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Extração de DNA
                                                  de Morangos
       O DNA (ácido desoxinucleotídeo) é uma molécula orgânica que
contem a "informação" que instrui o desenvolvimento e funcionamento de
todos os organismos vivos. O procedimento de extração de DNA já foi um
processo bem complicado de ser feito em laboratório. Hoje, é muito fácil de
se fazer até mesmo em casa. Podemos extrair o DNA de diversas fontes,
entre elas, o morango.

     Cada nucleotídeo que constitui o DNA é formado pela ligação
de um fosfato (Po4) a uma pentose, a desoxirribose (carboidrato de
cinco carbonos) e uma base nitrogenada, que pode ser uma
Adenosina, Timina, Citosina ou Guanina. As moléculas de DNA são
                       geralmente formada por duas cadeias
                       poliméricas em hélices unidas por pontes de
                       hidrogênio formadas entre uma base púrica
                       (Adenina ou Guanina) de uma das cadeias e
                       uma base pirimídica (Timina ou Citosina)
                       da outra. É importante lembrar que a
                       ligação sempre se dá entre Adenina e
                       Timina, ou Citosina e Guanina.
                               As técnicas de manipulação do
                       DNA têm influenciado direta ou
                       indiretamente a sociedade, através da cura e
                       diagnóstico precoce de doenças, dos testes de
paternidade, através das aplicações na medicina forense, na preservação de
espécies ameaçadas, na agricultura e na busca pela cura de diversas doenças.




Morangos
      Os morangos são plantas da espécie
Fragaria ananassa. Estas plantas são
Rosáceas, ou seja, são da mesma família
das rosas que enfeitam muitos jardins. Elas
se reproduzem principalmente por meio
do estolão, que é um ramo que cresce
paralelo ao chão, gerando brotos de novas
plantas. As variedades de morangos que
consumimos hoje são resultado de
cruzamentos de espécies diferentes que
ocorriam, naturalmente na Europa (França
e Rússia) e nas Américas (Chile e Estados
Unidos).
      Uma das razões de se trabalhar com morangos é que eles se prestam
muito bem à extração de DNA, porque são muito macios e fáceis de
homogeneizar. Morangos maduros também produzem pectinases e celulases, que
são enzimas que degradam a pectina e a celulose (respectivamente), presentes nas
paredes celulares das células vegetais. Além disso, os morangos possuem muito DNA:
eles possuem 8 (oito) cópias de cada conjunto de cromossomos, ou seja, são
octoplóides.
Extraindo o DNA de Morangos
Siga as instruções a seguir:


                          1 - Material a ser utilizado:            2 - Coloque os morangos
 1                        Dois morangos;                  2        (sem pétalas) no saco
                          Álcool 70% gelado;                       plástico e amasse bem.
                          Sal de Cozinha;
                          Saco plástico (”Zip Loc”);
                          Filtro descartável de café;
                          Palito de madeira (para
                          churrasco);
                          Detergente líquido;
                          Funil, Erlenmeyer (ou copo)
                          e tubo de vidro.



                          3 - Adicione meia colher de              4 - Logo após, adicione
                          sopa de Sal de cozinha.                  também uma colher de
                                                                   detergente líquido.




                     3                                        4


                          5 - Misture tudo, apertando              6 - Monte o Funil com o
 5                        com as mãos por 1 mim.                   filtro de papel e Erlenmeyer
                                                                   (ou copo). Derrame a
                                                                   mistura pelo filtro e deixe
                                                                   filtrar.




                                                              6


                          7 - Coloque o filtrado em um             8 - Derrame devagar o
                          tudo de vidro.                           álcool gelado no tubo, até
                                                                   que o mesmo esteja cheio
                                                                   até a metade.




                     7                                    8


                          9 - Depois de adicionar o                10 - O DNA vai formar uma
                          álcool, mexa a solução em                nuvem esbranquiçada na
                          movimentos circulares por 1              solução. Com o palito,
                          mim.                                     mergulhe na solução para
                                                                   evidenciar o DNA.




                      9                                       10
Extraindo o DNA de Morangos
O que Acontece...
       Assim que derramarem o álcool gelado no extrato de morango eles começarão a notar fitas
 brancas muito finas de DNA,que se formarão na interface entre as duas camadas.Agitando-se o DNA
 que se formou na camada de álcool,este formará fibras como as de algodão,que grudarão no objeto
 que se está usando para misturar (palito de madeira).




 Detergente?
     O detergente ajuda a dissolver a bicamada lipídica que compõe a
 membrana plasmática e as membranas das organelas.




                                                                                                                                              Sal?
                                  O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído, impedindo
                                                                               que elas precipitem com o DNA.




Álcool?
       O DNA não é solúvel em etanol (álcool
etílico). Quando as moléculas são solúveis em
um dado solvente, elas se dispersam neste
solvente e não são, portanto, visíveis. Por outro
lado, quando as moléculas são insolúveis em
um dado solvente, elas se agrupam, tornando-
se visíveis.Quanto mais gelado estiver o álcool,
menos solúvel o DNA vai estar. Por isso é tão
importante que o etanol seja mantido no
freezer ou em um banho de gelo até a hora do                                                        Ao final desse simples experimento,
                                                                                                    observe a nuvem de DNA na solução
experimento.
                                                                                                    (seta verde).




Fontes:
- O DNA vai à Escola. Extraindo o DNA do morango. Disponível em: <http://www.odnavaiaescola.com/morango.html>
- Carnegie Academy for Science Education. BERRY FULL OF DNA. Disponível em: <http://carnegieinstitution.org/first_light_case/horn/DNA/BERRYteacDNA>
- Colégio Marista São Francisco. Extraindo DNA de Morango. Disponível em:
<http://www.maristas.org.br/colegios/sfranc/download/feira_ciencias/2007/projetos/1ano_dna_morango.pdf>

Figuras
- http://www.molecularstation.com/molecular-biology-images/data/502/DNA_Overview.png
- http://www.makingthemodernworld.org.uk/stories/defiant_modernism/01.ST.02/img/IM.0528_zp.jpg
                                                                                                                                 A



                                                                                                                                          T
                                                                                                                                       G C
                                                                                                                               G
                                                                                                                                AT C




- http://www.ufmt.br/bionet/principal.htm
                                                                                                                                         A
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- http://www.sgc.utoronto.ca/SGC-WebPages/StructureDescription/2AV4.php


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Extraindo DNA de Morangos

  • 1. Extração de DNA de Morangos O DNA (ácido desoxinucleotídeo) é uma molécula orgânica que contem a "informação" que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os organismos vivos. O procedimento de extração de DNA já foi um processo bem complicado de ser feito em laboratório. Hoje, é muito fácil de se fazer até mesmo em casa. Podemos extrair o DNA de diversas fontes, entre elas, o morango. Cada nucleotídeo que constitui o DNA é formado pela ligação de um fosfato (Po4) a uma pentose, a desoxirribose (carboidrato de cinco carbonos) e uma base nitrogenada, que pode ser uma Adenosina, Timina, Citosina ou Guanina. As moléculas de DNA são geralmente formada por duas cadeias poliméricas em hélices unidas por pontes de hidrogênio formadas entre uma base púrica (Adenina ou Guanina) de uma das cadeias e uma base pirimídica (Timina ou Citosina) da outra. É importante lembrar que a ligação sempre se dá entre Adenina e Timina, ou Citosina e Guanina. As técnicas de manipulação do DNA têm influenciado direta ou indiretamente a sociedade, através da cura e diagnóstico precoce de doenças, dos testes de paternidade, através das aplicações na medicina forense, na preservação de espécies ameaçadas, na agricultura e na busca pela cura de diversas doenças. Morangos Os morangos são plantas da espécie Fragaria ananassa. Estas plantas são Rosáceas, ou seja, são da mesma família das rosas que enfeitam muitos jardins. Elas se reproduzem principalmente por meio do estolão, que é um ramo que cresce paralelo ao chão, gerando brotos de novas plantas. As variedades de morangos que consumimos hoje são resultado de cruzamentos de espécies diferentes que ocorriam, naturalmente na Europa (França e Rússia) e nas Américas (Chile e Estados Unidos). Uma das razões de se trabalhar com morangos é que eles se prestam muito bem à extração de DNA, porque são muito macios e fáceis de homogeneizar. Morangos maduros também produzem pectinases e celulases, que são enzimas que degradam a pectina e a celulose (respectivamente), presentes nas paredes celulares das células vegetais. Além disso, os morangos possuem muito DNA: eles possuem 8 (oito) cópias de cada conjunto de cromossomos, ou seja, são octoplóides.
  • 2. Extraindo o DNA de Morangos Siga as instruções a seguir: 1 - Material a ser utilizado: 2 - Coloque os morangos 1 Dois morangos; 2 (sem pétalas) no saco Álcool 70% gelado; plástico e amasse bem. Sal de Cozinha; Saco plástico (”Zip Loc”); Filtro descartável de café; Palito de madeira (para churrasco); Detergente líquido; Funil, Erlenmeyer (ou copo) e tubo de vidro. 3 - Adicione meia colher de 4 - Logo após, adicione sopa de Sal de cozinha. também uma colher de detergente líquido. 3 4 5 - Misture tudo, apertando 6 - Monte o Funil com o 5 com as mãos por 1 mim. filtro de papel e Erlenmeyer (ou copo). Derrame a mistura pelo filtro e deixe filtrar. 6 7 - Coloque o filtrado em um 8 - Derrame devagar o tudo de vidro. álcool gelado no tubo, até que o mesmo esteja cheio até a metade. 7 8 9 - Depois de adicionar o 10 - O DNA vai formar uma álcool, mexa a solução em nuvem esbranquiçada na movimentos circulares por 1 solução. Com o palito, mim. mergulhe na solução para evidenciar o DNA. 9 10
  • 3. Extraindo o DNA de Morangos O que Acontece... Assim que derramarem o álcool gelado no extrato de morango eles começarão a notar fitas brancas muito finas de DNA,que se formarão na interface entre as duas camadas.Agitando-se o DNA que se formou na camada de álcool,este formará fibras como as de algodão,que grudarão no objeto que se está usando para misturar (palito de madeira). Detergente? O detergente ajuda a dissolver a bicamada lipídica que compõe a membrana plasmática e as membranas das organelas. Sal? O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído, impedindo que elas precipitem com o DNA. Álcool? O DNA não é solúvel em etanol (álcool etílico). Quando as moléculas são solúveis em um dado solvente, elas se dispersam neste solvente e não são, portanto, visíveis. Por outro lado, quando as moléculas são insolúveis em um dado solvente, elas se agrupam, tornando- se visíveis.Quanto mais gelado estiver o álcool, menos solúvel o DNA vai estar. Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até a hora do Ao final desse simples experimento, observe a nuvem de DNA na solução experimento. (seta verde). Fontes: - O DNA vai à Escola. Extraindo o DNA do morango. Disponível em: <http://www.odnavaiaescola.com/morango.html> - Carnegie Academy for Science Education. BERRY FULL OF DNA. Disponível em: <http://carnegieinstitution.org/first_light_case/horn/DNA/BERRYteacDNA> - Colégio Marista São Francisco. Extraindo DNA de Morango. Disponível em: <http://www.maristas.org.br/colegios/sfranc/download/feira_ciencias/2007/projetos/1ano_dna_morango.pdf> Figuras - http://www.molecularstation.com/molecular-biology-images/data/502/DNA_Overview.png - http://www.makingthemodernworld.org.uk/stories/defiant_modernism/01.ST.02/img/IM.0528_zp.jpg A T G C G AT C - http://www.ufmt.br/bionet/principal.htm A T - http://www.sgc.utoronto.ca/SGC-WebPages/StructureDescription/2AV4.php Visite o nosso Site! Se você quer saber mais sobre Biotecnologia, acesse o site do nosso Projeto de Difusão Biotecnológica em www.bioinfo.ufpb.br/difusao. Núcleo de Difusão Biotecnológica http://www.bioinfo.ufpb.br/ndb