tablas con caracteristicas de composicion y reaccion de diferentes tipos bacterianos

1. B/ood Agar Base No. 2
BASE DE AGAR SANGRE N.2
Código CM271
FORMULA
Peptona protaoss en gramos por litro 15.0
Digerido de hfg.do 2,5
Extracto de levadura 5,0
Cloruro de sodio 5,0
Ag.r 12,0
pH 7,4 (aprox. I
INSTRUCCIONES
Se suspenden 40 gramos en 1 litro de agua destilada y se hierve hasta disolver
el medio por completo. Se esteriliza en el autoclave fr 121°C durante 15
minutos. Se enfria a 45-50 o C y se añade 7% de sangre estéril.
Se mezcla con agitación suave y se vierte en placas de Petri (12 mi para una
place de 9 cml u otros recipientes, LA RECONSTITUCIO"J y LA ME2CLA SE
DEBE DESARROLLAR EN UN MATRAZ QUE TENGA AL MENOS 2 Y,
VECES EL VOLUMEN DEL MEDIO PARA ASEGURAR UNA AIREACION
ADECUADA DE LA SANGRE,
DESCRIPGION
La Base de Agar Sangre Oxoid NQ 2 se desarrolló para corresponder a la
demanda de una base de agar sangre con calidades nutritivas especiales que
permitiera la máxima recuperación de organismos delicados sin influir en sus
reacciones hemoHticas. En comparación con el agar de digerido recién
preparado, la base de Agar Sangre NO 2 puede mostrar unas propiedades
estimuladoras del crecimiento iguales o superiores y las bacterias
cromogénicas crecidas sobre el medio de Oxoid muestran una formación de
pigmento superior. La comparación con otros muchos agares sangre ha
mostrado que, con la Base de Agar Sangre Oxoid N9 2 se mejora, en forma
considerable, el crecimiento de muchas bacterias, especialmente los
estreptococos exigentes y neumococos, como se muestra por el desarrollo
exuberante y precoz de las colonias.
El medio, con agentes nutritivos y selectivos añadidos, es especialmente
adecuado para el aislamiento de especies de Mycoplasma (PPLO): se añaden
40 g de polvo de Base de Agar Sangre NQ 2, 5 g de dextrosa y 0,125 g de
acetato de talio o sulfato de talio a 1 litro de agua destilnda y se hierve hasta
disolver. Se mezcla y se vierte en placas con gran espe~or. Se inoculan y se
incuban las placas durante 5 6 6 dfas a 37°C bajo condiciones aeróbicas y
anaeróbicas respectivamente.
Para el aislamiento primario de las especies de Haemophilus a partir de
muestras que contengan una flora mixta, se utiliza la BQse de Agar Sangre
N 92 con Sangre de Caballo Desfibrinada SR50. Se pueden obtener, incluso,
mejores resultados utilizando placas de agar sangre de caba!lo p.xtendiendo en
la mitad de cada placa dos gotas de saponina al 10% (Waterworth, 19551.
39

2. Cuando las ruacciones hemoliticas no sean importan tes , p .e., cua nd o se trate
de cu ltivos puros, se puede utilizar la Base para preparar Agar ' Chocolate': Se
añade 10% de Sangre de Caba llo Desfihrinada SR50 a léI Base a 80° C y se
mantiene a esta tempe ratu ra dUI·ante 5 6 10 minutos, agitándola
frecuentemente. Se enfría a 50°C, se mezcla bien y se vierte en placas.
REFERENCIA
1. Waterworth, Pamela M. 11955) 8rit. J. Exp . Path. 313(2), 186-194 .
Bordetella Selective Supplement
SUPLEMENTO SELECTIVO PARA IlORI)F.TELLA
Código SR82
Se trata de cefalGxini'l li ofil izada, parg añadir al Agar de Carbón Vegetal
(Charcoal Agar) CMl19 o al Agar de BOI"d ut-·Gengou (Bord et-Gengou AgarJ
CM267 para el aislamiento selectivo de Sordetell8 pertussis.
FORMULA (por vial)
Cefalexina 20 mg
Equivalente a 40 mg de ce"1alexina por litro de medio.
INSTRUCCIONES
Agar de Carbón Vegeta l
Se añaden 2 mi de Jgud destilada estéril a un vial, disolviéndose el contenido
por completo. Se añade esta soluc ión a 500 mI de Agar de Carbón Vegeta l
CM1 19 estéril, fundid o y enfriado ó 50° C. adicionado de sangre de ca ball o
desfibrinado SR50 al 10% v/ v. Se mezcla bien y se vie rte en placas de petri
es tériles.
Agar de Bord et -Gengou
El contenido de un vial rehidrótado puede añadirse igualmente a 500 m i de
Agar de Bordet-Gengou CM267 e;¡friarlo a 5f)° C, a los que se hallan añadido
75- 100 mi de sangre de caballo desfibrinada SR50 estéril.
Las placas con cefal8xina pueden almacenurse durante 1 semana a 4° C.
M edio de Transporte para B. pertussis
Puede añadirse el contenid o - e un vial a 500 .:r,1de Agar de Carbón Vegetal de
J
mitad de concentración + 10 % v/ v dE' sang re de ca ba ll o desfibrinada SR50
para utilizarse corno medio de tran!)porte para B. pf:rtussis.
DESCRIPCION
El Agar de Bordet·G8ngou Crl1267 con sangre de caballo desfibrinada estéri l o
el Agar de Carbón Vegetal CM1 19 co n sargre pueden utilizarse para el
aislam iento de B. pertussis.
40

3. Davis y cols. (1971) sugirieron los siguientes "':!cuentos bacterianos para
valorar la calidad de los yogures en el momento de su venta .
Satisfactorio DudoBO Insatisfactorio
Strept. thermophilus >1(1' lo' - lc1 <lo'
Lact. bulgadcus > 10' 10' - 10' <lo'
REFERENCIAS
1. Davis, J. G., Ashton, T . F. Y McCaskill, M ., (1971) , Enumeration ' and 'viabiliW 1)1 L. bulgaricus
a"d Srr. thermophilus in yog~ur(s, Cai,":, Ind. 36, 569 - 573.
2. $tocklin, P., (1969) , Production and handling 01 yoghurt on a commercial seal!, Cultured Dairy
Prad. J., 4, (3), 6-10.
3. Pette, J . W . y Lolkema, H., (1950), Yoghurt 111. Zuurvc.rminfl en aramovorming in yoghurt,
Nerh. MJ7k Dalfy .1., 4,261 - 273.
4. $el1ars, A. lo y Babet, F. J., (1970), Culture~ l or th e manufacture 01 daifY products. ehr.
Hansen's Laboratory, Ine., MilwaukdEl, Wis.
5. Sharp8, M. E. Y Fryflr, T . F., (1965), Madiü lor Lactic Adcf Btctaria, Laboratory Practice, 14,
497 - 701 .
6. Eloy, C. Y., Lacrosse. A. (1976) Bull. Rech. Agron. Gembloux 11, (1·2) , 83-86.
L ysine /ron Agar
AGAR DE LlSINA y HIERRO
Código CM381
FORMULA
Peptona bacteriológica en gramos por litro 5,0
Extracto de levadura 3.0
Dextrosa 1.0
L·Usina 10.0
Citrato férrico amónico 0.5
Tiosulfato de sodio O.O<!
Púrpura de bromocresol 0.02
Agar 14.5
pH ~.7 (aprox.1
INSTRUCCIONES
Se suspenden 34 gramos en 1 litro de agua destilada y se hierve has~a disolver
el medio por completo. Se distribuye en tubos y se esteriliza en el autoclave a
121 °C durante 15 minutos. Los tubos se cnfrfan en p.Jsici6n inclinada para
formar pendientes con fondos profundos.
DESCRIPCION
Edwards y Fife (1961) describieron la fe;rmulaci6n y el u~o d'3l Agar de Lisina y
Hierro para detectar organismos del grupo Arizona que pudieran fermentar
142

4. rápidamente la lactosa, Estas cepas producen colonias rojas o rosas sobre
Agar de MacConkey o Agar de Desoxicolato y Citrato y colonias amarillas
sobre Agar de Verde Brillante. En el examen normal para los patógenos
entéricos, estos organismos pasarían desapercibidos. Además, muchos de
estos cultivos, cuando se transfieren a tubos de Agar tie Tres Azúcares y
Hierro (T.S.I,), producen condiciones ácidas en el medio tan rápidamente que
se suprime le! reacción positiva esperada para el sulfhídrico. Puesto que los
tipos de Arizona que fermentan rápidamen te la lactosa se encuentran
ocasionalmente en brotes de infección alimenticia, es importante determinar
su incidencia .
Los únicos grupos reconocidos de entero bacterias que regularmente
decarboxilan la lisina de forma rápida y que producen grandes cantidades de
sulfhídric o, son miembros de los grupos de salmonela y Arizona (Moeller 1954
y Ewin, Davis y Edwards , 1960).
Por consiguiente, el Agar de Lisina y Hierro es un medio sensible para
detectar, ta nto organismos de salmonela como Arizona. El medio se
distribuye en tubos, ~e esteriliza y se deja solidifi car en forma inclinada con
una pendiente corta y un fondo profundo . Se inocula con una aguja recta
pinchando hasta la base del fondo y sembrando en estría la superficie de la
pendiente. Los tapones de los tubos se deben colocar en forma floja para que
prevalezcan las condiciones aeróbicas sobre la pendiente.
Se incuba a 37°C durante 18-24 horas .
Los cultivos que producen rápidamente una lisina decarboxilasa originan
una rea cc ion alcalina (color púrpura ) en tod o el medio. Los organismos que no
decarboxilan la lisina producen una pendiente alcalina y un fonda ácido (color
ama rillo ).
Los cultivos que producen sulfhídrico originan un ennegrecimient o intenso
en el medio:
Debido a la desaminación de la lisi na , los cultivos de Proteus y Providencia
producen una pendiente roja sobre un fondo ácido.
REACCIONES
Cultivos Pendiente Fondo SH,
A rizona Alcalina Alcali no +
Salmonella Alcalina Alcalino +
Proteus Roja Acido
Providencia Roja Acido
Citrobacter Alcalina Acido +
Escherichia Alcalina Acido o neutro
Shigella Alcalina Acido
Klebsiella Alcalina Alcalino
Thatcher y Clark (1968) describieron un procedimien to para el aislamien to
de salm : melas a partir de alimentos en los que se purificaban las colonias
sospechosas a partir de placas con agar selectivo y, después, se inoculaban en
Agar de Lisina con Hierro y en Agar de Tres Azúcares con Hierro. Utilizando
esta combina ción de medios, se puede hacer una mayor discriminación entre
143

5. los organismos coliformes, p.e., Escherichia y Shigel/a.
Timms (1971) describió las técnicas de aislamiento e identificación de
infección por Arizona en pavos, utilizando Agar,de Usina con Hierro.
REFERENCIAS
1. Edwards, P. A. Y Fife, Mary A. (1961) 'Lysj~u-lron Agar in the dete~t'ion of Arizona cultures'
Appl. Microbio/. 9. 478 _ 400. f • I ,
2. Ewing, W. H., Devis, B. A. Y Edward5, P. R. (19601 'Tlls decalboxylose reactions of
Enterobacteriaceae and their value in t. xonomy' Pub. Hllh. I .abs. 18. n - 83.
1
3. Moeller, V. (19541 'Oistribution of emino·acid decarboxylase, in Enterobacteriaceae' Acta.
Pathol. Microbio/. Scend. 35, 259 - 2n.
4. Thatcher, F. S. y Clark, D. S . (19681 'Micro-organisms in Foo:l' University of Toronto Press, p.
100.
5. Timms, l. (1971) 'Arizona Infection in Turkays in Grest BlitAin Med. Lab. Techn. 28, 150 - 156.
Lysine Medium
MEDIO DE LISINA
Código CM/9/
FORMULA
Dextrosa en gramos por litro 44.5
Fosfato monopotásico 1.78
Sulfato de magnesio 0.89
Cloruro de calcio fundido 0.178
Cloruro de sodio 0.089
Ad&nina I ,0.00178
OL-Metionina " ,
,
0.000891
L-Histidina 0.000891
DL Tript6fano 0.000891
Acido bórico ,0.1lOOOOa9
Sulfato de cinc 0.0000366
Molibdato amónico 0.0000178
Sulfato de manganeso 0.0000366
Sulfato ferroso G.OOO2226
Lisina 1.0
Inositol 0.02
Pantotenato de calcio 0.()(¡2
Aneurina 0.0004
Piridoxina " 0.0004
Acido p-'a minob'!nzoico 0.0002
Acido nicotfnicd 0.0004
Riboflavina 0.0002
Biotina 0.000002
Acido fólico 0.000001
Agar 17.8
INSTRUCCIONES
Se suspenden 6,~ gramos en 100 mi. de agua destila da qu e conte:1ga 1,0 mi de
L~ctato de PotasIo al 50 % l Potasslurn Lactate 50%) SR3,. Se hierve hasta
dIsolver el medio por completo . Se agita cún frecuencia para impedir el
144

6. sobrecalentamiento. Se enfría a 5Q°C y se añade 0,1 mi de Acido Láctico al
10% (Laetie Aeid 10%) SR21 para ajustar el pH a 5.0 (aprox.). Se distribuye
en placas de Petri y se elimina la humedad de la superficie secándolas a 37°C.
DESCRIPCION
Se trata de un medio complejo, descrito originalmente por Morris y Eddy
(1957) para el aislamiento y enumeración de levaduras salvajes en la masa de
levadura de cebada. Walters y Thiselton (1953) examinaron 180 especies de
levaduras en un medio líquido sintético que contenía lisina como única fuente
de nitrógeno. Encontraron que ninguna cepa normal de cerev;s;ae o
carlsbergens;s utilizaba la lisina mientras que otras muchas levaduras,
incluyendo levaduras salvajes, sí la utilizaban . Mantuvieron sus cultivos
'stock' sobre pendient.es de aQar de extracto de malta o en agar ce extracto de
malta tiza·en el caso de especIes de Brettanomyces. Posteriormente, Morris y
Eddy (1957) describieron un medio de lisina sólido pa ra el aislamiento y
enumeración de las levaduras salvajes en la masa de levadura de cebada. El
Agar de Lisina Oxoid se fabrica de acuerdo con su fórmula.
TECNICA
Se lava y centrifuga la muestra de masa de levadura de ccbada tres veces con
agua destilada. Se quitan 0,2 mi de la suspensión que con tenga
aproximadamente 107 células por mi y se extiende con un asa de platino
curvada sobre la superficie de una placa de Medio de Lisina. Se incuba a 25°C
y se examina diariamente para observar el crecimiento. Se recuenta el número
de colonias que se desarrollan y se expresa el grado de conté:lminación como el
número de células salvajes por millón de células del inóculo original. El número
de células en el in6culo es importante, ya que Morris y Eddy han demostrado
que un número escaso de células (aproximadamente de 100 a lCXX>l son
todavía capaces de crecer hasta cierto punto sobre el medio. Cuando el
número de células de levadura de la fermentación sobrepase
aproximadamente 10.000, un re cuento de las colonias en desarrollo
proporciona una medida directa de la contami na ción por levaduras salvajes.
REFERENCIAS
,. Morris, E. O. y Eddy, A . A. (19571 'Method f or ¡he Measurement of Wild Veas! Infeclion in
Pitching Yeast J. Inst. Brew. 63(1), 34 - 35.
2. Walters, L. S. V Th iselton, M. A. 0953) J Inst. Brew. 59, 401.
MacConkey Agar
AGAR DE MACCONKEY
CÓdigo - Polvo CM7
Tabletas CM8
FORMULA
Peptona en gramos por litro 20,0
Lactosa 10.0
Sales biliares 5.0
Cloruro de sodio 5.0
Rojo neutro 0,075
Ag., 12.0
pH 7.4 laprox.1
145

7. INSTRUCCIONES
Polvo: Se suspenden 52 gramos en 1 litro de agua de~ tiiada y se hierve hasta
disolver el medio por completo. Se esteriliza en el autoclave a 121°r:: durante
15 minutos. Antes de la inoculación, se seca la superficie del gElI.
Tabletas: Se añade una tableta a 5 mi Je agua destiléJda y se deja embeber
durante 5 minutos. Se esteril:za en el autoclave a 121 {'C durm~e. 15 minutos.
DESCRIPCION
Se trata de un medio diferencial para la detección, ú,:lamiento y enumeración
de coliformes y patóge nos intestinales en agua, productos lácteos y muestras
biológ icas. El Aga r de MacConke' CM7 c;orn~sponde al medio recomendado
por la Org:mizaci6n r..1'Jndial de la Salud (19631, el Ministerio de Sanidad
británico (1969) y por Windle Taylor (1958) para el examen bacterio lóg ico del
agua.
Este medio, aunque utiliudo r rincipalmente para 'os coliformes, puede ser
utilizado también pa ra la diferenciación de otl·as bacteri~s entéricas
(i ncluyendo patógenos) y es adecuado para la d i f~ren (;i ación de las especies
de Pasteurella (p.e., Hoog endijk , 1962).
TECNICA
Muestras patológicas
Debido a su capacidad para favorecer el crecimier lto de los cocos Gram-
positivos patógenos (p.e., esta filococos y emerococosl, as; como
entero bacterias, el Aga r de Mac Conkey CM7 se recomienda especia lmente
para el cu ltivo de patógenos qUE' puedan estar presentes Rn diversas muestr3s
tales como la orina, heces e hísODos de heridas. Si bien por una parte es
selectivo, por otra no elimina una flan! bacteriana mixta erll a medida en que lo
hacen otros medios inhibidores (incluyendo otros ágares :le MacConkeyl.
Proporciona otras indicaciones diagnósticas aparte de la tolerancia a la bilis,
tales como la morfología de la colonia y la crorno[lé r.esis. El Agar de
MacConkey se debe utilizar en paralelo con ot((S medios indicadores
selectivos tales como el Agélr de Desoxicolato y Citróto, Agar Su lfito de
Bismuto, Agar de Verde Brillante y Caldo de Verde Brillante y Bilis (2%), y un
medio no selectivo como el Agar Sangre.
Análisis de agua IWindle Taylor, 1958) (Ministerio de Sanidild británico.
19691.
Este medio puede usarse para el recuento directo de bacterias coli-ae!'ogenes,
utilizando placas preparadas a partir de volúmenes conocic os de lü muestra de
agua, pero una función más exacta de este medio es la diferencinción de los
organismos productores de ácido ' gas en Caldo de MacConkey a 37°C:
todos los caldos positivos se siembran en Agar de Ma cConkey, incubándose
las placas durante 24 horas a 37°C y exami nando si hay colonias típicas (véase
abajo). Las colonias com~uestas de bacilos Gram-negativm. no esporulados
se subcultiva n para identificarse a cont inuación. 3e pUflde confirmar la
presencia de estreptococos fecales en medios con a:z:ida o telurito por
subcultivo en Agar de MacConkey.
Véase abajo pa ra la morfología de las colonias.
Diferenciación de Pasteurella
El medio CM7 de Oxoid puede ut iliza rse para prob<lr la capacidad de los
bacilos de Pasteurella para crecer en Agar de MacConk9Y con la finalidad de
146

8. diferenciar sus especies (p.e., Hoof¡l endijk, 19621. PasteureJ,'a pestis y P.
pseudotuberculosis muestran un crecimiento escaso, pero visible después de
24 horas a 37°C aunque éste pued e desaparecer después de unos días, se
supone que debido a la autólisis (W ilson y Miles, 1964) . P multocida fP.
septica) y P. haemolytica no producen crecimiento visible .
Organismos pectinolfticos (Stewart, 1962)
Stewart utili.'!ó el Agar de MacConkey Oxoid como base de un medio selectivo
de diagnóstico para 10s organismos pectinolíticos con la fi nalidíld de aislar
especies de Erwini8 a partir de muestras pútridas que contenían otras
enterobacterias. Se inoculan pla cas de Agar de MacCan key con cloruro de
calcio (5,2 g de polvo CM7, 0,4 g de Gl2 Ca y 75 mI de agua destilada ) se
cubren con una capa de pectato-EOTA (0,1 % de EDTA que contenga un 2%
de palipectate de sodio) y se incuban durante 48 horas a 25°C. La s Erwinia
fermentadoras de lactosa producen colonias rojas en unos huecos
sujJerficiales, formados por la licu efacción del pecrato.
CARACTERISTICAS DE LAS COLONIAS
Después de 24 horas a 37°C, las colonias típicas ~on como siguen:
Organismo Color OlJservacion-as
~~~~~~------~~~------==
Esc hcrichia coli rojo no mucoi je
Aerobacter aerogenes rosa mucoic1e
Enterococcus
(p .e ., estreptococo f ecal) rojo diminuta, redonda
Staphylococcus rosa pálido opaca
Pseudomonas aeruginosa verde pálido creci miento fluorescente
Estas características son variables y las colon ias sospechosas deben
cultivarse en A~ua de Peptona CM9 o Agua de Triptona CM87 para llevar a
cabo pruebas diferenciales.
REFERENCIAS
1. Hoogendijk. J . L. (1962) Pasteurel/8 Strains Isolated from Human Sputum' Antonie van
Leeuwenhoek J. Micro bio/. Seral. 28(3), 315 - 320.
2. Dept. 01 Health & Social SecurilV (1969) 'The Baclerio!ogical Examinalion of Water Supplies' 4th
ed., H.M .S.O .. London.
3. Stewarl, O. J. (1962) 'A Selective-Oiagnostic Medium for the Isolalion of Peclinolytic Orga nisms
in the Enterobacteriaceae' Nature 195(4845). 1023.
4. W ilson, G. 5. y Miles, A . A. (1964) 'Topley and Wilson's PrincipIes 01 lJacteriology and
Immunity' 5th ed., Edward Arnold ltd., London vol. 2.
5. Windle Taylor. E. (1958) 'The Examination 01 Waters and Water Supplies' 7th ed .• Chu rchiU Lid ..
London.
6. Organización Mundial de la Salud (1963) 'Normas internacionales para el agua potable' , 2a ed ..
OMS. Ginebra.
MacConkey Agar IWITHOUT SALTI
AGAR DE MACCONKEY (SIN SAL)
Código CM7b
FORMULA
Peptona en gramos por litro 20,0
Lactosa 10,0
Sales biliares 5,0
Rojo neutro 0,Q75
Agar 12,0
pH 7,4 laprox.)
147

9. Enumeración de psicrófilos en el agua
1. Se tratan 50-100 mi de la muestra de agua en el momento de la recogida
con 0,5-1,0 de tiosulfato de sodio 0,1N para eliminar el cloro residual.
2. Se filtra la muestra a través de una Membrana Filtrante Oxoid estériP.
3. Se sigue la técnica (puntos 4-8) descrita para el requesón.
REFERENCIAS
Stan darG Methods for the ElIamination of Dairy Products. Eleventh Edirion, A PHA Inc., New
York, 1960.
2. Repon 71 (1969), " The Bacteriological ElIamination of Water Supplies," Founh Edition , London,
O.M. S.
Mueller Hinton Agar
AGAR DE MUELLER HINTON
Código CM337
FORMULA
Infusión de carne de vaca en gramos por litro 300,0
Hidrolizado de case(na 17,5
Almidón 1,5
Agar nO1 10,0
pH 7,4 (aprox. l
INSTRUCCIONES
Se suspenden 35 gramos en 1 litro de agua destilada y se hierve hasta disolver
el medio por completo. Se esteriliza en el autoclave a 121 ° C durante 15
minuto:) .
DESCRIPCION
El Agar de Mueller Hinton se ideó como un medio de cultivo reproducible para
el aislamiento de especies patógenas de Neisseria (Mueller y Hinton, 1941 ,. La
inclusión del almidón asegura que los factores tóxicos que se encuentran
durante el crecimiento sean absorbidos, siendo su prttSencia a menudo
esencial para que se establezca el creci miento a partir de inóculos muy
pequeños.
El Agar de Mueller Hinton se utiliza ampliamente en la actualidad para las
pruebas de sensibilidad a los antibióticos (incluyendo las sulfamidasL La
inelusiórl de un agar especiamente seleccionado en el Agar de Mueller Hinton
Oxoid asegura que las zonas de inhibici ón, amplias y ciarAS, sean evidentes
cuando los organismos sensibles se enfrentan a Ic.s antibióticos y las
sulfamidas activas, y que los tamaños de~ la zona correspondan con los de
otros medios estándar. Sin embargo, para la prueba con las sulfamidas, es
esencial que se diluyan al menos 100 veces los cultivos en caldo de los
organismos. Las sulfamidas pueden ser antagonizadas por los factores de
crecimiento en los caldos de cultivo y son susceptibles a los efectos de los
grandes in6culos, cuando los organismos pueden llevar suficientes
antagonistas de las sulfamidas para multiplicarse durante 3 Ó 4 generaciones
en presencia de una concentración bacteriostática del fármaco .
173

10. Las técnicas utilizadas para la prueba de sensibilidad incluyen métodos
cualitativos en los que un(j mJe3t ra primaria se puede inccular ~obre un medio
y se registran las zonas que no muest ren crec im ie ntcj alrededor de los discos
de antibióticos (A.C. P., 1966), y l o~ métodos sem icu antitativos de Ericsson
(1960) y Bauer y colaboradores (1966). .I
La técnica do Ericsson (1560) utiliza discús co1ocac1os en medios
estandardizados de un vol umen y profundidad conocidos, en recipientes de
fondo plano. El in6culo se m ide muy cu idadosamente y se inocula por
inundación sobre la superlide del medio. Después dn retira r el exceso de
liquido, se colocan sobre el medio los discos de amibi6ticos, dejánd ose un
periodo de preincubaci6n aurante el cual se produ c. la difusión de los
g
antibióticos antes de c¡ue se incuben las placas . Este p roc~dim ien to asegura
que los antibióticos de difusión lenta no Elstén en desventaja ell ~resencia de
los or,9anismos de crecimiento rápido. Después dG la incubación, se miden los
tamanos de las zonas de in hibición y se comparan cop las gráficas de las
pendientes de regresi ón a partir de la s pruebas hechas rorl gran ca ntidad de
organismos. Los informes pueden em itirse en t érminos de sensibilidad o
resistencia, o en va lores de e.u....,.
La técn ica de Kirby-Bauer (1966) utiliza Afilar de M ~I>3 l le r Hinton y discos de
alta concentración. El inócul o se estandardiza aj'Jstando la turbiedad de un
caldo de cu ltivo en fase de crecimiento a un estándar de ~ulfato de bario. Las
placas de Agar de Mueller Hinton se inoculan con hisopos de algod ón
humedecidos en esta suspensión . Barry y colaboré'do res ('19701 describen un
método más sencillo de preparación de Jos organ ismos en el cual se añade una
pequeña asa de un caldo de cultivo al agar f undido, el cual se viene entonces
sob re la superficie del med io. Se dice que una siembra del égar en capa fina
produce zonas de inhibición mejor definidas qup. los métodos de inundación o
de estriado sobre la superfi cie. Después. de colocar les discos de sensibilidad,
se incuban las placas inmediatamente o se e:ipera 30 minutos. Después de
18-24 horas de incubación a 37°C, se miden los diámetros de la zona y se
compa ran con los reproduci dos en la tabla de la página siflu ien te, tomados de
Bauer (1966) y Ryan y colaboradores (1970L
No se inform8 sobre las medidas de la zona, sólo las interpretaciones de
Resistente, Sensible o Intermedio.
Esser y Elefson (1970) observa ron que el método de Kirby -Bauer era
sencillo, exacto y reprodu cible.
Dewees , Poupard y Morton (19701 in vesti¡::¡aron el efecto del
almacenamiento de las placas con Agar de Mueller Hinton y mostraron que el
almacenamiento hasta 3 semanas a 4°C, en bolsas de plástico cerra da s, no
afectaba los tamaños de las zonas de inhibición en forma apreciable .
También se dispone de Caldo de Mueller Himon (Mu eller Hintún Broth l
CM405 para los estudios de sensibil idad antibiótica .
REFERENCIAS
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4. Dewees, linda, Poupard, J . A. Y MonC'n. H. E. {l 9701 'EHeet 01 stor&ge of Mueller Hinton agar
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PrBC(. 5,91 - lOC.
174

11. Taylor-Aobinson y colaboradores {197H describieron p.1 uso de medios de
caldo para el aisl&miento y tit ulaci6n de micopasmas viables por el
metabolismo de la arginina y de la glucosa. midi13ndo el cambio ele pH en el
medio. , 1
Kraybill y Crawford {196S1 describieron un medio selectivo para
Mycoplasma pneumoniBe,
Se pueden utilizar el Suplemento G para Micoplasma SFl59 y el Suplemento
P para Micoplasma SR60 con este medio - véasf! Mycoplasma Asar Base
CM401.
La mayorfa de las cepas de micoplasma se favorecen r.cn el crc¡;i miento en
el medio bifásico, en el cual una capa de caldo cubre é. una Ci'l¡::a basal de A~ar
de Micoplasma. (Véase Mycoplasma Agar Base CM401) ,
REFERENCIAS
1. Kraybill, W. H. y Crawford, Y. E. (1965) 'A selective rnedium antl colOllr test l or Mycoplasma·
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3. Taylor· Robinson, D., Manin·Bourgon, e., Watanable, T. y AJdey, J. P. 119711 '(sola tion 01
T·mycoplasmas from Dogs and SQuirrel Monkey:; : Biological alld Sorolugi-::al Corllparison with
those IsoLated from Man and Caltle' J. Gen. Microbio/. 68, 97- 107.
Nutrient Agar
AGAR NUTRITIVO
Código - Po/va CM3
Tabletas CM4
FORMULA
'Lab-Lemco' en polvo eh qra'ff,vs por litro 1
Extracto f1e Levadura 2
Peptona ¡;
Cloruro de sodio 5
Agar 15
pH 7.4 (aprox. )
INSTRUCCIONES
Polvo: Se suspenden 28 gramos en 1 Ii~ro de ag "J a destilajCl y se hierve hasta
disolver el medio por completo. Se esteriliza en el aut oc lave a 121°C dl.Jrante
15 minutos.
Tabletas: Se añade una tacleta a 5 mi de agua destilélda y se deja embeber
durante 5 minutos. Se esteriliza en el autoclave a 121 °C duran:e ') minutos,
DESCRIPCION
Se trata de un medio sencillo, uno de los primeros en la gama de Oxoid que ha
demostrado su valía en repetidas ocasi ones: entre I()~ muchos trabajos
publicados que men cionan el medio de Oxoid hay inform e~ soh re el cultivo de
miembros de los siguientps género.:; : Alysiella, Agrobacterium, Arthrobacter,
Bacdlus, Brucell8, Escherichia, F1avobacterium, Micromon()spora,
Pseudomonas, Rhizobium, Sarc;na, Simonsiell'J, Staphylococcus,
Streptomyces, Thermopolysora, Thiobacillus y Xantáomonas.
182

12. El agar nutritivo es un medio barato V, por consiguiente, es adecuado para
los propósitos docentes V de demostración. Contiene una concentración de
agar de 1,5% que permite añadir hasta el 10% de sangre u otro líquido
biológico, según se requiera . El medio, sin adiciones, puede ser utilizado para
el cultivo de organismos que no sean exigentes en sus requerimientos
alimenticios.
Para un medio más rico en sustancias nutritivas, véase Base de Agar
Sangre nO2 CM271 (BloOO Agar Base No. 2) .
Nutrient Broth
CALDO NUTRITIVO
Código - Polvo CMI
Tabletas CM2
FORMULA
'L'lb-Lemco' en polvo en gramos por litro 1
Extracto de levadura en polvo 2
Peptona 5
Cloruro de sodio 5
pH 7.4 (aprox.)
INSTRUCCIONES
Polvo: Se añaden 13 gramos a 1 litro de agua destilada. Se mezcla bien y se
distribuye en los recipientes definitivos. Se esteriliza en el autoclave a 121 °C
durant~ 15 minutos.
Tabletas: Se añade una tableta a 10 mi de agua destilada V se esteriliza en el
autoclave a 121°C durante 15 minutos.
DESCR;PCION
Se trata de un medio muy económico para el cultivo de organismos que no
sean muy exigentes en sus requerimientos nutritivos. 5(X} g de polvo de Caldo
Nutritivo Oxoid hacen más de 38 litros de caldo. El medio reconstituido y
esterilizado puede enriquecerse con otros ingredientes, tales como hidratos de
carbono, sangre, suero, etc, en la medida en que se requiera para fines
especiales. Véase también Caldo Nutritivo W~ 2 CM67 (Nutrient Broth No. 2l.
Nutrient Broth No. 2
CALDO NUTRITIVO N 9 2
Código - Polvo CM67
Tabletas CM68
FORMULA
'Lab-Lemco' en polvo en gramos por litro 10
Peptona 10
Cloruro de sodio 5
pH 7.5 (aprox )
183

13. impurificados de caseína en medios para la produccl6:1 de toxina tetánica, se
producen var iaciones ocasionales en 1<1 producción dA toxi na debido a
sustancias inhibidoras. Este prob lema fue resu elto por el tratamiento con
fosfato cálcico, el cual eliminn de una manera eficcz In's inhibido ~ es de la
producc ión de toxina ,
REFERENCIAS
1. Mueller, J. H. Y Miller, Pau!ine A , : 19!:4) 'Variable fac t ~rs influ(Jncir,g lhe production of tetllnus
toxin' J. BlIct. 67,271 - 2n.
Tryptose
TRIPTOSA
Código L47
La Triptosa Oxoid es una peptona mixta con propieciades nutritivas únicas que
la hacen idónea para usarla en medios para el aislam iento V cultivo de especies
de Brucel/a, estreptococos y otros organismos exiyentes. Su composición
altamente nutritiva la hace idónea pa ra uso en medios rara el aislamiento de
bacte rias más exigen tes en donde se requiera un Grecimien to rápido o
profuso, p.e., en el hemocultivo. ~a Tript0sa Oxoid S6 ~ecomienda, también,
para usarla en agar sang re y otros medios para la determinad6n de las
reacciones hemolíticas, yer. medios para la producción de indol.
Peptone Water
AGUA DE PEPTONA
Código - Polvo CM9
Tabletas CM10
FORMULA
Peptona en gramc-s por litro 10
Cloruro de sodio 5
pH 7,2 (aprox .1
INSTRUCCIONES
Polvo: Se añaden 15 g a 1 litro de agua destilada. Se mezcla bien y se
distribuye en tubos. Se esteriliza en el autoclave a 1'21oC durante 15 minu tos .
Tabletas: Se añade una tableta a 10 mi de agua de3tilada y se esteriliza en el
autoclave a 121 ° C durante 15 minutos.
Cuando se hayan de añéJdir soluciones estériles después del autoclavado, se
reduce el volumen de agua para recons~ itución en Igual cantidad.
DESCRIPCION
El Agua de Peptona puede utilizarse como un medio dE.: crp.cimiento o como
medio de base para la fermentac ién de hidratos de ca rb ono, mientras que un
cultivo puro en Agua de Peptona es un inóculo cómodo para una serie de
tubos de fermentación u otros medios diagnósticos.
198

14. Se dispone Lie soluciOnes estériles de otros hidratos de carbono y otros
reactivos para añadir al medio.
El Agua de Peptona, ajustada a pH 8,4 es idónea pera el cultivo y
enriquecimiento de Vibrio comma a partir de material infectado (Cruickshank,
R., 1968).
El medio se utilizó anteriormente para la realizaciÓn de la prueba del indol,
pero, en la actualidad, se obtienen mejores resultados utilizando Agua de
Triptona (Tryptone Water) CM87.
Se dispone tambii3n de este medio con indicador de Andrade (Agua de
Peptona, Peptone Water, CM61 / 62) o con indicador de r(¡jo de Fenal (Agua
de Peptond con Rojo de Fenal, Phenol Red Peptone Water, CM63J. El medio
con indicador de Andrade cambia el color de~:je el incoloro hasta el rosa si hay
producción de ácido, El medio con rojo de fenal es naranja cuando es neutro,
amarillo cuando es ácido, y rojo oscuro cuando es alcalino. Ambos medios se
preparan y esterilizan de la misma manera que el Agua de Peptona excepto en
que se incorpora un tubo de Durham invertido para la if"dicación de la
producción de gas. Si se añaden soluciones de hidratos de carbono, antes o
después del autoclavado, se debe reducir el volumen de agua utilizado para su
reconstitución por una cantidad equivalente, El medio con indicador de
Andrade es rosa cuando está caliente, pero se hace incoloro cuando . ;e vuelve
c
a enfriar,
REFERENCIA
1. Cruickshank, A. ('1968) 'Medical Microbiology' 11th &d ., Livingsto08ltd.' London, p. 268.
Perfringens Agar
AGAR PARA PERFRINGENS (P.O.S.P.J
ro. P. s. P.)
Código CM543
FORMULA
Triptona en gramos por litro 15
Extrllcto de levadura 5
Peptona de aoja 5
Extracto de hrgado 7
Citrato férrico amónico 1
Metablsulflto de sodio 1
Tampón tria 1,5
Aga, la
pH 7,3 (aprox.)
SUPLEMENTO A SR76 SUPLEMENTO B SR77
Cada vial contiene Cada vial contiene
Sulfadlaclna de sodio 50 mg Fosfato de
ola8ndomiclna 0.25 mg
Sulfato de polimixina B
5000 unidades i.
INSTRUCCIONES
Se suspenden 22,8 gr en 500 mi de agua destilada y se hierve suavemente
hasta disolver el medio por completo. Se esteriliza en el autoclave a 121°C
199

15. Se put:lden obtener los detalles completos de la técnicu y las gamas
disponibles solicitando el folleto correspondiente de Oxoid.
Medios para la Prueba de Sensibilidad
Oxoid fabrica una ar:1plia gama de productos para su uso ei"l la preparación de
los Medios para la Prueba de Sensibilidad. A continuación se d<l una lista de
estos productos pudierdo encor.trarse todos los detalles de cada uno de ellos
por orden alfabético en Inglés:
Agar Diagnós~jco para In Prueba de Sensibilidad - CM261
(Diagnostic Sensitivity Test Agar)
Agar de Mueller Hinton - CM337 (Mueller Hinton Agar)
Caldo de Mueller Hinton - CM405 (Mueller Hlnton Brothl
"Agar Iso-Sensitest" - CM471 ("Isosensitest Agar" )
" Caldo Iso-Sen;itest" - CM473 ("Isosensitest Broth")
Productos de Sangre (Sangre de Caballo Lacéldn - SR-?8, Laked
Hors. 810od)
Sheep Blood, Deflbrinated
(NO PRESfRVATIVE)
SANGRE DE CARNERO DESfl8RINADA (SIN PRESERVATIVO)
Código SR5/
Se trata de un producto para incluirlo en medios dI':: ,;ultivo bacteriológicos.
Véase Blood Products .
Simmons Cífrate Agar
AGAR DE CITRATO DE SIMMONS
Código - Polvo CM/55
Tabletas CM/56
FORMULA
Sulfato de magnesio en grómos pOI' litro 0,2
Fosfato de amonio dihfdrico D.2
Fosfato amónico de nodio 0.8
Citrato de sodio, tribásico 2.0
Cloruro de sodio 5.0
Azul de bromotimol 0.08
Agar 16.0
pH 7.0 (aprox.1
224

16. INSTRUCCIONES
Polvo: Se suspenden 23 gramos en 1 litro de agua destilada y se hierve hasta
disolver el medio por completo. Se esteriliza en el autoclave a 121 ° C durante
15 minutos.
Tabletas: Se añade 1 tableta a 5 mi de agua destilada y se deja embeber
durante 5 minutos. Se esteriliza en el autoclave a 121 ° C durante 15 minutos.
DESCRIPCION
El Agar de Citrato de 5immons se recomienda f Ewing y Edwards, 1960) para la
diferenciación de la fam ilia de enterobacterias y se basa en la utilización o no
del citrato como única fuente de carbono.
El medio es vinualmente una forma solidificada del medio de citrato de
Koser el cual, en su forma original, tenia la desventaja de dar lugar a falsos
crecimientos cuando se utilizaban grandes in6culos. La adición del indicador
de azul de bromotimol al medio fue una mejora considerable. Véase el Medio
de Citrato de Koser IKoser Citrate Mediuml CM65.
TECNICA
El medio puede utilizarse bien en agar inclinado en tu bar. de ensayo o bien en
placas de Petri. En ambos casos se inocula ligeramente la superficie del medio
en estría y, cuando'se utilice un agar inclinado, se inocula el fondo del medio
por picadura. Se recomienda una incubación a 37° C durante 48 horas.
El crecimiento positivo fa sea, utilización de citrato) produce una reacción
alcalina y el medio cambia de un color verde al azul blill3nte, mientras que en
una prueba negativa (o sea, no utilización del citrato) el color del medio
permanece inalterado.
Eschericihia coli no crece en el medio, mientras que la mayoría de los otros
organismos coliformes lo hacen . Todos los miembros de Klebsiella-
Aerobader-Serratia-$almonella-Arizona-Citrobacrer y algunos miembros de
las divisiones Proteus-Providencia utilizan el citrato. Proteus morganii y los
serotjpos de Escherichia coli de enteritis infan til ~::>idémjca no Jo utilizan
(Kauffmann, 19541. El Agar de Citrato de Simmons puede utilizarse para
diferenciar Salmonella schortmuellefl~ S. enteritidis y S. typhimurium de S.
typhosa, S. paratyphi y Shigella. Este último grupo no crece sobre el medio,
mientras que los miembros del primer grupo utilizan el citrato y producen la
coloración azul ca racterística .
REfERENCIAS
1. Ewing, W . H. y Edwards, P. R. (1960) Internar'/. Bull. SacI. Nomen and 'Taxon. 10(1), 1- 12.
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SIMMedium
MEDIO SIM
Código CM435
fORMULA
Triptona en gramos por litro 20,0
Peptona P 6.1
Sulfato ferroso de amonio 0.2
Tiosulfato de sodio 0.2
Agar nO 1 3.5
pH 7.3 (aprox .)
225

17. REFERENCIAS
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2. Kelsey, J. C. 119611 ' The Tes¡ing 01 Sterilizers. 2. Thermophilic Srore Papers' , J. c1in. PlHh.
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Landan.
S.S. Agar
AGAR S.S.
Agar para Salmonella y Shigella
Código - Polvo CM99
Tabletas CM/OO
FORMULA
' Lab-lemco ' en polvo en gram o~' por Uro 5.0
Peptona 5.0.
l actosa 10.0
Sales biliares NQ 3 e.5
Citrato de sodio 10.U
Tiosulfato de sod io 8.5
Citrato férrico 1.0
Verde brillante 0.00033
Rojo neutro 0.025
Agar 15, 0
pH 7.0 laprox I
INSTRUCCIONES
Polvo: Se suspenden 63 gramos en 1 litro de agua destilDda y se hierve a fuego
lento y con agitación fre cuente hasta disolver el aga r. NO SE DE BE
AUTOCLAVAR. Se enfría hasta aproximadamente 5l10C, se mezcla y se viene
en placas de Pe tri .
Tabletas: Se añade una tableta a 5 mi de agua destil3ca y se deja embeber
durante 5 minutos. Se lleva a e,bull ición en un baño ha!')!a disolver el medio por
completo . Se mezcla bien antes de verter. NO SE [ ' ESE AUTOCLAVAA.
DESCRIPCION
El Agar 5 .5, es un medio difere nci'3l y selectiv'c, ¡Jara el aislamiento de
especies de Shigella y Salmonella a partir de muestras pato lógica$, muestras
alimenticias sospechosas, etc. Los organismos Gram- pos itivos y co litormes se
inhiben por la acción de una nlezcla de sales biliares e$pecialmente preparada.
TECNICA
Se inocula el medio fuertemente con la muestra, extendiendo un'.! porción del
inóculo original con el fin de oblener colonia!:. bien sepa-a das en alguna parte
de la placa. Se incuba durante 18 a 24 horas '3 37 Cl C: los no fermen tadores de
la lactosa forman colonias ir.coloras, mientras que los ccliformes
ocasio nalmen te res istentes u otros fermentadores ne la lactosa produ cen
colonias rosas o rojas.
232

18. En paralelo con la placa de Agar S.S. se inocula un tubo de medio de
enriquecimiento de Caldo de Selenita {Selenite Brothl CM395; se incuba
durante 12 horas a 37°C y se subcultiva en otra placa de Agar S.S.
Standard Plate Count Agar IAPHAI
AGAR PARA RECUENTO EN PLACA ESTANDAR IA.F.H.A.I
Código - Polvo CM463
Tabletas CM464
FORMULA
Extracto de levadura en polvo en gramos por litro 2,5
Digerido pancreático de caseína 5,0
Glucosa 1,0
Agar 15,0
pH 7,0 (aprox.)
INSTRUCCIONES
Polvo: Se suspenden 23,5 gramos en 1 litro de agua destilada y se hierve hasta
disolver el medio por completo. Se distribuye en frascos y se esteriliza en el
autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
Tabletas: Se añade una tableta a 5 mi de agua destilada y se deja embeber
duranre 5 minutos. Se esteriliza en el autoclave a 121°C durante 15 minutos.
DESCRIPCION
El Agar para Recuento en Placa Esténdar CM463 se ajusta a la formulación del
Agar de los métodos estándar, descrita en: "Stand~ rd Methods for the
Examinatíon 01 Dairy Products", ll a edición, 1960.
Es la misma formulación que la descrita para el Agar Deshidratado para el
Recuento en Placa (Aga r de Triptona con Glucosa y Levadura) en "Standard
Methods for the Examination of Water and Wastewater" , 11 8 edición, 1960 de
A.P.H.A. Es, igualmente, la misma formulación qlle 131 Agar de Triptona con
Glucosa y Levadu ra IU.S.P. XVI y A.O.A .C., 10' edición, 19651. ,
Los ingredientes del Agar para Recuento en Placa Estándar CM463 se
ajustan a las especificaciones señaladas en "Methods for the Examination of
Dairy Products" , 12' Edición , 1967, páginas 232 - 233 de la A.P.H .A .
Las cualidades físicas del medio reúnen las especificaciones descritas por la
A.P.H.A., 12' Edición, 1967, página 233.
La producción del medio se controla con las pn.:ebas descritas en la
publicación arriba mencionada, páginas 234 - 242, en donde las muestras de
leche cruda y pasteurizada se exami nan en paralelo con las del Medio Estándar
de Referencia. t
El Agar para Recuento en Placa Estándar puede utilizarse también en el
examen microbiológico de alimentos, tal y como describe la Association of
lO
Official Agricultural Chemists", 9 Edi ción, 1960 y "Recommended Methods
for Microbiological Examination of Foods" , A.P.H.A. , 1958.
233

19. Trichomonas vagina"s permanece viab le, en el medio, hasta 24 horas,
mientras f1ue Cooper (1957) ha informado so bre la recuperaci ón de patógenos
del tracto respiratorio superior y :" '"'Itérico después de 8 a 12 semanas de
almacenaje. Stuart y cols. (1954) l,; .:izaron con éxito ¡JI rnétodo de transporte
para recuperar H. influenzae, Str. pneumoniae, Str. pyogenes y e,
diphlheriae a partir de muestras que habían estad o en tránsito durante 3 a 5
días,
REFERENCIAS
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Disease', J . Med. Lab, Techno/. 15(3) , 184 - 195,
Sucrose 10%
SACAROSA AL 10%
Código SRI3
Se trata de una solución esterilizada por filtración, disponible en ampollas de 5
mi en cajas de lO,
T. C. B. S. Cho/era Medium
MEDIO T.C.8.S. PARA COLERA
Código CM333
FORMULA
Extracto de levadura en polvo en gramos por litro 5
Peptona bacteriológica 10
Tiosulfato de sodio 10
Citrato de sodio 10
Bilis de buey 8
Sacarosa 20
Cloruro de sodio 10
Citrato férrico 1
tlzul de bromotimol 0.04
Azul de timol 0.04
Ag.r No. 1 14
pH 8.6 (oprox .1
237

20. INSTRUCCIONES
Se suspenden 88 gramos en 1 litro de agua destilada y se hierve hasta disolver
el medio por completo. NO SE DEBE AUTOCLAVAR.
Se vierte en placas sin más calentalT'iento y se seca éntes de utilizar .
DESCRIPCIOI
Kobayashi, Enamoto, Sakazaki y Kuwaha ra (1963) desarrollaron el medio
T,C .8.S. a partir del agar de aislamiento se lectivo dfl Nakanishi (19631.
El medio T.e.8.S. de Oxoid está de acuerdo con la formulación de
Kobayashi y cola boradores, excepto en Que contiene 'Jna bilis de buey
especialmente transformada, libre de los defectos obsflrvados por Nakanishi y
Kobayashi.
El medio de Oxoid es particu larmente adecuado para el crecimiento de
Vibrio chalerae biotipo el tor " V. parahaemol'lticus, además del clásico V.
chalerae.
Sakazaki (1963) describió el aislamien to :ie V. palahaemolyticus y V.
alginolyricus en medio T. C.8.S.
La mayoría de las enterobacterias que se hallan en les heces quedan
suprim idas totalmente durante, al menos 24 horas. Se puede producir un
crecim iento ligero de Proteus spp. y Strept. faocalis, pe ro las colonias se
distinguen fácilmente de las colonias de Vibr;o.
El medio T .C.8.S. Oxoid es completo y no requiere 3d:tivof. o adiciones
asépticas de sangre . Muestra , por tanto, una ventaja t:onsideré'ble sobre el
Aga r de Telurito y Sulfato de Lau ril que requiere adiciones ulteriores después
de la esteril ización . Aparte de este factor de comodid<Jd, posee también unas
características de crecimiento superiores para Viário spp., en com paración
con los medios de telurito. Mient ras que inhibe a los no vibrios, fav0rece el
crecimiento rápido de V;br;o SP~'I despuós de una incubación a 37°C durante
la noche.
ASPECTO DE LAS COLONIAS EN AGAR T.C.B.S.
Después de 24 horas de incubación a 37°C.
V. cholerae - colonias amari llo pa ~ das , de 2-3 mm d~ diámetro, con un
color amarillo en el medio.
V. parahaemo/yticus (grupo 1) - colonias incol0ras con un centro verde.
de 3-4 mm de diámetro.
V. parahaemolyticus Igrupo 2) - colonias amarillo pa rdas de 3A mm de
diámetro con color amarillo en el medio .
Escherichia coli
Slamonel/a typhi
Klebsie/la spp. Crecimiento ligel o cnrl colonias diminutas.
Shigella spp. No hay cu lor iJ marill o en el medio.
Pseudomonas aeruginosa
Proteus spp.
Stlepto~occus faeca/is - ligero crecimiento con cole.nias diminutas. Color
amarillo en el mt;dio.
TECNICA
Las heces o el material de prueba S8 siembrsn en estría a trav9s ne la superficie
del Medio T.C.8.S. pa ra Cólera Oxoid y se incuba du~ante 18-24 horas 3 37°C.
238

21. Todas las cepas de V. chalerae produc en colo nias grandes, lisas, elevadas,
y amarillas con un color amarillo en el medio de cu ltivo.
Las cepas de V. parahaemalyticus producen colonias similares, con la
excepción Ge Jos organismos perte necientes al grupo 1 que producen colonias
verdes sin alterar el color del medio.
REFERENCIAS
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3. Kobayashi, T., Enomoto, S., Sakazaki, R. y Kuwahara , S. (1963) 'A New Selective Medium for
Pathogenic Vibrios: T.e.a.S. Agar (Modified Nakanishi's Agar) '. Jap. J. Bacterio/. 18, 10-11 ,
387 - 391.
Tellurite Medium Hoy/e
MEDIO DE TELURITO DE HOYLE
Véase Base de Medio de Hoyle (Hoyle Medium Base) CM83.
Test Tube Caps IALUMINIUMI
TAPONES DE ALUMIN IO PARA TUBOS DE ENSAYO
Se trata de ta pones cilrndricos de alum inio que se utilizan para proporcionar
un.cierre bacteriológico a los tubos de ensayo, botellas y matraces. Para esta
finalidad, los Tapones para Tub os de Ensayo Oxoid poseen muchas ventajas
sobre los tapones de algodón convencionales.
(i) Los tapones pueden utilizarse en repetidas ocasiones;
(ii) No se pegan al cuello del recipiente, y se quit.3n y sustituyen fácilmente;
'
(iii) No existen fibras que contaminen los medio~ (un factor de importancia
considerable en los estudios de nu trición bacteriana y en los trabjaos
sobre análisis microbiológicos).
(iv) Los tapones se pue. en marcar fácilmente con un lá piz O rotulador que
d
resista el autoclavado;
(v) Se asegura la esterilidad durante un largo período, au nque se pueden fijar
los tapones al tubo con cinta adhesiva si fuera necesario.
Los Tapones para Tubos de Ensayo Oxoid se suministran para tubos de
ensayo sin bordes conforme a normas britá nicas, de 12, 16, 19 Y 25 mm y el de
30 mm que se ajusta a los frascos de 3 onzas, para muestras de leche.
Además, John Moncrieff Ltd ., de Perth, Escoda, fabrica una gama de
matraces cónicos "Monax" que pueden cerra rse con Jos Tapones Oxoid .
Para facilitar la identificación , los Tapones de Tubos de Ensayo Oxoid se
suministran en los siguientes colores anodizados:
Verde, azul, negro, plata, malva, oro, cobre, rojo .
Es particularmente importante evitar el uso de ál cal is fuertes y abrasivos
cuando se laven los tapones coloreados o no coloreados. Preferiblemente, se
deben lavar en agua ca liente que contenga una pequeña cantidad de
detergente no alcalino (p.e., "Taepol", "Quix", etc.) , se aclaran bien en agua
ca liente, y se secan en una estufa a l 00- 120°C.
239

22. Ensoyo8 ollnlC08 han ostablocldo qu o 01 M odio paro I rlco rn onu tJ NII ') UtJ
muy sa tisfactorio para el cultivo do r richomon8s vaginal/s, a partir de
aislamientos primarios. Una combinac ión del cultivo d~ laboratorio y un
examen en porta proporciona la mejor probabilidad d~ establecer la presencia
de este patógen o.
El Medio para Tricomonas NQ 2 contie ne suero y antibiótico y, por
consiguiente, está preparado para su inoculación inmediata. Se puede
almacenar a 4° C durante varios meses sin deterioro.
TECNICA
1. Se inocula el medio directamente con un hisopo vaginal, raspado sub-
prepucial, raspado uretral, liquido prostá:ico o el dépasito de una orina
centrifugada ligeramente (Stenton, 1951).
2. Se incuba a 34°C (Thomas, 1964).
3. Se examina al microscopio cada 24 horas.
4. So incuban los cultivos que, vistos al microscopio, hayan sido negativos,
hasta cinco días.
REFERENCIAS
1. Bushby, S. R. M. Y Copp, F. C. (1955) 'The Antitrichomonal Activity 01 Amidonitrothiazoles' . J.
Pharm. Pharmacol. 7, 112 - 117.
2. Squires, S. y McFadzean, J . A. (1962) 'Strain Sensitility of Trichomonas vagina/ís 10
Metronidazole' . Brir. J. venero Dls. 38. 218 - 219.
3. Stenton, P. (1957) 'The Isolation 01 Tríchomonss vagina/is'. J . Med. Lab. Technol, 14(41.
228-230.
4. Thomas, Patricia M . (1964) 'Sorne Laboratory Aspects 01 Trichomonss vaginal/s'. J. Med. Lab.
To chnol. 21 (1).48 - 50.
!:ffPo!~RE~lffl~fs !~~[Jo Agar
Código - Polvo CM277
Tabletas CM278
FORMULA
'lab·lemco' en polvo en gramos por litro 3,0
Extracto de levadura 3.0
Peptona 20.0
Cloruro de sodio 5.0
lactosa 10.0
Sacarosa 10.0
Dextrosa 1.0
Citrato férrico 0.3
Tiosulfato de sodio 0.3
Rojo de fenol q.S.
Agar 12.0
pH 7.4 (aprox. 1
INSTRUCCIONES
Polvo: Se suspenden 65 gramos en , litro de agua destilada y se hierve hasta
disolver el medio por completo. Se mezcla bien y se distribuye. Se esteriliza en
el autoclave a 121 ° C durante 15 minutos. Se deja solidificar el medio en
251

23. posición inclinada para formar un fondo de aproximadamente una longitud de
2,5 cm.
Tabletas: Se añade una tableta a 10 mi de agua dest iladA y se deja embeber
durante 5 minutos. Se esteriliza en el autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Se deja solidificar en pendie.f1tf! con un "(onda amplio '.
DESCRIPCION
Se trata de un medio mixto para la diferenciación de enH~robacterias de
acuerdo a su capacidad de fel·mentar la lactosa, sacaro:.;a y dextrosa , y
producir sulfhídrico. No solamente rjesarrolla este medio fa mayoría de fa s
funciones del Agar con Hierro de 1~li ger sino que además su contenido en
sacarosa permite el reconocimiento y la exclusión de especies de
Paracolobactrum y Proteus. Estos organismos atócan la jactosa lentamente o
no lo hacen en absoluto durante el paríodo de incubnci0n, pero pueden atacar
fácil mento la sacarosa. Puesto qt.:e alguna~ , species de Proteus y otros
a
organismos pueden dar reacciones s;mil<3res a las salmonelas y shigelas, es
necesario distinguirlas por su capacidad de hidroHzar la ureó. Por esta razón, el
Agar de Tres Azúcares y Hierro se debe utili. ar en para lelo con Calrlo de Urea
!
o Agar de Urea . I '
Al principio, se consideró que este medio era intercambiable con el Medio
de Kliger para la det.ección de la s enterobacterias producto ras de sulfhídrico .
En la actualidad, se piense que el Agar de Tres Azúcares y Hi erro no es
adecuado para la detección de la producción de .sulfhídrico por los organismos
fermentadores de la sacarosa, tales como especies de f:itrooacfer y Proteus,
en los que la fermentación de la saca rosa enmascara el indicador de
sulfhídrico en el medio (Bulmash y r-u lton, 19(4).
Se recomienda el Agar de Tres Azú cares y Hierro para la identificación
presuntiva de las cJlon ias o subcultivos a partir de merl;of, en placa tales como
Agar para Salmonela y ShigeJa (S.S. Agar.' CM99, Agar de Sulfito de Bismu to
(Bismuth Sulphite Agarl CM201, Agar de Verde Brillante (BriUiant Green
Agarl CM263, Agar de lvIacConkey NQ 3 IMacCon<ey Agar No. 31 CM115 o
Agar de Desoxycolato y Citrato (Hynes) (Oesoxycholate Citrate Agar, Hynes J
CM227.
TECNICA
Las técnicas americanas SP, describen en otra pane (American Public Health
Association , 1963, 1963; Edwards y Ewing, IOOZ y Society of American
Bacteriologists, 19571 , sugiriérdose io siguiente como una alternativa sencilla:
1. Se pica una colonia de la superficie de un meoio sel ectivo en placa y se
extiende sobre una placa de Agar de MacConkey (MacConkey Agar) CM7.
Se incuba durante 18 horas a 37°C y se inocul:1n dos tubos diferentes de
medio a partir de una colonia aislada:
(i) Agar de Tres Azúcares y Hierro - se ext iend'3 sobre la pendiente y se
pica el fondo.
(ji) Base de Caldo de Urea (U rea BrothJ CM71 (con Soluciórl de Urea (U rea
4O%ISA401.
2. Se incuba a 37°C.
3. Se examina el Caldo de Urea después de :; nora :; y otra vez después de 18
horas de incubación. Se desechan los tubcs q·.le muestren una coloración
roja o rosa, lo cual es debido a la hidrólisis de Id ureé! de las especies de
Proteus o paracolon.
4. Cuando no haya hidrólisis de la urea, se t,::<ami(lan 105 tubos de Agar de
Tres Al.úcares y Hierro después de 18 h ()~as v 48 horas. l.as reacciones
siguientes son típicas:
252

24. Organismo Fondo Pendiente SH,
Aerobacter aerogenes AG A
Aerobacter cloacae AG A
Escherichia coli AG A
Proteus vulgaris AG 1 +
Proteus morganii A o AG NC o ALC
Shigella dysenteriae A NC o ALC
Shigella sonnei A NC o ALC
Salmonella typhosa A NC o ALC +
Salmonella paratyphi AG NC o ALC
Salmonella schottmuelleri AG NC o ALC +
Salmonella choleraesuis AG NC o ALC
Salmonella enteritidis AG NC o ALC +
Salmonella typhimurium AG NC o ALC +
La nomenclatura está de acuerdo con la '¡a Ediciórl del " Bergey' s Manual of
DetArminative Bacteriology" .
AG ácido (amarjllo) y f ormac'ión de gas
A ácido (amarillo)
NC sin cambio
ALK alcalino (rojo)
+ (negro) sulfhídrico véase nota
no sulfhídrico (no negro) en la página
anterior.
La prueba presunta obtenida de esta manera se puede con firmar
serológicamente después de subcultivar el organismo <l partir del Agar de Tres
Azúcares y Hierro en Caldo Nutritivo NQ 2 (Nutriem Broth No. 2) CM67.
REFERENCIAS
1. American Public Health Association (19631 'Oiagnostic Pror.edures and Reagents' . 4th OO ., pp .
150 and 294 - 295. APHA Inc .. New York .
2. American Public Heallh Association (1966) ' Recommended Melhods for the Microbiological
ElCamination of Foods' . 2nd OO., APHA Inc ., New York, pp. 158 and 185.
3. Bulmash, J . M . Y Fulton. M . (1966) ' Discrepan! Tests for H'drogen Sulphide' . J. 8ect. 88(6),
1813.
4. Edwards, P. R. Y Ewing, W . H. (1962) 'Identification of Enrerobecteris ceee' Burgess Publishing
Co., Minneapolis.
5. $ociety of American Bacteriologists (1957) 'Manual of Microbiological Methods'. McGraw·
HiIIBook Co. Inc., London .
Tryptone
TRIPTONA
Véase Peptones and Hydrolysates.
Tryptone T
TRIPTONA T
253

25. Urea40%
UREA AL 40%
CÓdigo SR20
Para incluir en el Medio de Dos Tubos de Koh n No. 1 (Koh n' s Two-Tube
Medium No. 1) CM179, Base de Agar de Urea (Urea Agar Base) CM 53 , y Base
de Caldo de Urea (Urea Broth Base) CM71. Esta solución esterilizada po r
filtración es particularmente útil puesto que la solución de urea no puede ser
esterilizada por la aplicaCión del calor. Se dispone en ampollas de Yí mi y de 5
mI.
!-!!:~A~qf1~E~ase
Código - Polvo CM53
Tabletas CM54
FORMULA
Peptona en gramos p or litro 1.0
Dextrosa 1,0
Cloruro de sodio 5,0
Fosfato bisódico 1,2
Fosfato de potasio 0,8
Rojo de fenal 0,012
Ag.' 15,0
pH 6,8 {aprox. 1
INSTRUCCIONES
Polvo: Se suspenden 2,4 9 en 95 mi de agua destilada y se hierve hasta
disolver el medio por completo. Se esteriliza en el autoclave a 115° C durante
20 minutos. Se enfrfa hasta 50° C y se introducen 9sépticamente 5 mi de una
solución de urea estéril al 40 % (Urea 40 % ) SR20. Se mezcla bien , se
distribuye en cantidades de 10 mi en recipientes estériles y se deja que se
solidifique en posición inclinada.
Tabletas: Se añade una tableta a 9,5 mi de agua destilada . Se esteriliza en el
autoclave a 115° C durante 20 minutos. Se enfrfa hasta 55°C, aséptica mente
se añaden 0,5 mi de una solución de urea estéril al 40% (Urea 40% ) SR20. Se
mez¡,;;la bien y se deja en posición inclinada .
DESCRIPCION
Se recomienda la Base de Agar de Urea para la prepara ción del medio de
Christensen (Christensen , 1946) para la detección ae los organismos
desdobladores de la urea tal como Proteus vulgaris. El medio de urea puede
utilizarse para la detección de la hidrólisis de la urea por otros micro-
organismos incluyendo ciertos mi crococos y organismos paracolon.
TECNICA
Se hace un in6culo fuerte con un cultivo puro del org anismo en cuestión
sobre la superticie de un agar de urea inclinado. La reacción se completa
generalmente después de 3 a 5 horas a 37°C. Los organismos productores de
261

26. ureasa hidrolizan la urea para formar amonio, y el med io cambia a Jn co lor
rojo pú rpu ra.
Para prepa rar este medio cómodamente, la solució n de urea al 40% se
sum inistra como una solución estéril en amp'Jlles .
REFERENCIAS
1. Christensen, W . B. 11946) 'Urea Decomposition as a means 01 Dif1erentiating Proteus and
paracolon Cultures f rom each other and from Salm?nella and Shigella Tvpes'. J. 8aet. 52,
461 - 466.
Urea Broth Base
BASE DE CALDO DE UR~A
Código CM71
FORMU LA
Peptona en gr8('705 por litro 1,0
Dex trosa 1,0
Fosfato bisódit: o 1,2
Fosfato de potasi o 0,8
Cloruro de sodi o 5,0
Rojo de f enol 0,004
pH 6,8 (ap rox. ) I
INSTRUCCIONES
Se añaden 0,9 9 a 95 mi de sgua desti lada. Se esteri liza en el autoclave a
115°C durante 20 minutos . Se enfría a 55°C v se Infroducen aséptica mente 5
mi de una solución de urea estéril 3140% (U rea 40%) SR20. Se mezcla bien y
se distribuye en cantidades de 10 mi !'Jn reci pien tes ':!stériles.
DESCRIPCION
Se trata de una modificacióri líquida del medio de Christensen (Maslen, 1952l.
La modifi cación AS indicada paró la difere:lciación de los organismos
producto res de urea de lo s grupos SalmonellD y Shigella, du rante el examen
ord inario de los hisopos rect<~ J es y heces . Maslen obse.rvó Que, Rn el examen
rutinario de las heces para Sa/manella y Shige/la, mu cha s co lonias no
fermentadoras de la lactosó pertenecía n a los yrupos Proteu5 y pa racolon .
Desarrolló este medio de forma que estos organismos pudie ran ser detectados
rápidamente y eliminad os, ahorrando du esta forma 'jlla ca ntidad considerable
de tiempo y medios. M aslen expone que las ventujas :::lel meJio liquido son:
(i) Se puede utilizar un pipeta Pasteur para in oc ular otros medios
diag nósticos.
(i i) Sobrevien e un rápido crecimiento y e~ posible discernir una reacció n
claramente pnsitiva en 2 a 5 horas a 37°C.
(iii) Es mas fác il aetectar cualqu ier co;¡taminaci6n durante el almacencje.
262

27. DESCRIPCIDN
El Agar con Rosa de Bengala y Cloramfenicol es un meaío selectivo para la
enumeración de las levaduras y mohos a partir de una gran variedad de
muestras alimenticias. El medio tiene un pH neutro y el cloramfenicol se utiliza
como agente selectivo para suprimir el crecimiento bacterian o. Varios
investigadores han observado ventajas al utilizar medios a un pH neutro que
contengan antibi6ticos1.2 , Las colonias de mohos y levaduras captan el rosa
de Bengala y por ello se facilita la enumeración de las coloniéls pequeñas1. El
rosa de Bengala controla también el tamaño y la altura de las colonias de
mohos, tales como Neurospor8 y Rhizopus spp. De esta forma se evita que las
cepas de crecimiento lento queden cubiertas por las especies de crecimiento
más rápido, facilitándose el recuento de la placa.
La elección de un medio adecuado para la enumeración de las levaduras y
moho:i depende en gran medida de la naturaleza de las muestras alimenticias a
investigar y de los organismos que se suelen presentar en ellas4 • Se
recomienda el Agar con Rosa de Bens;¡ala y Cloramfenicol para los alimentos
proteináceos frescos cuya flora asocIada consta prinr.ipalmente de bacilos
Gram · ne~ativos , aunque debe advertirse que el cloramfenicol solo puede no
ser suficIente para inhibir el fondo bacteriano. Debido a la estabilidad del
cloramfenicol, el Agar con Rosa de Bengala y Cloramfellicol resulta también
adecuado cuando se requiera una incubación prolongada a temperaturas mas
elevJ3das, de unos 35°C.
TECNICA
Se añaden alícuotas de 1 mi de una serie de diluciones decimales adecuadas a
placas de Petr; vacías de 9 cm. Se utilizan dos placas para cada dilución. A
continuación se añaden a cada placa un os 15 mi de medIo enfriado a 50°C. Se
mezcla con suavidad, girando las pla cas tres vueltas en sentido dextrógiro y
tres vueltas en sentido levógiro.
S€: deja que el medio se solidifique, se invierten las placas y se incuban
durante cinco días a 22°C±2°.
Se inspeccionan las placas y se cuentas las colonias de aquellas que
con tengan unas 5Q..l00 colonias.
Se calcula el número de levaduras o mohos por 1 g o por 1 mi multiplicando
el número de colonias por el factor de dilución .
REFERENCIAS
1. Mossel, D. A. A. , Visser, M ., Mengerink. W. H. J . 11 962) Lab. Pract. 11 ,109- 112.
2. Kobvrger, J. A. 11968) 8act. Proc. 13, A73.
3. Jarvis, B. (1973) J . Appl. 8aa 36,723-727.
4. Mossel. D. A. A " Vega, C. lo V Put, H. M . C. (1975) J. Appl. 8act. 39. 15-22.
Sabouraud Dextrose Agar
AGAR DE SABOURAUD CON OEXTROSA
Código - Polvo CM41
Tabletas CM42
FORMULA
Peptona micológica en gramos por litro 10
Dextrosa 40
Agar nO 1 15
pH 5.6 (arrox.)
215

28. INSTRUCCIONES
Polvo: Se suspenden f.5 gramos en 1 litro de agua destila da y se hielve hasta
disolver el medio por comp leto. Se esteriliziJ en el au~ocave a 121 °C durante
15 minutos.
Tabletas: Se añade una tableta a 5 mi de agua destilada y se deja embeber
durante 5 minutos. Se esteril iza an el autoclave a 121"C du ran te 15 minutos.
OESCRIPCION
Esta modificación del agar de Sabouraud (Carlier, 194€) e~, arropiad¡:¡ pa ra el
cul tivo y diferenciac ión de los hongos.
Carlier demostró que el medio proporciona unos result.::tdos fiables con
Microsporum audou¡m~ M. can/s, Tricophy tor. fT'entagrophyte5', T. flavum, T.
rubrum y Candida alb/cans. El Agar de SabouraucJ C:)i1 Dextrosa puede
utilizarse en lugar del Medio Americano Standurd de Hodges 1.1928), Los
hongos mantienen sus aspectcs cu ltural es : ípicos, pudiéndose, por
consig uiente, identificarlos fácilmente de acue rdo n las caraterística s
macros cóp icas típicas descritas por Sabouraud (191Oi.
TECNICA
El medio se utiliza frecuentem ente con antibióticos para el aislamien to de los
hongos pa tógenos, a partir de material Que contenga gr~ n can tidad de otros
hongos o bacterias. Georg y co ls. (1954) añadieron asépticam~nte 0,5 g. de
cicloheximida, 20.000 unidades de penicilina ' '1 40 ,000 unidades de
estreptomicina n cada litro de medio autoclavado y e'lfriado. Cryptococcus
neoformans, Aspergl1lus fumiga tus y Allescheria b':Wdli son se nsibles a la
cicloheximida; Actinomyces bovis y Nvcardia asteroides son !;ensibl es a la
penic ilina y estreptomicina .
Por otra parte, se puede añarlir 0,4 'J de clo r:mfenicol y 0,5 9 de
ciclo heximida a cada litro de medio re cc n~t i tuido antes de autoclava r I Ajello,
1957). Los mismos microorganismos 'son sensibles a esta nueva combinación ,
véase arriba.
Williams Smith y Jones (1963) emplearon Agar de Sabnuraud con Dextrosa
Oxoid que con tenía 20.0Cú unidades de pe nicilina y 0,04 g de neomicina por
litro, para el recuento de levadura'5 en el tracto alimen ta rio del cerdo .
El Agar de Sabouraud con Dextrosa Oxoid puede utilizarse también como
base para el medio de Pagano-Levin (Pagano y cols. 1957 - 58) para el
aislamiento de Gandida albicans. Se añ ade O, 1 g de cloruro de trifeniltet razolio
(como solución esterilizada por filtración) a cada litro de med io fundido,
autoclava do, enfriado a 5!) OC. E-I medio se hace generalm~nte inhibitori o para
la mayoría de los hongos no patógenos V bacterias al añ adi r los antibióticos
como se ha descrito arriba . Después de la incubación d ura n~ e 3 días a 25°C,
las colonias de Gandida albir.afls qOJedan si n pigmentar o rosa páclidú mientras
que otras especies de Gandida y otrO$ hongos f orma n colonia s rosa oscuro
o rojas. La técnica de Pag ano-Lev in ha sido inv(;stigada por Kutscher y
cols (1959), Sinski (1969), rlidley (1960) y va rios otros: la pru~ba es suficiente
para fi nes de cribado, pero se deben utilizar otros criterios. diagnósticos pa ra la
identificación de Gandida albicans.
216

29. REFERENCIAS
1. Ajello, libero 119571 'Cultural Methods for Human Pathogenic Fungi' J. Chron. Dis. 5(51.
545-5!;1.
2. Carlier, Gwendoline L M. 119481 Dri,. J. Dem. Syph. 60. 61 - 63.
3. GeO(ge, Lucille 1<:. , Ajello. L. y Papageorge, Calomira (1954) J. Lab. elin. MfJd. 44131, 422 - 428.
4. Hodges, R. S . 11928) Arch. Derm. Syph .• New York, 18, 852.
5. Kutscher, A . H. , Saguin , l. , Zegarelli, E. V., Aankow, A. M. , Mercadante, J. y Piro, J. O.
(1959a1 ' Growth Charactetistics 01 Cllndids a/bicans on Pagano-Levin Cultu re Medium' J ¡nvest,
Darm. 33.41 - 47.
6. Kutscher, A. H., Saguin, l., Zegarelli, E. V., Rankow, R. M., Campbell, .J. B. Y Mercadante, J.
11959b1 ' Pagano-levin Culture Medium lor Differentiation of Candida Il/bicans' American Type
CultlJrt! Collection Studies, 1. Antiobiotics and Chemotherapy 9( 11" 649 - 659.
7. Pagano, J., levin, J. G. y Treja, W . 11957 -58) 'Oisgnostic Medium lar Oifferentialion of
Species 01 Candida' Antibiotics Annual 1957 - 58, 137 - 143.
8. Ridley, M. F. I1960J 'A Comparison 01 Methods lar Identification of Candida albicans Ausrralian
J. Dermar. 5(4), 209 - 213.
9. Sabouraud, R. (1910) 'Les Teignes', Masson, Paris.
10. Sinski, J . T . 11960) 'The EHectiveness 01 Pagano-Levin Medium for the Oetection and
Identification 01 Candida albicans in Clinical Specimens' J. invest. DeJ"mllt. 35(3), 131- 133.
l1.Willians Smith, H. y Jones, J. E. T. (1963) 'Observalions on tilo Alimentary Trael and ils
Bacterial Flora in Healthy and Diseased Pigs' J. Path. Sect. 86 (2), 387 - 412.
Sabouraud Liquid Medium
MEDIO LIQUIDO DE SABOURAUD
Código - Polvo CM/47
Tablet.s CM/48
fORMULA
Digerido pancréatico de caseina en gramos por litro 5
Digerido péptico de carne fresca 5
Dextrosa 20
pH 5,7 (aprox .)
INSTRUCCIONES
Polvo: Se añaden 30 gramos a 1 litro de agua destilada. Se mezcla bien, se
distribuye en los recipientes definitivos y se esteriliza en el autoclave a 121°C
durante 15 minutos.
Tabletas: Se añade una tableta a 10 mi de agua destilada y se esteriliza en el
autoclave a 121°C durante 15 minutos.
DESCRIPCION
El Medio Líquido de Sabouraud sirve para probar la esterilidad micológica de
acuerdo con el medio descrito en I~ Farmacopea de EE.UU. (1965 ) para la
determinación de la actividad tungistática de 105 productos farmacéuticos
para evitar pruebas de esterilidad falsas . También se recomienda para el
cultivo de hongos. levaduras y bacterias acidofílicas .
217