3. TS2 Analyses de biologie médicale L.Lokiec
Document n° 3. Documents Borrelia
Tiques
Poux
Le diagnostic sérologique est obtenu soit par immunofluorescence indirecte (IFI) soit par ELISA . Ces
réactions ont une spécificité médiocre, en particulier à la phase initiale.
La technique par Western-blot permet de caractériser une réponse anticorps à divers antigènes (OspC,
flagelline....) de taille différente: 18 à 93 kDa (igM, IgG). Cette dernière technique est plus sensible et
spécifique que l'IFI ou l'ELISA, donc indiquée lors d'un faux-négatif, ou pour la confirmation d'un positif.
Chapitre : Spirochètes
L'amplification génique (PCR) suivie ou non d'un séquençage est possible mais encore peu appliquée
s'appuiera sur des amorces spécifiques de gènes: ospA (outer specific protein), ospB, fla (flagelline), ssr
(ribosomes), enfin rpoB directement dans les prélèvements cliniques tels biopsie cutanée, LCR, liquide
articulaire, biopsie synoviale.
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4. TS2 Analyses de biologie médicale L.Lokiec
Document n° 3. Documents Leptospira
- Diagnostic sérologique
Celui-ci est réservé à quelques laboratoires avec la mise en oeuvre de plusieurs techniques (ci-dessous).
Celui-ci se positive vers le 8-10ème jour après le début de la maladie. Les anticorps décroissent sur 3 à 6
mois, peuvent persister à des taux résiduels plusieurs années. La cinétique des anticorps est indispensable
(2 tests à 2 semaines d’intervalle) et son interprétation intègre les données chronologiques et cliniques.
1 - ELISA:
Antigène non purifié (formaldéhyde et chauffage) de la souche saprophyte Patoc. Anti IgM humain
couplé à la peroxydase. Titre seuil : 1/400.
Anticorps sériques détectables à partir du 8ème jour suivant l'apparition de la fièvre.
Sensible et spécifique, excepté pour les sérogroupes Grippotyphosa ou Australis, ce qui la limite à une
réaction de dépistage.
2 - Test de micro agglutination (MAT, réaction d'agglutination lyse de Martin et Pettit).
Evaluation au microscope à fond noir du degré d'agglutination de cultures de leptospires par le sérum du
malade. Réaction de référence qui nécessite une batterie d'antigènes: souches représentatives des
principaux sérogroupes (20-23 antigènes). Technique complexe réservée à un laboratoire de référence.
Titre seuil: 1/100.
- Diagnostic moléculaire (PCR)
Il peut être positif dès le second jour de la maladie puis jusqu’au 12ème jour. La recherche s'effectue à
partir du sérum, LCR, urines, humeur aqueuse.
Chapitre : Spirochètes
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