mejoramiento genetico sobre formaulas de calculaciones

1. PROCESO DE PRODUCCIÓN CEPAS, LÍNEAS, CLONES GENÉTICA Mutantes Híbridos Recombinantes SELECCIÓN AGENTE BIOLÓGICO Microbianas Vegetales Animales SUSTRATO MEDIO DE CULTIVO ESTERILIZACIÓN PREPARACIÓN DISEÑO Y FORMULACIÓN Naturales (Wild type) Screening, colecciones de cultivo TIPO DE REACTOR MODO DE OPERACIÓN FERMENTACIÓN BIOTRANSFORMACIÓN DOWNSTREAM PROCESSING BIOCATALIZADOR SEPARACIÓN Y PURIFICACIÓN PRODUCTO EFLUENTES

5. Agentes Mutagenicos fisicos y quimicos y suS Mecanismos de acción

9. REPARACION POR RECOMBINACION

13. Mutagénesis Dirigida

14. Aislamiento selectivo de mutantes El objetivo de esta etapa es seleccionar las mutantes mas adecuadas, pero al mismo tiempo reducir el numero de ensayos que no ofrezcan resultados apreciables.

16. MEJORAMIENTO DE CEPAS MICROBIANAS Recuperación en cultivo líquido plaqueo Fermentación Ensayo de actividad Revisar la actividad de las cepas exitosas Analizar nuevamente las cepas exitosas (screening secundario) Preservación Post-test Scale up Cultivo sumergido Reinicio del proceso Mutagénesis

17. SELECCION DE CEPAS SOBREPRODUCTORAS DE PENICILINA

19. Otros mecanismos geneticos Recombinación : - sexual (híbridos de levadura) - parasexual - fusion de hifas fusión nuclear (1/10 -7 ) haploidization (al azar) fusion de Protoplastos Bacteria - lysozyme, fungi - glucanasa, chitinasa PEG, Electrofusion

20. haploide diploide Reproducción asexual Reproduccion asexual Fusión celular asco ascosporas Interacción de celulas de distinto mating type (Sexo) meiosis mitosis mitosis

21. - RECOMBINACION GENETICA EN HONGOS y LEVADURAS: CICLO SEXUAL

22. n + n heterokaryon n n haploide 2n diploide 2n + 1 2n - 1 nuclear fusion no-disyunción No-disyunción haploidisación PARA-SEXUAL CYCLE Recombinación mitótica 2n

27. TRANSFORMACION TRANSDUCCION

31. EXTRACCION DEL DNA FUENTE VECTOR DE CLONADO FRAGMENTACION ENZIMATICA LINEARIZACION AISLAR CELULAS CON EL GEN CELULA HUESPED PROTEINAS CODIFICADAS POR EL GEN CLONADO PRODUCCION DE PROTEINAS PROCEDIMIENTO DE CLONADO LIGADO INTRODUCCION DEL DNA EN EL HUESPED RECOMBINANTES

36. Células de mamíferos¨: CHO (de tumor ovárico de ratones), HeLa (human cervix) BHK (baby hamster kidney) e hibridomas. * los vectores son virus * se emplean para producir proteínas intracelulares pero preferentemente proteínas que requieren modificaciones postranscripcionales para permitir su secreción. * es fundamental testear el tipo y contenido de virus presentes en estas celulas ya que pueden acompañar los procesos de purificación junto con los fármacos (hepatitis, papiloma, HIV)

40. PROCARIOTAS GEN ESTRUCTURAL DNA mRNA TRANSCRIPCION TRADUCCION PROTEINA EUCARIOTAS I1 E1 I2 I3 E2 E3 I4 E5 I6 E6 I7 DNA TRANSCRIPCION mRNA primario TRADUCCION PROCESAMIENTO E1 E2 E3 E4 E5 E6 MENSAJERO FUNCIONAL ORGANIZACION GENETICA PROTEINA

41. Vector de expresion general de eucariotas * ORI euk y ORI E : origenes de replicacion. * Amp y ESM: marcadores de selección * Cs: sitio de clonado * P: promotor * T: señales de terminación y poli-A

42. 3- Cromosoma artificial de levadura

43. Sintesis de cDNA a partir de mRNA