofloxacin Norfloxacin Sulfisoxazol Tetraciclina * somente para MIC, para teste de disco difusão não está disponível
  8. 8. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 8 de 35 Tabela 1A: Sugestão do FDA Clinical Indications para Micro-organismos Fastidiosos. Haemophillus influenzae e Haemophillus parainfluenzae Neisseria gonorrhoeae Streptococcus pneumoniae Strptococcus ß- hemolitico Streptococcus spp Grupo Viridans GRUPOA (escolha primária- reportar) Ampicilina Ceftriaxona Cefixime Ciprofloxacina Tetraciclina Eritromicina Clindamicina Penicilina (*) Ampicilina (*) Penicilina (disco de oxacilina) Eritromicina Trimetropin- sulfametoxazol Penicilina ou AmpicilinaTrimetropin- sulfametoxazol GRUPOB(escolhaprimária–reportar seletivamente) Ampicilina-sulbactam Cefepime (*) Cefotaxima (*) Ceftriaxona (*) Cefepime ou Cefotaxima ou Ceftriaxona Cefepime Cefotaxima Cetriaxona Clindamicina Doxiciclina Cefuroxima (parenteral) Gemifloxacin Levofloxacin Moxifloxacin Ofloxacin Vancomicina Vancomicina Meropenem (*) Telitromicina Cefotaxima ou Ceftazidima ou Ceftriaxona Tetraciclina Vancomicina Cloranfenicol Meropenem GRUPOC (reportarseletivamente) Azitromicina Claritromicina Espectinomicina Amoxacilina (*) Amoxaclinina/ácido clavulânico(*) Ceftarolina Cloranfenicol Aztreonan Amoxaclinina/ácido clavulânico Ceftarolina Cloranfenicol Cefaclor Cefprozil Cefuroxima * Daptomicina (*) Cefepime ou Cefpodoxima ou Cefdinir Cloranfenicol Levofloxacina Ofloxacina Clindamicina Ceftarolina ** Ertapenem (*) Imipenem (*) Linezolida Cefuroxima (oral) Ciprofloxacina ou Levofloxacina ou Moxifloxacina ou Ofloxacina Gemifloxacina Linezolida Eritromicina Ertapenem ou Imipenem Rifampicina Linezolida Rifampicina Quinupristina- daldopristinaTetraciclina Telitromicina (*) somente para MIC, para teste de disco difusão não está disponível ** somente para Haemophillus influenzae
  9. 9. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 9 de 35 Tabela 2: Controle de Qualidade por teste de Disco Difusão. Valores de halos inibitórios esperados para Controle de Qualidade (mm) Agente Código Concentração E.coli ATCC25922 S.aureus ATCC25923 P.aeruginosa ATCC27853 E.coli ATCC35218 Observações Ácido Nalidíxico NAL 30 µg 22-28 - - - Amicacina AMI 30 µg 19-26 20-26 18-26 - Amoxicilina + clavulanato AMC 20/10 µg 18-24 28-36 - 17-22 Ampicilina AMP 10 µg 16-22 27-35 - 6 Ampicilina + Sulbactam ASB 10/10 µg 19-24 29-37 - 13-19 Azitromicina AZI 15 µg - 21-26 - - Aztreonam ATM 30 µg 28-36 - 23-29 - Carbenicilina - 100 µg 23-29 - 18-24 - Cefaclor CFC 30 µg 23-27 27-31 - - Cefazolina CFZ 30 µg 21-27 29-35 - - Cefdinir - 5 µg 24-28 25-32 - - Cefepime CPM 30 µg 31-37 23-29 24-30 - Cefixime CFM 5 µg 23-27 - - - Cefmetazole - 30 µg 26-32 25-34 - - Cefalexina CFX 30 µg 15-21 29-37 - - Cefamandole - 30 µg 26-32 26-34 - - Cefalotina CFL 30 µg 15-21 29-37 Cefetamet CFT 10 µg 24-29 - - - Cefonicid - 30 µg 25-29 22-28 - - Cefoperazona - 75 µg 28-34 24-33 23-29 - Cefotaxima CTX 30 µg 29-35 25-31 18-22 - Cefotetan - 30 µg 28-34 17-23 - - Cefoxitina CFO 30 µg 23-29 23-29 - - Cefpodoxima - 10 µg 23-28 19-25 - - Cefprozil CEZ 30 µg 21-27 27-33 - - Ceftazidima CAZ 30 µg 25-32 16-20 22-29 Ceftriaxona CRO 30 µg 29-35 22-28 17-23 - Cefuroxima CRX 30 µg 20-26 27-35 - - Ciprofloxacina CIP 5 µg 30-40 22-30 25-33 - Claritromicina CLA 15 µg - 26-32 - - Clindamicina CLI 2 µg - 24-30 - - Cloranfenicol CLO 30 µg 21-27 19-26 - - Colistina - 10 µg 11-17 - 11-17 - Doripenem - 10 µg 27-35 33-42 28-35 - Doxiciclina DOX 30 µg 18-24 23-29 - - Ertapenem - 10 µg 29-36 24-31 13-21 - Eritromicina ERI 15 µg - 22-30 - - Estreptomicina - 10 µg 12-20 14-22 - - Fosfomicina - 200 µg 22-30 25-33 - -
  10. 10. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 10 de 35 Valores de halos inibitórios esperados para Controle de Qualidade (continuação) Agente Código Concentração E.coliATCC 25922 S.aureusATCC 25923 P.aeruginosa ATCC27853 E.coliATCC 35218 Observações Gatifloxacin GTF 5 µg 30-37 27-33 20-28 Gentamicina GEN 10 µg 19-26 19-27 17-23 - Gentamicina GEN 120 µg - - - - E. faecalis ATCC 29212: 16-23 mm Imipenem IPM 10 µg 26-32 - 20-28 - Levofloxacin LVX 5 µg 29-37 25-30 19-26 - Linezolida - 30 µg - 25-32 - - Lomefloxacin LMX 10 µg 27-33 23-29 22-28 - Moxifloxacin MFX 5 µg 28-35 28-35 17-25 Meropenem MER 10 µg 28-34 29-37 27-33 - Netilmicina - 30 µg 22-30 22-31 17-23 - Nitrofurantoína NIT 300 µg 20-25 18-22 - - Norfloxacin NOR 10 µg 28-35 17-28 22-29 - Oxacilina OXA 1 µg - 18-24 - - Ofloxacin OFX 5 µg 29-33 24-28 17-21 - Penicilina G PEN 10 un - 26-37 - - Piperacilina - 100 µg 24 - 30 - 25 - 33 12 - 18 Piperacilina + Tazobactam PPT 100/10 µg 24-30 27-36 25-33 24-30 Polimixina B POL 300 un 13-19 - 14-18 - Rifampicina RIF 5 µg 8-10 26-34 - - Sulfametoxazol/ Trimetropin SUT 1,25/ 23,75 µg 23-29 24-32 - - Ticarcilina - 75 µg 24-30 - 21-27 6 Ticarcilina + clavulanato TIC 75/10 µg 24-30 29-37 20-28 21-25 Teicoplamina - 30 µg - 15-21 - - Tetraciclina TET 30 µg 18-25 24-30 - - Tigeciclina TIG 15 µg 20-27 20-25 9-13 - Tobramicina TOB 10 µg 18-26 19-29 20-26 - Trimetoprim TRI 5 µg 21-28 19-26 - - Vancomicina VAN 30 µg - 17-21 - -
  11. 11. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 11 de 35 Tabela 3: Valores de halos inibitórios esperados para Enterobacteriaceae. Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Ácido Nalidíxico NAL 10 µg ≤13 14-18 ≥19 * Apenas para isolados do trato urinário e para todos isolados de Salmonella spp. Amicacina AMI 30 µg ≤14 15-16 ≥17 Amoxicilina + Clavulanato AMC 20/10 µg ≤13 14-17 ≥18 Ampicilina AMP 10 µg ≤13 14-16 ≥17 Resultados podem ser usados como preditivos para amoxicilina Ampicilina + Sulbactam ASB 10/10 µg ≤11 12-14 ≥15 Aztreonam ATM 30 µg ≤17 18-20 ≥21 Azitromicina AZT 15 µg ≤12 - ≤13 Apenas para Salmonella typhi Cefaclor (Oral) CFC 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Cefalotina (Parenteral) CFL 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Pode predizer resultados para cefapirina, cefradina, cefalexina, cefaclor e cefadroxil. Cefamandole (Parenteral) - 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Cefazolina (Parenteral) Cefazolina (Oral) CFZ 30 µg ≤19 ≤14 20-22 - ≥23 ≥15 Cefepime CPM 30 µg ≤18 - ≥25 SDD: 19-24mm Cefdinir (Oral) - 5 µg ≤16 17-19 ≥20 Cefetamet CFT 10 µg ≤14 15-17 ≥18 Não aplicável em Morganella spp Cefixime (Oral) CFM 5 µg ≤15 16-18 ≥19 Não aplicável em Morganella spp Cefmetazole (Parenteral) - 30 µg ≤12 13-15 ≥16 Cefonicid (Parenteral) - 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Cefoperazona (Parenteral) - 75 µg ≤15 16-20 ≥21 Cefotaxima (Parenteral) CTX 30 µg ≤22 23-25 ≥26 Cefotetan (Parenteral) - 30 µg ≤12 13-15 ≥16 Cefoxitina (Parenteral) CFO 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Cefpodoxima (Oral) - 10 µg ≤17 18-20 ≥21 Não aplicável em Morganella spp Cefprozil (Oral) - 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Não usar disco difusão para Providencia spp pois foram relatados casos de falsa sensibilidade por este método. Ceftarolina (Parenteral) - 30 µg ≤19 20-22 ≥23 Ceftazidima (Parenteral) CAZ 30 µg ≤17 18-20 ≥21 Ceftibuten - 30 µg ≤17 18-20 ≥21 Apenas para ser testado e reportado em amostra de urina. Ceftizoxima (Parenteral) - 30 µg ≤21 22-24 ≥25 Ceftriaxona (Parenteral) CRO 30 µg ≤19 20-22 ≥23 Cefuroxima (parenteral) Cefuroxima (oral) CRX 30 µg ≤14 ≤14 15-17 15-22 ≥18 ≥23 Ciprofloxacina CIP 5 µg ≤15 16-20 ≥21 Somente para enterobactérias que não Salmonella spp e S. typhi Ciprofloxacina CIP 5 µg ≤20 21-30 ≥31 Para Salmonella spp e S. typhi extraintestinal Cloranfenicol CLO 30 µg ≤12 13-17 ≥18 Uso não indicado na rotina de urina Doripenem - 10 µg ≤19 20-22 ≥23 Doxiciclina DOX 30 µg ≤10 11-13 ≥14 Ertapenem - 10 µg ≤18 19-21 ≥22 Enoxacin - 10 µg ≤14 15-17 ≥18 Fosfomicina - 200 µg ≤12 13-15 ≥16 Gatifloxacin - 5 µg ≤14 15-17 ≥18 Gentamicina GEN 10 µg ≤12 13-14 ≥15 Imipenem IPM 10 µg ≤19 20-22 ≥23 Kanamicina - 30 µg ≤13 14-17 ≥18 Levofloxacin LVX 5 µg ≤13 - 14-16 - ≥17 - - Somente para enterobactérias que não Salmonella spp e S. typhi - Para Salmonella spp e S. typhi deve ser realizado MIC
  12. 12. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 12 de 35 Tabela 3: Valores de halos inibitórios esperados para Enterobacteriaceae (continuação) Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Tobramicina - 10 µg ≤12 13-14 ≥15 Lomefloxacin LMX 10 µg ≤18 19-21 ≥22 Uso indicado para urina Loracarbef (Oral) - 10 µg ≤14 15-17 ≥18 Mecilinam - 10 µg ≤11 12-14 ≥15 Meropenem MER 10 µg ≤19 20-22 ≥23 Minociclina - 30 µg ≤12 13-15 ≥16 Moxalactam (Parenteral) - 30 µg ≤14 15-22 ≥23 Netilmicina NET 30 µg ≤12 13-14 ≥15 Nitrofurantoína NIT 300 µg ≤14 15-16 ≥17 Uso indicado para urina Norfloxacin NOR 10 µg ≤12 13-16 ≥17 Uso indicado para urina Pefloxacina - 5 µg ≤23 - ≥24 Piperacilina - 100 µg ≤17 18-20 ≥21 Piperacilina + Tazobactam PPT 100/10 µg ≤17 18-20 ≥21 Ofloxacin OFX 5 µg ≤12 13-15 ≥16 Somente para Urina, demias materiais somente MIC Sulfametoxazol + Trimetoprim SUT 23,75/1,25 µg ≤10 11-15 ≥16 Sulfonamidas SUL 250 ou 300 µg ≤12 13-16 ≥17 Streptomicina - 10 µg ≤11 12-14 ≥15 Ticarcilina - 75 µg ≤14 15-19 ≥20 Ticarcilina + clavulanato TIC 75/10 µg ≤14 15-19 ≥20 Tetraciclina TET 30 µg ≤11 12-14 ≥15 Trimetoprim TRI 5 µg ≤10 11-15 ≥16 Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton (MHA) - Inóculo: suspensão realizada direto da colônia “over night”, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, por 16 a 18 horas em ar ambiente.
  13. 13. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 13 de 35 - Screening para pesquisa de ESBL - Para cepas de E. coli, K. pneumoniae e K. oxytoca . - Para Proteus mirabilis Antibiótico Halo Cefpodoxima ≤ 22 mm Ceftazidima ≤ 22 mm Cefotaxima ≤ 27 mm Teste confirmatório para produção de ESBL: - Método de duplo disco difusão: testar a cepa frente a dois discos, um contendo a cefalosporina de terceira geração e o outro, disposto a 20 mm de distância, contendo o inibidor de beta-lactamase (amoxacilina + ácido clavilânico). O aparecimento de uma “zona fantasma” ou o alargamento do halo de inibição da cefalosporina, confirma a produção de ESBL. - As setas mostram a formação da zona fantasma e alargamento da zona de inibição. - Resultados: A pesquisa de ESBL é indicada para confirmação da presença das enzimas para fim de controle epidemiológico. Não é indicado que qualquer resultado das cefalosporinas sejam editados. - Controle de Qualidade: Escherichia coli ATCC 25922: controle negativo Klebsiella pneumoniae ATCC 700603: controle positivo Antimicrobiano Halo esperado Cefpodoxima 9-16 mm Ceftazidima 10-18 mm Aztreonam 9-17 mm Cefotaxima 17-25 mm Ceftriaxona 16-24 mm Antibiótico Halo Cefpodoxima ≤ 17 mm Ceftazidima ≤ 22 mm Aztreonam ≤ 27 mm Cefotaxima ≤ 27 mm Ceftriaxona ≤ 25 mm
  14. 14. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 14 de 35 Teste Fenotípico Confirmatório para pesquisa de KPC Quando utilizados estes novos critérios de interpretação, os laboratórios clínicos não necessitam realizar o Teste de Hodge Modificado, exceto em casos de controles epidemiológicos e de infecção. - TESTE DE HODGE MODIFICADO: Para as amostras nas quais o teste de triagem for positivo para produção de KPC, pode ser realizado o Teste de Hodge Modificado como teste confirmatório fenotípico. - Preparar uma suspensão de Escherichia coli ATCC 25922 em soro fisiológico estéril (NaCl 0,9%), a partir de colônias isoladas em placa de ágar não seletivo, ajustada para a escala 0,5 de McFarland. - Realizar uma diluição 1:10 em soro fisiológico estéril. Em seguida com auxílio de um swab inocular esta diluição na superfície de uma placa de ágar Mueller Hinton. - Colocar um disco de imipenem no centro da placa. - Ao redor deste disco fazer estrias com as amostras suspeitas. - Incubadas a 37°C por 18 a 24 horas. O teste de Hodge é considerado positivo quando houver um alargamento da área de crescimento bacteriano na inserção com o limite externo do halo de inibição (Fonte: Metodologia descrita no Consenso em Detecção de Resistência Bacteriana, 2008).
  15. 15. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 15 de 35 Tabela 4: Valores de halos inibitórios esperados para Pseudomonas aeruginosa Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Amicacina - 30 µg ≤14 15-16 ≥17 Aztreonam - 30 µg ≤15 16-21 ≥22 Ceftazidima CAZ 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Uso parenteral Cefepime CPM 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Uso parenteral Ciprofloxacin CIP 5 µg ≤15 16-20 ≥21 Colistina - 10 µg ≤10 - ≥11 Doripenem - 10 µg ≤15 16-18 ≥19 Gatifloxacina - 5 µg ≤14 15-17 ≥18 Somente para ser testado e reportado em amostras do trato urinário Gentamicina GEN 10 µg ≤12 13-14 ≥15 Imipenem IM 10 µg ≤15 16-18 ≥19 Meropenem MER 10 µg ≤15 16-18 ≥19 Lomefloxacin LMX 10 µg ≤18 19-21 ≥22 Levofloxacin LVX 5 µg ≤13 14-16 ≥17 Netilmicina - 30 µg ≤12 13-14 ≥15 Norfloxacin NOR 10 µg ≤12 13-16 ≥17 Ofloxacin OFX 5 µg ≤12 13-15 ≥16 Piperacilina - 100 µg ≤14 15-20 ≥21 Piperacilina + tazobactam PPT 100/10 µg ≤14 15-20 ≥21 Polimixina B - 300 U ≤11 - ≥12 Ticarcilina - 75 µg ≤15 16-23 ≥24 Tobramicina - 10 µg ≤12 13-14 ≥15 Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton (MHA) - Inoculo: suspensão realizada direto da colônia “over night”, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, por 16 a 18 horas em ar ambiente.
  16. 16. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 16 de 35 Tabela 5: Valores de halos inibitórios esperados para Burkholderia cepacia Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Ceftazidima CTX 30 µg ≤17 18-20 ≥21 Cloranfenicol CLO - - - - Só existem valores definidos pata MIC Levofloxacin LEV 5 µg - - - Só existem valores definidos pata MIC Meropenem MER 10 µg ≤15 16-19 ≥20 Minociclina - 30 µg ≤14 15-18 ≥19 Sulfazotrim SUT 1,25/ 23,75 µg ≤10 11-15 ≥16 Ticarcilina-ácido clavulânico - - ≤10 11-15 ≥16 Só existem valores definidos pata MIC Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton - Inoculo: suspensão realizada direto da colônia “over night”, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, por 20 a 24 horas em ar ambiente.
  17. 17. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 17 de 35 Tabela 6: Valores de halos inibitórios esperados para Acinetobacter spp Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton - Inoculo: suspensão realizada direto da colônia “over night”, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, por 20 a 24 horas em ar ambiente. Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Ampicilina+Sulbactam ASB 10/10 µg ≤11 12-14 ≥15 Amicacina AMI 30 µg ≤14 15-16 ≥17 Ceftazidima CAZ 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Cefepime CPM 30 µg ≤14 15-17 ≥18 Cefotaxima CTX 30 µg ≤14 15-22 ≥23 Ceftriaxona CRO 30 µg ≤13 14-20 ≥21 Ciprofloxacin CIP 5 µg ≤15 16-20 ≥21 Colistina - - - - - Só existem valores definidos para MIC Doripenem - 10 µg ≥14 15-17 ≥18 Doxiciclina DOX 30 µg ≤9 10-12 ≥13 Gatifloxacina - 5 µg ≤14 15-17 ≥18 Gentamicina GEN 10 µg ≤12 13-14 ≥15 Imipenem IPM 10 µg ≤18 19-21 ≥22 Levofloxacin LEV 5µg ≤13 14-16 ≥17 Meropenem MER 10µg ≤14 15-17 ≥18 Minociclina - 30µg ≤12 13-15 ≥16 Piperacilina - 100 µg ≤17 18-20 ≥21 Piperacilina+tazobactam PPT 100/10µg ≤17 18-20 ≥21 Polimixina B POL - - - - Só existem valores definidos pata MIC Sulfazotrim SUL 1,25/ 23,75µg ≤10 11-15 ≥16 Tetraciclina TET 30µg ≤11 12-14 ≥15 Ticarcilina - 75µg ≤14 15-19 ≥20 Ticarcilina+clavulanato TIC 75/10µg ≤14 15-19 ≥20 Tobramicina TOB 10µg ≤12 13-14 ≥15
  18. 18. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 18 de 35 Tabela 7: Valores de halos inibitórios esperados para Stenotrophomonas maltophilia Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Ceftazidima CAZ - - - - Só existem valores definidos pata MIC Minociclina - 30 µg ≤14 15-18 ≥19 Levofloxacin LEV 5 µg ≤13 14-16 ≥17 Sulfazotrim SUT 1,25/23,75 µg ≤10 11-15 ≥16 Ticarcilina-ácido clavulânico - - - - - Só existem valores definidos pata MIC Cloranfenicol CLO - - - - Só existem valores definidos pata MIC Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton 90x15mm ou 140x15mm - Inoculo: suspensão realizada direto da colônia “over night”, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, por 20 a 24 horas em ar ambiente.
  19. 19. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 19 de 35 Tabela 8: Valores de halos inibitórios esperados para Staphylococcus spp Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Amicacina AMI 30 µg ≤14 15-16 ≥17 Azitromicina AZI 15 µg ≤13 14-17 ≥18 Cloranfenicol CLO 30 µg ≤12 13-17 ≥18 Clindamicina CLI 2 µg ≤14 15-20 ≥21 Induzir resistência a Clindamicina realizando o D-test Ciprofloxacin CIP 5 µg ≤15 16-20 ≥21 Claritromicina CLA 15 µg ≤13 14-17 ≥18 Doxiciclina DOX 30 µg ≤12 13-15 ≥16 Enofloxacin - 10 µg ≤14 15-17 ≥18 aprovado pela FDA p/ S. saprophyticcus e S. epidermides (mas não para S. aureus) Eritromicina ERI 15 µg ≤13 14-22 ≥23 Gentamicina GEN 10 µg ≤12 13-14 ≥15 Kanamicina - 30 µg ≤13 14-17 ≥18 Linezolida - 30 µg ≤20 - ≥21 Examinar halo de inibição utilizando luz transmitida. Para confirmação de resistência utilizar método por MIC. Levofloxacin LEV 5 µg ≤15 16-18 ≥19 Lomefloxacin LMX 10 µg ≤18 19-21 ≥22 Moxifloxacin MFX 5 µg ≤20 21-23 ≥24 Nitrofurantoína NIT 300 µg ≤14 15-16 ≥17 Norfloxacin NOR 10 µg ≤12 13-16 ≥17 Ofloxacin OFX 5 µg ≤14 15-17 ≥18 Penicilina PEN 10 Un ≤28 - ≥29 Para estafilococos resistentes a oxacilina, reportar a penicilina como resistente ou não reportar. Teicoplamina TEI 30 µg ≤10 11-13 ≥14 Tobramicina TOB 10 µg ≤12 13-14 ≥15 Tetraciclina TET 30 µg ≤14 15-18 ≥19 Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton - Inoculo: suspensão realizada direto da colônia “over night”, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, em ar ambiente, por 16 a 18 horas ; 24 horas (Estafilococos coagulase negativa e cefoxitina)
  20. 20. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 20 de 35 Tabela 8: Valores de halos inibitórios esperados para Staphylococcus spp (continuação) Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Oxacilina Para S. aureus e S. lugdunensis OXA - 30µg de cefoxitina - ≤21 - - - ≥22 Não reportar sensibilidade para Oxacilina por disco difusão. Para isso utilizar o disco de Cefoxitina como substituto. Cefoxitina é utilizada como substituta para Oxacilina. Reportar sensibilidade ou resistência da Oxacilina baseada no teste da Cefoxitina. . Oxacilina Para Estafilococos Coagulase negativa, exceto S. lugdunensis OXA - 30µg de cefoxitina - ≤24 - - - ≥25 - Cefoxitina é utilizada como substituta para Oxacilina. Reportar sensibilidade ou resistência da Oxacilina baseada no teste da Cefoxitina. . Vancomicina (para S. aureus) VAN 30 µg - - - Este teste não é mais recomendado pelo CLSI, para verificação da sensibilidade do S. aureus, por não apresentar resultados confiáveis pelo método de difusão em disco. Deve ser realizada a MIC. As MICs esperados são: Sensível: ≤ 2 µg/mL Intermediário: 4-8 µg/mL Resistente: ≥ 16 µg/mL Vancomicina (para estafilococos coagulase negativa) VAN 30 µg - - - Este teste não é mais recomendado pelo CLSI, para verificação da sensibilidade do Estafilococos coagulase negativa, por não apresentar resultados confiáveis pelo método de difusão em disco. Deve ser realizada a MIC. As MICs esperados são: Sensível: ≤ 4 µg/mL Intermediário: 8-16 µg/mL Resistente: ≥ 32 µg/mL Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton - Inoculo: suspensão realizada direto da colônia “over night”, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, em ar ambiente, por 16 a 18 horas ; 24 horas (Estafilococos coagulase negativa e cefoxitina)
  21. 21. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 21 de 35 Cli Eri 20 mm CLINDAMICINA RESISTENTE Cli Eri 20 mm CLINDAMICINA SENSÍVEL RESISTÊNCIA À CLINDAMICINA Cepas de S. aureus e ENPC (estafilococos não produtores de coagulase) resistentes a macrolídeos podem apresentar resistência constitutiva ou induzida a Clindamicina ou podem ser resistentes apenas aos macrolídeos dependendo do mecanismo envolvido. A resistência induzida à clindamicina pode ser detectada através do D-teste ou Teste da zona D, em que são colocados um disco de clindamicina e um disco de eritromicina afastados a uma distância de 15 a 26 mm, e após a incubação, caso não se apresente o achatamento do halo inibitório da clindamicina reporta-se a cepa como sensível a esta. Caso seja visualizado o achatamento do halo de inibição entre os discos, deve ser reportado resistência a clindamicina, mesmo que o teste in vitro tenha dado sensível. Cepas que apresentem crescimento enevoado no halo inibitório da clindamicina é considerada resistente independente do teste de resistência induzida. OBS: para Streptococcus ß-hemolítico = utilizar distância de 12mm. RESISTÊNCIA A PENICILINAS Historicamente a resistência dos estafilococos às penicilinas penicilinase - estáveis é referida como resistência à meticilina, desta forma o acrônimo MRSA (para S. aureus meticilina-resistente) ou MRS (Staphylococcus meticilina- resistente), neste trabalho os termos são expressos como resistência a determinada droga (oxacilina resistente, meticilina-resistente etc.); Para S. aureus e ENPC (Staphylococcus não produtores de coagulase), resultados para cefens, parenterais e orais, combinações com inibidores de beta-lactamase e carbapenems, se testados, são reportados de acordo com os resultados usando-se os critérios de interpretação; Para S. aureus resistentes à oxacilina e ENPC meticilina-resistentes, outros agentes beta-lactâmicos como penicilinas e combinações com inibidores de beta-lactamase, cefens e carbapenems, pode surgir sensibilidade a estes agentes in vitro, porém sem eficácia clínica. Resultados destas drogas devem ser reportados como resistentes ou não reportados. Isto deve-se a casos documentados de infecções por MRS com respostas fracas à terapia por beta-lactâmicos, ou ainda em base de dados clínicos de tratamento; Detecção de resistência à oxacilina: testes para mec-A (determinante genético do MRSA) ou para proteína expressa por mec-A, a penicilina-binding protein 2a (PBP 2a) são os métodos mais acurados para predizer a resistência à oxacilina podendo ser usados para confirmar os resultados dos testes de difusão por disco para estafilococos isolados de materiais provenientes de infecções severas. As cepas que não carregam mec-A ou não produzem PBP 2a são reportadas como oxacilina sensíveis. Devido à rara ocorrência de outros mecanismos de resistência, se o MIC (concentração inibitória mínima) for executado em conjunto com o teste por difusão para oxacilina µ 4 µg/mL e a cepa for mec-A ou PBP 2 a negativa, reportar como oxacilina resistente;
  22. 22. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 22 de 35 Teste fenotípico primário para resistência mediada por mec-A em estafilococos: usar disco de cefoxitina (30 µg) – na presença da cefoxitina o mec-A é expresso em níveis mais elevados que a oxacilina: S. aureus/S. lugdunensis: ≤ 22 mm (Oxacilina Sensível) ou ≥ 21 mm (Oxacilina resistente) ENPC: ≤ 25 mm (Oxacilina Sensível) ou ≥ 24 mm (Oxacilina resistente) Reportar os resultados do disco de cefoxitina como oxacilina resistente ou sensível; - Ler a Cefoxitina com luz refletida; - Drogas de escolha nos casos de resistência ou sensibilidade à oxacilina: Perfil da Oxacilina Primeira escolha Segunda escolha SENSÍVEL Oxacilina Nafcilina Cefalosporinas, vancomicina, combinações com inibidores, carbapenems, macrolídeos, clindamicina, fluoroquinona RESISTENTE Vancomicina Teicoplamina Linezolida, sulfazotrim Os estafilococos sensíveis a penicilina são também sensíveis a outras penicilinas (combinações com inibidores de beta- lactamase, cefens e carbapenems. Cepas penicilina-resistentes, oxacilina-sensíveis são consideradas resistentes às penicilinas lábeis porém sensíveis a outras penicilinas penicilinase estáveis, combinações com inibidores de beta- lactamase, cefens e carbapenems. Estafilococos oxacilina-resistentes são resistentes todos os antibióticos beta- lactâmicos. Desta forma sensibilidade ou resistência antibióticos beta-lactâmicos de largo espectro é deduzida partindo- se do teste com penicilina e oxacilina; Desde o ano de 2009, o CLSI não recomenda que o teste de susceptibilidade a vancomicina seja realizado pelo método de disco difusão, e sim pelo método de determinação da concentração inibitória mínima (CIM), pelo aumento do número de casos de S. aureus vancomicina intermediário (VISA) e vancomicina resistente (VRSA). O grande problema do método de disco difusão é que este teste não detecta com eficiência os VISA, principalmente as amostras heterogenias. Os critérios de interpretação para o S. aureus é de até 2 µg/mL para as amostras sensíveis, de 4 a 8 µg/mL para as intermediárias e para as resistentes acima de 16 µg/mL. Por este motivos, os testes de sensibilidade a vancomicina podem ser realizados em placas prontas de BHI contendo 2 µg/mL de vancomicina, o que representa uma etapa do CIM, assim as cepas que não crescerem podem ser consideradas sensíveis, com eficiência. Caso haja a formação de um filme bacteriano ou de apenas uma colônia caracteriza resistência heterogenia a vancomicina, sendo necessário o encaminhamento destas amostras para laboratórios de referência para a detecção do gene VanA. DETECÇÃO DA PRODUÇÃO A BETA-LACTAMASE Para detecção de produção de beta-lactamase é utilizado o Teste da Borda. Neste teste é utilizado um disco de penicilina de 10µg em um inoculo compatível com a escala 0,5 de Mac Farland, semeado em Agar Mueller Hinton. Deve ser verificado o tipo de crescimento na borda do halo de inibição, conforme figura a seguir:
  23. 23. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 23 de 35 Borda Definida = ß-lactamase negativa Penicilina - S Borda Difusa = ß-lactamase positiva Penicilina - R
  24. 24. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 24 de 35 Tabela 9: Valores de halos inibitórios esperados para Enterococcus spp Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Ampicilina AMP 10 µg ≤16 - ≥17 Cloranfenicol CLO 30 µg ≤12 13-17 ≥18 Ciprofloxacin CIP 5 µg ≤15 16-20 ≥21 Doxiciclina DOX 30 µg ≤12 13-15 ≥16 Eritromicina ERI 15 µg ≤13 14-22 ≥23 Fosfomicina - 200 µg ≤12 13-15 ≥16 Levofloxacin LEV 5 µg ≤13 14-16 ≥17 Linezolid LNZ 30 µg ≤20 21-22 ≥23 Nitrofurantoína NIT 300 µg ≤14 15-16 ≥17 Norfloxacin NOR 10 µg ≤12 13-16 ≥17 Penicilina PEN 10 un ≤14 - ≥15 Rifampicina RIF 5 µg ≤16 17-19 ≥20 Tetraciclina TET 30 µg ≤14 15-18 ≥19 Teicoplamina TEC 30 µg ≤10 11-13 ≥14 Vancomicina VAN 30 µg ≤14 15-16 ≥17 Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton - Inoculo: suspensão realizada direto da colônia “over night”, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC em ar ambiente, por 16 a 18 horas e 24h para vancomicina. - Para Enterococcus spp, cefalosporinas, aminoglicosídeos (exceto para screening de altos níveis de resistência a aminoglicosídeos), clindamicina e SX+T são ativos in vitro, mas clinicamente desenvolvem resistência; - Sinergismo entre ampicilina, penicilina ou vancomicina e os aminoglicosídeos ( gentamicina ou estreptomicina para testes de resistências a altos níveis de aminoglicosídeos) pode ser previsto por meio dos testes de triagem (screening para altos níveis de resistência); - Dadas as poucas alternativas, cloranfenicol, eritromicina, tetraciclinas e rifampicinas podem ser usados para enterococos vancomicina-resistentes (VRE), porém recomenda-se consulta ao médico assistente; - SREENING PARA RESISTÊNCIA A ALTOS NÍVEIS DE AMINOGLICOSÍDEOS (HLAR) TIPO TESTE GENTAMICINA HLAR STREPTOMICINA HLAR VANCOMICINA HLAR Método Disco Difusão Disco Difusão Disco Difusão Meio Mueller Hinton Ágar Mueller Hinton Ágar N/A Concentração antibiótico 120µg de gentamicina em disco 300µg de streptomicina em disco N/A Resultados 6mm – resistente 7 a 9 mm – inconclusivo ≥10 mm - sensível 6mm – resistente 7 a 9 mm – inconclusivo ≥10 mm - sensível N/A Controle de qualidade E. faecalis ATCC 29212 Resultado esperado: 16 a 23mm E. faecalis ATCC 29212 Resultado esperado: 14 a 20mm N/A
  25. 25. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 25 de 35 Cli Eri 12mm INDUÇÃO Cli Eri NÃO INDUÇÃO Tabela 10: Valores de halos inibitórios esperados para Streptococcus pneumoniae Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Amoxacilina (meningites e não meningites) AMO - - - - Apenas por MIC Azitromicina AZI 15 µg ≤13 14-17 ≥18 Cefepime (meningites e não meningites) CPM 30 µg - - - Apenas por MIC Cefotaxima (meningites e não meningites) CTX 30 µg - - - Apenas por MIC Ceftriaxona (meningites e não meningites) CRO 30 µg - - - Apenas por MIC Cloranfenicol CLO 30 µg ≤20 - ≥21 Clindamicina CLI 2 µg ≤15 16-18 ≥19 Resistência por indução da clindamicina pode ser testada utilizando o D-Teste por disco difusão. Claritromicina CLA 15 µg ≤16 17-20 ≥21 Doxiciclina - 30 µg ≤24 25-27 ≥24 Eritromicina ERI 15 µg ≤15 16-20 ≥21 Levofloxacin LEV 5 µg ≤13 14-16 ≥17 Linezolida - 30 µg - - ≥21 Ofloxacin OFX 5 µg ≤12 13-15 ≥16 Penicilina PEN 1 µg de oxacilina - - ≥20 Penicilina parenteral (não-meningites) - - - - - Apenas por MIC Penicilina parenteral (meningites) - - - - - Apenas por MIC Rifampicina RIF 5 µg ≤16 17-18 ≥19 Tetraciclina TET 30 µg ≤18 19-22 ≥23 Vancomicina VAN 30 µg - - ≥17 Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton com 5% de sangue de carneiro 90x15mm ou 140x15mm - Inóculo: suspensão realizada direto da colônia over night, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, por 20 a 24 horas, em tensão de 5% de CO2. OBS: Se for realizado o teste de resistência a clindamicina para S. pneumoniae, deve ser incluída a Pesquisa da Resitência Induzida a Clindamicina (D-teste). Meio: Mueller Hinton com 5% de sangue de carneiro Antibiótico: disco de eritromicina (15µg) e disco de clindamicina (2µg) Condição de incubação: 35±2ºC / 5%CO2 Tempo de incubação: 20 a 24 horas Controle de Qualidade: S. pneumoniae ATCC 49619
  26. 26. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 26 de 35 Cli Eri 12mm INDUÇÃO Cli Eri NÃO INDUÇÃO Tabela 11: Valores de halos inibitórios esperados para Streptococcus ß-hemolítico Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Ampicilina AMP 10 µg - - ≥24 Azitromicina AZI 15 µg ≤13 14-17 ≥18 Cefepime CPM 30 µg - - ≥24 Cefotaxima CTX 30 µg - - ≥24 Ceftriaxona CRO 30 µg - - ≥24 Cloranfenicol CLO 30 µg ≤17 18-20 ≥21 Clindamicina CLI 2 µg ≤15 16-18 ≥19 Claritromicina CLA 15 µg ≤16 17-20 ≥21 Eritromicina ERI 15 µg ≤15 16-20 ≥21 Levofloxacin LEV 5 µg ≤13 14-16 ≥17 Linezolida - 30 µg - - ≥21 Ofloxacin OFX 5 µg ≤12 13-15 ≥16 Penicilina PEN 10 un - - ≥24 Tetraciclina TET 30 µg ≤18 19-22 ≥23 Vancomicina VAN 30 µg - - ≥17 Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão - Agar Mueller Hinton com 5% de sangue de carneiro 90x15mm ou 140x15mm - Inóculo: suspensão realizada direto da colônia over night, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, por 20 a 24 horas, em tensão de 5% de CO2. - O grupo beta-hemolítico cujo termo é empregado nesta tabela, inclui os grupos formadores de colônias grandes: A (S. pyogenes), B (S. agalactiae), C ou G. Cepas beta-hemolíticas formadoras de colônias pequenas: grupo A, C, F ou G (S. anginosus) são consideradas pertencentes ao grupo viridans, que inclui também S. mitis, S. oralis, S. salivarius, S. bovis etc.; PESQUISA DE RESISTENCIA INDUZIDA A CLINDAMICINA Estreptococos beta-hemolíticos resistentes aos macrolídeos podem apresentar resistência constitutiva ou induzida à clindamicina (metilação do 23s rRNA codificado por gene erm (também referido como MLSb – macrolídeo, lincomicina e estreptogramina). Para testar, coloca-se um disco de eritromicina (15 µg) distante 12 mm de um disco de clindamicina (2 mg) e correr o antibiograma conforme determinado para o gênero. Observar que a indução caracteriza-se pela deformação de halo da clindamicina em “D”
  27. 27. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 27 de 35 Tabela 12: Valores de halos inibitórios esperados para Haemophilus influenzae e Haemophilus parainfluenzae Agente Código Discos Halos de inibição (mm) Observação R I S Ampicilina AMP 10 µg ≤18 19-21 ≥22 Ampicilina-sulbactam - 10/10 µg ≤19 - ≥20 Amoxacilina-ácido clavuilânico AMC 20/10 µg ≤19 - ≥20 Azitromicina AZI 15 µg - - ≥12 Aztreonam AZT 30 µg - - ≥26 Cefepime CPM 30 µg - - ≥26 Cefotaxima CTX 30 µg - - ≥26 Ceftazidima CAZ 30 µg - - ≥26 Cefuroxima - 30 µg ≤16 17-19 ≥20 Ceftriaxona CRO 30 µg - - ≥26 Cefpodoxima CPD 30 µg - - ≥21 Cefaclor - 30 µg ≤16 17-19- ≥20 Ciprofloxacina CIP 5 µg - - ≥21 Cloranfenicol CLO 30 µg ≤25 26-28 ≥29 Claritromicina CLA 15 µg ≤10 11-12 ≥13 Doripenem - 10 µg - - ≥16 Ertapenem ERT 10 µg - - ≥19 Imipenem IMI 10 µg - - ≥16 Levofloxacin LEV 5 µg - - ≥17 Meropenem MER 10 µg - - ≥20 Ofloxacin OFX 5 µg - - ≥16 Piperacilina-Tazobactam PIP 100/ 10 µg - - ≥21 Rifampicina RIF 5 µg ≤20 17-19 ≥20 Sulfazotrim SUT 1,25/ 23,75 µg ≤10 11-15 ≥16 Tetraciclina TET 30 µg ≤25 26-28 ≥29 Condições para o teste: - Meio: para Disco Difusão – HTM (Haemophilus Test Medium) - Inóculo: suspensão realizada direto da colônia over night, equivalente a escala 0,5 de Mac Farland - Incubação: temperatura de 35±2ºC, em tensão de 5% de CO2.
  28. 28. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 28 de 35 Tabela 11: Resistência Intrínseca para Enterobacteriaceae. Agente antimicrobiano Organismo Ampicilina Amoxacilina- clavulonato Ampicilina- sulbactam Piperacilina Ticarcilina CefalosporinaI: Cefazolina, Cefalotina Cefamicinas: Cefalotina, Cefotetan CefalosporinasII: Cefuroxima Tetraciclina Nitrofurantoína PolimixinaBe Colistina Citrobacter freundii R R R R R R Citrobacter koseri R R R R R Enterobacter aerogenes R R R R R R Enterobacter cloaceae R R R R R R Escherichia coli Não há resistência intrínseca para beta-lactâmicos neste micro-organismo Escherichia hermannii R R Hafnia alvei R R R R R Klebsiella pneumoniae R R Morganella morganii R R R R R R R Proteus mirabilis Não há resistência intrínseca para beta-lactâmicos neste micro-organismo R R R Proteus penneri R R R R R R Proteus vulgaris R R R R R R Providencia rettgeri R R R R R R Providencia Stuart R R R R R R Salmonella e Shigella spp. Não há resistência intrínseca para beta-lactâmicos neste micro-organismo Serratia marscens R R R R R R R R Yersinia enterocolitica R R R R Observação: Cefalosporinas III (3º geração), cefepime, aztreonam, ticarcilina-clavulonato, piperacilina-tazobactam e carbapenêmicos não estão listados pois não apresentam resistência intrínseca em Enterobacteriaceae.
  29. 29. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 29 de 35 Tabela 12: Resistência Intrínseca para não - Enterobacteriaceae. Agente antimicrobiano Organismo Ampicilina/ Amoxicilina Piperacilina Ticarcilina Ampicilina-sulbactam Ampicilina- clavulanato Piperacilina- Tazobactam Cefotaxima Ceftriaxona Ceftazidima Cefepime Aztreonam Imipenem Meropenam Ertapenem PolimixinaB Colistina Aminoglicosideos Tetraciclina/ Tigeciclina Trimetropim Trimetropin- sulfametoxazol Cloranfenicol Fosfomicina Acinetobacter baumanii / Acinetobacter calcoaceticus complex R R R R R R R Burkholderia cepacia complex R R R R R R R R R R R R R R R R Pseudomonas aeruginosa R R R R R R R R R R R Stenotrophomonas maltophilia R R R R R R R R R R R R R ** R R Observação: * Acinetobacter baumanii/calcoaceticus podem ser sucetíveis a ampicilina-sulbactam pela atividade do sulbactam frente a estas espécies. ** Stenotrophomonas maltophilia é intrisicamente resistente a tetraciclina, mas não a doxicilina, minociclina ou tigeciclina.
  30. 30. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 30 de 35 Tabela 13: Resistência Intrínseca para Staphylococcus sp. Agente antimicrobiano Organismo Novobiocina Fosfomicina AcidoFusidico S. aureus/ S. lugdunensis Não há resistência intrínseca nestas espéciesS. epidermides S. haemolyticus S. saprophyticus R R R S. capitis R S. cohnii R S. xylosus R
  31. 31. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 31 de 35 Tabela 14: Resistência Intrínseca para Enterococcus spp. Agente antimicrobiano Organismo Cefalosporinas Vancomicina Teicoplamina Aminoglicosideos Clindamicina Quinupristina- daftopriostina Trimetropin Trimetropin- sulfametoxazol ÁcidoFusidico Enterococcus faecalis R R R R R R R Enterococcus faecium R R R R R R Enterococcus gallinarum / E. casseliflavus R R R R R R R R Observação: * Para os Enterococcus spp., cefalosporinas, aminoglicosideos, clindamicina e sulfametoxazol-trimetropin podem ser sensíveis in vitro, porém podem não apresentar efetividade clínica, por isso não devem ser reportados como sensíveis.
  32. 32. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 32 de 35 10. QUESTÕES REFERENTES À LEITURA E INTERPRETAÇÃO DOS HALOS INIBITÓRIOS E CRESCIMENTO 1. Luz Refletida x Luz Transmitida Na maioria dos casos recomenda-se o uso da luz refletida, ou seja, a placa é posicionada abaixo da fonte de luz tendo como fundo um anteparo escuro. Nos casos em que se observe halos inibitórios tênues, como verificados em estafilococos com a oxacilina ou nos enterococos com a vancomicina, recomenda-se o uso de luz transmitida, ou seja, a placa deve ser posicionada contra a fonte luminosa. De qualquer forma, o observador deve determinar o melhor ângulo de leitura em qualquer que seja o tipo de fonte ou de iluminação utilizado (posiciona-se em vários ângulos). 2. Halos inibitórios anormais Há casos em que os halos inibitórios apresentam anormalidades, como crescimento de algumas colônias ou mesmo crescimento irregular. Muitas situações são atribuídas a fatores característicos de certas bactérias e antibióticos, cabendo ao laboratório padronizar sua forma de tratamento. 2.1 Halo duplo Observa-se na zona de inibição uma diferença de densidade no halo. Considera-se a leitura da zona mais clara; 2.2 Crescimento de colônias dentro da zona inibitória Esta situação pode ser devida a sub-populações resistentes dentro da amostra, ou a algum contaminante presente. A tomada de ação nestes casos é cuidadosa, pois em ambos os casos podem haver reflexos negativos em qualquer decisão tomada sem maiores avaliações. Inicialmente recomenda-se o reisolamento da(s) colônia(s) e sua
  33. 33. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 33 de 35 identificação. Tratando-se de espécie diferente, caracteriza-se a contaminação da amostra, recomendando-se purificar o inoculo original por repiques. Tratando-se da mesma espécie, é feito novo antibiograma, se na repetição não foi verificado o crescimento de colônias dentro da zona de inibição o resultado é validado, do contrário, considera-se como halo inibitório a zona livre de colônias conforme na figura acima. 2.3 Bordos difusos Neste caso há dificuldade em se estabelecer o halo em função de crescimento fraco muito próximo a zona de inibição propriamente dita. Neste caso, procurar observar qual a exata delimitação entre a zona aonde o crescimento está bem definido, ignorando o crescimento pobre. 2.4 Proteus As cepas de Proteus costumam produzir o véu ou swarming em meios considerados não-pobres em eletrólitos, como o caso do Mueller Hinton. Assim, é normal que o véu possa encobrir a zona de inibição de crescimento, dificultando a sua visualização. Deve-se procurar um posicionamento mais eficaz da placa ante a fonte luminosa e considerar a area aonde a demarcação é evidente.
  34. 34. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 34 de 35 2.5 Sulfazotrim O Sulfametoxazol + Trimetoprim apresenta particularidades no desenvolvimento de zonas de inibição em Mueller Hinton Agar devido a sua interação com antagonistas presentes no meio. Com isto a zona de inibição pode apresentar uma diminuição gradual de crescimento até indicar a completa inibição. A medida do halo deve considerar a região aonde se observou uma redução de cerca de 80% do crescimento. 2.6 Resistência homogênea e heterogênea em S. aureus Caso num antibiograma de S. aureus verifique-se no disco de oxacilina um fenômeno semelhante ao swarming do Proteus, este fato é significativo e significa resistência heterogênea. Na resistência homogênea o crescimento é confluente até o disco.
  35. 35. MANUAL DE ANTIBIOGRAMA Rev.: 10 04/2015 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda. Rua Casimiro de Abreu, 521 – CEP 83.321-210 0800-410027 – sac@laborlcin.com.br Página 35 de 35 11. REFERÊNCIAS CLSI publication M100-S25 Suggested Grouping of US-FDA Approved Antimicrobial Agents That Should Be Considered for Routine Testing and Reporting on Nonfastidious Organisms by Clinical Laboratories, 2015.

×