Este documento describe una práctica de laboratorio sobre la intoxicación por cloroformo en una rata. La práctica involucró la administración de cloroformo a la rata vía intraperitoneal, la observación de los síntomas de intoxicación y la muerte del animal. Luego se disecó la rata para examinar los órganos afectados y se realizaron reacciones químicas para detectar la presencia de cloroformo. El objetivo era estudiar los efectos tóxicos del cloroformo y confirmar su presencia a trav

1. “TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Irma Jeanneth Ochoa Toro
Curso: Quinto Paralelo: A
Grupo N03
Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 22 de junio del 2015
Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 29 de junio del 2015
PRÁCTICA N° 4
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
Animal de Experimentación: rata wistar
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
 OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
 Observar la sintomatología que se presenta cuando hay intoxicación por
cloroformo.
 Efectuar las reacciones químicas dispensables para detectar intoxicación por
cloroformo.
 MATERIALES: SUSTANCIAS
 Vaso de precipitación 250ml cloroformo
 Matraz Erlenmeyer 250ml alcohol de 95º
 Equipo de decisión nitrato de plata
 Bisturí potasa alcohólica (proporción 1:10)
 Perlas de vidrio percloruro de hierro
 Pipetas beta naftol
 Pinza para tubos solución alcohólica de potasa
 Funda plástica lejía de sosa 1:2
 Tubos de ensayos piridina
 Mangueras cristal de yodo
 Cronometro clorhidrato de piperacina
 Balón de destilación reactivo de Benedict
 Agitador
 Mechero de alcohol
 Tabla de disección
 Panema
 Jeringa de 10ml

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 Probeta de 50ml
 Refrigerante
 Cinta de embalaje
 Aro de hierro
 Fosforo
 Piola
 Mandil
 Mascarilla
 Guantes de látex
 PROCEDIMIENTO
1. Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área de trabajo y
tener os materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica.
2. Aplicamos a la rata wistar 10 ml de cloroformo.
3. Una vez administrado el toxico se procede a colocarlo en el panema.
4. Se observaran toda la sintomatología que presente por la intoxicación de
cloroformo hasta que muera tomando en cuenta el tiempo transcurrido.
5. Se coloca al animal en la tabla de disección, lo sujetamos por las extremidades con
ayuda de unas piolas para facilitar abrirlo.
6. Una vez correctamente ubicado se procede a raspar el área donde se realizara el
corte con el bisturí y después se abrirá con cuidado para evitar cortar los órganos.
7. Luego se observa detenidamente los órganos que se han afectado por la
intoxicación de cloroformo.
8. Seguido se coloca las vísceras afectadas en un balón volumétrico picando lo más
fino posible estas.
9. Luego colocamos NaOH 20%
10. Se arma el equipo de destilación correctamente, abrimos la llave de agua para
empezar el proceso de destilación por 30 minutos.
11. Una vez obtenido el destilado se realizara las respectivas reacciones de
reconocimiento para cloroformo.
12. Culminada la práctica se limpiara y desinfectara el área donde se realizó la práctica
y se dejara los reactivos en el lugar correcto bien cerrados y los materiales
empleados limpios y secos.
Reacciones de reconocimiento:
1. Solución alcohólica:
En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con
otras tantas de alcohol de 95% que contienen un poco de nitrato de plata, se inflama la
mezcla y se observa que esta arde con una llama bordeada de verde y que el ácido

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clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un
precipitado de cloruro de plata.
2. Reacción de Dumas:
Al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos milímetros de
potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3
+ 4KOH --- 3ClK + HCO2K + 2H2O. Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos
proporciones a una proporción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color
rojo en frío o un precipitado en caliente. A la otra proporción se le agrega solución de
nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelven en
amoniaco diluido.
3. Reacción de Lustgarten:
Al calentar la muestra con unos miligramos de beta – naftol y una solución alcohólica
concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de
alcohol), se obtiene un franco color azul. Se sustituye el B-naftol por timol el color es
amarillo más o menos oscuro; con Resorsinol la coloración es roja – violácea y con la
piridina rojo.
4. Reacción de Fujiwara:
En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de legía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de
piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agita, ponemos por unos
instantes en baño de María y se deja en reposos; se convierte en una materia
coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina. Esta reacción sensible
para unos pocos microorganismos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún
sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
5. Reacción de Roseboom:
Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos
miligramos de clorhidrato de piperacina; si el cloroformo está presente en la muestra,
la coloración violeta inicial cambia a amarilla – rojiza al disolverse al alcaloide
6. Reacción de Benedict:
Si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de
acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores que van
desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.

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 GRÁFICOS:
Preparación del
cloroformo
Muerte de la rata Observación de los órganos
afectados por el tóxico
Trituración de las
vísceras
Colocación de la mezcla en el
balón de destilación
Armado del equipo de
destilación
Antes de
administración de
cloroformo
Administración de
cloroformo (10ml)
Disección del animal
con el bisturí
Proceder a la
destilación

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 REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
Solución alcohólica:
Reacción positivo no característico precipitación
Reacción de Dunas:
FeCl3 Reacción positivo característico color rojo
FRIO:
Con AgNO3Reacción positivo característico precipitado
Reacción de Lustgarten:
Reacción positivo no característico cambio de color

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Reacción de Fujiwara:
Reacción positivo característico cambio de color
Reacción de Roseboom:
Reacción positivo característico precipitado
Reacción de Benedict:
Reacción positivo no característico precipitado
 OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar Cloroformo (10ml) por vía intraperitoneal la
rata, se presentaron las siguientes manifestaciones:
Vomito, cefalea, vértigo, nauseas.
Deceso: en 30minutos

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 CONCLUSIONES
En la práctica nos observamos las manifestaciones que presento la rata de wistar ante
la administración del toxico; presentando depresión del SNC, perdida de la movilidad
motora, hipoxia, el cual duro 30minutos hasta su deceso. A través de las reacciones de
reconocimientos identificamos la presencia del toxico como es en este caso el
cloroformo en el animal.
 RECOMENDACIONES
 limpiar los materiales y el área de trabajo
 seguir las normas de bioseguridad al momento de manipular los reactivos.
 Al momento de administrar la dosis realizarlo en la vía correcta, para evitar de
esta manera provocar embolias.
 Al finalizar práctica desinfectar en área en donde se realizo la practica.
 CUESTIONARIO:
¿Cuáles son las principales características del cloroformo?
El cloroformo es un líquido incoloro, dulcemente perfumado, que es más conocido por
su uso histórico como anestésico, aunque desde entonces ha sido abandonado debido
a preocupaciones sobre su seguridad. Hoy en día, el cloroformo se usa en una variedad
de procesos industriales, incluyendo la fabricación de productos químicos,
refrigerantes y disolventes. Se produce mediante la reacción de cloro con etanol y si
bien es relativamente estable, también es tóxico y debe ser manejado con cuidado. La
exposición excesiva a cloroformo puede causar daños a largo plazo para la salud de
varios órganos importantes.
¿Cuáles son los usos del cloroformo?
Comercialmente conocido como cloroformo, es empleado en la industria para la
limpieza como desengrasante de metales, en el decapado industrial de pintura, la
fabricación de productos farmacéuticos, procesado textil y en la industria de proceso
químico.
¿Qué produce la exposición del cloroformo?
La exposición a cloroformo puede ocurrir al respirar aire contaminado o al tomar agua
contaminada o al tocar sustancias que lo contienen. Respirar cloroformo puede causar
mareo, fatiga y dolores de cabeza. Respirar o ingerir cloroformo por períodos largos
puede causar daño al hígado y a los riñones. El cloroformo puede causar ulceración de
la piel si hay contacto con grandes cantidades.

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¿Aplicaciones del cloroformo?
Usado como reactivo relajante por los lípidos orgánicos, el triclorometano es usado
para dormir. El cloroformo es un reactivo químico útil debido a la polarización de sus
enlaces C−Cl, por lo que es una herramienta apreciada en síntesis orgánica, al
proporcionar el grupo CCl2. Además, debido a que es usualmente estable y miscible
con la mayoría de los compuestos orgánicos lipídicos y saponificables, es comúnmente
utilizado como solvente. Es también utilizado en biología molecular para varios
procesos, como la extracción de ADN de lisados celulares. Asimismo, es usado en el
proceso de fijación de muestras histológicas post mortem.
¿Cuáles son las Fuentes de exposición del cloroformo?
Está disponible como disolvente en laboratorio y en la industria farmacéutica. Se ha
prohibido su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos
como resultado de su efecto cancerígeno en animales después de exposiciones
crónicas, la intoxicación aguda y crónica.
GLOSARIO:
Triclorometano.-El triclorometano, también conocido como cloroformo, es un líquido
claro, volátil, no inflamable y con un olor característico. Se evapora muy rápidamente y
posee una solubilidad en el agua escasa, aunque es miscible con la mayoría de los
disolventes orgánicos.
Hepatotoxicidad.- también llamada enfermedad hepática tóxica inducida por drogas
implica daño —sea funcional o anatómico— del hígado inducido por ingestión de
compuestos químicos u orgánicos. El hígado está especialmente expuesto a toxicidad
por razón de su función en la biotransformación, metabolismo y eliminación de
agentes potencialmente tóxicos.
Toxicocinética.- Se define a la toxicocinética como el conjunto de fenómenos que
experimenta el tóxico desde su entrada a un organismo hasta su eliminación.
Fosgeno.- Es un importante componente químico industrial utilizado para hacer
plásticos y pesticidas. A temperatura ambiente (70 °F / 21 °C), el fosgeno es
un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de fosgeno puede ser convertido
en líquido, de forma que pueda ser transportado y almacenado.
Ictericia.- Coloración amarillenta de la piel y las mucosas que se produce por un
aumento de bilirrubina en la sangre como resultado de ciertos trastornos hepáticos.
 BIBLIOGRAFIA:
Baeder, C. y Hofmann, T. Chloroform: Supplementary inhalation embryotoxicity study
in Wistar rats.1991. (consultado el 25 de junio del 2014). Disponible: en:
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/TextosOnline/Valores_Li
mite/Doc_Toxicologica/FicherosSerie2/DLEP%2026.pdf

9. “TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
Komorniski E.; Calistro S. Hospital General De Agudos Juan Fernandez.Intoicacion con
Cloroformo. 2010.(consultado el 25 de junio del 2014). Disponible:
file:///C:/Users/Usuario/Downloads/cloroformo.pdf
Autoría
Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Machala, 22 de junio del 2015
FIRMAS DE RESPONSABILIDAD:
Jeanneth Ochoa ______________________

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ANEXOS
Animal en el cual se experimentó (rata wistar)
Datos de la práctica realizada
Cloroformo
El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente
anestésico, pero poco después se abandonó este uso por su gran toxicidad hepática y
renal. Es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente
volátil y muy liposoluble.
Fuentes de exposición
Está disponible como disolvente en laboratorios y en la industria química. Se ha
prohibido su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos
como resultado de su efecto carcinogénico en animales después de exposiciones
crónicas. La intoxicación aguda y crónica puede ocurrir por exposición a sus vapores.

11. “TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
Toxicocinética y mecanismo de acción
El cloroformo es un anestésico potente y origina una profunda depresión del SNC.
Entra en el organismo por vía respiratoria, digestiva o dérmica. En humanos puede
producir la muerte con la ingestión oral de tan solo 10 ml. Exposiciones prolongadas o
repetidas a los vapores pueden producir hepatotoxicidad, severa que se caracteriza
por necrosis centrolobular. Asimismo se ha descrito degeneración grasa del hígado, el
riñón y el corazón. El mecanismo de lesión parece ser la oxidación a nivel hepático del
cloroformo a fosgeno a través del sistema microsomal P450. También se forma fosgeno
cuando los vapores de cloroformo se exponen al calor de una llama. El fosgeno
inhalado se convierte en ácido hidroclorhídrico y dióxido de carbono cuando reacciona
con el agua en el alveolo; y el ácido produce edema pulmonar.
Cuadro clínico
La severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestiva o
dérmica, está en relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se
inhala, produce todos los niveles de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy
estrecho, debido a que causa fallo cardíaco y respiratorio de forma casi simultanea. No
puede detectarse por el olfato hasta que su concentración excede de 400 ppm. Una
exposición durante 10 minutos a concentraciones de 1000 ppm produce síntomas
generales como nauseas, vómitos, vértigo y cefaleas. Exposiciones a una concentración
de 1000 a 4000 ppm originan desorientación y concentraciones de 10000 a 20000 ppm
dan lugar a pérdida de conciencia, pudiendo originar la muerte.
Dependiendo de la dosis absorbida va a producir alteraciones más o menos
importantes de la función hepática, renal y cardíaca.
El cloroformo, por su acusado poder como disolvente de grasas, en contacto con la piel
da lugar a dermatitis local, y en los ojos produce irritación corneal .
Diagnóstico
El diagnóstico se basa fundamentalmente en la historia clínica. La analítica de función
hepática puede ser normal en exposiciones crónicas, sin embargo, suele estar alterada
en las intoxicaciones agudas. En estos casos también puede ser evidente la ictericia
que aparece a los 2-3 días de la exposición.
Tratamiento
El tratamiento es principalmente de soporte. La primera maniobra, llevada a cabo en el
lugar de la exposición es retirar a la víctima del área contaminada y llevarla a una zona
bien ventilada. En cuanto sea posible, se administra oxígeno suplementario, y si es
necesario, por coma o por insuficiencia respiratoria, se procede a intubación y
conexión a ventilación mecánica. Debe prestarse especial atención al compromiso de
la función hepática y renal, y a la aparición de arritmias cardíacas.