Les opinions exprimées dans ces exposés sont celles des auteurs et ne représentent pas nécessairement les points de vue du gouvernement du Canada. Les exposés sont diffusés dans leur format original, tel que nous les avons reçus des présentateurs. Les exposés présentés lors de la Conférence en vue d’élaborer un cadre fédéral relatif à la maladie de Lyme sont la propriété de l’auteur, à moins d’indication contraire. Si vous faites référence au travail de l’auteur, vous devez nommer l’auteur et le titre de son exposé, ainsi que le lieu et la date de l’exposé. Pour obtenir de plus amples renseignements, veuillez communiquer avec le secrétariat de la Conférence sur la maladie de Lyme à l’adresse maladie_lyme_disease@phac-aspc.gc.ca

1. État actuel du diagnostic de la
maladie de Lyme au Canada
Todd F. Hatchette
M.D., FRCPC

2. Divulgation du corps
professoral/du présentateur
• Corps professoral : Todd F. Hatchette
• Liens avec des intérêts commerciaux :
– Subventions/aide à la recherche : Ententes sur la recherche
collaborative pour les chercheurs – laboratoire d’ancrage pour le
Réseau de surveillance des cas sévères qui étudie l’efficacité du vaccin
contre la grippe et le pneumocoque de pneumonie acquise dans la
collectivité (GSK/Pfizer)
– Bureau des conférenciers/honoraires : Honoraires pour une
discussion sur les infections tuberculeuses latentes et la réactivation
chez les patients qui reçoivent un traitement biologique (Abbvie)
– Honoraires d’expert-conseil : Aucun
– Autre : Aucun

3. Atténuation du risque de partialité
• Le financement du programme de recherche/des honoraires
n’a rien à voir avec la maladie de Lyme

4. Définitions
• Stade localisé précoce de la maladie de Lyme
• Stade disséminé précoce de la maladie de Lyme
• Stade avancé de la maladie de Lyme
• Syndrome post-maladie de Lyme
• Maladie de Lyme chronique
Discutées de façon plus approfondie par Bill Bowie

5. Symptômes de la maladie de Lyme à
un stade précoce et à un stade avancé
Quelques jours à
quelques semaines
Quelques semaines
à quelques mois
Quelques mois à
quelques années

6. Évolution clinique de la maladie de Lyme
Maladie cutanée
aiguë
Stade disséminé
précoce de la maladie
Stade disséminé
tardif de la
maladie
http://ocw.jhsph.edu/courses/EpiInfectiousDisease/PDFs/EID_lec15_Griffin.pdf

7. Facteurs qui ont une incidence sur
l’exactitude des diagnostics
• Type d’échantillons
• Moment de la collecte relativement au stade
de la maladie
• Cinétique de l’expansion des anticorps
• Méthodologie (p. ex. molécules, culture,
sérologie, etc.)
• Souches bactériennes
– Antécédents de voyage
• Prévalence

8. Diagnostic en laboratoire de la
maladie de Lyme
• Sérologie (algorithme en deux étapes)
– Essai immunoenzymatique (EIA)
• EIA à cellules entières
• VlsE/peptide C6
• VIsE1/peptide C10
– Transfert Western
• Test de polymérase en chaîne
– Pour le liquide synovial ou le liquide
céphalorachidien
• Culture
– Jusqu’à 50 % dans les érythèmes migrants
• Tests avec rendement
incertain
– Détection de l’antigène
– Marqueurs immunologiques
• CD57 – cellules NK
• Elispot

9. Tests en deux étapes
• Les tests par transfert Western ne peuvent pas
être utilisés sans les EIA.
– Les EIA sont quantitatifs; les transferts sont
subjectifs
– Les tests par transfert Western (anticorps IgM)
présentent une mauvaise spécificité. Diagnostic, si
utilisé, seulement dans les six premières semaines
de l’infection
– Les espèces européennes peuvent être des faux
négatifs dans les analyses par transfert Western
Aguero-Rosenfeld et Wormser, 2015. Exprt Rev Mol Diagn 15:1-4
DeBiasi. 2014. Curr Infect Dis Rep 16:450-455

10. • Les protéines individuelles diffèrent largement en matière de sensibilité et de spécificité
pour ce qui est de prédire le résultat final des tests par transfert Western (anticorps IgG)
• Les antigènes P39 et VlsE sont les plus uniformes, mais la courbe caractéristique de la
performance d’un test (ROC) est inférieure à 90 %
• Aucune protéine n’est prédictive à plus de 90 % (ROC > 90 %) du résultat des tests par
transfert Western (anticorps IgG)
• La réduction du niveau de réponse nécessaire pour qu’une bande soit considérée comme
étant positive augmente légèrement la sensibilité, mais diminue la spécificité
Les protéines individuelles diffèrent largement en matière de
sensibilité et de spécificité pour ce qui est de prédire le résultat
final des tests par transfert Western (anticorps IgG)
(Source : R. Lindsay, LNM)

11. Le rendement des tests sérologiques dépend
du stade de la maladie

12. • 1999-2001 East Lyme Connecticut
• La culture de 76 patients a confirmé l’existence
d’érythèmes migrants
• 147 patients étaient au stade tardif de la maladie de
Lyme ou d’autres maladies
– Constatations cliniques objectives et sérologie positive
• Syndrome post-maladie de Lyme (après la maladie de Lyme ou
maladie de Lyme chronique)
– Douleur, déficience neurocognitive ou fatigue moins de 6 mois
après les antibiotiques appropriés
• Témoins
CID 2008 47:188-195

13. Le rendement des tests sérologiques
dépend du stade de la maladie
Stade de la maladie EIA C6 EIA + transfert
Western
(anticorps
IgM)
EIA + transfert
Western
(anticorps IgG)
EIA et anticorps
IgM ou tansfert
Western
(anticorps IgG)
Aigu (stade 1) 19 à 38 % 11 à 38 % 6 à 15 % 17 à 43 %
Phase de
convalescence après
antibiotiques
47 à 63 % 39 à 70 % 17 à 20 % 53 à 75 %
Infection disséminée
(douleurs
neurologiques ou
arthrite aiguës)
(stade 2)
100 % 85 % 85 % 100 %
Infection persistante
(stade 3)
100 % 23 % 100 % 100 %
CID 2008 47:188-195

14. Stade de la maladie EIA C6 EIA + transfert
Western
(anticorps IgM)
EIA + transfert
Western
(anticorps IgG)
EIA et anticorps
IgM ou tansfert
Western
(anticorps IgG)
Syndrome post-maladie de
Lyme (n = 14)
43 % 50 % 36 % 71 %
Pas la maladie de Lyme
(n = 75)
(Encéphalo-myélite
myalgique, fibromyalgie,
sclérose en plaques,
polyarthrite rhumatoïde)
1 % 0 % 0 % 0 %
En santé (région
endémique) (n = 86)
5 % 1 % 1 % 2 %
En santé (région non
endémique) (n = 50)
2 % 0 % 0 % 0 %
Spécificité élevée d’un algorithme en
deux temps
CID 2008 47:188-195

15. Le rendement des tests sérologiques dépend
du stade de la maladie
*Sérums obtenus après traitement par antibiotiques
Molins et al 2014 JCM 52:10

16. Nouvelles cibles antigéniques
• Antigènes exprimés au début dans le cas d’infection chez les
mammifères
– C6, peptide contenant 26 acides aminés dans la principale séquence
protéinique variable (VlsE1)
– VlsE1 recombinante même
– pepC10, portion conservée de peptide contenant 10 acides aminés
dans l’OspC
• Les réponses immunitaires à VlsE1 sont des IgG à médiation,
même dans les premiers stades de la maladie, tandis que
pepC10 génère une réponse précoce et parfois durable des
anticorps IgM (2, 5, 28).
• B. burgdorferi Lipoprotéine BBK07 – antigène
immunodominant – est un antigène de surface provoqué in
vivo qui est exprimé de façon sélective durant l’infection chez
les mammifères
Porwancher et al., Clin. Vaccine Immunol. 2011 18:851-859
Coleman et al., Clin vaccine Immunol. 2011 18:406–413.

17. Évolution des EIA : sensibilité améliorée
Essais biologiques Sensibilité (%) Spécificité
Stade
précoce
Stade disséminé
précoce
Stade
tardif
En santé Patients non atteints
de la maladie de
Lyme
Essai d’immuno-
absorption
enzymatique (test
ELISA) – sonicat de
cellules entières
74 97,7 98,4 96,4 89,3
Test ELISA – sonicat
de cellules entières +
transfert Western
35,2 77,3 95,9 99,5 99,2
Test ELISA – C6 66,5 88,6 98,4 98,8 99,5
Test ELISA – C6 +
transfert Western
34,5 75 95,1 99,5 99,5
VlsE CIA 69,8 100 100 99,5 93,7
PepC10 kELISA (IgM) 47,3 46,1 10,3 100 98,0
VlsE/PepC10 kELISA 67,2 88,5 94,1 99,2 96,7
Adapté de Theel S JCM 2016

18. Autres algorithmes
EIA à cellules entières + C6 par rapport à
l’essai actuel en deux temps
• Meilleure sensibilité au stade précoce de l’infection
Branda et al. Clinical Infectious Diseases 2011;53(6):541–547
• Spécificité au moyen de témoins en santé de
niveau égal

19. Autres algorithmes
VlsE1-IgG et pepC10-IgM
• Deuxième temps : immuno-essai au moyen d’un système de
microsphères multiples qui mesure VlsE1-IgG et pepC10-IgM
• Meilleure sensibilité au stade précoce de l’infection
Porwancher et al., Clin. Vaccine Immunol. 2011 18:851-859

20. Résumé des tests de dépistage de la maladie de
Lyme dans les provinces
Prov. 1er
temps 2e
temps
C.-B. Zeus VlsE + pepC10 EIA
Transferts Western MarDx (IgM et IgG), transférer les
tests par transfert Western propres à l’Europe au LNM
Alb. Immunetics C6 IgG/IgM ELISA transférer tous les tests par transfert Western vers le LNM
Sask. Diasorin Liason cLIA (IgG/IgM + VlsE), transférer tous les tests par transfert Western vers le LNM
Man. Immunetics C6 IgG/IgM ELISA transférer tous les tests par transfert Western vers le LNM
Ont. Immunetics C6 IgG/IgM ELISA
Transferts Western MarDx (IgM et IgG), transférer les
tests par transfert Western propres à l’Europe au LNM
Qc Divers* Test ELISA pour le dépistage transférer tous les tests par transfert Western vers le LNM
N.-B. Immunetics C6 IgG/IgM ELISA transférer tous les tests par transfert Western vers le LNM
N.-É.
ZEUS WC IgG/IgM ELISA ensuite
Immunetics C6 IgG/IgM ELISA,
transférer tous les tests par transfert Western vers le LNM
Î.-P.-É. transfert en N.-É. aux fins de dépistage
T.-N.-L. Transfert au LNM pour tous les tests
LNM Immunetics C6 IgG/IgM ELISA
Euroimmun Us (IgM et IgG)
Euroimmun Transferts Western propres à l’Europe (IgG)
*Immunetics C6 IgG/IgM ELISA, VIDAS Lyme IgG II EIA, Euroimmun Anti- Borrelia IgM et
Anti-Borrelia VlsE IgG ELISA

21. D’autres méthodes peuvent mener à de faux résultats
• Fallon et al., 2014. Clin Infect Dis 59(12):1705–10
• Critères de laboratoire internes pour un transfert Western (anticorps IgM) au laboratoire spécialisé B ≥2
supérieurs aux bandes suivantes : 23–25, 31, 34, 39, 41, 83/93. Critères pour un transfert Western (anticorps
IgM) ≥2 supérieurs aux bandes suivantes : 23–25, 31, 34, 39, 41, 83/93.

22. • Comparaison de la capacité de la microscopie photonique
pour diagnostiquer l’infection à Borrelia dans le sang
– 25 témoins en santé sur 41 ont obtenu une microscopie positive
• Le test de polymérase en chaîne n’était pas uniforme dans les
quatre laboratoires et il y a eu des préoccupations quant à la
contamination entre les contrôles positifs
Maladie infectieuse 2016 48:411-419

23. Rendement des tests déclarés selon Fallon dans Clinical Infectious Diseases 2014
100 autres
tests de
dépistage de
la maladie de
Lyme
Pourquoi la spécificité est-elle aussi
importante que la sensibilité

24. Autre approche – Métabolomique
Molins et al., Clin Infect Dis 2015;60(12):1767 – 75
• Petits métabolites moléculaires extraits d’un sérum
avec du méthanol et analysés au moyen du couplage
de chromatographie en phase liquide et
spectrométrie de masse (CPL-SM).

25. Le diagnostic d’une réinfection pose un défi
• Il n’existe pas de test de contrôle
• Réinfection signalée dans cinq études prospectives
sur la maladie de Lyme aux États-Unis
– Taux de réinfection/année : -1,2 % et 3,1 %
– Érythème migrant habituellement à un endroit différent
• Aucun modèle n’a été déterminé pour distinguer une
réinfection d’infections antérieures
• Séroconversion ou augmentation multipliée par 4 de
titres d’anticorps pourrait indiquer la réinfection –
difficiles à faire
Nadelman et Wormser, 2007 CID 45:1032-1038
Krause et al., 2006 AJTMH 75:1090-1094

26. Biodiversité
Cerar T 2016 EID 2016
• Bactéries B. burgdoferi différentes en
Europe et aux États-Unis
• Les présentations cliniques diffèrent
en Europe et aux États-Unis
• Diversité plus importante aux
États-Unis selon l’OspC

27. La diversité des souches existe
Haninkova et al. Plos one 2013. 8(9)
Arbre sans racines multilocus de
B. burgdorferi selon des séquences
concaténées de huit gènes constitutifs
soumis au typage génomique multilocus
Diagrammes de Venn illustrant la
répartition géographique de la bactérie
B. burgdorferi chez les patients atteints
de la maladie de Lyme.

28. La biodiversité influe sur le résultat des
tests par transfert Western, mais moins
pour C6 ou EIA à cellules entières
Wormser et al., Clinical Infectious
Diseases 2008; 47:910–4
RST OMP C

29. Problèmes de diagnostic
Résumé
• Rendement médiocre de la sérologie au stade précoce de
l’infection
• La séroconversion pourrait ne pas se produire avec le
traitement précoce
• Aucun test de contrôle –
• la sérologie peut persister pendant une décennie
• Le diagnostic d’une réinfection pose un défi
• Besoin d’étudier davantage l’influence de la biodiversité
• Aucun dépistage n’existe actuellement pour le syndrome
post-maladie de Lyme

30. Besoin urgent d’échantillons bien
caractérisés
• Des échantillons pratiques sont utilisés pour déterminer la
sensibilité et la spécificité
• Difficulté à comparer les nouveaux tests si la référence est
fondée sur des résultats sérologiques à deux niveaux
• Impossible d’étudier facilement les bactéries par des
méthodes moléculaires
• Les CDC possèdent un répertoire de sérum et un certain accès
à cette information est offert au Canada
– Ressources limitées
– Préférable de connaître le contexte canadien

31. Problèmes de diagnostic
Résumé
• Nous avons besoin de cohortes mieux définies afin
d’avoir des échantillons pour valider les nouvelles
méthodes à mesure qu’elles sont élaborées
– Stade localisé précoce de la maladie de Lyme (30 jours)
– Stade disséminé précoce de la maladie de Lyme (< 3 mois)
– Stade tardif de la maladie de Lyme (> 3 mois)
– Syndrome post-maladie de Lyme
– Maladie de Lyme chronique
• Diagnostic fondé uniquement sur les caractéristiques cliniques
• Diagnostiqué au moyen d’autres méthodes de dépistage