1. Laboratorio de Análisis Clínicos
T.L.C. Andrés Valle Gutiérrez
Hemograma Automatizado

2. introducción
«La Sangre es un fluido muy especial»
J.W. Goethe en su obra Fausto

3. Introducción
 Desorden hematológico
 Dx de primera instancia es la citometría hemática
 Prueba mas rutinaria
 Se buscan maneras mas rápidas, fáciles y sencillas de
llevarla acabo.
 Por ello así hemos evolucionado desde las antiguas
cámaras de Neubauer y los tediosos conteos manuales,
hasta la modernidad de equipos de impedancia eléctrica
y citometria de flujo.

4. El estudio del paciente hematológico
Alteraciones en
elementos formes
Alteraciones a nivel
plasmático
 Citometría Hemática
 Frotis de sangre
periférica
 Reticulocitos
 VSG
 Tiempos de
coagulación
 Factores del
complemento
 Determinación de
anticuerpos
 COOMBS

7. ALGO DE HISTORIA

8. Siglo XIX,
Primeros
Conteos
manuales
1952 Los
Coulter
inventan
el Coulter
Counter
A
53, Parker y
Host utilizan
el principio
de
Dispersión
Óptica,
tiñendo a
los G.r. y a
los G.b de
rojo y azul.
1960
Inicia
la
CMF
Actualidad, modernos
equipos
automatizados,
algunos de CMF
realizan
INMUNOTIPIFICACIO
N

9. Los hermanos coulter

10. Coulter Counter Model A
Realizaba los conteos sanguíneos sin diferencial, en 10
minutos pero no daba diferencial, por lo que los mejoro para
crear toda la serie Coulter Counter Model .

11. Beckman coulter LH 750

12. BHC

13. Clasificación de
Hemacitometros
1 GENERACION:
BH Manual de 5
parámetros
2 GENERACION:
BH
semiautomatizada
21 parámetros
3 GENERACION:
BH Automatizada
de 18 parámetros
con 3 histogramas
4 GENERACION:
BH Automatizada
de 18 parámetros
mas 3
histogramas y
dispersograma
5 GENERACION:
BHC, 28
parámetros, CD4-
CD8, Plaquetas,
Reticulocitos y Hb
Reticulada

15. Principio de coulter

16. Principios de los contadores
automatizados
Los equipos automatizados para recuentos celulares
han sido elaborados teniendo en cuenta algunas
propiedades de las células:

17. Principios
 Son malas
conductoras de la
electricidad, por lo
que aumentan la
Resistencia Eléctrica.
 Tienen variedad de
tamaños.
 Tienen una densidad
caracterizarle y
diferente para cada
una.
 Cada una refracta la luz
con una intensidad
diferente.
 Tienen composición
citoquímica diferente.
 La relación núcleo –
citoplasma es diferente
para cada célula.

18. Principio de Coulter
Si el orificio es atravesado solamente por líquido diluyente, la resistencia
eléctrica medida por los electrodos es mínima y constante, pero cuando el
orificio es atravesado por una célula sanguínea, se produce un aumento de la
resistencia eléctrica y un cambio de potencial entre los electrodos.

19. Principio de coulter

20. Lectura en el Osciloscopio

21. Funcionamiento del equipo
automatizado

22. DILUSION
1:300
G.B.
+>30 fL
1: 15,000
G.R. +>
36fL
PQT -<35 fL
DILUSIONES

23. ERRORES
El error de
coincidencia se
presenta cuando
la apertura
coinciden dos
células o más y
son contadas
como una sola;
en este caso se
disminuye el
recuento total y
se aumenta el
volumen
corpuscular de
las células en la
dilución.

25. OXIDACION
En el
Hbnometro a
520 – 540nm
Fe (++)
Fe (+++)
Férrico
Ferroso
Fe en
Hb
Ferrocianur
o
Rx
LECTURA
REACCION
HB

26. ADE
Usada para diagnosticar anisocitosis en los eritrocitos,
se observa en el histograma, Su V.R. es de 12 a 15%

27. C,V,S

28. Formula blanca
 Al realizar esta medición en 5.000-10.000
leucocitos se determina el diferencial y si
existe la presencia de células anómalas.

29. DISPERSIÓN ÓPTICA
Cada célula posee diferente volumen,
morfología e índice de refracción
Célula
Láser
Detector de ángulo amplio
Detector de
ángulo cerrado
Angulo 0

32. Cámara de Neubauer vs Analizador

33. ventajas
RECUENTOS MANUALES RECUENTOS AUTOMATIZADOS
75 a 85% de fiabilidad 95 A 98% de fiabilidad, repite la prueba 3
veces para comprobar
Técnicas ya conocidas Rapidez
Reactivo más barato Menos gasto de reactivo
Frotis y evaluación citomorfológica
sanguínea
Histograma

34. desventajas
RECUENTO MANUAL RECUENTO AUTOMATIZADO
Muy comunes los errores humanos Ciertos parámetros se calculan a partir del
despeje matemático de fórmulas, lo que
ocasiona que algunos datos sean errados
Aproximadamente el proceso dura entre
45 minutos a 1 hora y media
Diferencial poco confiable, tanto de
plaquetas como de leucocitos, en su
morfología
Laborioso proceso Costos

35. Histogramas hemáticos

36. Histograma
Son gráficas de frecuencias de
volúmenes celulares.
Eje X representa el volumen
celular en fL.
El eje Y; por ser relativo, no tiene
un equivalente numérico real.

37. Histogramas eritrocitarios
La curva normal de glóbulos rojos es cónica, modal y se encuentra
representada en Tamaños de 60 a 110 FL, con un pico o curva
secundaria modal de plana a ligeramente cóncava con muy poca
altura que llega a 200 FL.

38. HISTOGRAMA DE ERITROCITOS
RBC
REL
NIo
DISTRIBUCIÓN NORMAL
RBC 6.09
HGB 17.5
HCT 50.6
MCV 83.1
MCH 28.7
MCHC 34.6
RDW 13.0
10050 200 300
130
DEDO
CUERPO
Artefactos
glóbulos rojos
aglutinados
VCM x ADE
fL

39. Desviaciones
 Curva desplazada a la izquierda
 Células con un registro menor a 60 fL
 Se observa en microcitosis, poiquilocìtosis,
esquistocitos, leptocitos, dacriocitos,
drepanocitos.
 Curva desplazada a la derecha
 Células con mas de 95 fL
 Se observa en macrocitosis, ovalocitos,
eliptocitos, normoblastos y parásitos hemáticos

40. Micro y Macro

41. CURVA BIMODAL
Se presenta cuando existen dos poblaciones celulares, cada
una hace su media y se interceptan en las coincidencias de
tamaños.

42. ADE AUMENTADO
Se observan en diferentes casos de anisocitosis e implican un
registro de pulsos con una dispersión en tamaños muy grandes,
en algunos casos incluyendo pulsos menores de 30 fL que no
quedan registrados en el histograma de rojos sino en el de

43. Arranque extenso en Y
 El recuento de plaquetas y de glóbulos rojos se
realiza en la misma dilución y que luego los pulsos
registrados son discriminados únicamente por
tamaño, dejando para el histograma y recuento de
rojos los pulsos de tamaño superior a 30 FL, y los de
tamaño inferior quedan registrados como plaquetas.
 Se presenta cuando hay microcitosis, o
esquistocitos, drepanocitos y leptocitos, son
contados como plaquetas aumentando su recuento
y disminuyendo el de rojos.

44. Arranque extenso en Y
Se presenta en trombocitosis o
macrotrombocitosis o hay presencia de

45. Reticulocitos
El equipo los tiñe supra vitalmente y así creando un precipitado
de azul nuevo de metileno y la maquina lo detecta por medio
de sus detectores ópticos.

46. Histogramas plaquetarios
Es una curva cónica sin distribución normal cuya distribución
en tamaños está de
2 a 20 FL.

47. HISTOGRAMA DE PLAQUETAS
DISTRIBUCIÓN NORMAL
NOMOGRAMA NORMAL
PLT 319
PCT .239
MPV 7.5
PDW 16.3
REL
NIo:
PLT FEMTOLITROS2 10 20

48. No hay arranque en x
Trombocitopenia

49. Extendida 25-30 FL
Arranque extenso en leucocitos

50. PLAQUETAS EN TOPE
Trombocitosis

51. HISTOGRAMA LEUCOCITARIO
Los glóbulos blancos se agrupan en tres curvas claramente definidas y estas configuran
la arquitectura normal.
• Curva de linfocitos cóncava 50-100 fL
• Curva de mononucleares plana a cóncava 100- 150 fL.
• Curva de granulocitos cóncava 150-380 fl

52. HISTOGRAMA DE LEUCOCITOS
Recuento total de Leucocitos
90 160
Linfocitos
MO – MID = Eosinófilo, Basófilo, Monocito
MO o MID
Granulocitos
Neutrófilos
EJEMPLO DE ANALISIS
DISTRIBUCIÓN NORMAL
WBC 8.3
LY # 2.5
MO # .8
GR # 5.1
50 100 300200 400WBC
REL
NIo.

53. Agranulocitos

54. LINFOCITOPENIA
Linfocitopenia y Granulocitosis

55. INTERFERENCIA CELULAR
Conteo de precursores celulares, parásitos,
etc.

56. Nk linfocitosis

57. GRANULOCITOPENIA
UNION DE LA CURVA MONO CON LA GRANULOCITICA

58. Aumento cónico sin perdida de arquitectura
Leucocitosis, Linfocitos atipicos, monocitos activados.

59. Presencia de blastos

60. Granulocitos

61. GRANULO-MONOCITOSIS
UN AUMENTO EN ALGUNA DE ESTAS 2 LINEAS PUEDE
OCACIONAR LA UNION ENTRE AMBAS CURVAS.

62. Granulocitopenia

63. Neutrofilia
HAL REVISAR EL FSP :
Neutrofilia, aumento de BANDAS
HIpersegmentados

64. Neutrofilia-Monocitopenica
NEUTROFILIA ESPECIALMENTE BANDAS

65. Procesos malignos Medula osea
Alteración hemática completa

66. Bloques
Los bloques en la distribución del histograma se presenta cuando el número
de
células está disminuido (-1000) y se hace necesario aumentar los intervalos

67. leucocitosis
Valores sobrepasan a los que la maquina puede
contar
Entre 2000 – 100 000

68. INTRODUCCION A LOS
DISPERSOGRAMAS

69. dispersograma
Gráfico que representa la distribución de dos variables en una población de muestra.
Una variable se representa gráficamente en el eje vertical; la otra en el horizontal.
Un dispersograma demuestra el grado o tendencia de presentación de las variables en
relación mutua.

70. DISPERSOGRAMA
Cuadrante 1 Blastos
Cuadrante 2
Linfocitos
Cuadrante 3
Monocitos
Cuadrante 2
Linfocitos
Cuadrante 4
Neutrofilos
Cuadrante 6
Eosinófilos
Cuadrante 5
Cel. Dañadas

71. cuadrantes
 Cuadrante 1: Tenemos en este grupo núcleos de
normoblastos, agregados plaquetarios,
macroplaquetas, forma adultas de plasmodium,
sombras nucleares y células de difícil hemólisis como
drepanocitos.
 Cuadrante 2: Normalmente se ubican los linfocitos en
la región central derecha, la aparición de células en la
región superior e inferior derecha hacen sospechar
lapresencia de linfocitos atípicos. En la zona superior
central se sospecha la presencia de blastos.
 Cuadrante 3: Encontramos el registro de monocitos
hacia la región central derecha, la presencia de
células en la región central superior hace sospechar
la presencia de blastos.

72. cuadrantes
 Cuadrante 4: Se ubican en la zona central el registro normal de
neutrófilos; la aparición de células inmaduras de esta línea celular se
registra en la región superior de dicho cuadrante; la presencia de
neutrófilos de registro pequeños y los macropolicitos, se da en la
parte inferior del mismo cuadrante.
 Cuadrante 5: normalmente no presenta células, cuando allí por
alguna razón se encuentran células estas pueden relacionarse con
células dañadas de sangre envejecida.
 Cuadrante 6: En la región central de este cuadrante podemos
encintrar el registro deeosinòfilos, así mismo por la densidad de los
puntos registrados podemos sospechar el aumento de este tipo de
células

73. ANORMALIDADES

74. DISPERSOGRAMA ANORMAL
4
1. Blastos
2. Granulocitos
inmaduros
3. Neutrófilos
envejecidos
y lesionados
4. Plaquetas
gigantes
5. Eritrocitos
nucleados
6. Linfocitos
Variantes
7. Blastos
8. Linfocitos
Variantes
9. Blastos
5
9
2
7
8
3
6
1

75. NEUTROPENIA LINFOCITOSIS
V
O
L
U
M
E
N
WBC
DF1

76. GRANULOCITOS INMADUROS
V
O
L
U
M
E
N
DF1
WBC

77. LINFOCITOS ATÍPICOS
V
O
L
U
M
E
N
DF1
WBC

78. NEUTROPENIA LINFOCITOSIS
(ATÍPICOS)
V
O
L
U
M
E
N
DF1
WBC

79. EOSINOFILIA
V
O
L
U
M
E
N
DF1
WBC

80. GRANULOCITOS INMADUROS
V
O
L
U
M
E
N
DF1
WBC

81. ¿Dudas?

82. Bibliografía
 Fundamentos de Hematología, Dr. Guillermo Ruiz Arguelles.
 Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, John
Bernard Henry.
 Hematología: La sangre y sus enfermedades, Dr. José Carlos
Jaime Pérez.
 Hemograma, Como hacer e interpretar, Dr. Raimundo Antonio
Gomes Oliveira.
 Hematología, Guía práctica para el diagnóstico microscópico, Dr.
Mathias Freund.
 Artículo de revisión, Semiología de la Citometría hemática,
Revista de la facultad de medicina UNAM, Dr. Rafael Hurtado
Monroy.