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T.4. MORFOLOGÍA Y ANATOMÍA
BACTERIANAS. GRAM+ y GRAM-
2°ENFERMERÍA
MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
PROF.: PATRICIA NARBÓN
MORFOLOGÍA BACTERIANA
• Las bacterias son seres unicelulares procariotas
  que se multiplican por división binaria.
• Tamaño variable: entre 1 µm y 10 µm.
• Se diferencian 3 morfologías fundamentales:
4.Formas esféricas o cocos
5.Formas cilíndricas rectas o bacilos
6.Formas cilíndricas incurvadas o espirilos
• Pueden estar aisladas o agrupadas. Los cocos
  están agrupados:
2.En parejas: diplococos
3.En cadenas
4.En racimos
5.En tétradas o paquetes cúbicos
Los bacilos están agrupados:
7.Parejas
8.Cadenas
9.Empalizada
10.Letras y caracteres chinos
Los espirilos no suelen formar agrupaciones, y se
  distinguen por una o varias curvaturas, o por
  formas onduladas.
• Las agrupaciones bacterianas que proceden de
  un único individuo son visibles
  macroscópicamente en un medio de cultivo, y se
  denominan colonias. Las características
  diferenciales de las colonias (color, forma,
  tamaño…) dependen de la bacteria y del medio
  de cultivo.
• La mayor parte de las bacterias mantiene su
  forma constante, pero algunas especies pueden
  variar la forma, son las llamadas bacterias
  pleomórficas. Arthrobacter es un ejemplo de
  pleomorfismo debido a que su forma cambia en
  función de la edad del cultivo.
• En las células bacterianas la relación superficie y
  volumen de la célula es muy alta lo que permite
  la entrada de muchos nutrientes para alimentar
  a un pequeño volumen y una alta actividad
  metabólica.
Caracteres generales con respecto a
células eucariotas
• Poseen ribosomas 70S: subunidades 50S y 30S.
• Carecen de núcleo y membrana nuclear
• Tienen un único cromosoma ADN bicatenario circular, y
  pueden tener ADN extracromosómico llamado plásmido.
• Carecen de mitocondrias, cloroplastos, sistemas de
  endomembranas, lisosomas, peroxisomas y
  citoesqueleto.
• Pueden existir, además, apéndices filamentosos:
  Flagelos, Fimbrias (= pelos, pili)
• Presencia de cápsula en algunas especies
• Presencia de pared celular (distinta a vegetales)
• Membrana similar a la eucariota, pero con pliegues
  internos llamados mesosomas.
PARED CELULAR
• La pared celular confiere forma a las bacterias y
  las protege de la lisis osmótica en medios
  hipotónicos.
• No poseen pared celular: micoplasmas y algunas
  arqueobacterias.
• Las bacterias que pierden su pared:
Esferoplastos: pérdida parcial
Protoplastos: pérdida total
• Lugar de acción de los ß-lactámicos.
Estructura de la Pared
• Varía según sean las bacterias GRAM+ o GRAM-
• Principal componente es el peptidoglucano o
  mureína.
• Mureína: polímero formado por residuos
  alternantes de dos derivados de azúcares:
5.N-acetilglucosamina: NAG
6.N-acetilmurámico: NAM
• Las cadenas glucosídicas están orientadas de forma
  paralela y están unidas entre sí mediante puentes
  peptídicos formados por cadenas de 4 aminoácidos
  de configuración L y D alternantes, que están unidos
  al grupo carboxilo del ácido N-acetilmurámico.
GRAM POSITIVAS
• Pared gruesa formada fundamentalmente por
  mureína (90%).
• Cadena lateral formada frecuentemente por L-
  alanina, D-glutámico, L-lisina y D-alanina. Estas
  cadenas se unen por puentes tranversales de
  péptidos de pentaglicinas o lisinas que conectan D-
  alanina de una cadena con L-lisina de otra (tercer aa
  de una con el cuarto de la otra). La transpeptidación
  se produce en el exterior de la membrana
  plasmática.
• Pared celular compuesta por una única capa
  homogénea de mureína, situada por fuera de la
  membrana plasmática. Más gruesa que GRAM-.
• Presencia de ácidos teicoicos en la pared celular.
  Son polímeros de glicerol o ribitol unidos entre
  sí por enlaces fosfodiester. Unidos a la molécula
  de alcohol hay polisacáridos o aminoácidos.
  Tienen carácter antigénico y están cargados
  negativamente.
GRAM NEGATIVAS
• Capa de mureína es muy fina
• Poseen una membrana externa a continuación
  de la capa de mureína.
• El tercer residuo de la cadena peptídica suele ser
  el ácido meso-diaminopimélico, en lugar de L-
  lisina. Y las uniones se establecen directamente
  entre el ácido m-diaminopimélico y la D-alanina.
• La unión de la membrana externa al
  peptidoglucano se realiza mediante
  lipoproteínas. La más abundante es la
  lipoproteína de Braun o lipoproteína de
  mureína.
• El espacio entre la membrana externa y la
  membrana plasmática, donde se encuentra la
  mureína, se denomina espacio periplásmico. Es
  un lugar con gran cantidad de: enzimas
  hidrolíticos, proteínas de transporte, y
  quimiorreceptores.
• Membrana externa: sus constituyentes más
  característicos son sus lipopolisacáridos (LPS),
  con carácter de endotoxina. Son responsables de
  la acción tóxica inespecífica de los GRAM-. Tiene
  efecto pirogénico, y puede causar un choque
  séptico. El LPS sirve a la bacteria como barrera
  protectora, ya que evita o disminuye la entrada
  de: sales biliares, antibióticos, y otras sustancias
  que podrían dañar la bacteria.
Estructura del LPS:
2.Lípido A: fracción más interna, inserto en la
  membrana externa. Fracción tóxica.
3.Polisacárido central o core
4.Cadena lateral O, o antígeno O. Fracción más
  externa de naturaleza polisacarídica. Tiene carácter
  antigénico. Composición variada según cepa
  bacteriana, por lo que se utiliza para clasificación
  serológica de las enterobacterias.
En la Membrana externa también existen porinas,
  proteínas que permiten la penetración de solutos.
  Estas proteínas salen a la membrana externa a
  través de zonas de adhesión entre m.plasmática y
  externa llamadas uniones de Bayer.
LPS
MYCOBACTERIAS
• Bacterias Gram+ del género Mycobacterium
• Poseen pared especial con ácidos micólicos
  (ácidos grasos insaturados de cadena larga)
  unidos a polisacárido superficial.
• En el glicopéptido no poseen NAM, sino N-
  glicolilmurámico
• La composición rica en lípidos es la responsable
  de la resistencia a la decoloración con alcohol
  ácido tras la tinción.
CÁPSULA
• Estructura que poseen algunas bacterias por fuera
  de la pared
• Es antigénica. Antígeno K, identificación serológica
  de distintas cepas de una especie.
• Su eliminación no compromete la supervivencia de
  la bacteria, pero su presencia sí que le confiere
  diversas ventajas
• Función: protección frente a fagocitosis por
  macrófagos y neutrófilos, y frente a enzimas líticos,
  adhesión de bacterias a superficies, retardan
  desecación de bacterias en ambientes secos
• Las colonias de las bacterias que poseen cápsula
  son de aspecto mucoso y liso
• Factor de virulencia
• Rígida
• No se tiñen con tinciones habituales, sino con
  tinción negativa o tinta china
• Composición:
• Polisacarídica: mayoría de las bacterias. Ex:
  Streptococcus pneumoniae (90 serotipos),
  Haemophilus influenzae (6 serotipos, el b es
  productor de meningitis), klebsiella pneumoniae…
•   Polipeptídica: Bacillus anthracis
•   Detección de diferencias en la composición
    antigénica para identificar los serotipos,
    mediante el empleo de antisueros específicos.
    Se produce el hinchamiento de las cápsulas-
    reacción de Quellung o Neufeld.
Cápsula del neumococo
(Streptococcus pneumoniae)
MEMBRANA PLASMÁTICA
• Similar a la de eucariotas (bicapa de fosfolípidos
  y proteínas), pero sin esteroles. Salvo los
  micoplasmas
• Permeabilidad selectiva
• Se localiza por dentro de la pared
• Presenta repliegues internos llamados
  mesosomas, que intervienen en la división
  celular, ya que son origen de invaginaciones
• En la membrana plasmática se localizan los
  componentes de la cadena de transporte
  electrónico
CITOPLAMA
• El citoplasma bacteriano es la masa de materia viva
  delimitada por la membrana citoplásmica.
• Rico en ribosomas e inclusiones de material
  nutritivo.
• En su interior se alberga al nucleoide y material
  genético extracromosómico: plásmido (no en todas)
- Nucleoide: cromosoma único que carece de
  membrana. ADN doble cadena circular. Se fija al
  mesosoma previo a la división celular.
- Plásmido: elementos genéticos extracromosómicos
  con capacidad de replicación autónoma .
  Intercambio material genético entre bacterias.
• Ribosomas: contienen componentes necesarios
  para síntesis proteica. Ribosoma 70S.
• Inclusiones de material nutritivo: gránulos de
  polifosfato o votulina, gránulos de cianoficina,
  gránulos de poli-ß-hidroxibutirato,
  carboxisomas, vacuolas de gas…
GLICOCALIX
• Son fibras de polisacáridos que se extienden
  desde la superficie de la célula.
• Algunas bacterias
• Funciones:
- Adherencia a superficies (Vibrio cholerae)
- Protección antifagocitaria
- Almacenamiento de sustancias nutritivas
FLAGELOS
• Apéndices filiformes de naturaleza proteica (flagelina)
  que se originan en el citoplasma
• Deben teñirse para observarlos
• Órganos de movilidad (excepciones como Salmonella)
• Capacidad antigénica (Ag H)
• Según número y disposición se diferencian bacterias:
6.Átricas: sin flagelos
7.Monotricos: un solo flagelo
8.Anfitricos: un solo flagelo en cada uno de los polos.
9.Lofotricos: un penacho de flagelos en uno de los polos,
  o en los dos.
10.Peritricos: flagelos distribuidos por todo el perímetro
  bacteriano
• Ultraestructura formada por 3 partes:
2.Cuerpo basal
3.Gancho: une el cuerpo basal con el filamento
4.Filamento: desde la superficie celular hasta el
  extremo del flagelo. Cilindro rígido y hueco.
  Polímero de flagelina.
• Síntesis de los flagelos: autoensamblaje de las
  unidades de flagelina que se agregan en el
  extremo.
• Mecanismo del movimiento: hélice rígida que
  gira a favor o en contra de las agujas del reloj.
FIMBRIAS O PILI
• Prolongaciones proteicas
• Intervienen en la transferencia de material
  genética
• Adherencia
• Antifagocitosis
• Más cortas que los flagelos
• No se visualizan con las tinciones
• Rodean a algunas GRAM-
QUIMIORRECEPTORES

• Las bacterias detectan moléculas atrayentes y
  repelentes, a través de los quimiorreceptores.
• Son proteínas especiales capaces de unirse a
  sustancias químicas y transmitir señales a sus
  sensores para compararlas.
• Se localizan en el espacio periplásmico o en la
  membrana plasmática.
• En ausencia de gradiente químico hay bacterias
  que se mueven al azar
ENDOSPORAS BACTERIANAS
• Se desarrollan dentro de algunos géneros de
  células bacterianas (Clostridium sp., Bacillus
  sp.) vegetativas.
• Son formas de resistencia frente a condiciones
  adversas
• Eliminación: autoclave 120°C durante 15-20
  minutos.
• Se libera por lisis celular
• Poseen unas proteínas que protegen el ADN
  frente al calor, radiación ultravioleta, desecación
  y sustancias químicas.
SIDERÓFOROS
• Captan el hierro presente en bajas
  concentraciones. Quelantes
• Pueden ser factor de virulencia
• Enterobacterias enteroinvasivas: enterobactina,
  enteroquelina.
BACTERIOCINAS
• Proteínas codificadas en plásmidos que
  destruyen cepas relacionadas que no lleven
  dicho plásmido
• Pseudomonas sp.
TOXINAS
• Endotoxinas o exotoxinas
• Endotoxinas: forman parte de la pared celular de
   bacterias GRAM- (lipopolisacárido). La parte
  lipídica es la fracción tóxica y más interna, y la
  polisacarídica es la fracción antigénica. Son
  termoestables y no forman toxoides.
• Exotoxinas: proteínas solubles (enzimas casi
  siempre), termolábiles, que el agente patógeno
  secreta durante su crecimiento.

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Morfología bacteriana GRAM+ y GRAM

  • 1. T.4. MORFOLOGÍA Y ANATOMÍA BACTERIANAS. GRAM+ y GRAM- 2°ENFERMERÍA MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA PROF.: PATRICIA NARBÓN
  • 2.
  • 3. MORFOLOGÍA BACTERIANA • Las bacterias son seres unicelulares procariotas que se multiplican por división binaria. • Tamaño variable: entre 1 µm y 10 µm. • Se diferencian 3 morfologías fundamentales: 4.Formas esféricas o cocos 5.Formas cilíndricas rectas o bacilos 6.Formas cilíndricas incurvadas o espirilos
  • 4. • Pueden estar aisladas o agrupadas. Los cocos están agrupados: 2.En parejas: diplococos 3.En cadenas 4.En racimos 5.En tétradas o paquetes cúbicos Los bacilos están agrupados: 7.Parejas 8.Cadenas 9.Empalizada 10.Letras y caracteres chinos
  • 5. Los espirilos no suelen formar agrupaciones, y se distinguen por una o varias curvaturas, o por formas onduladas. • Las agrupaciones bacterianas que proceden de un único individuo son visibles macroscópicamente en un medio de cultivo, y se denominan colonias. Las características diferenciales de las colonias (color, forma, tamaño…) dependen de la bacteria y del medio de cultivo.
  • 6.
  • 7.
  • 8.
  • 9.
  • 10. • La mayor parte de las bacterias mantiene su forma constante, pero algunas especies pueden variar la forma, son las llamadas bacterias pleomórficas. Arthrobacter es un ejemplo de pleomorfismo debido a que su forma cambia en función de la edad del cultivo.
  • 11. • En las células bacterianas la relación superficie y volumen de la célula es muy alta lo que permite la entrada de muchos nutrientes para alimentar a un pequeño volumen y una alta actividad metabólica.
  • 12.
  • 13. Caracteres generales con respecto a células eucariotas • Poseen ribosomas 70S: subunidades 50S y 30S. • Carecen de núcleo y membrana nuclear • Tienen un único cromosoma ADN bicatenario circular, y pueden tener ADN extracromosómico llamado plásmido. • Carecen de mitocondrias, cloroplastos, sistemas de endomembranas, lisosomas, peroxisomas y citoesqueleto. • Pueden existir, además, apéndices filamentosos: Flagelos, Fimbrias (= pelos, pili) • Presencia de cápsula en algunas especies • Presencia de pared celular (distinta a vegetales) • Membrana similar a la eucariota, pero con pliegues internos llamados mesosomas.
  • 14.
  • 15. PARED CELULAR • La pared celular confiere forma a las bacterias y las protege de la lisis osmótica en medios hipotónicos. • No poseen pared celular: micoplasmas y algunas arqueobacterias. • Las bacterias que pierden su pared: Esferoplastos: pérdida parcial Protoplastos: pérdida total • Lugar de acción de los ß-lactámicos.
  • 16. Estructura de la Pared • Varía según sean las bacterias GRAM+ o GRAM- • Principal componente es el peptidoglucano o mureína. • Mureína: polímero formado por residuos alternantes de dos derivados de azúcares: 5.N-acetilglucosamina: NAG 6.N-acetilmurámico: NAM • Las cadenas glucosídicas están orientadas de forma paralela y están unidas entre sí mediante puentes peptídicos formados por cadenas de 4 aminoácidos de configuración L y D alternantes, que están unidos al grupo carboxilo del ácido N-acetilmurámico.
  • 17.
  • 18.
  • 19. GRAM POSITIVAS • Pared gruesa formada fundamentalmente por mureína (90%). • Cadena lateral formada frecuentemente por L- alanina, D-glutámico, L-lisina y D-alanina. Estas cadenas se unen por puentes tranversales de péptidos de pentaglicinas o lisinas que conectan D- alanina de una cadena con L-lisina de otra (tercer aa de una con el cuarto de la otra). La transpeptidación se produce en el exterior de la membrana plasmática. • Pared celular compuesta por una única capa homogénea de mureína, situada por fuera de la membrana plasmática. Más gruesa que GRAM-.
  • 20. • Presencia de ácidos teicoicos en la pared celular. Son polímeros de glicerol o ribitol unidos entre sí por enlaces fosfodiester. Unidos a la molécula de alcohol hay polisacáridos o aminoácidos. Tienen carácter antigénico y están cargados negativamente.
  • 21.
  • 22. GRAM NEGATIVAS • Capa de mureína es muy fina • Poseen una membrana externa a continuación de la capa de mureína. • El tercer residuo de la cadena peptídica suele ser el ácido meso-diaminopimélico, en lugar de L- lisina. Y las uniones se establecen directamente entre el ácido m-diaminopimélico y la D-alanina. • La unión de la membrana externa al peptidoglucano se realiza mediante lipoproteínas. La más abundante es la lipoproteína de Braun o lipoproteína de mureína.
  • 23.
  • 24.
  • 25. • El espacio entre la membrana externa y la membrana plasmática, donde se encuentra la mureína, se denomina espacio periplásmico. Es un lugar con gran cantidad de: enzimas hidrolíticos, proteínas de transporte, y quimiorreceptores. • Membrana externa: sus constituyentes más característicos son sus lipopolisacáridos (LPS), con carácter de endotoxina. Son responsables de la acción tóxica inespecífica de los GRAM-. Tiene efecto pirogénico, y puede causar un choque séptico. El LPS sirve a la bacteria como barrera protectora, ya que evita o disminuye la entrada de: sales biliares, antibióticos, y otras sustancias que podrían dañar la bacteria.
  • 26. Estructura del LPS: 2.Lípido A: fracción más interna, inserto en la membrana externa. Fracción tóxica. 3.Polisacárido central o core 4.Cadena lateral O, o antígeno O. Fracción más externa de naturaleza polisacarídica. Tiene carácter antigénico. Composición variada según cepa bacteriana, por lo que se utiliza para clasificación serológica de las enterobacterias. En la Membrana externa también existen porinas, proteínas que permiten la penetración de solutos. Estas proteínas salen a la membrana externa a través de zonas de adhesión entre m.plasmática y externa llamadas uniones de Bayer.
  • 27. LPS
  • 28.
  • 29.
  • 30.
  • 31. MYCOBACTERIAS • Bacterias Gram+ del género Mycobacterium • Poseen pared especial con ácidos micólicos (ácidos grasos insaturados de cadena larga) unidos a polisacárido superficial. • En el glicopéptido no poseen NAM, sino N- glicolilmurámico • La composición rica en lípidos es la responsable de la resistencia a la decoloración con alcohol ácido tras la tinción.
  • 32. CÁPSULA • Estructura que poseen algunas bacterias por fuera de la pared • Es antigénica. Antígeno K, identificación serológica de distintas cepas de una especie. • Su eliminación no compromete la supervivencia de la bacteria, pero su presencia sí que le confiere diversas ventajas • Función: protección frente a fagocitosis por macrófagos y neutrófilos, y frente a enzimas líticos, adhesión de bacterias a superficies, retardan desecación de bacterias en ambientes secos
  • 33. • Las colonias de las bacterias que poseen cápsula son de aspecto mucoso y liso • Factor de virulencia • Rígida • No se tiñen con tinciones habituales, sino con tinción negativa o tinta china • Composición: • Polisacarídica: mayoría de las bacterias. Ex: Streptococcus pneumoniae (90 serotipos), Haemophilus influenzae (6 serotipos, el b es productor de meningitis), klebsiella pneumoniae…
  • 34. Polipeptídica: Bacillus anthracis • Detección de diferencias en la composición antigénica para identificar los serotipos, mediante el empleo de antisueros específicos. Se produce el hinchamiento de las cápsulas- reacción de Quellung o Neufeld.
  • 36. MEMBRANA PLASMÁTICA • Similar a la de eucariotas (bicapa de fosfolípidos y proteínas), pero sin esteroles. Salvo los micoplasmas • Permeabilidad selectiva • Se localiza por dentro de la pared • Presenta repliegues internos llamados mesosomas, que intervienen en la división celular, ya que son origen de invaginaciones • En la membrana plasmática se localizan los componentes de la cadena de transporte electrónico
  • 37.
  • 38.
  • 39. CITOPLAMA • El citoplasma bacteriano es la masa de materia viva delimitada por la membrana citoplásmica. • Rico en ribosomas e inclusiones de material nutritivo. • En su interior se alberga al nucleoide y material genético extracromosómico: plásmido (no en todas) - Nucleoide: cromosoma único que carece de membrana. ADN doble cadena circular. Se fija al mesosoma previo a la división celular. - Plásmido: elementos genéticos extracromosómicos con capacidad de replicación autónoma . Intercambio material genético entre bacterias.
  • 40. • Ribosomas: contienen componentes necesarios para síntesis proteica. Ribosoma 70S. • Inclusiones de material nutritivo: gránulos de polifosfato o votulina, gránulos de cianoficina, gránulos de poli-ß-hidroxibutirato, carboxisomas, vacuolas de gas…
  • 41. GLICOCALIX • Son fibras de polisacáridos que se extienden desde la superficie de la célula. • Algunas bacterias • Funciones: - Adherencia a superficies (Vibrio cholerae) - Protección antifagocitaria - Almacenamiento de sustancias nutritivas
  • 42. FLAGELOS • Apéndices filiformes de naturaleza proteica (flagelina) que se originan en el citoplasma • Deben teñirse para observarlos • Órganos de movilidad (excepciones como Salmonella) • Capacidad antigénica (Ag H) • Según número y disposición se diferencian bacterias: 6.Átricas: sin flagelos 7.Monotricos: un solo flagelo 8.Anfitricos: un solo flagelo en cada uno de los polos. 9.Lofotricos: un penacho de flagelos en uno de los polos, o en los dos. 10.Peritricos: flagelos distribuidos por todo el perímetro bacteriano
  • 43.
  • 44.
  • 45. • Ultraestructura formada por 3 partes: 2.Cuerpo basal 3.Gancho: une el cuerpo basal con el filamento 4.Filamento: desde la superficie celular hasta el extremo del flagelo. Cilindro rígido y hueco. Polímero de flagelina. • Síntesis de los flagelos: autoensamblaje de las unidades de flagelina que se agregan en el extremo. • Mecanismo del movimiento: hélice rígida que gira a favor o en contra de las agujas del reloj.
  • 46. FIMBRIAS O PILI • Prolongaciones proteicas • Intervienen en la transferencia de material genética • Adherencia • Antifagocitosis • Más cortas que los flagelos • No se visualizan con las tinciones • Rodean a algunas GRAM-
  • 47.
  • 48.
  • 49. QUIMIORRECEPTORES • Las bacterias detectan moléculas atrayentes y repelentes, a través de los quimiorreceptores. • Son proteínas especiales capaces de unirse a sustancias químicas y transmitir señales a sus sensores para compararlas. • Se localizan en el espacio periplásmico o en la membrana plasmática. • En ausencia de gradiente químico hay bacterias que se mueven al azar
  • 50. ENDOSPORAS BACTERIANAS • Se desarrollan dentro de algunos géneros de células bacterianas (Clostridium sp., Bacillus sp.) vegetativas. • Son formas de resistencia frente a condiciones adversas • Eliminación: autoclave 120°C durante 15-20 minutos. • Se libera por lisis celular
  • 51.
  • 52. • Poseen unas proteínas que protegen el ADN frente al calor, radiación ultravioleta, desecación y sustancias químicas.
  • 53.
  • 54. SIDERÓFOROS • Captan el hierro presente en bajas concentraciones. Quelantes • Pueden ser factor de virulencia • Enterobacterias enteroinvasivas: enterobactina, enteroquelina.
  • 55. BACTERIOCINAS • Proteínas codificadas en plásmidos que destruyen cepas relacionadas que no lleven dicho plásmido • Pseudomonas sp.
  • 56. TOXINAS • Endotoxinas o exotoxinas • Endotoxinas: forman parte de la pared celular de bacterias GRAM- (lipopolisacárido). La parte lipídica es la fracción tóxica y más interna, y la polisacarídica es la fracción antigénica. Son termoestables y no forman toxoides. • Exotoxinas: proteínas solubles (enzimas casi siempre), termolábiles, que el agente patógeno secreta durante su crecimiento.