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Unidad III



Pericias Químicas de Manchas
          de Sangre


                       Parte 4
Antígenos-Anticuerpos.       Enzimas    y    Proteínas
Polimórficas: su aplicación en manchas de sangre.
Antígeno
• sustancia que puede provocar una respuesta
  inmune.
• molécula que puede inducir la formación de
  Anticuerpos.
• En general son sustancias que no se encuentran
  usualmente en el cuerpo.
Antígeno
• Muchos tipos de moléculas pueden ser antígenos:
  proteínas, polisacáridos y ácidos nucleicos.
• Cada antígeno está definido por su anticuerpo, los
  cuales interactúan por complementariedad espacial.
Anticuerpos
Anticuerpos
• son glucoproteínas secretadas por los plasmocitos.
• tienen afinidad específica y alta por los Antígenos.
• Su producción forma parte de la respuesta inmune
  humoral.
• Propósito: reconocer cuerpos extraños invasores:
  bacterias y virus para mantener al organismo libre
  de ellos.
• Los plasmocitos : proliferación y diferenciación:
  linfocitos B activados.
Anticuerpos
• En el ser humano existen cinco clases de
  anticuerpos, conocidos con el nombre de
  Inmunoglobulinas:
• G (IgG)
• A (IgA)
• M (IgM)                 Tamaño
• D (IgD)
                difieren
                          Carga eléctrica
• E (IgE)                 AA
                       Azúcares
Anticuerpos: tipos
 IgG: 80% del total, puede atacar a cualquier tipo
  de patógeno: virus, bacterias y hongos, bloqueando
  sus toxinas. Tiene cuatro subtipos, IgG1, IgG2,
  IgG3, IgG4.
 IgA : 15 al 20% . Actúa contra patógenos que
  contactan con la superficie corporal, ingeridos o
  inhalados. Existen dos formas: IgA1 e IgA2.
Anticuerpos: tipos
• IgM: puede detectar el tipo de ABO
  sanguíneo de una persona.
También es importante en el diagnóstico de fase
aguda de distintas infecciones.
• IgD:     1% , en la membrana plasmática de los
  linfocitos B. Participa en el desarrollo de células de
  memoria en los linfocitos B.
Anticuerpos: tipos
IgE: en suero y secreciones externas, representa
apenas el 0,002% de las Ig.
Se encuentra en la membrana de los basófilos y del
mastocito.
Participa en las reacciones de hipersensibilidad, y en
la respuesta a parásitos.
Tipos de reacción
            Ag-Ac
La unión Ag-Ac se lleva a cabo mediante distintos
tipos de reacciones:
• Neutralización
• Aglutinación
• Precipitación
• Activación del Complemento
• Citotoxicidad celular
[Ag-Ac]
Neutralización de toxinas o patógenos: impidiendo
su unión a los receptores de la membrana de las
células diana y su penetración al citoplasma.
Aglutinación de los antígenos que se encuentran en
la superficie celular facilitando su destrucción por los
macrófagos.
Precipitación de moléculas antigénicas disueltas
mediante        la      formación      de      complejo
antígeno/anticuerpo.
Activación del sistema del complemento que permite
la lisis u opsonización de los patógenos.
Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos.
Anticuerpo monoclonal
• Un anticuerpo monoclonal es un anticuerpo
  homogéneo producido por una célula híbrida
  producto de la fusión de un clon de linfocitos B
  descendiente de una sola y única célula madre y
  una célula plasmática tumoral.
• Mab, del inglés monoclonal antibody
• Es posible producir anticuerpos monoclonales que se
  unan específicamente con cualquier molécula con
  carácter antigénico. Este fenómeno es de gran
  utilidad en bioquímica, Biología Molecular y
  Medicina.
Usos o aplicaciones
•   Los anticuerpos monoclonales se utilizan en muchos campos como:
•   La investigación biomédica, como la identificación y clonación de
    genes, la identificación y aislamiento de proteínas, la activación
    de enzimas, conocimiento de la estructura molecular y
    morfogénesis.
•   Diagnóstico: En medicina, gracias a la gran especificidad y
    capacidad     prácticamente     ilimitada   de   los   anticuerpos
    monoclonales para reconocer cualquier estructura química,
    permite la detección de hormonas, vitaminas, citocinas; la
    monitorización de drogas, detección de enfermedades infecciosas
    en microbiología; la detección de alergenos en alergia,
    hematología, marcadores tumorales e infartos de miocardio,
    aplicaciones forenses, inmunoescintografía.
•   En las ténicas diagnósticas se emplean diversas herramientas de
    biología    molecular     como      ELISA,     EIA,    citometría,
    inmunohistoquímica, inmufluorescencia.
•   Los anticuerpos monoclonales son unas de las sustancias más
    utilizadas en los laboratorios de diagnóstico.
Aplicaciones
• Una vez que se han producido anticuerpos
  monoclonales que se unen a determinadas
  sustancias, estos pueden ser usados para detectar
  la presencia y cantidad de esta sustancia, gracias
  a la prueba de Western blot, que detecta una
  sustancia en una solución o con una prueba de
  inmunofluorescencia, que detecta una sustancia en
  una célula entera.
• Los anticuerpos monoclonales también son usados
  para purificar una sustancia con técnicas llamadas
  inmunoprecipitación y cromatografía.
ventajas
Los anticuerpos monoclonales muestran una serie de
ventajas sobre los anticuerpos policlonales como:
• Mayor homogeneidad.
• Reproductibilidad     de    sus     efectos,     como
  consecuencia de su homogeneidad.
• Mayor capacidad potencial de seleccionar los
  mejores    anticuerpos   en     afinidad,   tipo   de
  reconocimiento.
• Catálisis: Los anticuerpos monoclonales se han
  utilizado como catalizadores de múltiples reacciones
  químicas.
• Biosensores:     Los     anticuerpos    monoclonales
  acoplados a transductores electrónicos pueden
  detectar     tanto    moléculas    orgánicas   como
  inorgánicas como la contaminación de metales
  pesados en alimentos y agua, detección de gases
  tóxicos, etc. Un biosensor es un instrumento
  analítico formado por un material biológico
  inmovilizado como una enzima, anticuerpo, célula
  entera, orgánulo o combinaciones de los mismos, en
  íntimo contacto con un sistema transductor
  adecuado que convierta la señal bioquímica en una
  señal eléctrica cuantificable.
• Tratamiento:     Las    aplicaciones    terapéuticas
  constituyen el campo más importante de los
  anticuerpos monoclonales, ya que son capaces de
  erradicar ciertas infecciones y destruir células,
  incluidas   las   tumorales,    mediante    distintos
  mecanismos. Por esta razón, son excelentes
  sustancias para el tratamiento de enfermedades
  infecciosas, enfermedades autoinmunes, el cáncer o
  en trasplantes para evitar el rechazo. Existen
  varios anticuerpos monoclonales aprobados para su
  uso en determinadas enfermedades.
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    Inmunodifusión o Test de Ouchterlony.
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Unidad III 03 04 4º

  • 1. Unidad III Pericias Químicas de Manchas de Sangre Parte 4
  • 2. Antígenos-Anticuerpos. Enzimas y Proteínas Polimórficas: su aplicación en manchas de sangre.
  • 3. Antígeno • sustancia que puede provocar una respuesta inmune. • molécula que puede inducir la formación de Anticuerpos. • En general son sustancias que no se encuentran usualmente en el cuerpo.
  • 4. Antígeno • Muchos tipos de moléculas pueden ser antígenos: proteínas, polisacáridos y ácidos nucleicos. • Cada antígeno está definido por su anticuerpo, los cuales interactúan por complementariedad espacial.
  • 5.
  • 7. Anticuerpos • son glucoproteínas secretadas por los plasmocitos. • tienen afinidad específica y alta por los Antígenos. • Su producción forma parte de la respuesta inmune humoral. • Propósito: reconocer cuerpos extraños invasores: bacterias y virus para mantener al organismo libre de ellos. • Los plasmocitos : proliferación y diferenciación: linfocitos B activados.
  • 8. Anticuerpos • En el ser humano existen cinco clases de anticuerpos, conocidos con el nombre de Inmunoglobulinas: • G (IgG) • A (IgA) • M (IgM) Tamaño • D (IgD) difieren Carga eléctrica • E (IgE) AA Azúcares
  • 9. Anticuerpos: tipos  IgG: 80% del total, puede atacar a cualquier tipo de patógeno: virus, bacterias y hongos, bloqueando sus toxinas. Tiene cuatro subtipos, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4.  IgA : 15 al 20% . Actúa contra patógenos que contactan con la superficie corporal, ingeridos o inhalados. Existen dos formas: IgA1 e IgA2.
  • 10. Anticuerpos: tipos • IgM: puede detectar el tipo de ABO sanguíneo de una persona. También es importante en el diagnóstico de fase aguda de distintas infecciones. • IgD: 1% , en la membrana plasmática de los linfocitos B. Participa en el desarrollo de células de memoria en los linfocitos B.
  • 11. Anticuerpos: tipos IgE: en suero y secreciones externas, representa apenas el 0,002% de las Ig. Se encuentra en la membrana de los basófilos y del mastocito. Participa en las reacciones de hipersensibilidad, y en la respuesta a parásitos.
  • 12. Tipos de reacción Ag-Ac La unión Ag-Ac se lleva a cabo mediante distintos tipos de reacciones: • Neutralización • Aglutinación • Precipitación • Activación del Complemento • Citotoxicidad celular
  • 13. [Ag-Ac] Neutralización de toxinas o patógenos: impidiendo su unión a los receptores de la membrana de las células diana y su penetración al citoplasma. Aglutinación de los antígenos que se encuentran en la superficie celular facilitando su destrucción por los macrófagos. Precipitación de moléculas antigénicas disueltas mediante la formación de complejo antígeno/anticuerpo. Activación del sistema del complemento que permite la lisis u opsonización de los patógenos. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos.
  • 14. Anticuerpo monoclonal • Un anticuerpo monoclonal es un anticuerpo homogéneo producido por una célula híbrida producto de la fusión de un clon de linfocitos B descendiente de una sola y única célula madre y una célula plasmática tumoral. • Mab, del inglés monoclonal antibody • Es posible producir anticuerpos monoclonales que se unan específicamente con cualquier molécula con carácter antigénico. Este fenómeno es de gran utilidad en bioquímica, Biología Molecular y Medicina.
  • 15. Usos o aplicaciones • Los anticuerpos monoclonales se utilizan en muchos campos como: • La investigación biomédica, como la identificación y clonación de genes, la identificación y aislamiento de proteínas, la activación de enzimas, conocimiento de la estructura molecular y morfogénesis. • Diagnóstico: En medicina, gracias a la gran especificidad y capacidad prácticamente ilimitada de los anticuerpos monoclonales para reconocer cualquier estructura química, permite la detección de hormonas, vitaminas, citocinas; la monitorización de drogas, detección de enfermedades infecciosas en microbiología; la detección de alergenos en alergia, hematología, marcadores tumorales e infartos de miocardio, aplicaciones forenses, inmunoescintografía. • En las ténicas diagnósticas se emplean diversas herramientas de biología molecular como ELISA, EIA, citometría, inmunohistoquímica, inmufluorescencia. • Los anticuerpos monoclonales son unas de las sustancias más utilizadas en los laboratorios de diagnóstico.
  • 16. Aplicaciones • Una vez que se han producido anticuerpos monoclonales que se unen a determinadas sustancias, estos pueden ser usados para detectar la presencia y cantidad de esta sustancia, gracias a la prueba de Western blot, que detecta una sustancia en una solución o con una prueba de inmunofluorescencia, que detecta una sustancia en una célula entera. • Los anticuerpos monoclonales también son usados para purificar una sustancia con técnicas llamadas inmunoprecipitación y cromatografía.
  • 17. ventajas Los anticuerpos monoclonales muestran una serie de ventajas sobre los anticuerpos policlonales como: • Mayor homogeneidad. • Reproductibilidad de sus efectos, como consecuencia de su homogeneidad. • Mayor capacidad potencial de seleccionar los mejores anticuerpos en afinidad, tipo de reconocimiento.
  • 18. • Catálisis: Los anticuerpos monoclonales se han utilizado como catalizadores de múltiples reacciones químicas. • Biosensores: Los anticuerpos monoclonales acoplados a transductores electrónicos pueden detectar tanto moléculas orgánicas como inorgánicas como la contaminación de metales pesados en alimentos y agua, detección de gases tóxicos, etc. Un biosensor es un instrumento analítico formado por un material biológico inmovilizado como una enzima, anticuerpo, célula entera, orgánulo o combinaciones de los mismos, en íntimo contacto con un sistema transductor adecuado que convierta la señal bioquímica en una señal eléctrica cuantificable.
  • 19. • Tratamiento: Las aplicaciones terapéuticas constituyen el campo más importante de los anticuerpos monoclonales, ya que son capaces de erradicar ciertas infecciones y destruir células, incluidas las tumorales, mediante distintos mecanismos. Por esta razón, son excelentes sustancias para el tratamiento de enfermedades infecciosas, enfermedades autoinmunes, el cáncer o en trasplantes para evitar el rechazo. Existen varios anticuerpos monoclonales aprobados para su uso en determinadas enfermedades.
  • 20. Reacción de Inmunoprecipitación Inmunodifusión o Test de Ouchterlony.