O documento descreve uma pesquisa sobre a resistência aos carbapenemas em isolados de Acinetobacter spp. na China. Foram encontrados 7 isolados resistentes aos carbapenemas portando o gene NDM. Três isolados eram A. nosocomialis e 4 eram A. pittii. Análises mostraram que o gene NDM estava presente em um plasmídeo conjugativo de aproximadamente 120kb.

1. LAPIH – Laboratório
de Pesquisa em
Infecção Hospitalar
Ivson Cassiano de Oliveira Santos
Rio, 2014
Artigo
científico
Eur JClin Microbiol Infect Dis
DOI 10.1007/s10096-013-2024-4

2. Introdução – Acinetobacter spp.
Acinetobacter spp.Acinetobacter spp. Diversidade (solo, na água, em vegetais e
em hospedeiros animais e humanos).
Ambiente hospitalarAmbiente hospitalar 1970 - Relato das primeiras
infecções por Acinetobacter spp.
Infecções oportunistasInfecções oportunistas
causadas pelocausadas pelo
complexocomplexo
AcinetobacterAcinetobacter
baumannii-baumannii-
calcoaceticoscalcoaceticos
80%das novas infecções clínicas.
Complexo composto pelas espécies
A.calcoacetitus; A. pittii; A.
nosocomialis; A. baumannii
Acinetobacter baumanniiAcinetobacter baumannii

3. Introdução – Infecções por Acinetobacter spp.
Wisplinghoff H, et al, 2012
A. baumannii
A. nosocomialis
A. pittii
Hospitalar Comunidade
Pneumonia Pneumonia
Bacteremia
Queimados e
ferida
Trato urinário
Meningite
Sítio de infecção por A. baumannii
A. pittii e A. nosocomialis infecções nosocomiais e da comunidade.

4. Introdução – Resistência em Acinetobacter spp.
Bactérias
produtoras de beta-
lactamases de
espectro estendido
Carbapenemas
es
Carbapenemas
Polimixina
Tigeciclina
Taxas de resistência aos carbapenemas
na América Latina (SENTRY, 2012).
(GALES et al., 2012)

5. Classificação de Ambler (Sequencia de aminoácidos)
Introdução – Mecanismo de resistência
(MANCHANDA, V. et al, 2010)

6. Introdução – Mecanismo de resistência
Tab.: Distribuição de carbapenemases em Gram-negativos.
+++ Elevada prevalência (>10%)
++ Moderada prevalência (1-10%)
+ Baixa prevalência
+/ - Casos isolados
(WASH, 2010)

7. OBJETIVO
- Pesquisar o mecanismo de resistência aos
carbapenemas em isolados negativos para OXA-
51.
- Pesquisar o mecanismo de resistência aos
carbapenemas em não-baumannii.
- Avaliar a disseminação destes isolados
- Caracterizar o plasmídio carreador da
resistência.

8. Metodologia e resultados
Outubro de 2010 a março de 2013
15 hospitais da China
1.067 isolados do complexo
Vitek Cartão para GN PCR bla
OXA-51
136 isolados negativos p. OXA-51
R aos carbapenemas 10 resistentes
Detecção genotipa de
carbapenemases - PCR
MALDI-TOF

9. 7 positivos para NDM
ITS do gene 16S-23S Sequenciamento do rpoB
3 A. nosocomialis
4 A. pittii
Metodologia e resultados

10. Resultados e discussão

11. Metodologia e resultados

12. Metodologia e resultados

13. Metodologia e resultados

14. Metodologia e resultados
Three novel MLST profiles were found in the
present study with the MLST profiles (25-55-25-
new allele-37-20-55) in clone A. While MLST
profiles for clones B and C were completely
different from previously reported profiles, none
of the seven alleles were entirely consistent with
known sequences described up to now.

15. Metodologia e resultados
A. nosocomialis An1 – ISAba1-OXA-23 Beta-lactamases adiconais não
Foram encontradas.
KPC, VIM, IMP, OXA-24,OXA-58,
CTX-M, TEM, SHV, PER, VEB,
AMPC

16. Metodologia e resultados
Conjugação

18. 120 kb
50 kb
Clone AClone BClone C
<20 kb

19. Metodologia e resultados
Análise do contexto genético da NDM (3.760pb) mostrou:
aphA6 ISAba125 NDM bleo trpF
(GenBank accession number JQ080305.1)

20. Metodologia e resultados
Análise do contexto genético da NDM (3.760pb) mostrou:
aphA6 ISAba125 NDM bleo trpF
(GenBank accession number JQ080305.1)
Aminoglycoside
phosphotransferase
(APH)
Transposase
R a bleomicina
Carbapenemase
isomerase phosphoribosyl
anthranilate

21. Discussão
MBLs – NDM.
India – 2009

22. Discussão
India – 2009
MBLs – NDM.
India – 2009

23. Discussão
Klebisiella pneumonia
Providencia rettgeri
Outras Enterobacter
E. coli
P. aeruginosa
A baumannii
k. oxytoca
Salmonella
Vibrio cholerae
Raoultella ornithinolytica
Citrobacter freundii

24. Discussão
Klebisiella pneumonia
Providencia rettgeri
Outras Enterobacter
E. coli
P. aeruginosa
A baumannii
k. oxytoca
Salmonella
Vibrio cholerae
Raoultella ornithinolytica
Citrobacter freundii
PRESSÃO SELETIVA – DISSEMINAÇÃO - ADAPTAÇÃO

25. Discussão
aphA6 ISAba125 NDM bleo trpF
A. haemolyticus
Principal responsavel pela disseminação
Intra e inter espécies.
Fácil disseminação
Mobilidade - Tn
instabilidade

26. Discussão
aphA6 ISAba125 NDM bleo trpF
Disseminação de NDM em A. baumannii parece ser devido a
diferentes cepas transportando Tn125 ou derivados de Tn125 em vez
de mediada por plasmídeo ou clonal – na Europa ( Bonnin et al , 2013;
Poirel et al , 2012a ).

27. Discussão

28. ● O envolvimento de isolados não-baumannii mostra o potencial de disseminação
plasmidial da NDM.
● Em espécies não-baumannii este plasmídio tem se mostrado instavél e de dificil
caracterização.
● Potencial risco do fenotipo de resistência aos beta-lactamicos em isolados
nosocomiais e ambientais.
● Dificil identificação no Acinetobacter spp. pela produção de carbapenemases de
classe D e possível reservatorios para disseminação do gene.
● Fatores de risco incluem idade avançada, UTI, tratamento prévio com um beta-
lactamico. Principal sítio tem sido o trato respiratório.
● Disseminação de NDM implica em 2 possíbilidades:
1 – Transmissão entre os pacientes da UTI.
2 – Pacientes assintomaticos carreando NDM.
Conclussão

29. Obrigado!