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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE
                        MEXICO

                    FACULTAD DE QUIMICA

           LABORATORIO DE EQUILIBRIO Y CINETICA




Conocimiento de técnicas analíticas. Parte I:
Fundamentos de Espectrofotometría




EQUIPO

ALVAREZ RAMOS GABRIELA



                                            SEMESTRE 2013-1
Conocimiento de técnicas analíticas. Parte I: Fundamentos de
          Espectrofotometría


OBJETIVO GENERAL

Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometría para la determinación de concentraciones
en soluciones.

OBJETIVOS PARTICULARES

    a) Conocer los fundamentos de la espectrofotometría y las variables involucradas en la ley de
       Lambert-Beer-Bourger.
    b) Seleccionar la longitud de onda apropiada para las mediciones de absorbancia
    c) Construir una curva patrón de soluciones de yodo (serie tipo).

PROBLEMA

A partir del espectro de absorción de una solución acuosa de yoduro de potasio seleccionar la longitud
de onda apropiada para determinar el coeficiente de absortividad molar de soluciones acuosas de
yoduro de potasio por medio de una curva patrón

PROPUESTA DEL DISEÑO EXPERIMENTAL

La cinética química es el estudio de la velocidad (rapidez) de las reacciones.
Los factores que afectan la velocidad de la reacción son temperatura, presión y concentración de las
sustancias.
Lo primero a saber es la ecuación y de ahí podemos saber si presenta cambio de color, de presión o en
su conductividad. La espectroscopia de absorción determina la concentración de una sustancia
La transición desde un nivel bajo de energía acompañadode una transferencia de energía se llama
absorción.

En el experimento determinaremos la absorbancia y la transmitancia (valor entre 0y 1)
Haremos denominaciones cuantitativas de las longitudes de onda para una sustancia con diferente
concentración
Si la muestra no tiene moléculas que absorban energía, se va a detectar exactamente la misma energía
que se envió.
Si la muestra absorbe se detecta la resta. La ley de Lambert y Beer explica la relación lineal entre la
absorción de luz a través de una sustancia y la concentración de la sustancia.

                                                A=ε∙ί∙c

Donde es el coeficiente de extinción molar de cada sustancia. ( 1M cm)
Ί es la longitud de celdas (cm)
C es la concentración (mol L)

METODOLOGÍA EMPLEADA.

Calibración del espectrofotómetro y barrido del espectro de absorción
1. Encender el espectrofotómetro
2. Esperar 15 minutos
3. Calibración: oprimir la tecla MODE, hasta que la luz roja se encuentre en A (absorbancia)
4. Seleccionar la longitud de onda girando la perilla
5. Introducir la celda con el blanco (con un volumen por arriba de la mitad; (nunca llena) en la porta-
celda, oprime la tecla Λ(0A/100 %T) y esperar a que se ponga en ceros la absorbancia
6. Tomar la lectura de absorbancia de la solución propuesta a una longitud de onda baja ( nm). Utilizar
como blanco agua destilada.
7. Repetir el procedimiento desde el punto 4 dando incrementos regulares a la longitud
de onda. Registrar los datos en la tabla 1

Curva patrón

8. Preparar soluciones de distinta concentración a partir de la solución de referencia
I2 –KI (0.0002M - 0.2M) (Serie tipo)
9. Seleccionar una longitud de onda adecuada para hacer las lecturas de Absorbancia para las
soluciones de la serie tipo. (Se sugiere 460 nm)
10. Introducir la celda con el blanco(agua destilada), con un volumen por arriba de la mitad; nunca
llena, en la porta-celda, oprimir la tecla (0A/100 %T) y esperar a que se ponga en ceros la
absorbancia
11. Tomar la lectura de absorbancia de las soluciones propuestas para la serie tipo, a la longitud de
onda seleccionada (nm).
Registrar las lecturas de absorbancia y concentración de la serie tipo en la tabla 2

RESULTADOS
                                Tabla 1. Espectro de la solución de yodo

                                 evento          (nm)       Absorbancia
                                    1            430           1.096
                                    2            435           0.96
                                    3            440           0.843
                                    4            445           0.729
                                    5            450           0.634
                                    6            455           0.547
                                    7            460           0.457
                                    8            470           0.324
                                    9            480           0.218
                                   10            490           0.148
                                   11            500           0.111
                                   12            510           0.089
                                   13            515           0.081
                                   14            520           0.076
                                   15            525           0.071
                                   16            530           0.063
                                   17            535           0.061
                                   18            540           0.06
Gráfica 1. Espectro de la solución de yodo


                     1.2
                                      Espectro de la solución de yodo
                     1.1
                       1
                     0.9
                     0.8
       Absorbancia




                     0.7
                     0.6
                     0.5
                     0.4
                     0.3
                     0.2
                     0.1
                       0
                           0   50   100     150   200   250     300    350     400    450     500      550     600

                                                                (nm)


            Cálculos para la concentración de la curva patrón de yodo I2 (mol/L)
                                                                                                    * Ver Tabla 2




Mediante las ecuaciones antes descritas se obtienen todas las concentraciones de la curva patrón.


Para calcular las absorbancias a partir de las transmitancias:

                                                                                      Ec. 1

Para obtener la absorbancia corregida de la solución:



                                      *La absorbancia del blanco es cero, por lo tanto la absorbancia no necesita ser corregida

Ejemplo de cálculo:

Sustituyendo en la ecuación 1 tomando como ejemplo la mezcla 2
Tabla 2. Curva patrón de Yodo

                  Mezcla         I2 (0.002 M)/(mL)      H2O/mL       I2 mol/L          Abs           T
                    0                     0                0         0.00E+00           0            0
                    1                    10                0         2.00E-03         0.964         10.9
                    2                     8                2         1.60E-03         0.763         17.3
                    3                     6                4         1.20E-03         0.578         26.4
                    4                     4                6         8.00E-04         0.386         41.1
                    5                     2                8         4.00E-04         0.205         62.4


                                                  Gráfica 2. Curva patrón


                                                Curva patrón de yodo
                       1.2

                        1

                       0.8
         Absorbancia




                       0.6

                       0.4
                                                                                   y = 477.57x + 0.0051
                       0.2                                                              R² = 0.9998


                        0
                             0         0.0005           0.001         0.0015            0.002         0.0025
                                                     Concentración de I2 (mol/L)


Se obtiene de la gráfica 2, la ecuación para determinar la concentración de I2 en una solución
desconocida.

Ecuacion obtenida del grafico 2

                                                     Y = 477.57 x +0.0051
Donde:

Y- Absorbancia
X – Concentración de I2
Pendiente = 477.57
Despejando de la ecuación anterior la concentración se obtiene:




Análisis de Resultados

A partir de la mezcla de una solución de yodo (0.002 M) con agua se obtuvieron absorbancias para cada
disolución empleada, con la cual se realizo una curva patrón, de igual manera para una misma
concentración de I2 se obtuvieron diferentes absorbancias modificando la longitud de onda.

La longitud de onda empleada para obtener las absorbancias de la curva patrón fue de 460 nm, la
pendiente de la curva representa el coeficiente de extinción molar multiplicado por la longitud de la
celda, en este mismo grafico (2) se puede observar que la absorbancia y la concentración son
directamente proporcionales.

Conclusiones

Comprobamos que con ayuda del espectrofotómetro se puede calcular tanto la concentración de
distintas soluciones mediante la luz que absorbe la sustancia y la que refleja, y esto se logra gracias a
las partículas contenidas dentro de la solución.

Se pudo haber generado cierto grado de error dado que las celdas donde se colocaban la solución de
yodo y el agua pura son distintas, y como es distinto el recipiente puede que tenga otro acomodo
distinto al primero.Notamos que a mayor concentración de la disolución aumentaba la absorbancia por
tanto tuvimos que ocupar una longitud de onda mayor a la que habíamos escogido al principio para
poder obtener buenos valores de la disolución más concentrada.

Se obtuvo una curva patrón representativa de la concentración de yodo a diferentes concentraciones,
obteniendo absorbancias cuantitativas para cada una.

Bibliografía

Fisicoquímica,     Castellan     G.    W.,      Addison    Wesley   Longman,     2ª    Edición,    1987.
Fisicoquímica,     Keith     J.   Laidler,     John     H.  Meiser,   CECSA,    1a.    Edición,    1997.
Fisicoquímica, Ira N. Levine, Mc Graw Hill, 4ª edición, 19

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  • 1. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO FACULTAD DE QUIMICA LABORATORIO DE EQUILIBRIO Y CINETICA Conocimiento de técnicas analíticas. Parte I: Fundamentos de Espectrofotometría EQUIPO ALVAREZ RAMOS GABRIELA SEMESTRE 2013-1
  • 2. Conocimiento de técnicas analíticas. Parte I: Fundamentos de Espectrofotometría OBJETIVO GENERAL Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometría para la determinación de concentraciones en soluciones. OBJETIVOS PARTICULARES a) Conocer los fundamentos de la espectrofotometría y las variables involucradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger. b) Seleccionar la longitud de onda apropiada para las mediciones de absorbancia c) Construir una curva patrón de soluciones de yodo (serie tipo). PROBLEMA A partir del espectro de absorción de una solución acuosa de yoduro de potasio seleccionar la longitud de onda apropiada para determinar el coeficiente de absortividad molar de soluciones acuosas de yoduro de potasio por medio de una curva patrón PROPUESTA DEL DISEÑO EXPERIMENTAL La cinética química es el estudio de la velocidad (rapidez) de las reacciones. Los factores que afectan la velocidad de la reacción son temperatura, presión y concentración de las sustancias. Lo primero a saber es la ecuación y de ahí podemos saber si presenta cambio de color, de presión o en su conductividad. La espectroscopia de absorción determina la concentración de una sustancia La transición desde un nivel bajo de energía acompañadode una transferencia de energía se llama absorción. En el experimento determinaremos la absorbancia y la transmitancia (valor entre 0y 1) Haremos denominaciones cuantitativas de las longitudes de onda para una sustancia con diferente concentración Si la muestra no tiene moléculas que absorban energía, se va a detectar exactamente la misma energía que se envió. Si la muestra absorbe se detecta la resta. La ley de Lambert y Beer explica la relación lineal entre la absorción de luz a través de una sustancia y la concentración de la sustancia. A=ε∙ί∙c Donde es el coeficiente de extinción molar de cada sustancia. ( 1M cm) Ί es la longitud de celdas (cm) C es la concentración (mol L) METODOLOGÍA EMPLEADA. Calibración del espectrofotómetro y barrido del espectro de absorción
  • 3. 1. Encender el espectrofotómetro 2. Esperar 15 minutos 3. Calibración: oprimir la tecla MODE, hasta que la luz roja se encuentre en A (absorbancia) 4. Seleccionar la longitud de onda girando la perilla 5. Introducir la celda con el blanco (con un volumen por arriba de la mitad; (nunca llena) en la porta- celda, oprime la tecla Λ(0A/100 %T) y esperar a que se ponga en ceros la absorbancia 6. Tomar la lectura de absorbancia de la solución propuesta a una longitud de onda baja ( nm). Utilizar como blanco agua destilada. 7. Repetir el procedimiento desde el punto 4 dando incrementos regulares a la longitud de onda. Registrar los datos en la tabla 1 Curva patrón 8. Preparar soluciones de distinta concentración a partir de la solución de referencia I2 –KI (0.0002M - 0.2M) (Serie tipo) 9. Seleccionar una longitud de onda adecuada para hacer las lecturas de Absorbancia para las soluciones de la serie tipo. (Se sugiere 460 nm) 10. Introducir la celda con el blanco(agua destilada), con un volumen por arriba de la mitad; nunca llena, en la porta-celda, oprimir la tecla (0A/100 %T) y esperar a que se ponga en ceros la absorbancia 11. Tomar la lectura de absorbancia de las soluciones propuestas para la serie tipo, a la longitud de onda seleccionada (nm). Registrar las lecturas de absorbancia y concentración de la serie tipo en la tabla 2 RESULTADOS Tabla 1. Espectro de la solución de yodo evento (nm) Absorbancia 1 430 1.096 2 435 0.96 3 440 0.843 4 445 0.729 5 450 0.634 6 455 0.547 7 460 0.457 8 470 0.324 9 480 0.218 10 490 0.148 11 500 0.111 12 510 0.089 13 515 0.081 14 520 0.076 15 525 0.071 16 530 0.063 17 535 0.061 18 540 0.06
  • 4. Gráfica 1. Espectro de la solución de yodo 1.2 Espectro de la solución de yodo 1.1 1 0.9 0.8 Absorbancia 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 (nm) Cálculos para la concentración de la curva patrón de yodo I2 (mol/L) * Ver Tabla 2 Mediante las ecuaciones antes descritas se obtienen todas las concentraciones de la curva patrón. Para calcular las absorbancias a partir de las transmitancias: Ec. 1 Para obtener la absorbancia corregida de la solución: *La absorbancia del blanco es cero, por lo tanto la absorbancia no necesita ser corregida Ejemplo de cálculo: Sustituyendo en la ecuación 1 tomando como ejemplo la mezcla 2
  • 5. Tabla 2. Curva patrón de Yodo Mezcla I2 (0.002 M)/(mL) H2O/mL I2 mol/L Abs T 0 0 0 0.00E+00 0 0 1 10 0 2.00E-03 0.964 10.9 2 8 2 1.60E-03 0.763 17.3 3 6 4 1.20E-03 0.578 26.4 4 4 6 8.00E-04 0.386 41.1 5 2 8 4.00E-04 0.205 62.4 Gráfica 2. Curva patrón Curva patrón de yodo 1.2 1 0.8 Absorbancia 0.6 0.4 y = 477.57x + 0.0051 0.2 R² = 0.9998 0 0 0.0005 0.001 0.0015 0.002 0.0025 Concentración de I2 (mol/L) Se obtiene de la gráfica 2, la ecuación para determinar la concentración de I2 en una solución desconocida. Ecuacion obtenida del grafico 2 Y = 477.57 x +0.0051 Donde: Y- Absorbancia X – Concentración de I2 Pendiente = 477.57
  • 6. Despejando de la ecuación anterior la concentración se obtiene: Análisis de Resultados A partir de la mezcla de una solución de yodo (0.002 M) con agua se obtuvieron absorbancias para cada disolución empleada, con la cual se realizo una curva patrón, de igual manera para una misma concentración de I2 se obtuvieron diferentes absorbancias modificando la longitud de onda. La longitud de onda empleada para obtener las absorbancias de la curva patrón fue de 460 nm, la pendiente de la curva representa el coeficiente de extinción molar multiplicado por la longitud de la celda, en este mismo grafico (2) se puede observar que la absorbancia y la concentración son directamente proporcionales. Conclusiones Comprobamos que con ayuda del espectrofotómetro se puede calcular tanto la concentración de distintas soluciones mediante la luz que absorbe la sustancia y la que refleja, y esto se logra gracias a las partículas contenidas dentro de la solución. Se pudo haber generado cierto grado de error dado que las celdas donde se colocaban la solución de yodo y el agua pura son distintas, y como es distinto el recipiente puede que tenga otro acomodo distinto al primero.Notamos que a mayor concentración de la disolución aumentaba la absorbancia por tanto tuvimos que ocupar una longitud de onda mayor a la que habíamos escogido al principio para poder obtener buenos valores de la disolución más concentrada. Se obtuvo una curva patrón representativa de la concentración de yodo a diferentes concentraciones, obteniendo absorbancias cuantitativas para cada una. Bibliografía Fisicoquímica, Castellan G. W., Addison Wesley Longman, 2ª Edición, 1987. Fisicoquímica, Keith J. Laidler, John H. Meiser, CECSA, 1a. Edición, 1997. Fisicoquímica, Ira N. Levine, Mc Graw Hill, 4ª edición, 19