Uso de la proteína anti apoptótica Bcl-xL para la alteración de la apoptosis de células diana
1. USO DE LA PROTEÍNA
ANTI-APOPTÓTICA
BCL-XL PARA LA
ALTERACIÓN DE LA
APOPTOSIS DE
CÉLULAS DIANA
2. •El objetivo del presente estudio es evaluar la
eficacia anti-apoptótica de Bcl-xL expresando
sistema de plásmido promotor dual como un
candidato para ser utilizado para la
producción de proteína recombinante y los
enfoques de vacunación con ADN.
3. • Bcl-xL gen de la proteína anti-apoptótica se insertó
en un sistema de vector de expresión de doble de la
línea celular BHK-21 en el marco con IRES (sitio
ribosómico interno) y después con EGFP (proteína
de fluorescencia verde mejorada).
• El plásmido CMV (promotor del citomegalovirus)
tiene un sitio de clonación múltiple que después de
deja vacío para ser insertado un gen de la proteína
biofarmacéutica o antígenos de la vacuna de ADN.
• Células BHK-21 fueron transfectadas tanto como con
el vector plásmido como con el vacío como control.
4. • Más de expresión de proteínas anti-apoptóticas en la
producción de proteínas biofarmacéuticas utilizando células
animales como anfitrión aumenta los rendimientos, así como
mejora la respuesta inmune del huésped contra provocó el
antígeno de la vacuna en la vacunación de ADN.
• Además, Bcl-xL sobre la expresión eficiente inhibe la muerte
celular neuronal, protege el tejido de la isquemia cardiaca,
inhibe la muerte de células dendríticas en el melanoma y
también inhibe la muerte celular de linfocitos en el SARS.
5. • La apoptosis fue estimulada por varios agentes inductores de
apoptosis y la privación de suero en las células transfectadas
durante 48 horas. Las células que expresan la proteína Bcl-xL en
marco con EGFP se determinaron por citometría de flujo como un
indicador de la viabilidad celular.
• Las células fueron tratadas con doxorubicina (inhibe la replicación
de ADN y ARN) en la que las eficacias anti-apoptóticos se inhiben.
• En conclusión, se demostró que en la expresión transitoria in vitro
de Bcl-xL inhibe eficientemente la apoptosis inducida por privación
de suero, la doxorrubicina. Por lo tanto, la expresión proteína de
plásmido de doble cojinete de Bcl-xL anti-apoptóticos podría ser
un buen candidato para la producción de proteínas recombinantes
y aplicaciones de vacunación de ADN.