Budapest Science Meetup: 2013. február

1. Idegsejtpótlás
őssejtekkel?
Markó Károly
MTA Kísérleti Orvostudományi Kutatóintézet
Budapest Science Meetup
2013. 02. 14.

2. John Gurdon
nukleáris transzfer
békában (1958-)
Shinya Yamanaka
Indukált pluripotens
őssejtek (iPS)(2006-)
Embrionális őssejtek
(James Thomson, 1998-)
nukleáris transzfer emlősben (Ian Wilmut,
Keith Campbell; Dolly, 1996)

3. 1990-es évek vége
gyrus dentatus
bulbus olfactorius
és a rostralis
migrációs ösvény
napjainkban gyrus dentatus
striatum
bulbus olfactorius
és a rostralis
migrációs ösvény
piriform kéreg
tuberculum
olfactorium
amygdala
hypothalamus substantia
nigra nucleus vagus
Elizabeth Gould
Nature Reviews Neuroscience 8, 481-488 (June 2007)
1990 előtt
Felnőttkori neurogenezis

4. - Parkinson-kór (PD)
- Huntington-kór (HD)
- Batten-kór (neuronális ceroid lipofuscinosis)
- amiotrofikus laterális szklerózis (ALS)
- Alzheimer-kór (AD)
- ischémiás stroke
- gerincvelői sérülés (SCI)
O Lindvall, Z Kokaia (2010),
J. Clin. Invest. 120:29-40

5. - Parkinson-kór (PD)
- Huntington-kór (HD)
- Batten-kór (neuronális ceroid lipofuscinosis)
- amiotrofikus laterális szklerózis (ALS)
- Alzheimer-kór (AD)
- ischémiás stroke
- gerincvelői sérülés (SCI)
S Gögel et al, (2010), Gene Ther. 18, 1-6

6. - Parkinson-kór (PD)
- Huntington-kór (HD)
- Batten-kór (neuronális ceroid lipofuscinosis)
- amiotrofikus laterális szklerózis (ALS)
- Alzheimer-kór (AD)
- ischémiás stroke
- gerincvelői sérülés (SCI)

7. - Parkinson-kór (PD)
- Huntington-kór (HD)
- Batten-kór (neuronális ceroid lipofuscinosis)
- amiotrofikus laterális szklerózis (ALS)
- Alzheimer-kór (AD)
- ischémiás stroke
- gerincvelői sérülés (SCI)
O Lindvall, Z Kokaia (2010),
J. Clin. Invest. 120:29-40

8. - Parkinson-kór (PD)
- Huntington-kór (HD)
- Batten-kór (neuronális ceroid lipofuscinosis)
- amiotrofikus laterális szklerózis (ALS)
- Alzheimer-kór (AD)
- ischémiás stroke
- gerincvelői sérülés (SCI)
O Lindvall, Z Kokaia (2010),
J. Clin. Invest. 120:29-40

9. - Parkinson-kór (PD)
- Huntington-kór (HD)
- Batten-kór (neuronális ceroid lipofuscinosis)
- amiotrofikus laterális szklerózis (ALS)
- Alzheimer-kór (AD)
- ischémiás stroke
- gerincvelői sérülés (SCI)
O Lindvall, Z Kokaia (2010),
J. Clin. Invest. 120:29-40

10. - Parkinson-kór (PD)
- Huntington-kór (HD)
- Batten-kór (neuronális ceroid lipofuscinosis)
- amiotrofikus laterális szklerózis (ALS)
- Alzheimer-kór (AD)
- ischémiás stroke
- gerincvelői sérülés (SCI)
O Lindvall, Z Kokaia (2010),
J. Clin. Invest. 120:29-40

11. tenyésztés, expanzió
differenciáltatás
tisztítás
transzplantáció
- tisztaság
- immunológiai státus
- homogenitás
- megfelelő sejtszám
- megfelelő fenotípus
- megfelelő differenciációs potenciál

12. Primer neurális tenyészet (E15,5)
8. nap PLL-en8. nap AK-cyclo(RGDfC)-n
AK-cyclo(RGDfC)
NH
N
H
NH
H2N
N
H
O
OH
NH
HN
O
HS
HN
O
O
O
O
Markó et al., Bioconj Chem 2008
- RGD szekvencia: univerzális adhéziós motívum
- ciklikus RGD-pentapeptidek: az αvβ3/αvβ5
integrinek specifikus ligandumai
3. passzázs AK-cyclo(RGDfC)-n
Idegi őssejtek tenyésztési lehetőségei in vitro

13. Blbp
Pax6
RGl-1 - +
Glast
Sox2
Gfap
Math2
Nanog
Oct4
Olig2
0
0.05
0.1
0.15
0.2
cont r ol EG F AG 1478 EG F+AG 1478
kontrol EGF AG1478 EGF+
AG1478
Életképesség [MTTOD]
Nestin
Nestin
Sox2
RC2
2n=40
DMEM/F12/B27 + EGF (!)
GFAP
Pax6
Markó et al., PLoS One 2011

14. bIII-tubulin DAPI
- EGF
6. nap
GFAP DAPI
+ FCS
3. nap
O4 DAPI
+ FGF, PDGF, forskolin
+ aszkorbinsav, T3
4+4 nap
N-cadherin DAPI
+ FCS; - FCS
3+6 nap
GABA VGAT
VGlut2
Vglut2
Vgat
RGdN - +
Vglut1
Pitx3
Dbh
Tph2
Chat
TH
TH

15. Mash1Ngn2Allen Brain Atlas
SVZ
HC
E15
P62
CTX
MES
0
5
10
15
20
25
30
dors ventr HC CTX MID SVZ
E14,5 Adult
% oligodendrocita/
összes sejt
dors ventr
E14.5 Adult
HC CTX MID SVZ
% neuron/
össz sejt
0
5
10
15
20
HC SVZ Mid Ctx
Markó et al., PLoS One 2011

16. Köszönöm a figyelmet!